弱精子症精子线粒体DNAA3243G，G3316A和T3394C突变的检测

目的：检测弱精子症精子线拉体tRNA^1eu3243位点、线粒体NDI3316位点和3394位点碱基突变频率,分析三个位点突变与弱精子症的相关性。方法：按WHO标准随机收集了69例弱精子症患者精子标本和60例正常人正常活动力精子标本,以聚合酶链反应、ApaⅠ和HaeⅢ限制性内切酶长度多态性分析和测序检测mtDNAA3243G、G3 316A和T3 394C三个位点的突变,比较两组突变频率的差异。分析G3316A和T3394C突变的氨基酸变异情况并结合生物信息学工具分析错义突变氨基酸进化保守性。结果：弱精子症精子mtDNAG3316A突变率（4．35％）、T3394C突变率（2．90％）和总突变率（7．25％）与正常对照纽（分别为5．00％、1．67名和6．67％）比较,差异无显著性。氨基酸变异分析发现,G3316A（Ala-〉Thr）、T3394C（Tyr-〉His）均为错义突变,其中T3394C突变位点所编码的氨基酸在人、牛、小鼠、爪蟾4种生物中进化具有高度保守性。结论：G3316A和T3394C突变可能不是影响人类精子活动力的主要因素。     

导致少、弱精子症的因素和治疗

引起男性少、弱精症的原因多与遗传、染色体异常、感染、精浆异常、内分泌异常、自身兔疫性疾病、男性附属性腺炎症或功能下降、精索静脉曲张、不良的环境因素等有关,随着临床实践及科研的深入,少、弱精症的病因及治疗又有了新的发现。     

中医治疗弱精子症和少精子症

所谓弱精子症是指连续三次精液检查,精子活动率<50％,活动力<Ⅱ°,正常形态精子<60％;少精子症指连续三次精液检查,精子密度<20×10~9/L。中医传统典籍中没有量的确切概念,但也有类似性的论述:《金匮、血痹虚劳篇》云“男子脉浮而涩,为无子,精气清冷”。《诸病源候论·虚劳少精候》有“精气竭少”的提法。《辩证     

线粒体及其自噬与不同程度弱精子症的关系*

目的 观察弱精子症患者的射精精子中是否存在自噬及线粒体自噬现象,并探讨线粒体及其自噬对精子活动力的影响。方法 收集湖北医药学院附属人民医院男科及生殖中心就诊的精液样本,并依照计算机辅助精液分析系统（CASA）检测结果,分为正常对照组和轻、中、重度弱精子症组,每组30例。采用电镜观察各组精子线粒体形态及自噬小体分布;Western blotting检测精子线粒体膜蛋白及自噬标志性蛋白TOM20、LC3等的表达水平;共聚焦显微镜检测精子中的LC3及线粒体荧光斑点,以了解精子中发生的自噬是否属于特异性线粒体自噬。结果 不同程度弱精子症患者的精子中,线粒体分布及自噬发生程度均有不同的表现,两者存在共定位的特点,并且与弱精子症程度呈负相关（P?<0.05）。结论 线粒体自噬是人类精子的活性过程,自噬的活化在人类精子生理活动中起积极作用,保持并调节精子活动力。     

弱精子症的病因

弱精子症是指精液参数中前向运动的精子（a和b级）小于50％或a级运动的精子小于25％的病症，故又称精子活力低下。精子的运动功能或运动能力的强弱直接关系到人类的生殖，只有正常前向运动的精子才能确保精子抵达输卵管壶腹部与卵子结合形成受精卵。正常离体后的精子，在精液液化前，活动受限制，     

少精子症及弱精子症的药物治疗

少精子症及弱精子症的治疗和其他疾病的治疗一样，要取得好的效果必须找到原因。但往往很多时候病因不能明确。药物治疗可以分为：①特异性治疗。病因及病理机制明确，治疗效果较好。②半特异性治疗。引起不育的疾病病理机制未完全阐明，治疗效果不肯定。但有文献报告通过治疗其怀孕率较该病的自然怀孕率有所提高，但对结果存在争论。     

少弱精子症和弱精子症患者精液质量下降与锌的关系

采用原子吸收光谱法对67例患弱精子症和少弱精子症的男性不育症患者精子和精浆中锌元素进行了测定,结果发现弱精子症患者和少弱精子症患者精子中锌的含量明显低于正常具有生育能力的对照组,统计学上有极显著性差异(P<0.01)。而精浆中锌的含量三组间差别无统计学意义(P>0.05)。研究提示弱精子症患者和少弱精子症患者的精子运动能力降低以及精子的数量减少可能与精子中锌元素的含量下降有关。对这类患者酌情补锌具有一定的治疗意义。     

隐匿精子症和严重弱精子症的ICSI术前准备和疗效分析

目的总结运用卵胞浆内单精子显微注射(ICSI)技术治疗隐匿精子症和严重弱精子症的诊治经验。方法283周期隐匿精子症及65周期严重弱精子症患者经药物治疗提高活动精子数量后再进入ICSI治疗周期,观察ICSI操作情况和受精、妊娠等治疗结果,并以52周期供精ICSI作为对照组。结果隐匿精子症和严重弱精子症两组分别有15周期和3周期因精子不足或卵子数量较多使用部分供精,其余均使用夫精完成ICSI操作治疗。隐匿精子症组的受精率与对照组比较有显著差异(77.4%vs85.1%,P=0.001),临床妊娠率无显著差异(40.7%vs38.8%,P=0.805);严重弱精子症组的受精率和临床妊娠率与对照组比较均无显著差异(81.2%vs85.1%,P=0.131;31.3%vs38.8%,P=0.404)。结论恰当的ICSI术前准备和熟练的ICSI操作技术能使隐匿精子症和严重弱精子症达到与正常精子相似或稍低的受精率和妊娠率。     

Studies on the Relationship between Urokinase Plasminogen Activator(uPA)and Human Sperm Motility

Plasminogenactivators(PAs)arehighlyselectivetrypsin--likeserineproteaseabletoconverttheinactiveplasminogen,azymogenpresentinmostextracellularfluids,intoplasmin,alsoatrypsin--likeproteaseofbroadspecificity['].SeminalplasmalevelsofPAsinmenshowup60to100foldhigherthaninbloodplasma['].ThetwoknownPAs,urokinase--type(uPA)andtissue-type(iPA)aresecretedbyalargenumberofcellsandarethoughttoexhibitmultiplefunctionsinextracellularproteolysisaccompanyingtissueremodelingandcellmigration[']'Duetotheseprop…     

Effectiveness of Testosterone Undecanoate Treatment in Men with Asthenospermia

Objective To assess the effectiveness of testosterone undecanoate on sperm motility and pregnancy incidence in men with asthenospermia.Methods A clinical trial was performed.Fifty men with asthenospermia were included to receive placebo(control group,n=9) or T undecanoate 80 mg/d(study group,n=41).Pregnancy incidence and sperm characteristics after 1,2 and 3 months of medication and 3 months after the end of the trial were measured.Results Compared with the placebo,T undecanoate treatment produced a satisfactory improvement of seminal motility(F=55.904,P=0.000).In study group,the incidence of pregnancy was 28.2% while the incidence of pregnancy in control group was 11.1%.In study group,26 patients took T undecanoate for more than 3 months.In the 3 months,semen volume showed no statistical difference(F=1.206,P=0.312) before and after treatment,sperm concentration(F=0.023,P=0.000) and motility a,b,a+b(P=0.000) showed statistical differences.Motility grade a showed significantly higher increment in 2 and 3 months after treatment than 1 month and there was no statistical difference between 2 and 3 months.So did grade b.Conclusion The results indicate that T undecanoate increases seminal motility,leading to a higher incidence of pregnancy in couples with infertility related to asthenoaspermia.     

Differential analysis of two-dimensional gel electrophoresis profiles of spermatozoa protein in human normal motility sperm and idiopathic asthenospermia

Objective: To evaluate the application of two-dimensional electrophoresis in the research of differentially expressed proteins in the human asthenospermia. Methods: Two-dimensional gel electrophoresis was performed on 4 normal sperm samples from healthy men and 4 sperm samples from 4 asthenospermia patients. After silver staining, the differential expression proteins were analyzed by PDQuest 2D analysis software. Results: Six differential protein spots were identified. Four spots showed increased expression in the control gels compared with the patient gels. Conclusion: The protein profiles of differential expression between the normal spermatozoa and idiopathic asthenospermia were established and some differential proteins were found. The data of this study would establish the better fundament for further isolation and identification of differentially expressed proteins in human asthenospermia sperm.     

复方精氨酸胶囊治疗男性少弱精症疗效观察

目的:探讨复方精氨酸胶囊治疗男性少弱精症的有效性和安全性.方法:将80例男性少弱精症不育患者随机分为试验组及安慰剂组,各40例.分别给予复方精氨酸胶囊和安慰剂,共服药60 d.于停药后第10 d评价有效性和安全性.结果:试验组有效率(63.64%,21/33)明显高于安慰剂组(31.43%,11/35),2组间差异有统计学意义(P＜0.01).2组患者在治疗过程中无严重不良事件发生.结论:复方精氨酸胶囊能有效治疗少弱精症,短期用药无严重不良反应.     

五子衍宗丸含药血清对活性氧致大鼠精子活力下降的保护作用

目的观察五子衍宗丸含药血清对活性氧致大鼠精子活力下降的保护作用。方法收集8只SD大鼠附睾精子,将精子分为正常组、活性氧组、五子衍宗丸含药血清低剂量组、五子衍宗丸含药血清中剂量组、五子衍宗丸含药血清高剂量组、维生素C组,除正常组外,各组均与活性氧体外共孵育,其中五子衍宗丸含药血清低、中、高剂量组和维生素C组分别同时加入相应血清和维生素C,30min后取精子,采用计算机辅助精子分析系统观察精子运动参数的变化。结果五子衍宗丸含药血清低、中、高剂量组精子活力、精子活率、直线运动速度(VSL)、平均路径速度(VAP)、曲线运动速度(VCL)与活性氧组比较显著升高(P<0.05),但仍显著低于正常组和维生素C组(P<0.05)。结论五子衍宗丸含药血清对活性氧造成的精子活力下降具有一定的保护作用。     

长沙地区2794例男性不育患者精液常规结果分析

目的 通过分析男性不育患者精液常规结果,了解本地区男性不育患者精液质量现状,为临床诊断和治疗提供依据.方法 应用以色列欧霸SQA-V自动化精子质量分析系统,对2009年3月～2011年6月来该院不育专科就诊的2 794例男性不育怠者的精液就外观、液化时间、精液量、精子密度、精子活动率、精子活力、精子形态正常率等参数进行分析.结果 2794例精液标本中,各项指标均在正常范围的有356例(占12.74％),余2 438例标本中有一项或多项指标异常.异常指标中精液量少、精液液化不良、pH值异常、精子活力降低、精子活率低、无精症、精子密度降低、精子畸形率增高在异常精液中的比率分别是:24.61％、20.59％、2.30％、65.71％、39.38％、2.63％、31.91％、25.31％.结论 男性不育患者中普遍存在精子活率和活力、精子密度、精子形态和精液液化时间等指标的异常改变,准确地分析精液质量是判断男性生育能力的重要检测手段,自动化检测系统的应用为男性不育症的诊治提供了客观准确的依据.     

3例SUN5基因变异导致无头精子症的遗传学分析和助孕治疗结局

畸形精子症是男性不育的常见原因之一[1],其中无头精子症(acephalic spermatozoa syndrome,ASS)是一种严重导致男性不育的罕见畸形精子症,其特征是精液中含有无头精子尾部和一些松散的精子头部,主要表现为头颈部连接处异常[2-3],精子在电子显微镜下通常显示精子头部和尾部之间缺少植入窝和基板[4].     

二氢嘧啶脱氢酶基因T85C位点突变与乳腺癌细胞5-氟尿嘧啶敏感性的关系

目的:探讨二氢嘧啶脱氢酶基因（DPYD）T85C位点突变对乳腺癌细胞5-氟尿嘧啶（5-FU）敏感性的影响。方法:从肝脏组织中提取mRNA,扩增得到野生型DPYD编码序列。利用定点突变技术,获得T85C定点突变的DPYD编码序列。将GFP、野生型和突变型DPYD序列,连入PCDH-CMV-MCS-EF1-Puro载体。转染上述三种质粒到MDA-MB-231细胞中,获得稳定表达的细胞株。MTT法检测不同浓度5-FU（0、1、5、10、50μg/mL）处理24h后,细胞存活情况。结果:酶切验证三种重组质粒,观察到目的序列。测序验证定点突变质粒,突变位点发生T到C的改变。相比对照组,突变型细胞的存活率显著增高（P <0.01）,且突变型细胞存活率高于野生型（P <0.05）。结论:DPYD基因突变影响乳腺癌细胞对5-FU敏感性,T85C突变型DPYD细胞对5-FU的敏感性显著降低。

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