流式-荧光原位杂交技术在骨髓增生异常综合征患者骨髓CD34＋细胞相对端粒长度检测中的应用

本研究旨在初步探讨流式-荧光原位杂交（Flow-FISH）技术在骨髓增生异常综合征（MDS）患者骨髓细胞亚群端粒长度测定中的可行性.7例初治低危MDS患者为实验组,7例年龄、性别匹配的营养性贫血患者为对照组.收集肝素抗凝骨髓,以Molt-4细胞株为内对照细胞,以CD34-Alexa Fluor（R）647标记细胞表面抗原,高温变性DNA后与FITC标记端粒探针进行荧光原位杂交,DNA复染后,采用四色流式细胞术检测骨髓有核细胞和CD34＋细胞的相对端粒长度（RTL）.结果显示：实验组和对照组骨髓有核细胞经变性、杂交后,可进行细胞亚群的端粒长度检测.检测结果显示MDS患者骨髓CD34＋细胞RTL显著短于骨髓有核细胞（P =0.001）;与对照组相比,MDS患者骨髓有核细胞RTL及CD34＋细胞RTL均显著缩短（P分别为0.020和0.002）.结论：通过耐热荧光抗体对特定细胞进行标记,Flow-FISH技术可用于细胞亚群RTL检测,值得进一步探索.     

流式原位杂交法检测白血病和MDS患者骨髓中单个核细胞端粒长度的研究

目的通过流式原位杂交法(FLOW-FISH)研究白血病和MDS患者骨髓中单个核细胞端粒长度的变化.方法采用荧光原位杂交法结合流式细胞术检测43例血液疾病患者和48名健康对照者骨髓中白细胞的端粒长度.以流式细胞仪测定的细胞平均荧光强度,即Q-FISH值来表示端粒长度.结果健康对照组Q-FISH值为0.066(0.015,与同年龄健康对照相比较,除3例未发生转型的MDS和2例缓解期慢性髓细胞性白血病(CML)患者的端粒长度无明显变化外(Q-FISH值分别为0.069(0.007和0.060(0.008),其余38例患者(包括2例转型为急性髓细胞性白血病的MDS和2例急变期CML)骨髓中白血病细胞的端粒长度均明显变短(P<0.05),Q-FISH值为0.047(0.019.8例白血病患者在初诊和化疗完全缓解后端粒长度的改变无统计学差异(P>0.05),但慢性淋巴细胞性白血病(CLL)治疗后端粒有缩短趋势(由0.052变为0.048),而急性髓细胞性白血病(AML)治疗后端粒有变长趋势(由0.043变为0.056).健康对照组端粒长度随年龄增加而变短(r=0.67),而患病组端粒长度与年龄不相关(r=0.14).结论通过FLOW-FISH法检测到大部分白血病和MDS患者骨髓中端粒长度比健康人短,其端粒长度的变化与疾病进程、预后和治疗有一定关系.     

急性髓系白血病细胞端粒酶活性及端粒长度的同步分析

目的探讨急性髓系白血病(AML)患者端粒酶活性、端粒长度的变化及意义.方法采用TRAP-ELISA-PAGE法测定端粒酶表达活性,Southernblot方法测定端粒长度.结果AML患者端粒酶活性[吸光度(A)值为2.298±1.059]较正常对照(A值为0.387±0.598)显著增高,同时其平均端粒长度[(7.6±2.1)kb]较正常对照[(9.3±1.9)kb]明显缩短.端粒长度的变化主要发生在端粒酶活性高表达的白血病细胞中.结论AML细胞端粒酶活化可能与其端粒缩短有关.端粒的丢失可导致染色体的失稳,激活端粒酶依赖的端粒机制,在白血病的发生中起着重要作用.     

10例获得性骨髓衰竭综合征患者端粒长度的检测

目的 探讨端粒酶基因突变与端粒长度变化间的关系.方法 收集来自北京协和医院、河北廊坊市中医院诊断明确的10例骨髓衰竭综合征患者外周血标本,提取有核细胞DNA,筛查TERC基因及TERT基冈的突变,Southern blot法测定患者端粒长度,并与2例血液系统恶性疾病患者及45名同龄健康对照者的端粒长度进行比较.结果 经基凶突变筛查,10例患者中2例携带端粒酶基因突变患者(其中1例为重型再生障碍性贫血,1例最终证实为先天性角化不良)端粒长度严重缩短,小于同龄正常对照长度的50%,与部分恶性血液病如骨髓增生异常综合征伴原始细胞增多(MDSRAEB Ⅱ)患者的端粒长度重叠,提示有恶性转化的可能.部分无突变的骨髓衰竭综合征患者端粒也有缩短,只有同龄正常对照长度的50%～80%,但缩短程度不及有突变者.结论 端粒酶基因突变患者端粒长度较同龄正常对照严重缩短(＜正常对照长度50%),提示可能为基因突变的结果 .部分无突变患者也存在端粒长度的缩短,但不及有突变者.     

急性白血病免疫表型的预后意义

免疫表型对白血病的预后判断有重要意义。目前临床宜选用一些与细胞分化阶段有明确关系的、代表某些形态学特征的抗原进行免疫分型,可补充FAB分型的不足,还可确定形态学不能或很难区分的白血病类型。通过免疫表型检测和计分可明确双表型白血病和未分化白血病的诊断。某些特异的抗原与特异的细胞遗传学以及分子水平异常有关,决定了白血病的恶性行为及对治疗的反应。用多参数流式细胞术可同时检测2个或更多的抗原,数种抗原组合可用来检测微小残留病,提高检测的准确性,在患者初诊时即对其各白血病细胞亚群进行表型分析,为以后的微小残留病监测提供依据,才具有预测复发的价值。     

流式原位杂交法检测白血病和骨髓异常增生综合征患者端粒长度的研究

目的　通过流式原位杂交法 (FLOW FISH)研究白血病和骨髓异常增生综合征 (MDS)患者骨髓中白细胞端粒长度的变化。方法　采用荧光原位杂交法结合流式细胞术检测 4 3例血液疾病患者和 4 8名健康对照者骨髓中白细胞的端粒长度。以流式细胞仪测定的细胞平均荧光强度 ,即Q FISH值来表示端粒长度。结果　健康对照组Q FISH值为 0 0 66± 0 0 15 ,与同年龄健康对照相比较 ,除 3例未发生转型的MDS和 2例缓解期慢性髓细胞性白血病 (CML)患者的端粒长度无明显变化外(Q FISH值分别为 0 0 69± 0 0 0 7和 0 0 60± 0 0 0 8) ,其余 3 8例患者 (包括 2例转型为急性髓细胞性白血病的MDS和 2例急变期CML)骨髓中白血病细胞的端粒长度均明显变短 (P <0 0 5 ) ,Q FISH值为0 0 4 7± 0 0 19。 8例白血病患者在初诊和化疗完全缓解后端粒长度的改变无统计学差异 (P >0 0 5 ) ,但慢性淋巴细胞性白血病 (CLL)治疗后端粒有缩短趋势 (由 0 0 5 2变为 0 0 4 8) ,而急性髓细胞性白血病 (AML)治疗后端粒有变长趋势 (由 0 0 4 3变为 0 0 5 6)。健康对照组端粒长度随年龄增加而变短 (r=0 67) ,而患病组端粒长度与年龄不相关 (r =0 14 )。结论　通过FLOW FISH法检测到大部分白血病和MDS患者骨髓中端粒长度比健康人短 ,其     

急性髓系白血病微小残留病的多色流式细胞术检测

目的:建立本实验室急性髓系白血病微小残留病检测的十色抗体组合方案,探讨其临床应用价值.方法:根据初发急性髓系白血病患者白血病细胞的抗原表达特征,采用多参数流式细胞术检测骨髓微小残留病,并将检测结果与骨髓细胞形态学和PCR结果进行比较,确定本实验室微小残留病检测的十色抗体组合方案.结果:分析郑州大学第一附属医院392例初...     

端粒、Bcl-2、P53对急性白血病患者端粒酶活性的调节

端粒酶作为急性白血病 (ＡＬ)治疗的新靶位已引起普遍关注 ,但端粒酶活性的调控因素目前尚未阐明。我们选择既往已被证实与ＡＬ发病密切相关的因素 :凋亡抑制蛋白Ｂｃｌ 2和突变型Ｐ5 3水平和端粒长度[1 ,2 ] ,以发现这些因素对端粒酶活性的调控作用。病例和方法1　临床资料　采集 1998年 9月～ 2 0 0 1年 9月住院的 14 8例ＡＬ患者骨髓标本。其中急性非淋巴细胞白血病 (ＡＮＬＬ) 92例 ,急性淋巴细胞白血病 (ＡＬＬ) 5 6例 ,初治 75例 ,复发 36例 ,完全缓解 (ＣＲ) 37例。其中 14 8例检测了端粒酶活性 ,初治 70例检测了端粒长度 ,85例检测…     

血清乳酸脱氢酶及β2-微球蛋白联合C反应蛋白检测在诊断急性髓细胞白血病中价值

目的探讨急性髓细胞白血病患者在初发、缓解、复发时血清乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、β2-微球蛋白(β2-microglobulin,β2-MG)及C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)水平的变化及临床意义。方法检测100例急性髓细胞白血病患者血清LDH,β2-MG及CRP水平并进行比较,分析其与治疗效果及预后的关系,并与40例健康体检者(对照组)进行比较。结果急性髓细胞白血病患者血清LDH,β2-MG及CRP水平在初发组、复发组高于对照组和缓解组(P<0.01);缓解组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论联合检测LDH,β2-MG及CRP水平对于判断急性髓细胞白血病治疗效果、预后及复发有一定价值。     

血清乳酸脱氢酶及β2-微球蛋白联合C反应蛋白检测在诊断急性髓细胞白血病中价值

目的 探讨急性髓细胞白血病患者在初发、缓解、复发时血清乳酸脱氢酶( lactate dehydrogenase,LDH)、β2-微球蛋白(β2-microglobulin,β2- MG)及C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)水平的变化及临床意义.方法 检测100例急性髓细胞白血病患者血清LDH,β2-MG及CRP水平并进行比较,分析其与治疗效果及预后的关系,并与40例健康体检者(对照组)进行比较.结果 急性髓细胞白血病患者血清LDH,β2-MG及CRP水平在初发组、复发组高于对照组和缓解组(P＜0.01);缓解组与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 联合检测LDH,β2-MG及CRP水平对于判断急性髓细胞白血病治疗效果、预后及复发有一定价值.     

Id4基因甲基化在急性白血病微量残留病检测中的意义

目的探讨Id4基因甲基化作为检测急性白血病（AL）微量残留病变指标的可行性.方法采用甲基化特异性聚合酶链反应（MS-PCR）技术对细胞系中不同比例的白血病细胞以及正常人、初诊和完全缓解期的AL患者骨髓进行Id4基因甲基化状态检测.结果MS-PCR方法可在低于1%白血病细胞中检测到Id4基因甲基化.Id4基因在正常骨髓中呈完全性非甲基化状态,初治急性髓系白血病（AML）和急性淋巴细胞白血病（ALL）患者中甲基化比例分别为84%和86%.Id4基因在完全缓解的ALL患者中甲基化比例达60.9%,高于完全缓解状态的AML患者.Id4基因甲基化检测阳性的14例ALL患者中有8例在12个月内复发,而甲基化检测阴性的9例ALL患者仅有1例复发.Id4基因呈甲基化状态的8例AML患者中有5例在12个月内复发,而Id4基因呈非甲基化的20例AML患者中12个月内仅有2例复发.结论MS-PCR检测Id4基因甲基化有可能作为AL微量残留病的检测方法.     

动态监测儿童B系急性淋巴细胞白血病微量残留病的临床意义

目的 探讨动态监测儿童白血病微量残留病(MRD)对指导B系急性淋巴细胞白血病(B-ALL)治疗的临床意义.方法 以2004年1月至2009年12月确诊并完成诱导治疗的81例B-ALL患儿作为研究对象.初诊时用流式细胞术(FCM)筛选白血病细胞标志,随后定时随访.结果 81例患儿中80例诱导治疗获缓解,5年无事件生存(EFS)率为(76.80±5.70)%,其中标危组(89.40±5.90)%,中危组(66.99±13.60)%.81例患儿中68例筛选出特异性白血病细胞抗原作为MRD监测标志,13例未筛选出特异性白血病细胞抗原标志,两者5年EFS率分别为(79.10 ±6.20)%和(62.50±15.10)%,差异无统计学意义(P>0.05).诱导治疗第35天MRD检测显示68例患儿中MRD阴性(残留白血病细胞<0.01%)52例,5年EFS率为(88.50±4.90)%;MRD阳性(残留白血病细胞≥0.01%)16例,5年EFS率为(42.10±20.10)%,差异具有统计学意义(P<0.05),单因素分析提示MRD监测结果与危险度分层相关.诱导治疗第55天MRD监测显示,诱导第35天MRD阴性的52例患儿中,51例仍为阴性,1例阳性;而16例MRD阳性患者中14例(87.50%)转为阴性,2例仍阳性(后经加强治疗转为阴性).68例缓解患儿1年内MRD阳性9例(3例复发),1年后MRD阳性4例(2例复发),持续MRD阴性55例(4例复发).差异有统计学意义(P<0.05).结论 动态监测B-ALL患儿MRD,可判断预后,及时调整治疗方案,具有重要临床意义.

Abstract：

Objective To study the clinical significance of sequentially monitoring minimal residual disease( MRD)in childhood B-cell acute lymphoblastic leukemia( B-ALL). Method Eighty one B-ALL cases were enrolled in the study from January 2004 to December 2009. Leukemia cell markers were detected by flow cytometry at diagnosis, then regularly followed-up. Results Of 81 cases, 80 achieved complete remission (CR) after induction therapy, 5-year event-free survival (EFS) was (76.80 ±5.70)%. Among them, the EFS was (89.40±5.90) % in standard risk group and(66.99 ±13.60)% in intermediate risk group. Eight cases were screened for leukemia markers for MRD monitoring and identified in 68; and 5-year EFS was (79. 10 ±6.20) % and (62.50 ± 15. 10) % (P>0.05, respectively). MRD detection at day 35 in induction therapy showed that 52 of 68 cases were MRD negative (leukemia cells < 0.01%), the 5-year EFS being (88. 50 ± 4. 90)% , and 16 were MRD positive (leukemia cells ≥ 0. 01% ), the 5-year EFS being (42. 10±20. 10)% (P>0. 05). Univariate analysis confirmed that there was a correlation between MRD monitoring and risk stratification. MRD detection at day 55 showed that among the 52 day 35 MRD negative cases, 51 were still negative, 1 positive, among 16 day 35 MRD positive cases, 14(87. 50% ) turned negative, 2 still positive. Of the 68 cases, 9 were MRD positive within one year after CR (3 relapsed), 4 MRD positive after one year (2 relapsed) and 55 MRD negative (4 relapsed) (P > 0.05). Conclusions Sequential monitoring MRD can find out treatment outcome and adjust therapy in time.     

流式细胞术定期监测微量残留病可预测急性白血病复发——单中心163例研究

目的 研究急性白血病(AL)在化疗获得第1次完全缓解( CR1)后用流式细胞术(FCM)定期监测微量残留病(MRD)的预后价值.方法 对2005年4月至2009年7月北京市道培医院收治的CR1期AL患者(不包括接受造血干细胞移植者),定期用FCM监测患者骨髓MRD,追踪至复发或至2010年7月.根据每例患者的白血病特点选择抗体组合,MRD≥0.01％为阳性,否则为阴性.用Kaplan-Meier法统计持续完全缓解(CCR)率,用Log-rank检验方法比较MRD阳性与阴性患者CCR率差异.结果 163例患者中急性髓系白血病(AML) 108例,急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)55例.89例AML患者在诊断后1年内接受MRD监测,根据化疗至12个月时的MRD检测结果将患者分为MRD阳性及阴性组:30例MRD阳性者中仅3例CCR至2010年7月,24、36个月的CCR率分别为13％、13％;59例MRD阴性者中47例CCR至2010年7月,24、36个月的CCR率分别为94％、78％;两组CCR率差异有统计学意义(P＜0.01).35例B-ALL患者在诊断后5个月内接受MRD监测,根据MRD检测结果将患者分为MRD阳性及阴性组:13例MRD阳性者无一例CCR至2010年7月,24、36个月的CCR率为0;22例MRD阴性者中20例CCR至2010年7月,24、36个月的CCR率均为96％;两组CCR率差异有统计学意义(P＜0.01).超过以上监测时间MRD阳性的其他患者均复发,而MRD持续阴性者很少复发.结论 用FCM定期监测AL的MRD有良好的预后价值.     

实时荧光定量PCR检测急性淋巴细胞白血病患者TCR VγI-Jγ基因重排

目的　探索提高急性淋巴细胞白血病 (ALL)微量残留病 (MRD)检测技术。方法　构建实时荧光定量聚合酶链反应 (PCR)检测TCRVγI Jγ基因重排技术并定量分析 36例ALL患者的检测结果。结果　建立的实时荧光定量PCR方法的灵敏度为 10 -4水平。 36例患者荧光定量PCR方法检测结果初治组为 (7.38± 6 .6 5 )× 10 -2 ,完全缓解 (CR)组为 (1.0 2± 1.0 8)× 10 -2 ,造血干细胞移植(HSCT)组为 (3.89± 5 .6 5 )× 10 -3 。CR组和HSCT组TCRVγI Jγ基因重排水平显著低于初治组 (P值均为 0 .0 0 1) ,HSCT组MRD水平显著低于CR组 (P <0 .0 5 )。 6例HSCT后检测阳性病例中 2例MRD水平 <1× 10 -3 ,获长期无病生存 ,另 4例MRD水平较高患者一年内均出现复发。结论　所建立的实时荧光定量PCR方法简便、快速、灵敏及特异 ;实时荧光定量检测缓解期ALL患者MRD水平对预测预后有一定的意义     

多参数流式细胞术对急性髓系白血病微小残留病变与疾病复发的监测

本研究探讨微小残留病变（MRD）检测对急性髓系白血病（AML）治疗后疾病复发的预测作用。采用多参数流式细胞术（multiparameter flow cytometry,MPFC）分析AML治疗前白血病相关免疫表型（1eukemiaassociatedimmunphenotypes,LAIP）,检测诱导和巩固治疗后MRD（Post—IndMRD,Post—ConsMRD）的水平。结果表明：122例初发AML患者中（AML—M3除外）,有115例（94．3％）存在明确的LAIP,其中存在单一LAIP类型的患者15例（13．0％）,存在2个或2个以上LAIP类型的患者100例（87．0％）。抗原跨系列表达者占40．9％,抗原跨阶段表达者、抗原过度表达者和抗原表达减弱或缺失者分别占20．9％、27．0％和34．8％。对41例诱导化疗后达完全缓解并进行2个疗程以上巩固治疗的AML患者MRD监测显示,Post—IndMRD＋的24例中,巩固治疗后18例复发;Post—IndMRD-者17例中,巩固治疗后5例复发;Post—IndMRD-患者和Post—IndMRD＋患者的平均无病生存时间（RFS）分别为43．05±6．25个月和12．48±1．69月（P〈0．0001）。Post—ConsMRD＋者18例均复发;Post—ConsMRD一者23例中仅5例复发。Post—ConsMRD-患者和Post—ConsMRD＋患者的平均RFS分别为39．32±5．44月,9．72±1．51个月（P〈0．0001）。结论：Post—IndMRD水平和Post—ConsMRD水平均与AML患者的RFS密切相关,可作为AML治疗依赖的预后因素。     

定量分析儿童急性淋巴细胞白血病脑脊液微小残留病

目的：总结急性淋巴细胞白血病(急淋)患儿脑脊液中微小残留病(minimal residual dis-ease，MRD)的变化及其临床意义。方法：确诊为急淋患儿18例，采用一步煮沸法提取脑脊液白细胞DNA，采用常规酚-氯仿抽提法提取骨髓DNA。追踪并采用改良的极限稀释法定量检测MRD值。分析初治病例在骨髓诱导达到缓解时脑脊液MRD值与预后的关系。结果：诱导缓解的18例中，9例脑脊液MRD阳性，9例阴性。经随访MRD阳性者，有5例发生中枢神经系统白血病(central nervous system leukemia，CNSL)；而阴性者无l例发生CNSL。结论：急淋完全缓解时，脑脊液MRD高水平者发生CNSL的危险性较高，故追踪检测脑脊液MRD对临床CNSL的预防、治疗有一定的指导意义。     

MRD检测新靶点在急性髓系白血病复发中的研究现状

大多数急性髓系白血病(AML)患者虽然在标准化疗方案诱导下可达到完全缓解(CR),但缓解后的复发率仍高居不下,最关键的原因在于其在细胞遗传学和分子生物学方面的高度异质性.有证据表明,微小残留病(MRD)与疾病复发密切相关,因此,寻找特定的遗传学和分子生物学改变作为MRD检测的新靶点成为近些年的研究热点.本文旨在阐述AM...     

多参数流式细胞术动态监测儿童B系急性淋巴细胞白血病微量残留病的临床意义

摘要本研究旨在探讨儿童B系急性淋巴细胞白血病（B-ALL）化疗过程中监测不同时间点微量残留病（MRD）水平的临床意义。回顾性分析我院2008年8月至2011年9月以流式细胞术监测3个时间点（即诱导化疗第15天、第33天和治疗第12周）的206例B-ALL患儿骨髓的MRD。结果表明：①206例B-ALL患儿中196例诱导化疗后迭完全缓解（CR）（CR率95．1％）,其1年与3年无事件生存（EFS）率分别为（92．7±1．8）％和（78．7±3．7）％,其中标危、中危、高危组的3年EFS率分别为（85．6±4．9）％、（82．1±5．8）％和（58．1±9．2）％,3组比较有明显统计学差异（P〈0．001）;②各时间点上MRD分析显示：MRD水平越高,患儿的3年EFS率越低,其中第15天MRD≥10^-2组、第33天和第12周MRD≥10^-3组的患儿预后明显不佳;多因素分析显示,第12周MRD≥10^-3为独立的不良预后因素;第12周MRD〈10^-3的3年EFS率为（86．3±4．1）％,MRD≥10^-3的3年EFS率为（55．8±9．1）％,差异有统计学意义（P〈0．05）;③在化疗第33天MRD阴性（MRD〈10^-4）的98例患儿中有8例复发（复发率为8．2％）,在这98例惠儿中有39例在第12周时转为阳性（MRD≥10^-4）,其中5例复发;在第12周时MRD仍为阴性的59例中有3例复发;在第33天MRD阳性的108例患儿中有19例复发（复发率为17．6％）,复发率在MRD阳性和阴性两组间差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：B-ALL患儿治疗过程中以流式细胞术动态监测MRD可有效地评估治疗反应、判断预后、预测复发及指导化疗方案的调整,其中第15天、第33天及第12周的MRD分别以10^-2、10^-3、10^-3为区分危险度最佳界值,第12周MRD≥10^-3为独立的不良预后因素。     

FLT3基因动态监测在急性髓系白血病治疗中的应用

微小残留病（Minute Residual Disease,MRD）是急性髓系白血病（Acute myeloid leukaemia,AML）复发和妨碍长期无病生存率的重要原因。本研究旨在探讨FLT3基因在AML发病中的作用及对微小残留病（MRD）检测的意义。应用PCR技术检测了125例AML患者在化疗与异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）治疗前后FLT3基因的表达,并对FLT3基因阳性者进行了随访观察。结果表明：PCR检测FLT3基因的灵敏度为10-4;AML初诊患者中FLT3基因的阳性表达率为69.6%;完全缓解（CR）患者FLT3表达基因阳性表达率44.90%,FLT3转为阴性者占48.98%;FLT3表达无改变者占6.12%;复发者FLT3基因表达转为阳性,而未缓解者FLT3持续阳性,治疗前FLT3阳性AML患者完全缓解率低于FLT3基因表达阴性患者,两者有显著性差异（p〈0.05）。获得CR的FLT3阳性AML患者的复发率显著高于FLT3阴性患者（p〈0.05）。结论：FLT3基因表达与白血病发生有关,PCR动态检测AML患者治疗前后FLT3表达水平,可作为判断AML白血病预后和监测微量残留病的一项指标。     

Minimal residual disease monitoring by flow cytometry in children with acute lymphoblastic leukemia

The cells that have avoided the action of antitumor drugs may be retained after remission achievement during induction therapy and consolidation. A combination of these cells is given the name minimal residual disease (MRD). Multicolor flow cytometry has recently attracted considerable interest as the most promising method for measuring the content of residual tumor blasts. This technique is based on the detection of the so-called leukemia-associated immunophenotype (LAIP), i.e., a tumor-specific combination of the expression of membrane and cytoplasmic markers. Flow cytometry may be successfully used to monitor MRD in 90-95% cases of acute lymphoblastic leukemia (ALL) and in 80-85% of patients with acute myelocytic leukemia. The sensitivity of flow cytometry, which is real for routine flow techniques, is a possibility of identifying one cell among 10(4)-10(5) cells. Multicolor flow cytometry (that involves the simultaneous analysis of the expression of a few markers) is the most reasonable tool for MRD monitoring. The monoclonal antibody panels recommended by different groups of investigators for MRD monitoring in B-lineage ALL include antibodies to the pan-B-cell antigen CD19, markers of different stages of differentiation of B-lineage precursors of CD10, CD34, and CD20 and leukemia-associated markers different for each panel, such as CD22, CD38, CD58, CD45, TdT, CD13, CD33. The hyperexpression of CD10, CD34, CD19, TdT, the decreased expression of CD38, CD45, CD22, CD19, the simultaneous expression of markers of different stages of differentiation of B lymphocytes, such as CD10 and CD20, and the lymphoblast coexpression of myeloid markers of CD13, CD33, CDS15 are the most frequently described immunophenotype aberrations in B-lineage ALL. The selection of combinations of markers for MRD monitoring in children with T-ALL is based on the simultaneous expression of combinations of the antigens characteristic for early stages of differentiation of normal T lymphocytes, namely TdT and cytoplasmic CD3. Some authors consider the use of CD99 versus TdT to be most appropriate. There is recent evidence that MRD-positive patients have a higher cumulative risk for recurrences as compared with those without residual blasts. Moreover, the longer the tumor cells are retained during therapy, the worse the prognosis is. Thus, for choice of the adequate intensity of antitumor therapy, it is necessary to qualitatively and quantitatively assess MRD by multicolor flow cytometry at different stages of therapy.