姜黄素和环氧合酶-2抑制剂NS-398对肝星状细胞时效的双向调节体外实验研究

【目的】观察抗氧化剂姜黄素（Cur）与选择性环氧合酶-2（COX-2）抑制剂NS-398两种药物同时联用或分时联用对大鼠肝星状细胞（HSC）生长的影响。【方法】体外培养大鼠肝星状细胞株HSC-T6，接种96孔板，分为5组。I：单独姜黄素系列浓度组（0、20、30、40μmol／L）；单独NS-398系列浓度组（0，20,40，80μmol／L）；Ⅱ：单独NS-398系列浓度组（ABS1）和NS-398系列浓度组＋姜黄素20μmol／L（,4BS2）对大鼠HSC增殖的影响。Ⅲ：两种药物同时加药组；Ⅳ：两种药物先后6h加药组：先加姜黄素20μmol／L作用HSC6h后加NS-398系列浓度组（0、20、40、80wmol／L）；先加NS-398系碉浓度（0、20、40、80Vunol／L）作用HSC6h后加姜黄素20μmol／L组，V：析因分析组。各组设不加药物的细胞对照组，与HSC共同培养，以MTT法检测姜黄素、NS-398单用或同时、分时联用对HSC生长的影响。LDH法检测各组对HSC的细胞毒性舴用。[结果]单独NS-398系列浓度组和单独姜黄素系列浓度组有抑制HSC的作用，但姜黄素的作用比NS-398强；同时加两药组比分时加药组有明显不同，先加NS-398作用HSC6h组比先加姜黄素作用HSC6h组的抑制率明显降低。【结论】时间因素导致两药联用是双向调节，同时加药或先加姜黄素作用HSC6h组后加NS一-98时呈正调节作用，抑制率升高，而先加黼98作用ItSC6h后加姜黄素呈负调节作用，抑制率降低。NS-398对HSC作用一定时间后有抑制姜黄素对HSC起生物效应的作用。     

环氧合酶-2抑制剂联用姜黄素对肝星状细胞增殖抑制作用的观察

目的观察选择性环氧合酶-2抑制剂NS-398与姜黄素联用对大鼠肝星状细胞（hepatic stellate cells，HSC）增殖的影响。方法体外培养肝星状细胞株HSC-T6，接种96孔板，分别加入终浓度为20μmol／L的NS-398和姜黄素，两药物单独或联合应用与HsC共同培养，以M＇IT法检测NS-398、姜黄素单用或联用24h（n=4）对HSC生长的抑制情况。LDH法检测NS-398、姜黄素对HSC的毒性作用。结果NS-398、姜黄素及联合应用两药对HSC的增殖的抑制率分别为6．0％，20．5％，44．0％，与细胞对照组比较差异有显著性（P〈0．01），联合用药组优于单用药组（P〈0．05）。与对照组比较，各浓度组培养上清液中LDH活力差异无显著性（P〉0．05）。结论NS-398与姜黄素均可以抑制HSC增殖，联合用药的效果明显优于任一药物单用。     

姜黄素对胃癌细胞系AGS环氧合酶-2转录和活性的影响

目的探讨姜黄素对胃癌细胞系AGS COX-2转录和活性的影响。方法以选择性COX-2抑制剂NS-398作为阳性对照,应用不同浓度的3种姜黄素（1μmol/L、5μmol/L、20μmol/L）分别对AGS细胞进行干预,作用16 h和24 h后,以逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测COX-2 mRNA的表达,以COX活性检测试剂盒检测COX-2活性。结果与空白对照组相比,姜黄素对AGS细胞COX-2 mRNA的表达具有明显抑制作用（P〈0.05）,而且这种作用呈剂量和时间依赖性（P〈0.05）;与空白对照组相比,姜黄素对AGS细胞COX-2活性具有明显抑制作用（P〈0.05）,而且这种作用呈剂量和时间依赖性（P〈0.05）;姜黄素与NS-398联合应用对COX-2 mRNA表达和COX-2活性的抑制作用具有协同性（P〈0.05）。结论姜黄素对胃癌细胞的COX-2转录和活性具有抑制作用,与选择性COX-2抑制剂NS-398联用时两者的抑制作用具有协同性,为姜黄素或姜黄素联合选择性COX-2抑制剂在胃癌化学预防中的应用提供了新的理论依据。     

NS-398和抗癌药联用对胃癌细胞增殖的影响

目的探讨选择性环氧合酶-2(COX-2)抑制剂NS-398和抗癌药5-氟尿嘧啶(5-FU)联用对胃癌细胞增殖的影响。方法不同浓度的NS-398与10μg/mL的5-FU单用、联用48h。四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测各组抑制率,应用中效原理和金正均法判定选择性环氧合酶-2抑制剂与抗癌药联用的效果。结果两药单独应用时药物浓度和抑制率呈量效关系,其效应随药物浓度的增加而增加;两种药物联用抑制率均高于单用,具有协同作用。结论NS-398与5-FU联用后起协同作用,可以作为5-FU的化疗增敏剂。     

环氧合酶2抑制剂NS-398对人肝癌细胞SMMC-7721增殖与凋亡的影响

目的：分析环氧合酶2(COX-2)抑制剂NS-398对人肝癌细胞SMMC-7721形态、细胞周期、增殖和凋亡等的影响,探讨NS-398影响肿瘤细胞生长的机制。方法：应用不同浓度NS-398（25、50、75、100和150 μmol/L）分别作用于SMMC-7721细胞（24、48和72 h）,并设正常对照组,观察各组SMMC-7721细胞形态学,流式细胞术分析各组细胞周期变化和细胞凋亡率,MTT方法分析各组肝癌细胞生长抑制率。结果：随着NS-398浓度和作用时间的增加,细胞逐渐不能贴壁生长,部分漂浮于培养液中,培养液浑浊。与正常对照组比较,不同浓度NS-398组SMMC-7721细胞G0/G1期比例降低、G2/M期比例增高。正常对照组SMMC-7721细胞无凋亡峰,50 μmol/L NS-398组SMMC-7721细胞作用24 h后可见凋亡峰出现,作用72 h后细胞凋亡水平增高明显。NS-398各组细胞生长抑制率呈浓度和时间依赖性升高。结论：COX-2抑制剂NS-398能够抑制肝癌细胞SMMC-7721的增殖,并诱导细胞凋亡,该过程具有明显的时间和剂量依赖性。     

环氧化酶-2选择性抑制剂NS-398逆转HCT-8/FU细胞多药耐药及其机制探讨

目的观察环氧化酶-2(COX-2)选择性抑制剂NS-398对结肠癌细胞HCT-8/FU多药耐药(MDR)的逆转作用,并初步探讨其作用机制。方法通过CCK-8法检测NS-398对HCT-8/FU的耐药逆转倍数,应用免疫细胞化学法检测NS-398作用前后细胞膜P-gp表达情况,流式细胞术检测细胞早期凋亡。结果 NS-398作用HCT-8/FU细胞24 h后,细胞对5-FU的敏感性显著增加,浓度为10μmol/L和20μmol/L时耐药逆转倍数为3.55和10.73倍,呈现剂量依赖性,20μmol/L作用24 h后免疫细胞化学法检测P-gp表达减少,流式细胞术检测到NS-398 10μmol/L、20μmol/L作用24 h,细胞早期凋亡率分别为(11.95±0.325167)%及(21.49±0.690217)%,均验证了该细胞对5-FU重新恢复敏感性。结论环氧化酶-2选择性抑制剂NS-398可逆转HCT-8/FU细胞多药耐药,一定浓度范围内呈现剂量依赖关系,无毒剂量的NS-398亦可具有逆转耐药的作用,其机制可能通过抑制P-gp的表达及促进细胞凋亡起作用。     

选择性环氧合酶-2抑制剂NS-398对食管癌细胞株EC9706的生长抑制作用

目的:探讨NS-398对人食管癌细胞株EC9706的生长抑制作用。方法:采用3H-TdR掺入法检测不同浓度(0、10、20、50、100μmol/L)和作用24、48、72、96h的NS-398对细胞的增殖抑制效应;采用流式细胞术(FCM)及DNA片段分析法检测NS-398诱导的细胞凋亡情况。结果:EC9706经不同浓度的NS-398处理后,实验组3H-TdR掺入量明显减少,具有时间和剂量依赖关系,与对照组比较差异显著(P<0.05或P<0.001)。FCM检测发现实验组在G1期前出现亚倍体凋亡峰,细胞凋亡率达(45.23±1.08)%,并出现典型的细胞凋亡梯带;而对照组无凋亡峰出现,细胞凋亡率为(2.14±0.28)%,两组比较有显著性差异(P<0.001)。结论:NS398对食管癌细胞株EC9706细胞具有增殖抑制作用和诱导细胞凋亡作用。     

顺铂联合COX-2选择性抑制剂NS-398对食管癌Eca-109细胞增殖和凋亡的影响

目的 体外观察顺铂(diamminedichloroplatinum, DDP)以及DDP联合环氧合酶-2(cyclooxygenase, COX-2)选择性抑制剂NS-398对人食管癌Eca-109细胞增殖和凋亡的影响,比较单独应用DDP与DDP联合NS-398应用于食管癌Eca-109细胞的抗肿瘤效应.方法 CCK-8法检测不同浓度的DDP(1.25、2.50、5.00、10.00、20.00 mg/L)单独作用及DDP联合NS-398(1.00、10.00 μmol/L)作用Eca-109细胞24 h的细胞增殖抑制率.琼脂糖凝胶电泳技术检测DDP(1.25、2.50、5.00 mg/L)单用及联合NS-398(1.00、10.00、80.00 μmol/L)作用Eca-109细胞24 h和48 h的DNA Ladder出现情况.透射电镜观察DDP单用以及联合NS-398作用于Eca-109细胞24 h超微结构的变化.药物未处理组作为对照组.结果 细胞增殖抑制实验表明顺铂、NS-398对Ec-109细胞有剂量依赖性抑制增殖作用(P<0.05).顺铂联合NS-398用药组细胞增殖抑制率明显高于同浓度顺铂单用组,且随添加的NS-398的剂量的增加而增加,DDP联合NS-398用药组对Ec-109细胞的增殖抑制效应和诱导凋亡效应明显高于DDP单药组,二者具有协同效应.结论 与DDP单用相比,添加低剂量NS-398能够增强DDP对Eca-109细胞的增殖抑制效应和诱导凋亡效应.     

COX-2选择性抑制剂联合奥沙利铂对结肠癌HCT-8细胞增殖和凋亡的影响

目的观察环氧合酶-2(COX-2)选择性抑制剂NS-398联合奥沙利铂(L-OHP)对结肠癌HCT-8细胞增殖和凋亡的影响,比较NS-398联合L-OHP与单独应用L-OHP对结肠癌HCT-8细胞的杀伤效应。方法 CCK-8法检测不同浓度的L-OHP(1.25、2.50、5.00、10.00及20.00μmol/L)单独作用及L-OHP联合NS-398(20.00及80.00μmol/L)作用HCT-8细胞24 h的细胞增殖抑制率。分别应用流式细胞术检测细胞早期凋亡率;Hoechst33258染色观察细胞凋亡形态学改变;分光光度法检测Caspase-3的活性。结果细胞增殖抑制实验表明L-OHP、NS-398对HCT-8细胞有剂量依赖性抑制增殖作用(P<0.05)。NS-398联合L-OHP用药组细胞增殖抑制率明显高于同浓度L-OHP单用组,且随着添加的NS-398剂量的增加而增加,联合用药组对HCT-8细胞的诱导凋亡效应明显高于L-OHP单药组,二者具有协同效应。两药均能提高Caspase-3的活性,联合用药组中Caspase-3的活性显著高于L-OHP组和NS-398组(P<0.01)。结论 NS-398和L-OHP均能抑制HCT-8细胞的增殖及诱导凋亡,NS-398能够显著增强L-OHP的癌细胞增殖抑制及诱导凋亡作用。     

CD40配体通过诱导型环氧合酶途径诱导单核巨噬细胞分泌基质金属蛋白酶

目的:观察重组人CD40配体(rhCD40L)对U937细胞分泌基质金属蛋白酶(MMPs)的影响,探讨其可能的作用机制.方法:不同浓度(0.1、0.2、0.4 μg/ml)的rhCD40L和不同浓度(10-5、10-4、10-3 mol/L)的NS-398(COX-2特异性抑制剂)分别刺激体外培养的U937细胞24 h后收集上清液;在加入终浓度为0.4 μg/ml rhCD40L的基础上,分别加入终浓度为10-4 mol/L的阿司匹林(COX-1抑制剂)或NS-398,共同刺激U937细胞24 h后收集上清液.酶谱法测定上述U937细胞培养上清中MMPs活性.结果:rhCD40L可使MMP-2和MMP-9活性增加(P＜0.01),且随浓度的增加而逐渐增强,0.4 μg/ml rhCD40L作用最强;NS-398可抑制MMP-2和MMP-9的活性,且抑制作用随剂量的增加而增强(P＜0.05).NS-398、阿司匹林均可抑制rhCD40L诱导U937细胞分泌MMP-2和MMP-9(P＜0.01),NS-398的抑制作用强于阿司匹林(P＜0.05).结论:rhCD40L以浓度依赖的方式诱导单核巨噬细胞分泌MMPs,这种诱导作用可能与诱导型环氧合酶(COX)有关,而且与COX-2的相关性可能较COX-1更密切.     

DHA和NS-398联合对人胆管癌QBC939细胞的抑制作用

目的 研究二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA)和选择性环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)抑制剂NS-398联合对人胆管癌细胞QBC939的抑制作用。 方法 体外培养人胆管癌QBC939细胞株,分别设立DHA浓度组、NS-398浓度组、二者联合组和空白对照组,即将0、15、30、45、60、75 μg/ml浓度的DHA和0、25、50、100、150、200 μmol/L浓度的NS-398分别联合作用于胆管癌QBC939细胞;应用CCK8法检测其分别对QBC939细胞生长的相对抑制率;采用流式细胞术检测QBC939细胞的凋亡情况;应用Transwell小室检测QBC939细胞的体外侵袭情况。 结果 DHA和NS-398在体外均能够单独抑制QBC939细胞生长,45 μg/ml的DHA联合100 μmol/L的NS-398经24 h作用后,细胞生长抑制率达到90%,实验组与DHA浓度组、NS-398浓度组和空白组差异均有统计学意义(P<0.05),继续增加2种药物浓度,细胞生长抑制率变化不明显;流式细胞术显示DHA和NS-398联合能明显促进QBC939细胞早期凋亡;15 μg/ml的DHA联合50 μmol/L的NS-398经24 h作用后,对胆管癌细胞生长无明显抑制作用,但QBC939的体外侵袭能力明显降低,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01)。 结论 DHA和NS-398联合能明显抑制胆管癌QBC939细胞生长,促进胆管癌细胞早期凋亡,抑制胆管癌细胞的侵袭,二者联合对胆管癌QBC939细胞生长的抑制作用可能是通过促进细胞早期凋亡实现的。      

姜黄素、阿米洛利联用对大鼠肝星状细胞增殖的影响

目的　探讨姜黄素 (curcumin)、阿米洛利 (Amiloride)联用对大鼠肝星状细胞增殖的影响。方法　HSC T6细胞与不同浓度的姜黄素、阿米洛利共同培养 2 4h。LDH法观察姜黄素、阿米洛利对HSC T6的毒性作用 ,以MTT法观察姜黄素、阿米洛利单用及联用对HSC T6增殖的效应。结果　各治疗组HSC的增殖与对照组相比明显为低 ,均有显著性差异 (P <0 0 0 1) ;联用组对HSC增殖的抑制率最高 ;联用组HSC的增殖更低于姜黄素组 (P <0 0 5 )。各治疗组培养上清液中LDH活力与对照组相比未见显著性差异 (P >0 0 5 )。结论　姜黄素、阿米洛利均可抑制HSC的增殖 ,且联用组优于姜黄素单用组 ;它们的作用不是非特异性细胞毒作用所致。     

环氧化物酶抑制剂NS-398联合奥沙利铂对宫颈癌HeLa细胞生长抑制及诱导凋亡作用的研究

目的 研究环氧化酶抑制剂NS-398联用奥沙利铂(L-OHP)对宫颈癌HeLa细胞的抑制及诱导凋亡作用.方法 体外培养人宫颈癌HeLa细胞,CCK-8法检测不同浓度NS-398(0、30、60μmol/L),L-OHP(0.0、2.5、5.0、10.0 mg/L)单独作用及联合作用于HeLa细胞后对细胞的抑制作用;将H...     

环氧合酶-2选择性抑制剂对乳腺癌细胞株生长及凋亡的影响

目的观察环氧合酶-2(COX-2)的特异性抑制剂NS-398对乳腺癌MCF-7细胞的生长抑制和凋亡作用,及其对阿霉素(ADM)诱导的MCF-7细胞凋亡作用的影响。方法应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法分析NS-398对MCF-7细胞的生长抑制作用,进一步用NS-398和ADM单独及联合作用于MCF-7细胞,流式细胞术检测细胞的凋亡,免疫印迹法检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Pax的表达。结果40μg／ml的NS-398就可抑制MCF-7细胞生长、诱导其凋亡,下调Bcl-2蛋白表达;和ADM联用凋亡率显著增高。结论NS-398可抑制MCF-7细胞生长、诱导其凋亡,并且和阿霉素有协同作用,其诱导凋亡与Bcl-2表达下调有关。     

姜黄素对人卵巢癌细胞株HO-8910增殖和凋亡的影响

目的:探讨姜黄素对体外培养人卵巢癌HO-8910细胞增殖和凋亡的影响。方法:选用人卵巢癌细胞株HO-8910进行体外培养至对数生长期,以0~80μmol/L姜黄素(5μmol/L,10μmol/L,20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L)分别处理HO-8910细胞24、48、72h,四甲基偶氮唑蓝(MTT)实验测定细胞的生长抑制率;流式细胞仪检测不同浓度药物对细胞凋亡率的影响;免疫组化法检测PCNA在细胞中的表达,评价细胞的增殖状态。结果:姜黄素对HO-8910细胞增殖抑制率随药物浓度增加及作用时间延长有升高趋势,呈时间剂量依赖性。姜黄素作用24h随浓度的升高PCNA阳性表达逐渐降低。流式细胞仪分析证实随着浓度的升高细胞凋亡率和膜受损率均提高。结论:姜黄素对人卵巢癌细胞株HO-8910的生长有显著的抑制作用,并能诱导其凋亡。     

硫化氢对氧应激下大鼠肝星状细胞的收缩和黏附作用

目的 探讨硫化氢(H2S)含量的变化对氧应激下大鼠肝星状细胞(HSC)收缩和黏附作用影响.方法 将HSC分为空白组(B组,HSC-T6);对照组(C组,HSC-T6+ 500μ mol/L FeN-TA);NaHS组(N组,N1:HSC-T6+500μmol/L FeNTA+100μmol/L NaHS;N2:HSC-T6+500μmol/L FeNTA+200μmol/L NaHS;N3:HSC-T6 +500μmol/L FeNTA+ 300μ mol/LNaHS;N4:HSC-T6 500μmol/L FeNTA+ 400μmol/LNaHS);GLBN组(G组,G1:HSC-T6+ 500μmol/L FeNTA+ 200 μmol/LGLBN;G2:HSC-T6+ 500μmol/L FeNTA+ 400μmol/LGLBN).应用500 μmol/L次氮基三乙酸铁(FeNTA)制备氧应激模型.采用聚硅酮膜法直观检测氧应激模型大鼠肝星状细胞收缩情况、甲苯胺兰染色法测定细胞黏附率、Boyden Chamber小室法测定HSC跨膜迁移数量.给予不同浓度的外源性H2S供体NaHS和KATP通道阻断剂格列本脲(GLBN),在不同刺激条件下,观察上述指标.结果 HSC被NaHS处理后可见聚硅酮膜由于细胞收缩而引起明显皱纹,能够明显促进HSC收缩,而且随H2S浓度的升高和作用时间的延长,HSC收缩程度增强,这些作用能够被格列本脲阻止.加入200、400 μmol/L H2S的HSC黏附抑制率分别为62.4％、81.7％,与对照组相比有显著差异;100、200、300、400 μmol/L 4种不同浓度NaHS的HSC细胞迁移数量为6.43×103、8.85×103、11.34×103、14.86×103,与对照组(2.52×103)比较存在显著差异.结论 H2S在氧化应激下能促进HSC的收缩.H2S通过抑制细胞黏附、增加HSC跨膜迁移数量发挥细胞保护作用.     

诱导型环氧合酶抑制剂对重组人CD40配体抑制人Ⅰ型胶原α2(Ⅰ)链启动子活性的影响

目的:观察诱导型环氧合酶(COX-2)抑制剂NS-398对重组人CD40配体(rhCD40L)抑制人Ⅰ型胶原α2(Ⅰ)链启动子活性的影响,探讨NS-398治疗AS的可能机制.方法:体外培养人血管平滑肌细胞(VSMCs),人Ⅰ型胶原α2(Ⅰ)链基因启动子重组质粒pCOLH22.4和pCOLH21.6扩增和酶切鉴定后转染VSMCs,用不同浓度rhCD40L (0.1、0.2、0.4 μg/ml)、100 μmol/L NS-398以及rhCD40L(0.4 μg/ml) NS-398(100 μmol/L)作用于转染后细胞, ELISA检测各组细胞CAT目的基因的表达,以未加任何细胞因子或药物处理的成功转染后细胞为对照组.结果:与对照组相比,NS-398增加pCOLH22.4、pCOLH21.6 CAT基因的表达(P《0.05);rhCD40L抑制Ⅰ型胶原基因启动子活性,且呈剂量依赖性,0.4 μg/ml的rhCD40L对启动子活性抑制作用最强(P《0.05);而NS-398可以逆转0.4 μg/ml rhCD40L的抑制作用(P《0.05).结论:NS-398增加Ⅰ型胶原基因启动子活性,在转录水平上促进Ⅰ型胶原的表达;rhCD40L抑制人Ⅰ型胶原α2(Ⅰ)链启动子活性可能与COX-2通路有关.     

环氧合酶-2抑制剂调控Stat5信号转导通路抑制结肠癌细胞增殖的分子机制

目的观察选择性环氧合酶-2（COX-2）抑制剂NS-398对结肠癌细胞系SW480中Stats与PPAR8信号转导通路的影响,以期初步阐明选择性COX-2抑制剂抗结直肠癌非COX-2依赖性的作用机制。方法应用RT—PCR检测结肠癌细胞系SW480中COX-2 mRNA表达水平,用选择性COX-2抑制剂NS-398处理结肠癌细胞系SW480,Western印迹检测Stats与PPAR8信号转导通路成员表达,四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测细胞增殖状态,流式细胞技术检测细胞周期与凋亡情况。结果结肠癌细胞系SW480中未检测到COX-2 mRNA表达,NS-398（75μmol／L）作用于SW480细胞72h后,G1期细胞比率由31．2％上升至40．6％,S期细胞比率由52．8％下降至41．2％,细胞增殖受抑制。Stats、PPAR8、细胞周期蛋白D1与Bcl—x1表达水平随NS-398作用时间延长而下降。结论选择性COX-2抑制剂NS-398可能通过非COX-2依赖途径影响结肠癌细胞的增殖。     

姜黄素对骨肉瘤细胞增殖、凋亡影响及作用机制研究

目的:探讨姜黄素对骨肉瘤细胞增殖、凋亡的影响及作用机制。方法:选用骨肉瘤MG-63细胞株,分别采用不同浓度的姜黄素进行处理。采用MTT比色法检测骨肉瘤MG-63细胞增殖抑制率,采用流式细胞仪检测骨肉瘤MG-63细胞凋亡情况,采用Western Blot法检测骨肉瘤MG-63细胞凋亡相关蛋白表达水平。结果:①干预12、24、48 h后,与对照组比较,姜黄素各浓度组骨肉瘤MG-63细胞增殖抑制率较高,且姜黄素5μmol/L组10μmol/L组15μmol/L组及20μmol/L组,差异有统计学意义(P0.05)。②干预48 h后,与对照组比较,姜黄素各浓度组骨肉瘤MG-63细胞凋亡率较高,且姜黄素5μmol/L组10μmol/L组15μmol/L组,差异有统计学意义(P0.05)。③与对照组比较,黄素各浓度组骨肉瘤MG-63细胞P53、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Caspase-9前体(proCaspase-9)蛋白表达水平较低,且姜黄素5μmol/L组10μmol/L组15μmol/L组,差异有统计学意义(P0.05)。④与对照组比较,姜黄素各浓度组骨肉瘤MG-63细胞Bcl相关蛋白(Bax)、细胞色素C(Cyt-C)、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白表达水平较高,且姜黄素5μmol/L组10μmol/L组15μmol/L组,差异有统计学意义(P0.05)。结论:姜黄素能剂量依赖性的抑制骨肉瘤MG-63细胞增殖,并促进其凋亡,其作用可能与下调P53、Bcl-2、proCaspase-9蛋白表达,上调Bax、Cyt-C、Caspase-3蛋白表达,激活线粒体凋亡途径有关。     

姜黄素联合顺铂对肺癌A549细胞侵袭转移的影响及其可能机制

目的 探究姜黄素联合顺铂对肺癌A549细胞侵袭转移的影响并探讨其对基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase 9,MMP-9)、上皮钙黏素(E-cadherin)等与侵袭转移相关蛋白的影响。方法 运用四甲基偶氮唑盐法检测姜黄素及顺铂两种药单用及联用后对肺癌细胞增殖的影响;运用Transwell小室测定姜黄素、顺铂及两药联用对肺癌细胞侵袭转移的影响;用Western blot检测姜黄素及顺铂单用及联用后肺癌细胞内MMP-9、E-cadherin蛋白的表达。结果 5、10、20、40μmol/L的姜黄素对肺癌A549细胞的增殖抑制率分别为6.50%±1.06%、11.70%±0.88%、22.97%±0.82%、27.93%±0.94%;四种浓度不相同的姜黄素组与对照组相比,差异有统计学意义(P0.01);四种浓度不相同的姜黄素组之间相比,差异有统计学意义(P0.05)。1、2、4mg/L的顺铂对肺癌A549细胞的增殖抑制率分别为7.12%±0.86%、20.07%±1.14%、26.88%±0.51%;三种浓度不相同的顺铂组与对照组相比,差异有统计学意义(P0.01),三种浓度不相同顺铂组之间相比,差异有统计学意义(P0.01)。姜黄素(2Oμmol/L)联用顺铂(1 mg/L)、姜黄素(20μmol/L)联用顺铂(2 mg/L)、姜黄素(20μmol/L)联用顺铂(4 mg/L)对肺癌A549细胞的增殖抑制率分别是28.37%±0.57%、39.72%±0.64%、46.27%±0.86%;联合用药组和对照组相比,差异有统计学意义(P0.01);联合用药组与单药组比较,差异有统计学意义(P0.01)。姜黄素组(20μmol/L)、顺铂组(2 mg/L)、联合组(姜黄素20μmol/L+顺铂2 mg/L)对肺癌A549细胞的侵袭抑制率分别38.62%±0.23%、36.52%±0.33%、63.78%±0.59%;用药组与对照组比较,差异有统计学意义(P均0.01);联合组与单一用药组比较,差异有统计学意义(P均0.01)。对照组、姜黄素组(20μmol/L)、顺铂组(2 mg/L)、联合组(姜黄素20μmol/L+顺铂2 mg/L)肺癌细胞内蛋白的灰度值比值分别是:MMP-9,0.768±0.047、0.654±0.104、0.684±0.008、0.444±0.104;E-cadherin,0.603±0.170、0.792±0.050、0.784±0.045、0.879±0.110。药物组与对照组比较,差异有统计学意义(P均0.01),联合组与单药组比较,差异有统计学意义(P均0.05)。结论 姜黄素及顺铂联用可以抑制肺癌A549细胞的侵袭与转移,其机制可能与下调MMP-9蛋白,增加E-cadherin蛋白相关。