四种归肝经明目中药防护晶状体氧化损伤和上皮细胞凋亡的研究

目的 :探讨四种归肝经明目中药车前子、青葙子、菊花和熟地对晶状体氧化损伤及晶状体上皮细胞 (lensepithelialcell,LEC)凋亡的防护作用。方法 :将 2 1只 (42眼 )新西兰白兔晶状体分成 7组 :空白对照组、Fenton组、吡诺克辛钠 (PS)组和车前子、青葙子、菊花及熟地四种归肝明目中药组。采用Fenton反应复制兔晶状体氧化损伤模型 ,在显微镜下观察各组晶状体的混浊程度 ,并分别测定晶状体酶性和非酶性抗氧化剂水平。同样 ,将 2 1只 (42眼 )SD大鼠双眼随机分成上述 7组 ,采用H2 O2 复制LEC凋亡模型 ,同时分别采用上述不同药物干预。应用TUNEL法检测LEC凋亡及凋亡率、透射电子显微镜观察LEC超微结构改变和凋亡小体形成。结果 :四种归肝明目中药组的晶状体混浊程度均明显轻于Fenton组 ;四种归肝明目中药组晶状体中酶性抗氧化剂的活性和非酶性抗氧化剂的含量均明显高于Fenton组。四种归肝明目中药组LEC凋亡率均显著低于H2 O2 组 (P <0 .0 1) ,且与PS组均有显著性差异 (P <0 .0 5 )。超微结构研究显示 ,H2 O2 组绝大多数LEC发生凋亡 ,并呈凋亡各期改变 ;四种归肝明目中药组均仅有少数LEC发生凋亡 ,并多为早期或中期的轻微改变。结论 :四种归肝经明目中药均可通过提高晶状体的抗氧化能力对抗晶状体的氧化损伤 ,抑     

凋亡相关基因Caspase-9在年龄相关性白内障晶状体上皮细胞中的表达及意义

目的探讨细胞凋亡相关基因Caspase9在年龄相关性白内障晶状体上皮细胞中的表达及意义。方法采用免疫组织化学法和末端脱氧核苷酸转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL),分别观察对照组和白内障组晶状体上皮细胞中Caspase9的表达水平及细胞凋亡的情况。结果对照组与白内障组相比较,晶状体上皮细胞中Caspase9的阳性表达率和细胞凋亡率,均有显著性差异。结论Caspase9在年龄相关性白内障的形成过程中起重要作用。     

晶状体上皮细胞凋亡的研究进展

近年来研究发现,晶状体上皮细胞(LEC)凋亡在白内障的发生中具有重要的作用,并发现多种基因参与调控LEC凋亡本文总结了该方面的研究进展,希望为研究白内障形成机制和防治方法提供新的依据和参考。1LEC凋亡的形态学特点细胞凋亡(apotosis)或称程序性细胞死亡(pragrammed cell death,PCD),是受基因控制的一种主动性细胞自杀过程,是生物体中一种普遍存在的现象。Li[1,2]等用透射电镜观察正常及白     

Bcl-2、Bax、Fas等凋亡基因调控的细胞凋亡与妊娠

目的探讨细胞凋亡的研究进展以及与病理妊娠的关系。方法以国内外发表的有关文献为基础,综述细胞凋亡及病理妊娠研究进展情况。结果胎盘细胞的凋亡和病理妊娠的发生发展有密切相关。结论研究与妊娠有关的细胞凋亡及凋亡基因的表达,将有助于明确多种病理妊娠的发病机制,并为相关疾病的治疗提供新方法。     

老年性白内障晶状体上皮细胞凋亡及Fas、FasL表达的临床意义

目的探讨老年性白内障晶状体上皮细胞凋亡及Fas、FasL表达的临床意义。方法采用免疫组化法检测25例老年性白内障患者(观察组)和10例成人尸体解剖非白内障眼球(对照组)的晶状体前囊膜组织中Fas、FasL的表达,并应用TUNEL方法检测两组LECs的凋亡情况。结果观察组LECs中凋亡细胞百分率为(30.4±3.7)%,对照组LECs中凋亡细胞百分率为(0.27±0.12)%。两组凋亡细胞百分率比较,观察组显著高于对照组,差异有统计学意义(t=11.59,P0.01)。观察组LECs中Fas、FasL蛋白的阳性表达率为60.0%、68.0%,而对照组LECs中Fas、FasL蛋白的阳性表达率为10.0%、20.0%,两组Fas、FasL蛋白阳性表达率比较,观察组显著高于对照组,差异有统计学意义(t=8.95,7.68,P0.01)。25例老年性白内障患者的LECs中Fas、FasL蛋白的表达与细胞凋亡数间均呈正相关(r=0.574,0.614,P0.01)。结论老年性白内障形成过程可能与LECs的凋亡及Fas、FasL的调控有关。     

miR-145-5 p靶向调控MRGBP基因表达对晶状体上皮细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨微小RNA-145-5p(miR-145-5p)是否通过靶向调控MRG结构域结合蛋白(MRGBP)基因表达来影响晶状体上皮细胞增殖和凋亡.方法 使用紫外线照射晶状体上皮细胞SRA01/04,构建细胞凋亡模型.在细胞中转染anti-miR-145-5p或pcDNA-MRGBP,并构建细胞凋亡模型.实时荧光定量P...     

靶向Ccnd1基因的siRNA对大鼠晶状体上皮细胞增殖的抑制作用

目的探讨靶向Ccnd1基因小干扰RNA(si RNA)对培养的大鼠晶状体上皮细胞(LECs)Ccnd1 mRNA和周期蛋白D1表达及细胞增殖的抑制作用。方法合成3条靶向大鼠Ccnd1基因的siRNA(si-Ccnd1-1,si-Ccnd1-2,si-Ccnd1-3),LipofectamineTM2000转染体外培养的大鼠LECs,应用RT-PCR和Western blot方法分别检测Ccnd1 mRNA和周期蛋白D1表达变化,筛选最有效si RNA序列。MTT法连续测定转染最有效si RNA序列后24、48、72、96和120 h细胞增殖情况。结果与对照组相比,3条si RNA均能不同程度地抑制Ccnd1 mRNA和周期蛋白D1的表达,以si-Ccnd1-3最为有效(P<0.05)。与对照组比较,si-Ccnd1-3转染后24 h开始明显发挥对细胞增殖的抑制作用,并持续至120 h以后(P<0.05)。结论靶向Ccnd1的si RNA能有效降低大鼠LECsCcnd1 mRNA和周期蛋白D1蛋白表达,抑制LECs增殖。     

细胞凋亡调控蛋白Bcl-2和Bax在溃疡性结肠炎表达的研究

溃疡性结肠炎的特征性表现在于结肠上皮表浅广泛的缺失和固有层的炎症改变。关于溃疡性结肠炎上皮层破坏的机制目前还不清楚，认为可能与上皮细胞坏死和凋亡均有关。胞细凋亡是为了调控机体发育，维护内环境稳定，而由一系列基因控制的细胞主动死亡过程。Bcl-2（B cell leukemia／lymphoma-2）和Pax（Bcl-2-associated Xproteingene）均为凋亡相关基因。本研究采用免疫组织化学的方法观察溃疡性结肠炎肠黏膜组织中细胞凋亡调控蛋白Bel-2和Bax的表达情况，以了解其在溃疡性结肠炎发病中的作用。     

蛇葡萄根提取物的含药血清对肝星状细胞凋亡及基因Bax/Bcl-2表达的影响

目的:研究中药蛇葡萄根提取物的含药血清对HSC/T6凋亡及凋亡基因Bax/Bcl-2表达的影响,从细胞学和分子生物学水平探讨中药蛇葡萄根抗纤维化的作用机制。方法:用流式细胞仪测定各体积分数(5%,10%和20%)的含药血清对HSC/T6作用后的DNA含量,计算细胞凋亡率;用SABC染色检测凋亡基因Bax和Bcl-2的蛋白表达。结果:含药血清体积分数为5%,10%和20%的蛇葡萄根提取物对HSC/T6的凋亡率分别为8.50%,14.30%和22.65%,均显著大于含生理氯化钠溶液的血清对照组(P<0.01);且均上调HSC/T6的促凋亡基因Bax的蛋白表达,同时下调抗凋亡基因Bcl-2的基因表达。结论:蛇葡萄根提取物含药血清能诱导HSC/T6的凋亡,上调促凋亡基因Bax的表达,下调抗凋亡基因Bcl-2的表达。     

爱普列特对原代培养大鼠输精管上皮细胞及bcl-2表达的影响

目的　探讨爱普列特对原代培养SD大鼠输精管上皮细胞及原癌基因bcl 2表达的影响。方法　应用HE染色、电镜、流式细胞术和免疫组化方法研究爱普列特对输精管上皮细胞形态改变、细胞凋亡率以及bcl 2表达的影响。结果　 0 1 μmol·L- 1 爱普列特对细胞形态无显著影响 ;0 3和 1 0 μmol·L- 1 爱普列特作用 72h后 ,细胞呈核固缩、深染、碎裂、染色质边集等多种形态改变 ,电镜下可见典型的凋亡细胞特征 ;流式细胞仪分析结果显示 ,溶剂对照组细胞凋亡率为 3 42 %± 1 49% ,0 1、0 3和 1 0 μmol·L- 1 爱普列特作用 72h后 ,细胞凋亡率分别为 4 66 %± 2 2 3 % ,39 0 4 %± 1 0 69%和 52 74%± 8 91 % ;免疫组化结果显示输精管上皮细胞bcl 2阳性率为 76 96 %± 9 2 5 % ,0 1、0 3和 1 0 μmol·L- 1 爱普列特作用 72h后 ,Bcl 2阳性表达的百分率分别为 63 93 %± 3 40 %、52 82 %± 8 66 %和 2 9 64 %± 8 74%。结论　 0 1 μmol·L- 1 爱普列特对大鼠输精管上皮细胞无影响 ,0 3和 1 0 μmol·L- 1 可诱导大鼠输精管上皮细胞发生凋亡 ,其作用机制可能与降低bcl 2表达有关     

车前子对晶状体上皮细胞氧化损伤防护作用的信号转导机制

目的：研究车前子对过氧化氢（H2O2）所致氧化损伤的晶状体上皮细胞（LEC）内钙（Ca^2＋）、环磷酸腺苷（cAMP）、环磷酸鸟苷（cGMP）的影响,探讨归肝经明目中药防治白内障的细胞信号转导机制。方法：将H2O2与传代培养的牛LEC共同孵育复制氧化损伤模型,同时加入车前子水提取液孵育后,用四甲基偶氮唑蓝法（MTT）检测LEC活性,用荧光分光光度法检测LEC内钙离子的浓度（[Ca^2＋]i）、放射免疫分析法检测LEC内cAMP和cGMP含量,并探讨不同浓度的车前子及孵育12、24、36h的影响。结果：H2O2组LEC活性下降,车前子可明显增强氧化损伤的LEC活性（P〈0.01）,呈浓度依赖关系和时间依赖关系。H2O2组LEC的[Ca^2＋]i升高,车前子可显著降低由氧化损伤所致的LEC的[Ca^2＋]i的升高（P〈0.01）,呈时间-效应关系。H2O2组LEC的cAMP浓度升高、cGMP浓度下降,车前子可使氧化损伤的LEC的cAMP水平显著降低（P〈0.01）、cGMP水平显著升高（P〈0.01）,也呈时间-效应关系。结论：车前子可明显抑制LEC氧化损伤及凋亡,[Ca^2＋]i、cAMP和cGMP信号系统及其相互作用调节生物学效应可能是其细胞和分子生物学的主要作用机制。     

阿魏酸钠对脓毒症大鼠肾组织Bcl-2和Bax表达的影响

目的观察阿魏酸钠(活血化瘀中成药)对脓毒症大鼠肾脏细胞凋亡及Bcl-2、Bax的影响。方法用盲肠穿孔结扎术制作脓毒症模型;24只SD大鼠随机分为模型组、实验组、假手术组和正常组(均n=6);术后6 h处死大鼠;用光镜观察肾脏病理改变,用免疫组化法检测Bcl-2及Bax的表达。结果模型组Bax表达明显升高(P<0.01),见细胞凋亡;实验组Bax表达明显降低而Bcl-2表达明显升高(P<0.01),病理损伤有改善。结论阿魏酸钠通过下调Bax、上调Bcl-2的表达,提高Bcl-2/Bax比值,抑制肾小管上皮细胞凋亡。     

维生素E与维生素C抑制晶体上皮细胞凋亡研究

目的探讨抗氧化剂维生素(VitE)、维生素(VitC)对H2O2氧化损伤所诱发的晶体上皮细胞(LECS)凋亡的抑制作用。方法在MEM培养基中离体培养兔晶体,分别在不同培养时限时观察对照组和各试验组晶体混浊情况,计算细胞凋亡率。结果H2O2 Vit E组、H2O2 Vit C组和H2O2 Vit E Vit C组晶体混浊度都明显低于H2O2组晶体混浊度(P<0.01),说明它们能够抑制H2O2的氧化损伤作用,其中H2O2 Vit E Vit C组的细胞凋亡率最高时才(11.22±0.25)%明显低于其他2组(P<0.01),抑制效果最好。结论抗氧化剂Vit E和Vit C可抑制H2O2氧化损伤所诱导的兔晶体上皮细胞凋亡及白内障的形成。     

Zinc oxide nanoparticles inhibit Ca2+-ATPase expression in human lens epithelial cells under UVB irradiation

Epidemiological and experimental studies have revealed that lens epithelial cells exposed to ultraviolet B (UVB) light could be induced apoptosis, and lens epithelial cell apoptosis can initiate cataractogenesis. Posterior capsular opacification (PCO), the most frequent complication after cataract surgery, is induced by the proliferation, differentiation, migration of lens epithelial cells. Thus, inhibiting the proliferation of lens epithelial cells could reduce the occurrence of PCO. It is reported that zinc oxide (ZnO) nanoparticles have great potential for the application of biomedical field including cancer treatment. In the present study, we investigated the cytotoxic effect of ZnO nanoparticles on human lens epithelial cell (HLEC) viability. In addition, changes in cell nuclei, apoptosis, reactive oxygen species and intracellular calcium ion levels were also investigated after cells treated with ZnO nanoparticles in the presence and absence of UVB irradiation. Meanwhile, the expression of plasma membrane calcium ATPase 1 (PMCA1) was also determined at gene and protein levels. The results indicate that ZnO nanoparticles and UVB irradiation have synergistic inhibitory effect on HLEC proliferation in a concentration-dependent manner. ZnO nanoparticles can increase the intracellular calcium ion level, disrupt the intracellular calcium homeostasis, and decrease the expression level of PMCA1. UVB irradiation can strengthen the effect of reduced expression of PMCA1, suggesting that both UVB irradiation and ZnO nanoparticles could exert inhibitory effect on HLECs via calcium-mediated signaling pathway. ZnO nanoparticles have great potential for the treatment of PCO under UVB irradiation.     

屈洛昔芬对假孕大鼠黄体细胞凋亡和Bax、Bcl-2蛋白表达的影响(英文)

目的:研究屈洛昔芬对假孕大鼠黄体细胞凋亡和Bax、Bcl-2蛋白表达的影响。方法:HE染色观察大鼠卵巢黄体组织学变化,TUNEL法检测黄体中凋亡细胞的存在,免疫组织化学方法观察假孕大鼠卵巢黄体中Bax和Bcl-2蛋白的表达。结果:成年假孕大鼠卵巢黄体自然退化中黄体细胞凋亡出现在假孕第13天,15天时可观察到凋亡细胞的显著增加。Bax和Bcl-2蛋白在黄体细胞中的表达在整个黄体自然退化中无显著改变。20mg·kg~(-1)假孕大鼠第2天口服给予20mg·kg~(-1)屈洛昔芬后,第8天观察时黄体中出现凋亡细胞,且假孕期从(15.5±1.1)天缩短至(12.8±1.6)天。经屈洛昔芬作用后,假孕大鼠黄体中Bax蛋白的表达增加而Bcl-2蛋白表达下降。结论:成年假孕大鼠卵巢黄体自然退化中有细胞凋亡的发生,屈洛昔芬可加速假孕大鼠黄体细胞凋亡的出现并可缩短假孕期。Bax和Bcl-2蛋白的表达在假孕不同时间时无明显改变,而屈洛昔芬所诱导的Bax/Bcl-2的增加可能与该药物对黄体细胞凋亡的促进作用有关。     

过期妊娠胎盘滋养细胞Bax、Bcl-2基因表达情况的研究

目的 :通过观察过期妊娠患者促凋亡基因Bax和抑凋亡基因Bcl 2在胎盘滋养细胞层的表达 ,探讨细胞凋亡与过期妊娠的关系。方法 :采用免疫组织化学方法对20例过期妊娠和20例正常足月妊娠产妇的胎盘滋养细胞层Bax和Bcl 2基因表达进行检测和对比研究。结果 :胎盘滋养细胞层Bax和Bcl-2基因表达过期妊娠组分别为 (44 87±3 16) %和 (20 03±3 82) % ,足月妊娠组分别为 (43 89±3 96) %和 (34 14±3 85) %。2组比较Bax表达差别无统计学意义 (P>0 05) ,而Bcl 2表达差别有统计学意义 (P<0 05)。结论 :(1)胎盘滋养细胞层抑凋亡基因Bcl 2表达减少 ,可能与过期妊娠有关。 (2)胎盘滋养细胞层促凋亡基因Bax表达与过期妊娠无明显关系     

Oridonin induces apoptosis of HeLa cells via altering expression of Bcl-2 ／ Bax and activating caspase-3 ／ ICAD pathway

INTRODUCTIONHerbal medicine, Donglingcao (rabdosiarubescens), has been traditionally used in China for thetreatment of various diseases such as leukemia.Oridonin (Fig 1) is a diterpenoid compound isolated fromRabdosia rubescens (hemsl). It has various pharmaco-logical and physiological effects such as anti-inflammation, anti-bacteria, anti-tumor[1-3] and has beenused for the treatment of human cancers, especiallyFig 1. Chemical structure of oridonin.esophageal carcinoma[4]. This comp…