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胶体金免疫层析技术同步检测甲、戊型肝炎病毒IgG抗体的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
[目的]探索并建立胶体金免疫层析(GICA)同步检测血清中的甲、戊型肝炎病毒的IgG抗体的方法。[方法]采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记鼠抗人IgG单克隆抗体,制成免疫层析测试条。血清中甲、戊型肝炎的特异性IgG抗体与测试条上金标抗体结合后沿着硝酸纤维素膜移动与膜上固相包被的抗原(HAAg、HEAg)、抗体(羊抗鼠IgG)结合形成肉眼可见的红色线条。[结果]自制的GICA试条与EIA对比检测血清标本188份,各单项指标抗-HAV IgG、抗-HEV IgG两法总符合率分别为98.9%、98.9%,检测灵敏度可达1ng/ml。[结论]用于同步检测血清中的甲、戊型肝炎病毒特异性IgG抗体的GICA试条的制备条件已基本建立;其检测结果特异性强、灵敏度高、操作方法简便、快捷,无需特殊仪器设备,有广泛的应用价值。 相似文献
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戊型肝炎是经肠道传播的一种急性病毒性肝炎,其爆发性流行和散播性传播都时有发生。目前对HEV感染的血清学诊断主要依据HEV-lgM抗体和HEV—lgG抗体的测定来判断,同时检测HEV—lgM抗体和HEV—lgG抗体可大大减少HEV感染的漏检率,而HEV—lgM作为早期诊断和鉴别意义更大,为此我们对市场上常见的四种国产HEV—lgM试剂作了以下比较试验,今报道如下: 相似文献
3.
目的:对MP生物医学亚太私人有限公司(简称MP公司)生产的戊型肝炎病毒IgM抗体快速检测试剂(胶体金法)和戊型肝炎病毒IgM抗体检测试剂(酶联免疫吸附试验,ELISA)进行临床验证,评价其与参比试剂的等效性。方法采用SFDA注册的试剂(北京万泰生物药业股份有限公司生产,ELISA)为参比试剂,与MP公司生产的上述两种试剂,同时对250例标本进行比对试验;如MP公司试剂与万泰试剂检测结果不一致,用SFDA注册的第3方试剂(上海科华生物工程股份有限公司生产,戊型肝炎病毒IgM抗体,ELISA)进行复核。结果MP公司的胶体金法和ELISA试剂与万泰ELISA试剂检测戊型肝炎病毒IgM抗体阴性符合率分别为96.9%和94.9%,阳性符合率分别为94.5%和92.7%,总符合率分别为96.4%和94.4%。两公司试剂检测结果比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论MP公司胶体金法和ELISA检测戊型肝炎病毒IgM抗体试剂,与参比试剂(万泰试剂)具有等效性,可以在临床诊断中应用。 相似文献
4.
目的评价2种戊型肝炎病毒(HEV)IgM抗体诊断试剂的可靠性。方法用捕获法试剂(E2 IgM)和间接法试剂(GL IgM)对349例临床诊断为急性戊型肝炎及急性非甲~戊型肝炎患者的血清进行HEV IgM检测。同时结合其HEV RNA检测结果作为戊型肝炎的确认标准,以此为依据对2种HEV IgM诊断试剂和以往常用的ELISA试剂的可靠性进行评估。同时检测69例散发性急性肝炎患者血清的HEV IgM及甲型肝炎病毒(HAV)IgM,分析HAV IgM对HEV IgM检测可能造成的干扰。结果E2 IgM试剂的敏感性为98.2%,特异性为100.0%;GL IgM试剂的敏感性仅为60.0%,特异性为91.7%;而传统诊断方法的敏感性为77.9%,特异性仅66.0%,三者差异有统计学意义(P<0.05)。E2 IgM、GL IgM及传统诊断方法的总符合率分别为99.1%、85.5%和70.5%。HAV IgM有可能导致GL IgM试剂的假阳性。结论E2 IgM试剂是一种良好的戊型肝炎急性诊断试剂,在临床应用中优于GL IgM试剂和传统诊断方法。 相似文献
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目的评价2种戊型肝炎病毒(HEV)IgM抗体诊断试剂的可靠性。方法用捕获法试剂(E2 IgM)和间接法试剂(GL IgM)对349例临床诊断为急性戊型肝炎及急性非甲~戊型肝炎患者的血清进行HEV IgM检测。同时结合其HEV RNA检测结果作为戊型肝炎的确认标准,以此为依据对2种HEV IgM诊断试剂和以往常用的ELISA试剂的可靠性进行评估。同时检测69例散发性急性肝炎患者血清的HEV IgM及甲型肝炎病毒(HAV)IgM,分析HAV IgM对HEV IgM检测可能造成的干扰。结果E2 IgM试剂的敏感性为98.2%,特异性为100.0%;GL IgM试剂的敏感性仅为60.0%,特异性为91.7%;而传统诊断方法的敏感性为77.9%,特异性仅66.0%,三者差异有统计学意义(P〈0.05)。E2 IgM、GL IgM及传统诊断方法的总符合率分别为99.1%、85.5%和70.5%。HAV IgM有可能导致GL IgM试剂的假阳性。结论E2 IgM试剂是一种良好的戊型肝炎急性诊断试剂,在临床应用中优于GL IgM试剂和传统诊断方法。 相似文献
6.
自 198 9年Reyes等[1] 应用分子克隆技术获得戊型肝炎病毒 (HEV)的基因克隆以来 ,有关戊型肝炎(HE)的研究日渐深入。HEV感染后 ,机体特异性抗体呈现各自的免疫应答规律。作为早期抗体的IgA ,其意义如何尚不清楚。本研究希望通过建立IgA抗HEV检测方法 ,探讨其临床意义。1 材料与方法1 1 病例选择1 1 1 急性散发性戊型肝炎 85例 ,男 6 7例 ,女 18例 ,年龄 18~ 70岁 ,平均 34 7± 13 9岁 ,所有病人临床上均表现为急性肝炎 ,血清IgM抗HEV和 或IgG阳性 (单项IgG阳性者抗体滴度在 1∶4 0以上 ) ,其他肝炎病毒急性感染血清标记物… 相似文献
7.
目的 评估基于戊型肝炎病毒(HEV)主要免疫表位多肽及其截短多肽的新型ELISA检测抗HEV IgM的敏感度与特异度.方法 根据抗HEV抗体与主要免疫表位多肽的高反应性以及与截短多肽的不反应性,分别以两种多肽为包被抗原,建立新型ELISA法,检测2007-2012年收集的612例可疑HEV感染者血清抗HEV IgM,并与万泰HEV IgM抗体诊断试剂盒检测结果比较,结果不一致血清用免疫印迹法(Western blotting)确认,χ^2检验比较两种试剂灵敏度和特异度.结果 抗HEV IgM检测中,新型ELISA阳性326例,阴性286例;万泰试剂阳性370例,阴性242例;两种试剂同时阳性320例,同时阴性236例.在万泰试剂阳性而新型ELISA阴性的50例中,Western blotting证实阳性21例,阴性29例;在万泰试剂阴性而新型ELISA阳性的6例中,Western blotting显示阳性与阴性各3例.以两种试剂同时阳性或Western blotting阳性为标准,万泰试剂与新型ELISA灵敏度分别为99.1%(95% CI:0.972-0.998)和93.8%(95% CI:0.907-0.961),差异有统计学意义(χ^2=13.988,P<0.001);特异度分别为89.2%(95% CI:0.847-0.925)和98.9%(95% CI:0.965-0.997),差异有统计学意义(χ^2=22.466,P<0.001).结论 与万泰试剂相比,新型ELISA检测抗HEV IgM敏感度略低,但特异度较好,可减少抗HEV IgM检测中的假阳性. 相似文献
8.
戊型肝炎(Hepatitis E,HE)是由戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)引起的经消化道传播的急性传染病,发病率逐年升高,目前尚无特效治疗方法,也无特异性被动和主动免疫制剂可供预防。在急性戊型肝炎患者中,血液或粪便中HEV RNA持续时间较短,操作复杂、成本高,不能在临床广泛开展。HE的诊断主要依靠血清HEV抗体检测,抗-HEV IgM是HE急性感染的诊断指标之一,类风湿因子等的存在会影响血清IgM的检测,造成假阳性。抗-HEV IgG一般在发病2周后可检测到,可持续1年甚至数年,因此抗-HEV IgG不能鉴别患者为HEV急性感染还是既往感染。有研究表明抗-HEVIgA是HE的急性指标,可代替或辅助现有IgM诊断试剂用于HE诊断,既增加了检测特异性,又能有效减少漏诊。 相似文献
9.
胶体金免疫层析测定(简称GICA法)具有简便、快速、特异性高、试剂稳定的优点,已在临床免疫检验中广泛应用。我们采用GICA试条对180例血清标本的HBsAb进行了检测,同时与EIA法的结果做了比较和评价。 相似文献
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目的了解2010~2011年环江县公共卫生从业人员甲、戊型肝炎阳性率及性别差异。方法采用酶联免疫吸附试验对从业人员血样中的甲、戊型肝炎IgM抗体进行检测。结果 2010~2011年共检测4 441例,甲型肝炎IgM抗体阳性5例,阳性率为0.11%;戊型肝炎IgM抗体阳性14例,阳性率为0.32%,戊型肝炎IgM抗体阳性率和甲型肝炎IgM抗体阳性率差异有统计学意义(χ2=4.27,P<0.05)。结论环江县公共卫生从业人员2011年甲型肝炎和戊型肝炎阳性率比2010年有所下降,但差异无统计学意义,建议继续加强和提高全民防治甲、戊型肝炎的卫生知识水平和意识,尤其加强对戊型肝炎的监测与防治。 相似文献
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目的分析胶体金免疫层析法对呼吸道合胞病毒(RSV)抗原快速检测的灵敏度和特异度。方法用RSV抗原检测试剂盒(胶体金免疫层析法)对197例疑似RSV感染患者的鼻咽抽吸物或鼻咽拭子标本进行检测,以反转录聚合酶链反应(RT-PCR)核酸检测结果为参考,比较胶体金免疫层析法对不同类型标本和不同年龄组患者的灵敏度。结果 197例患者标本中经RT-PCR检测,95例(48.2%)为阳性。以RT-PCR核酸检测结果为标准,胶体金免疫层析法的灵敏度和特异度分别是34.7%和100%。该方法对鼻咽抽吸物的阳性检出率较鼻咽拭子高(36.2%对8.6%,P<0.01),鼻咽抽吸物标本的灵敏度明显高于鼻咽拭子(22.1%对12.6%)。RSV检出率与年龄呈负相关(P<0.01),1岁以下患儿的阳性检出率最高(29.5%),而在>5岁患儿中阳性检出率为0。结论胶体金免疫层析法对1岁以下幼儿的鼻咽抽吸物中的RSV有较好检测效果,可辅助临床进行早期筛查。但鉴于该方法灵敏度较低,且适用于5岁以下儿童,临床上还需用RT-PCR对RSV进行确认和补充检测,以免漏诊。 相似文献
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Lin LR Tong ML Fu ZG Dan B Zheng WH Zhang CG Yang TC Zhang ZY 《Diagnostic microbiology and infectious disease》2011,70(1):10-16
Syphilis remains as a worldwide public health problem; hence, it is necessary to develop a new diagnostic approach that is easier and faster than conventional tests. A new testing method to detect Treponema pallidum IgM (TP-IgM), named colloidal gold immunochromatography assay (GICA), is presented in place of fluorescent treponemal antibody absorption (FTA-Abs). TP-IgM was detected using GICA developed on syphilis-specific recombinant proteins TPN17 and TPN47. The FTA-Abs IgM test was set as the gold standard. A GICA TP-IgM test was performed to detect syphilis in 1208 patients who received recommended therapy for syphilis for more than 1 year at the Xiamen Center of Clinical Laboratory in China from June 2005 to May 2009. One hundred blood donors were set up as control. The sensitivity, specificity, positive predictive value, negative predictive value, positive likelihood ratio, and negative likelihood ratio were 98.21%, 99.04%, 93.75%, 99.73%, 102.3, and 0.018, respectively. Detection on 500 interference specimens indicated that the biological false-positive rate of the GICA test was extremely low and was free from other biological and chemical factors. The patients were divided into the following experimental groups based on the results of toluidine red unheated serum test (TRUST) and treponemal pallidum particle agglutination (TPPA): (1) the syphilis serofast reaction (SSR) group consisted of 411 cases with (+) TRUST and (+) TPPA, which exhibited no clinical manifestations of syphilis after 1 year of recommended syphilis treatment; (2) the serum cure group, which was further subdivided into group A, a group that consisted of 251 cases with (-) TRUST and (+) TPPA, and (3) group B, a group that consisted of 546 cases with (-) TRUST and (-) TPPA; and (4) the blood donor control group, which consisted of 100 healthy persons with (-) ELISA-TP and (-) TPPA. We used the FTA-Abs method and the GICA method to detect TP-IgM; the positive rate of TP-IgM in 411 SSR patients was 34.55% and 36.01%, respectively. However, in serum cure group A, the positive rate of TP-IgM was 10.36% and 11.16%, respectively. The χ(2) test revealed that there is a significant difference in the positive rate between these 2 groups (P < 0.01). The TP-IgM positive rate in the same group, as detected by the GICA method and the FTA-Abs method, had no significant difference in statistics. However, as detected by the GICA method and the FTA-Abs method, all the samples in serum cure group B and the control group were negative for TP-IgM. The TP-IgM-positive result demonstrated that active T. pallidum remained in the bodies of SSR patients. In summary, the characteristics of GICA TP-IgM correspond to that of FTA-Abs TP-IgM; this can be used as a serologic marker for the relapse and infection of syphilis in place of the conventional FTA-Abs IgM test. 相似文献
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胶体金免疫斑点法检测人巨细胞病毒pp150抗体 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:建立一种简便、快速的检测血清中人巨细胞病毒(HCMV)抗pp150抗体的胶体金免疫斑点法。方法:采用Frens法制备胶体金颗粒,标记葡萄球菌A蛋白(SPA),将本所利用基因工程技术生产的pp150抗原固定于0.45μm孔径的硝酸纤维素膜上,制成免疫斑点检测装置。血清中抗pp150 IgG与硝酸纤维素膜上的抗原结合,然后滴加胶体金标记的SPA,在膜上可形成肉眼可见的红色斑点。结果:胶体金免疫斑点法与ELISA试剂盒对比检测了200份临床确诊血清标本中抗pp150 IgG抗体,胶体金法的特异性和敏感性分别为92%和90%。结论:胶体金免疫斑点法检测血清中的抗pp150抗体特异性、灵敏度较高,简便快速,不需要昂贵的仪器。 相似文献
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目的 建立并应用软海绵酸(OA)胶体金免疫层析检测法.方法 通过纯化抗OA单抗、制备胶体金、标记单抗、制备胶体金试剂条、样品模拟提取与加标回收检测、贝类染毒提取及检测,建立和优化金标免疫层析法.结果 选择30 nm胶体金颗粒用于单抗标记,金标单抗浓度为200 μg/mL,金标单抗包被量为2.5 μL/cm,二抗包被浓度为1.0 mg/mL,反应时间为3~5 min,对加标贝肉和染毒贝类的检测灵敏度为25 ng/mL.结论 建立了可用于OA检测的胶体金免疫层析检测法,满足规定的贝类OA含量安全阈值,为腹泻性贝毒检测与食品安全检验提供了新的技术方法. 相似文献
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目的评价胶体金法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)临床应用价值。方法采用头孢西丁纸片扩散法、PCR扩增mecA基因和胶体金法对临床分离的150株金黄色葡萄球菌(100株MRSA和50株MSSA)、68株溶血葡萄球菌(58株MRSH和10株MSSH)、135株表皮葡萄球菌(97株MRSE和38株MSSE)进行检测并作比较。结果 MRSA、MSSA、MRSE、MSSE、MSSH三种方法检测结果一致。58株MRSH中6株胶体金法检测阴性。结论胶体金法可作为MRSA简便而准确的检测方法,同时也可分析MRCNS。 相似文献
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目的应用梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)法对ELISA法和胶体金法梅毒血清学检测试剂的临床适用性进行评价。方法收集6 291例临床手术前或输血前住院患者的血清标本,采用ELISA法(试剂A、试剂B)和金标法分别进行初筛检测,初筛阳性或弱阳性标本用TPPA法做确证试验。结果血清标本6 291份中,试剂A、试剂B、金标法检测阳性分别为66、64、56份,金标法阳性检出率与试剂A、B比较,差异无统计学意义(P0.05)。阳性标本经TPPA确证为66份,其中试剂A、试剂B阳性均为61份,金标法为56份。试剂A检测为阳性的5份标本及试剂B检测为阳性的3份标本,经TPPA确证为阳性的分别为3、2份,金标法灵敏度与试剂A、B比较差异有统计学意义(P0.05)。结论 ELISA法灵敏度高,易实现自动化酶联免疫分析,适合临床手术前或输血前患者标本的筛查,金标法灵敏度低,但特异度高,方法简捷,适用于大规模健康体检及急诊手术前的初筛试验。为避免医疗纠纷,对ELISA法和金标法阳性的标本应用TPPA法来确诊。 相似文献
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目的制备单增李斯特菌54001、54002型的单克隆抗体(McAb),制备胶体金标记单增李斯特菌抗体免疫层析检测试剂板。方法以纯化单增李斯特菌为抗原,免疫Balb/c小鼠,制备单克隆抗体,鉴定其特性,建立并验证胶体金标记单增李斯特菌抗体免疫层析试剂板的检测方法。结果筛选出2株单抗杂交瘤细胞株F5、F9,免疫球蛋白亚类均为IgM。通过选用柠檬酸钠法制备胶体金,测定其最适结合蛋白浓度为28g/ml,制备胶体金标记单增李斯特菌抗体免疫层析检测板。结论为产单核李斯特菌提供了一个方便、快捷、切实有效的检测技术。 相似文献