羧甲基茯苓多糖对人外周血淋巴细胞分泌IFN—α和IFN—γ的调 …

用羧甲基茯苓多糖（ＣＭＰ）预处理人外周血淋巴细胞（ＨＰＢＬ），经２００ＩＵ／ｍｌＩＦＮ－α启动后，加ＮＤＶ的促诱生的α－干扰素（ＩＦＮ－α）效价比无ＣＭＰ的常规诱生组高１．２倍，经ＰＨＡ和／或ＣｏｎＡ促诱生组成的γ－干扰素（ＩＦＮ－γ）产价比无ＣＭ宾ＰＨＡ和ＣｏｎＡ刺激常规诱生组高０．５倍尤以ＣＭＰ＋ＰＨＡ＋ＣｏｎＡ促诱生的ＩＦＮ－γ效果最佳。说明ＣＭＰ具有ＩＦＮ－α和ＩＦＮ－γ促诱生效应。用ＣＭ     

羧甲基茯苓多糖和PHA诱导人外周血淋巴细胞产生GM-CSF的研究

健康人外周血淋巴细胞在羧甲基茯苓多糖与PHA等的刺激诱导下共同培养7d后可获高效价粒-巨噬细胞集落刺激因子。该制剂经特殊处理后可达到临床药用标准。     

茯苓及羧甲基茯苓多糖的研究概况

茯苓为多孔菌科真菌茯苓的干燥菌核.中医认为茯苓具有利水渗湿、健脾宁心功能;临床用于治疗水肿尿少、痰饮眩悸、脾虚食少、心神不宁、惊悸失眠等症.现代药理学研究表明,茯苓及羧甲基茯苓多糖具有提高机体免疫力、抗菌、降糖、抗肿瘤等作用,现就1997～2003年有关茯苓的研究资料作一概述.     

羧甲基茯苓多糖的制备及抗肿瘤活性研究

目的 提取茯苓药材中的多糖,测定其总糖含量,并进行羧甲基化改性,考察茯苓多糖与修饰后的羧甲基茯苓多糖的抗肿瘤活性。方法 采用稀碱浸提法提取茯苓多糖,苯酚-硫酸显色法测定茯苓多糖中总糖含量,通过羧甲基化反应得到羧甲基茯苓多糖。并采用MTT法检测茯苓多糖与羧甲基茯苓多糖对人肝癌细胞HepG-2的毒性反应。结果 苯酚-硫酸法测得茯苓多糖中总糖含量为95.96%,羧甲基茯苓多糖与茯苓多糖对HepG-2细胞的增殖均具有一定的抑制作用,其中羧甲基茯苓多糖活性更强。结论 经过修饰后的羧甲基茯苓多糖具有更好的抗肿瘤活性。     

香菇多糖增强肿瘤浸润淋巴细胞杀伤活性及TNF-α、IFN-γ的分泌

目的研究香菇多糖对肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)杀伤活性及细胞因子分泌的影响。方法将从肺癌中分离的TIL分别置于含IL-2或IL-2加香菇多糖培养液中培养30天,观察TIL的杀伤活性和TNF-α、IFN-γ的分泌作用。结果用两种方法分别培养25天时,IL-2加香菇多糖培养的TIL杀伤活性及TNF-α、INF-γ的分泌作用均明显高于IL-2培养的IIL(P<0．05)。结论香菇多糖具有增强TIL杀伤活性及TNF-α、INF-γ的分泌作用。     

羧甲基茯苓多糖在家兔体内的测定及药物动力学

建立了苯酚-硫酸法测定兔血浆中的羧甲基茯苓多糖,测定波长为488nm。以2g/kg剂量给5只家兔灌胃,计算得各参数Cmax、tmax、t1/2(α)、t1/2(β)、AUC0→10h分别为(33.5±6.8)μg/ml、(17.5±9.7)min、(14.1±4.7)min、(65.6±24.5)min、(1674.5±533.6)μg·min·ml-1,符合二室模型。     

灵芝多糖和当归多糖促进人外周血T淋巴细胞增殖和分泌IFN-γ

目的探讨中药灵芝多糖和当归多糖对人外周血活化T淋巴细胞的免疫调节作用。方法分离健康人外周血T淋巴细胞并分为空白对照组、灵芝多糖组和当归多糖组,免疫荧光观察各组T细胞PI3K和Caspase-3蛋白的表达;MTT法检测培养72 h后各组T细胞的增殖水平;流式细胞术分析各组T细胞凋亡率和细胞周期变化;ELISA检测各组T细胞培养上清液的IFN-γ含量。结果灵芝多糖组和当归多糖组T细胞均表达PI3K,细胞增殖OD值均明显高于空白对照组(P<0.01,P<0.05);灵芝多糖组T细胞Caspase-3蛋白表达的平均光密度值明显低于空白对照组(P<0.05),T细胞凋亡率也低于空白对照组,分别为18.23%和29.74%;灵芝多糖组和当归多糖组T细胞培养上清液IFN-γ的含量明显高于空白对照组(P<0.05,P<0.05)。结论灵芝多糖和当归多糖均明显促进外周血T淋巴细胞增殖和分泌IFN-γ,灵芝多糖还能下调Caspase-3蛋白表达并抑制T淋巴细胞凋亡。     

人脾细胞γ-干扰素的研制初探

Ⅱ型干扰素，或称免疫干扰素，也称γ一干扰素（HuIFN－γ），是T淋巴细胞在特异性抗原或某些有丝分裂原刺激后产生的低分子糖蛋白。HulFN－γ在基因结构、特性及作用上都有别于α、β干扰素，它的主要特点是PH为2．0时不稳定，且具有较强的免疫调节和、抗肿瘤生长的作用。有关应用HYIFN－Y？ftgj；肿瘤患者的报道较少。为了探讨HYIFN一丁治疗肿瘤患者的临床效果，我们采用诱生方法研制人脾细胞Y一干扰素，现就初步研制的情况报告如下。1材料与方法l·Iy一干扰素的诱生1·1·1材料健康人外伤摘除的新鲜脾脏（排除HBSAg健康携带者…     

裙带菜多糖对人外周血淋巴细胞因子分泌的影响

目的分析裙带菜多糖对人外周血淋巴细胞亚群、细胞因子分泌的影响,探讨裙带菜多糖的免疫调节机制。方法用流式细胞术检测淋巴细胞亚群的变化,用酶联免疫方法测定裙带菜多糖作用后淋巴细胞培养上清中细胞因子的浓度。结果不同浓度的裙带菜多糖可使CD+8T细胞比例明显增加(P<0.01);并可使CD+4T细胞比率增加,但与阴性对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);裙带菜多糖对B细胞增殖反应无明显影响(P>0.05)。不同浓度的裙带菜多糖作用后,NK细胞比例明显增高(P<0.01),并呈浓度依赖性,可明显刺激外周血淋巴细胞产生白细胞介素-2(IL-2)(P<0.01),但对IL-6及IL-10的产生作用无明显影响(P>0.05)。结论裙带菜多糖可促进CD+8、NK细胞增殖,产生Th1类细胞因子发挥免疫调节作用。     

羧甲基茯苓多糖对氟尿嘧啶致肠炎小鼠的保护作用

目的探讨羧甲基茯苓多糖(carboxymethylpachymaran,CMP)对氟尿嘧啶(fluorouracil,5-Fu)所致小鼠肠黏膜炎的改善、肠道保护作用及可能作用机制。方法建立5-Fu小鼠肠黏膜炎模型,随机分组、给药。炭末推进法测定小鼠肠推进率,并测量小鼠结肠长度;生物化学方法检测派氏集合淋巴结(PPs)匀浆上清液中活性氧类(ROS)和谷胱甘肽(GSH)的含量、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活力;ELISA法检测PPs匀浆上清中IL-1β的含量;小鼠结肠做病理组织切片观察,免疫组化法检测结肠组织中NF-κB和p-p38的表达。结果与5-Fu模型组比较,CMP能明显延长5-Fu所致的结肠缩短(P<0.01);明显促进肠推进功能(P<0.05);结肠病理学切片显示,CMP能明显减轻5-Fu所致的结肠黏膜上皮杯状细胞丢失、隐窝深度变浅及炎症细胞浸润;并且明显升高PPs匀浆上清中GSH含量、CAT和GSH-Px的活性(P<0.01或P<0.05),降低ROS(P<0.05)和IL-1β的含量(P<0.01);免疫组化结果显示,相比5-Fu组,CMP明显降低结肠组织NF-κB和p-p38的表达。结论 CMP能够减轻5-Fu所致小鼠结肠黏膜炎,改善5-Fu所致的肠道传输功能失调,并保护5-Fu对肠道的氧化损伤和细胞凋亡,其机制可能与增强机体抗氧化、抑制炎症及抗凋亡作用有关。     

脑瘫患儿IFN-γ、TNF-α及IL-6水平的研究

目的:探讨干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子(TNF)-α及白细胞介素(IL)-6在脑瘫中的作用。方法:采用酶联免疫吸附法检测28例脑瘫患儿及15例正常儿童外周血单核细胞(PBMC)中IFN-γ、TNF-α及IL-6的水平。结果:脑瘫患儿PBMC中IFN-γ、TNF-α、IL-6分别为(46.17±14.29)pg/ml、(28.65±11.44)pg/ml、(67.13±21.10)pg/ml,对照组分别为(37.31±16.64)pg/ml、(18.43±10.97)pg/ml、(46.44±23.39)pg/ml,差异均有统计学意义(P<005)。结论:脑瘫患儿IFN-γ、TNF-α及IL-6水平的升高,可能与脑瘫的发生有关,即脑瘫的发生与免疫系统及其功能异常有密切关系。     

当归多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖及诱生IFN-γ的影响

目的研究当归多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖及诱生IFN-γ的影响。方法用4种不同浓度乙醇将当归总多糖(AP)进行分级沉淀,获得AP-I,AP-II,AP-III和AP-IV 4个部分多糖。用［³H］-TdR参入法检测当归部分多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖作用;结晶紫染色法测定IFN-γ的生物活性;ELISA法测定IFN-γ的含量。结果AP-I和AP-II能明显促进体内外小鼠脾淋巴细胞增殖,体外显著诱导脾淋巴细胞分泌IFN-γ,增强IFN-γ的生物活性;特别是AP-II体外诱生较高含量的IFN-γ,AP-I体内诱生的IFN-γ生物活性较强。结论AP-I和AP-II是免疫活性较强的部分。     

重组人白细胞介素对人外周血淋巴细胞功能的影响及芍药苷的作用

目的 观察重组人白细胞介素-1β(rhlL-1β)对人外周血淋巴细胞(PBLC)增殖及产生白细胞介素-2(IL-2)和白细胞介素-10(IL-10)的影响及芍药苷(Pae,抗炎免疫中药)对PBLC的作用.方法 用密度梯度离心法,分离人PBLC;用MTT法检测PBLC的增殖反应;用放射免疫法检测PBLC培养的上清液中IL-2水平;用酶联免疫吸附法检测PBLC培养的上清液中IL-10水平.结果 体外给予rhIL-1β(1×10-2、0.1、1.0、10.0、100.0μg·L-1)可不同程度促进人PBLC增殖和IL-2产生;但可抑制IL-10产生.体外给予1μg·L-1 rhlL-1β(3、6、12、24、48 h),可使人PBLC产生IL-2水平升高和IL-10水平降低;不同浓度(1×10-9、1×10-8、1×10-7、1×10-6、1×10-5mol·L-1)Pae体外可不同程度抑制1μg·L-1rhlL-1β对人PBLC促增殖反应和IL-2产生;但可促进IL-10产生.结论 rhlL-1β体外,可促进人PBLC的增殖,升高IL-2水平;而降低IL-10水平.Pae体外可逆转rhlL-1β对其增殖及产生IL-2和IL-10的影响.     

羧甲基茯苓多糖对溃疡性结肠炎大鼠的研究

目的 研究羧甲基茯苓多糖通过调控Toll样受体4/髓样分化因子88/核转录因子-κB（TLR4/MyD88/NF-κB）信号通路对溃疡性结肠炎大鼠的改善作用。方法 从40只SPF级大鼠中随机分出8只大鼠作为正常组,其余大鼠用2,4,6-三硝基苯磺酸（TNBS）联合乙醇造模法建立大鼠溃疡性结肠炎模型,造模成功后大鼠随机分为模型组、对照组和低、高剂量实验组。低、高剂量实验组分别给予0.5%羧甲基茯苓多糖混悬液2 mL和1.5%CMP混悬液2 mL,灌胃;对照组给予0.5 g·kg^-1柳氮磺吡啶灌胃;正常组和模型组每日灌胃给予等量的生理盐水,连续给药14 d。末次给药结束后,测定大鼠体质量、脾质量、结肠长度和质量,用自动化血液学分析仪分析血液参数,用酶联免疫吸附（ELISA）法检测各组大鼠血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）和白细胞介素-12（IL-12）水平;用蛋白质印迹法检测TLR4/MyD88/NF-κB信号通路相关蛋白TLR4、MyD88和NF-κB p65的表达水平。结果 正常组、模型组、对照组和低、高剂量实验组的肠质量分别为（1....     

α-甘草次酸衍生物对大鼠淋巴细胞体外活化的影响

目的:研究α-甘草次酸衍生物(GB)对大鼠外周血淋巴细胞体外活化的影响,探讨其是否对淋巴细胞活性存在抑制作用.方法:无菌分离大鼠外周血淋巴细胞并制成悬液,分别与不同浓度的GB预先孵育2 h,加入促分裂原伴刀豆蛋白A(ConA),继续孵育24 h后,ELISA法检测上清液中IL-4、IFN-γ含量.结果:2 mg·L-1和1 mg·L-1 GB能显著降低ConA刺激下大鼠淋巴细胞产生的IL-4水平,而0.5 mg·L-1GB则提高淋巴细胞产生的IL-4水平;2 mg·L-1 GB显著降低ConA刺激下大鼠淋巴细胞产生的IFN-γ水平,而1 mg·L-1和0.5 mg·L-1 GB则提高淋巴细胞产生的IFN-γ水平.结论:给药剂量不同,GB对活化的大鼠外周血淋巴细胞作用不同,值得深入研究.     

系统性红斑狼疮患者外周血IL-17、TNF-α和INF-γ表达水平及临床意义

目的 探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血白介素-17(IL-17)、干扰素-γ(INF-γ)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平及其临床意义.方法 选取2012年7月-2015年12月治疗的80例SLE患者及同期40例正常健康体检人群为研究对象,分别记为SLE组和健康组,再根据SLE活动指数评分将SLE分为活动期组和非活动期组,每组40例.测定并比较各组IL-17、INF-γ和TNF-α的表达水平,分析其临床意义.结果 活动期组、非活动期组、SLE组的IL-17、INF-γ和TNF-α水平均高于健康组(P＜0.05).活动期组IL-17、INF-γ和TNF-α水平高于非活动期组(P＜0.05).结论 IL-17、INF-γ和TNF-α在SLE患者外周血中存在高表达,且随着病情活动度增强而升高.     

海洋真菌多糖(YCP)对小鼠淋巴细胞免疫功能的影响

目的研究海洋真菌多糖(YCP)促进小鼠淋巴细胞的免疫调节作用,探讨其抗肿瘤作用机制。方法采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测YCP对淋巴细胞增殖的作用,用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测白介素-2(IL-2)和干扰素-γ(IFN-γ)的含量,MTT法检测淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK细胞)的诱生及其细胞杀伤活性。结果YCP体外能显著提高淋巴细胞增殖反应;显著增加细胞上清液中IL-2和IFN-γ的浓度;与IL-2单独刺激相比,YCP体外能显著提高与IL-2协同诱导产生的LAK细胞对于NK不敏感的Hela细胞和NK敏感的K562细胞的杀伤作用。结论YCP能够增强小鼠脾淋巴细胞的免疫作用。     

川芎嗪对实验性肝纤维化大鼠TNF-α、IL-4和IFN-γ表达的影响

目的观察川芎嗪对大鼠肝Ⅱ肿瘤坏死因子（TNF—α）、白介素-4（IL-4）和γ干扰素（IFN-γ）表达的影响,进一步阐明川芎嗪抗肝纤维化的可能作用机理。方法80只大鼠随机分为正常对照组（N组）、模型对照组（M组）、川芎嗪治疗组（T组）和空白对照组（R组）,采用四氯化碳造模。8周后,T组予以川芎嗪腹腔注射（一日1次80mg／kg）,R组予以相同容最生理盐水腹腔注射,共8周。实验结束后所有大鼠处死,分别行苏木素-伊红（HE）染色,采用半定量计分系统（SSS）评估肝纤维化程度,荧光定量聚合酶链式反应（PCR）技术检测TNF—α、IL-4和IFN—Y在肝内的表达。结果T组大鼠肝纤维化程度明显低于R组,且差异有统计学意义（P〈0．05）;M组TNF—α、IL-4的表达明显高于N组,IFN-γ的表达明显低丁N组;T组TNF-α、IL-4的表达明显低于M组,IFN—γ的表达则明显高于M组;R组TNF-α、IL-4及IFN—γ的表达介于M组和T组之间。结论川芎嗪用于大鼠肝纤维化有显著疗效,其机制可能与其能影响TNF—α、IL-4及IFN-γ等细胞因子存肝组织的表达有关。     

老年丙型肝炎患者IL-1α、IL-6、IFN-γ测定的临床意义

目的:探讨老年丙型肝炎与细胞因子的关系及其临床意义。方法:应用ELISA法测定老年丙型肝炎患者血清IL-10、IL-6、IFN-γ值。结果:老年丙型肝炎患者血清IL-1α为142.91±173.05pg/ml显著高于健康人对照组(P<0.05);IL-6为34.01±24.53pg/ml亦非常显著高于健康人对照组(P<0.01)。同时发现IL-10、IL-6活性与患者黄疸指数呈正相关(P<0.05 P<0.01)。老年丙型肝炎患者血清IFN-γ的活性与健康人对照组无显著性差异(P>0.05)。结论:IL-1α、IL-6可作为老年丙型肝炎患者病情预后及指导治疗的临床指标之一。     

补肾调冲方对卵巢早衰大鼠性激素水平及TNF-α、IFN-γ蛋白表达的影响

目的 观察补肾调冲方对卵巢早衰模型大鼠血清促卵泡刺激素（FSH）、促黄体生成素（LH）、抗缪勒管激素（AMH）水平及卵巢组织肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、干扰素-γ（IFN-γ）蛋白表达的影响。方法 60只SD雌性大鼠随机分为6组：对照组,模型组,补肾调冲方低、中、高剂量（以生药计24、12、6 g/kg）组,结合雌激素片（阳性药）组,每组10只。除对照组外,其余各组均ig雷公藤多苷片造模14 d,造模结束24 h后,给予相应药物治疗36 d。给药结束后,酶联免疫吸附（Elisa）法检测大鼠血清FSH、LH、AMH水平,免疫组化法检测卵巢组织TNF-α、IFN-γ蛋白表达。结果 与对照组比较,模型组血清FSH、LH水平、卵巢TNF-α、IFN-γ蛋白表达均显著升高,AMH水平显著降低（P<0.05）;与模型组比较,各给药组FSH、LH水平、卵巢TNF-α、IFN-γ蛋白表达均显著降低,AMH水平显著升高（P<0.01）。结论 补肾调冲方可提高卵巢早衰大鼠卵巢储备能力,抑制卵泡封闭及黄体细胞凋亡,对卵巢早衰可能有治疗作用。