刚地弓形虫感染对孕鼠细胞凋亡的影响

目的 探讨刚地弓形虫对孕鼠胎盘细胞凋亡及其相关基因bax、bcl-2表达的影响。方法 建立刚地弓形虫感染的孕鼠模型，采用胎盘组织压片及病理切片，观察胎盘组织的损伤情况；采用DNA缺口末端标记技术（TUNEL）检测胎盘细胞的凋亡情况；采用免疫组织化学法（SP法）观察细胞凋亡调控基因bax和bcl-2在胎盘细胞中的表达。结果 与对照组相比，随着感染时间的延长，感染组胎盘组织压片中可见弓形虫虫体逐渐增加，HE染色可见有大量的淋巴细胞浸润及凋亡小体；TUNEL证实感染组胎盘滋养层细胞凋亡显著增强（P〈0．05）；免疫组织化学结果显示，感染组胎盘滋养层细胞凋亡相关基因bax表达显著增强、bcl-2表达减弱（P〈0．05）。结论 刚地弓形虫侵入胎盘组织，可通过上调滋养层细胞bax基因表达，下调bcl-2基因表达而诱导胎盘滋养层细胞凋亡增加，从而影响胎盘组织结构和功能，导致不良妊娠。     

全反式维甲酸诱导胰腺癌细胞凋亡机制研究

目的 维甲酸类药物调节肿瘤细胞生长、分化和凋亡是其防治肿瘤的基础。本研究观察全反式维甲酸(ATRA)诱导体外胰腺癌细胞凋亡的可能机制。方法 胰腺癌细胞Patu8988与ATRA共同孵育。通过DNA断裂分析、TUNEL标记证实凋亡存在，并用流式细胞仪检测凋亡细胞比例。用RT-PCR和Western blot方法检测凋亡诱导过程中p53、bcl-2和bax基因的水平及其表达变化。结果 ATRA处理组细胞凋亡比例明显增加。TUNEL标记和DNA断裂分析发现典型凋亡特征。ATRA处理组bax和phospho-p53(Ser 46)表达上调，但bcl-2表达下调。结论 ATRA能诱导胰腺癌细胞凋亡，其分子机制可能与bcl-2/bax和p53的表达相关。     

bax/bcl-2蛋白比值及凋亡细胞在妊娠期高血压疾病胎盘组织中的表达趋势研究

目的探讨妊娠期高血压疾病产妇胎盘组织中bax/bcl-2蛋白比值及凋亡细胞表达趋势。方法采用免疫组化SP法对6例正常产妇和18例妊娠期高血压疾病产妇的胎盘组织bax/bcl-2蛋白比值检测、TUNEL法检测凋亡细胞。结果妊娠期高血压组、子痫前期轻度、重度组bax/bcl-2蛋白比值及凋亡细胞表达数值呈增高趋势,且均高于正常组,具有显著性差异（P〈0.01）。结论 bax/bcl-2蛋白表达比值在妊娠期高血压疾病的发生和发展中失衡,胎盘细胞凋亡可能起着重要作用。     

丹酚酸B抗神经细胞凋亡的实验研究

目的观察丹酚酸B对大鼠局灶性脑缺血再灌注时神经细胞凋亡的影响及其可能的分子机制。方法健康雄性Wistar大鼠39只，随机分为3组，即假手术组、模型组和丹酚酸B组；线栓法制备大脑中动脉缺血再灌注模型；分别采用原位细胞凋亡检测技术和免疫组化方法，利用病理图像分析系统测定脑组织细胞凋亡指数（AI）以及bcl-2和bax蛋白表达量，应用半定量逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测各组大鼠脑组织bcl-2和bax mRNA相对表达量。结果丹酚酸B组AI较模型组降低，bcl-2表达增加，bax表达减少。结论 丹酚酸B能上调bcl-2表达同时下调bax表达，这可能是其抗神经细胞凋亡的作用机制之一。     

大肠腺瘤中细胞凋亡和增殖相关基因的表达与意义

目的：探讨大肠腺瘤中细胞凋亡和增殖相关基因的表达与意义。方法：用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的TUNEL法缺口末端标记和免疫组化技术，检测45例大肠腺瘤组织细胞的原位凋亡（AI）、原位增殖（KI）及bcl-2、bax基因表达；并设立20例正常大肠粘膜和40例大肠癌为对照组，探讨细胞凋亡和细胞增殖在大肠癌早期发生中的作用。结果：正常结肠粘膜有少量的bcl-2、bax和ki－67（用KI表示）表达及少量凋亡细胞存在，但无异常表达。大肠腺瘤中bcl-2表达和KI明显增加，与正常组相比P均＜0.05；AI和bax表达轻度增加，与正常相比P＜0.05。bax与AI表达呈正相关（P＜0.01），bcl－2和bax及AI呈负相关。大肠癌中bcl-2表达和KI表达虽增加，但与腺瘤相比无统计学差异P＞0.05；大肠癌组织中AI和bax表达明显增加且与腺瘤组相比P＜0.05。结论：大肠癌发生早期即腺瘤中就有细胞凋亡调控基因及增殖基因的表达异常，且以抗凋亡基因bcl-2和增殖基因表达占主导地位。该基因的表达异常可能是大肠癌发生的一个较早期分子标志；细胞凋亡增加和bax表达异常可能是大肠癌发生的一个相对较早期分子生物学事件。早期检测抗细胞凋亡基因和增殖基因，有助于对大肠癌早期发生的评估。     

尾加压素Ⅱ对ox-LDL诱导的EVC-304细胞凋亡的影响

目的探讨尾加压素Ⅱ(UⅡ)对ox-LDL诱导的EVC-304细胞凋亡的影响,并探讨其可能机制。方法体外培养人脐静脉内皮细胞系ECV304,将不同浓度UⅡ及ox-LDL与内皮细胞共同孵育24 h后,应用倒置显微镜观察细胞形态变化,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测内皮细胞活性,TUNEL、流式细胞仪检测内皮细胞凋亡,免疫组化法检测内皮细胞凋亡基因bcl-2,bax,caspase-3蛋白表达水平。结果 ox-LDL(20μg/ml)处理24 h后,可诱导内皮细胞凋亡;同时给予不同浓度的UⅡ(20μg/ml ox-LDL+10-10mol/L UⅡ,20μg/ml ox-LDL+10-9mol/L UⅡ,20μg/ml ox-LDL+10-8mol/L UⅡ,20μg/ml ox-LDL+10-7mol/L UⅡ)处理24 h后,可显著增强ox-LDL诱导内皮细胞凋亡作用,并呈浓度依赖性。ox-LDL处理内皮细胞24 h后,bcl-2蛋白阳性表达率降低,而bax、caspase-3阳性表达率升高。同时给予UⅡ可增强促凋亡作用,与ox-LDL组比较,ox-LDL+UⅡ组的bcl-2蛋白阳性表达率显著降低(P0.05),而bax、caspase-3阳性表达率显著升高(P0.05)。结论 UⅡ可增强ox-LDL诱导的内皮细胞凋亡,并呈浓度依赖性,其作用可能与bcl-2、bax、caspase-3调节有关。     

复肝春6号抗H22肝癌作用机制的实验研究

目的探讨复肝春6号（FGC-6）抗肝癌作用机制。方法建立荷H笠肝癌小鼠模型，以DNA琼脂糖凝胶电泳观察FGC-6对肿瘤细胞诱导凋亡的作用，以Western blot检测肿瘤组织中bcl-2、bax基因的蛋白表达水平；制备FGC-6含药血清，观察其对体外培养H22细胞的增殖抑制作用。结果FGC-6可诱导肿瘤组织DNA片段化，琼脂糖凝胶电泳结果可见梯状条带出现；Western blot结果显示FGC-6使肿瘤组织中bcl-2基因表达量明显降低，而bax基因的表达水平却明显升高；FGC-6含药血清对体外培养H22细胞增殖有明显抑制作用。结论FGC-6的抗肝癌作用可能与调节bcl-2和bax基因的表达量，诱导肝癌细胞凋亡有关。     

羟基磷灰石纳米粒子诱导肝癌SMMC-7721细胞凋亡后bcl-2和bax表达的变化

目的探讨凋亡相关基因bcl-2和bax在羟基磷灰石（HAP）纳米粒子诱导肝癌SMMC-7721细胞凋亡后表达的变化。方法采用免疫组化法检测bcl-2蛋白和bax蛋白表达。结果不同浓度的HAP纳米粒子处理细胞24、48、72h后bcl-2蛋白的表达降低，bax蛋白的表达升高，与对照组比较均有显著性差异，并且均呈现时间和剂量依赖性。结论。HAP纳米粒子诱导肝癌SMMC-7721细胞凋亡，与凋亡调控基因bax表达增强、bcl-2表达减少有关。     

毒胡萝卜素诱导K562细胞凋亡及其调控机制的研究

目的探讨毒胡萝卜索（TG）对K562细胞凋亡诱导作用及其调控机制。方法Hoechst33258染色荧光显微镜观察凋亡细胞形态改变；Annexin V—FITC／PI双染检测细胞凋亡率变化；RT—PCR检测bcl-2、bax、bcl—XL 、XIAP、survivin基因表达变化并通过免疫组织化学技术检测其在蛋白质水平的表达。结果TG作用后，K562细胞呈典型的凋亡细胞形态；细胞凋亡率均明显升高（P〈0.05），且在一定范围内呈浓度和时间依赖性；bax、bcl—XL、XIAP mRNA和蛋白质表达上调，survivin mRNA和蛋白质表达下调，bcl-2／bax比率降低。结论TG可诱导K562细胞发生内质网应激反应性凋亡，其机制可能与Bax表达上调、survivin表达下调有关，bcl-XL XIAP表达上调可能发挥拮抗凋亡的作用。     

醒脑启智胶囊药物血清对缺氧诱导的PC12细胞凋亡及凋亡基因的影响

目的 探讨醒脑启智（XNQZ）胶囊药物血清对缺氧诱导的PCI2细胞凋亡及其相关基因bcl-2、bax表达的影响。方法 采用血清药理学方法，体外培养PCI2细胞，以药物血清孵化后用连二亚硫酸钠（Na2S2O4）缺氧诱导，观察PCI2细胞凋亡及bcl-2、bax表达的变化。结果 缺氧诱导后，PC12细胞的bax蛋白表达上调，使细胞凋亡趋势增强。XNQZ药物血清可使bcl-2基因表达量增加，bax基因表达量降低，细胞凋亡率下降。结论 XNQZ可通过调节bcl-2、bax表达，抑制细胞凋亡，提高细胞抗损伤和修复能力，以达到对抗神经元迟发性死亡，抑制智力减退的作用，并呈现一定的剂量依赖关系。     

原花青素对β-淀粉样肽（25—35）诱导PC12细胞bax和bcl-2基因表达的影响

目的探讨原花青素（Procyanidins，PC）对β-淀粉样肽（25-35）（hi325弗）诱导凋亡PCI2细胞bax和bcl-2基因表达的影响。方法采用MTT比色法分析细胞存活率，Hoechst33258-PI荧光染色观察细胞核凋亡的形态学改变，RT—PCR检测bax和bcl-2基因mRNA表达，Western blot检测Bax和Bcl-2蛋白表达。结果不同剂量PC预处理PC12细胞1h，可剂量依赖性对抗Aβ25-35引起的细胞凋亡，增加细胞存活率，减少Aβ25-35引起的细胞核固缩、核碎裂，降低baxmRNA及Bax蛋白表达，增加bcl-2mRNA及Bcl-2蛋白表达。结论PC可剂量依赖性对抗Aβ25-35诱导的PCI2细胞凋亡，其机制可能与下调凋亡基因bax和上调抗凋亡基因bcl-2表达有关。     

芍药甙诱导人肝癌细胞系HepG2凋亡的研究

目的：观察芍药甙诱导人肝癌细胞系HepG2凋亡及凋亡相关基因的变化。方法：用0．5～0．2g／L芍药甙处理人肝癌HepG2细胞，光镜下观察细胞形态；MTT法检测细胞增殖率；流式细胞仪检测凋亡峰；免疫组化法检测P53，bcl-2，bax等凋亡相关基因的表达。结果：0．5～2．0g／L浓度的芍药甙对HepG2有显著抑制作用；可诱导HepG2凋亡，并能上调凋亡相关基因P53和bax表达、下调抗凋亡基因bcl-2表达。结论：0．5～2．0g／L芍药甙可诱导人肝癌细胞HepG2凋亡，其机制可能与凋亡相关基因表达增强和抗凋亡相关基因表达减弱有关。     

苦参素注射液联合顺铂对人肝癌SMMC-7721细胞凋亡相关基因c-myc、bcl-2和bax表达的影响

目的探讨苦参素注射液(MI)联合顺铂(DDP)对人肝癌SMMC-7721细胞凋亡相关基因c-myc、bcl-2和bax表达的影响。方法分别采用MI、顺铂及MI联合顺铂干预SMMC-7721细胞。TUNEL法检测细胞凋亡率,半定量RT-PCR法检测c-myc、bcl-2和bax mRNA表达,二步法免疫组化检测c-myc、bcl-2和bax蛋白表达。结果苦参素组、顺铂组和联合用药组细胞凋亡率显著上升,与对照组(不干预)比较差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01),联合用药具有单纯相加或协同作用;联合用药组的细胞凋亡率显著增加,bax mRNA和蛋白表达显著升高,c-myc、bcl-2 mRNA和蛋白表达显著减少,与DDP单药组比较差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论苦参素注射液联合顺铂具有单纯相加或协同诱导肝癌SMMC-7721细胞凋亡作用,其机制可能与bax基因表达上调和c-myc、bcl-2基因表达下调有关。     

促红细胞生成素预处理在心肌缺氧复氧损伤中对凋亡相关基因表达影响的研究

目的：观察促红细胞生成素（erythropoietin,EPO）预处理在大鼠心肌缺氧复氧损伤（hypoxia/reoxygenation,H/R）中的抗凋亡效应以及对凋亡相关基因bcl-2及bax表达的影响。方法：Wistar成年雄性大鼠60只,分为2组,分别为对照组,EPO预处理组（EPO组）,每组30只,EPO组大鼠经腹腔注射5000U/kg重组人促红细胞生成素（Recombinant human erythropoietin,RHuEPO）,对照组注射同体积生理盐水。2组各15只大鼠于给药24h后,检测各项指标,其余15只大鼠置于常压缺氧环境中（O27%）12h后,移至常压常氧环境中2h,予H/R损伤,之后采取心肌标本,DNA末端转移酶标记法（TUNEL法）检测心肌细胞凋亡,免疫组化检测凋亡效应酶胱天蛋白酶-3（caspase-3）、凋亡相关基因B细胞淋巴瘤/白血病-2（B-cell lymphoma/leukemia-2,bcl-2）及B细胞淋巴瘤/白血病相关x蛋白（Bcl-associated x protein,bax）蛋白表达水平,计算bcl-2/bax比值。结果：H/R损伤前2组心肌细胞凋亡率,caspase-3以及bax蛋白表达水平无显著性差异（P〉0.05）,EPO组bcl-2蛋白表达水平、bcl-2/bax比值显著高于对照组（P〈0.01）。H/R损伤后2组心肌细胞凋亡率,caspase-3、bax及bcl-2蛋白表达水平显著高于损伤前（P〈0.01）,而bcl-2/bax比值显著低于损伤前（P〈0.01）,EPO组的心肌细胞凋亡率、caspase-3蛋白表达水平显著低于对照组（P〈0.05,P〈0.01）,而bcl-2蛋白表达水平以及bcl-2/bax比值显著高于对照组（P〈0.05,P〈0.01）,2组bax蛋白表达水平差异无显著性（P〉0.05）。结论：EPO预处理在心肌H/R损伤中具有显著的抗凋亡效应;这一效应与其上调抗凋亡基因bcl-2的表达有关。     

三棱、莪术抗大鼠肝纤维化的作用机理探讨

目的 观察肝纤维化大鼠的肝细胞凋亡和肝组织中的bax、bcl-2蛋白表达情况,探讨其抗肝纤维化的作用机理.方法 以腹腔注射猪血清制备大鼠肝纤维化模型,三棱、莪术灌胃处理大鼠.以HE染色观察大鼠肝脏组织病理变化,TUNEL法检测细胞凋亡,免疫组化法检测bax、bcl-2蛋白表达.结果 三棱、莪术能改善肝脏组织病理学变化,降低肝纤维化大鼠的细胞凋亡、bax蛋白表达,提高bcl-2蛋白表达.结论 三棱、莪术通过调节细胞凋亡相关蛋白表达,抑制细胞凋亡,起到抗肝纤维化作用.     

Kruppel样因子4过表达对热应激所致C2C12细胞凋亡的影响

目的探讨Kruppel样因子4对热应激所致C2C12小鼠肌原细胞凋亡的影响。方法采用热应激（42．5℃）处理Kruppel样因子4过表达的C2C12细胞1h，37℃恢复12h；采用流式细胞术、Hoechst33258染色检测细胞凋亡；采用Westernblot检测凋亡相关蛋白bcl-2、bax的表达。结果流式细胞术结果发现，两组细胞凋亡百分率较热应激前均升高，但与转空载体组相比较Kruppel样因子4过表达组升高更明显，凋亡百分率达19．6％；荧光染色可见细胞出现核固缩、凋亡小体等凋亡形态学改变；Kruppel样因子4组细胞经Westernblot能检测到bcl-2、bax蛋白明显改变。结论Kruppell样因子4可以诱导热应激所致（22C12小鼠肌原细胞凋亡。     

神经酰胺诱导内皮细胞凋亡机制的研究

目的 探讨p53、Fas在外源性神经酰胺（C2-ceramide）诱导内皮细胞凋亡中的作用。方法 体外培养人脐静脉内皮细胞（HUVEC）,以不同浓度的C2-ceramide处理后,用TUNEL染色法检测细胞的凋亡。用p53 的抑制剂PFT-α和Fas的抑制剂Fas相关磷酸酶-1（FAP-1）预处理细胞后,加入C2-ceramide,与对照组比较观察Fas的表达和细胞凋亡指数的变化。结果 C2-ceramide可剂量依赖性地诱导内皮细胞凋亡。FAP-1可抑制C2-ceramide诱导的内皮细胞凋亡;PFT-α不能抑制C2-ceramide诱导的内皮细胞凋亡。结论 神经酰胺能够诱导内皮细胞凋亡,其作用机制可能是通过Fas途径而非通过p53途径。     

NF-κB在TNF-α致人脐静脉内皮细胞凋亡中的作用

目的研究核转录因子-κB（nuc lear factor-κB,NF-κB）在TNF-α诱导培养的人脐静脉内皮细胞凋亡过程中的作用。方法体外培养人脐静脉内皮细胞,并用10 ng/m l的TNF-α进行诱导,不同时间段观察NF-κB活性、NF-κB抑制物IκBα表达以及细胞凋亡的情况,EMSA测定NF-κB活性,W estern-b lot检测IκBα的表达情况;Tunel法检测细胞凋亡;并用NF-κB的抑制剂PDTC预处理细胞后来观察TNF-α诱导细胞凋亡的情况。结果TNF-α以时间依赖性诱导人脐静脉内皮细胞凋亡,NF-κB的活性在处理后10 m in开始增强,2 h后恢复正常,IκBα的表达在10m in开始下降,2 h恢复正常;PDTC能抑制TNF-α诱导的凋亡。结论TNF-α在诱导体外培养的人脐静脉内皮细胞时,IκBα降解,NF-κB激活,从而引起细胞的凋亡。     

压力超负荷下bcl—2、bax蛋白对兔左室细胞凋亡的影响

目的：探讨超负荷时兔左室心肌细胞bcl-2和bax蛋白表达对兔左室心肌细胞凋亡的影响。方法：采取末端脱核苷酸转移酶介导的dUTP－生物素平移末端标记（TUNEL）技术和链酶亲和素－生物素－过氧化物酶复合物（SABC）免疫组化方法，观察持续压力超负荷下免左室心肌凋亡的动态变化及bcl-2和bax蛋白的表达。结果：对照组出现极少量凋亡细胞，表达少量bcl-2蛋白，不表达bax蛋白。术后凋亡阳性心肌细胞数和bcl-2蛋白阳性表达心肌细胞数迅速增加，两者在心衰组最高，凋亡阳性心肌细胞数在术后第3天多于术后第7天。左室心肌细胞仅在术后第1组和心衰组表达bax蛋白。结论：在持续压力负荷所致心力衰竭的全过程，bcl-2蛋白都以与了抑制心肌细胞凋亡的调节，bax蛋白可能只以与了心肌细胞凋亡的启动。     

EHT1864对低氧诱导内皮细胞的影响和机制研究

目的 探讨Rac抑制剂EHT 1864对低氧诱导的内皮细胞凋亡和氧化应激的影响。方法 在低氧和正常氧的情况加入EHT 1864孵育HUVECs（人脐静脉内皮细胞）24 h,CCK-8（细胞增殖-毒性检测试剂盒）法检测细胞活性,DCFH-DA（二氯二氢荧光素-乙酰乙酸酯）荧光探针检测活性氧簇（ROS）水平,TUNEL（原位缺口末端标记法）染色观察细胞凋亡水平,免疫印迹法检测氧化应激、凋亡及相关通路蛋白的表达。结果 培养处理24 h后,低氧刺激组细胞促氧化因子Gp91、p47 phox蛋白表达及凋亡水平高于正常氧浓度组,而抗氧化因子SOD2蛋白表达低于正常氧浓度组,差异均有统计学意义（P<0.05）;而EHT 1864处理后能抑制低氧诱导的炎症和凋亡因子表达,差异均有统计学意义（P<0.05）。结论 EHT1864能够通过AMPKα-NOXs信号通路改善低氧诱导的内皮细胞氧化应激及凋亡。