显色培养基检测医务人员手和鼻咽携带耐甲氧西林金黄色葡萄球菌方法的应用评价

目的：通过对本院医生、护士及护理员的手及鼻咽前庭进行耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）检出情况的分析,比较两种检验方法MRSA的检出效果。方法将医护人员的678例手标本及179例鼻咽前庭标本分别用两种检验方法进行MRSA鉴定,一种将标本用血平板分离培养初筛后,再用全自动微生物鉴定仪进行菌种鉴定,同时用头孢西丁（30μg/片）和苯唑西林（1μg/片）纸片扩散法按2010年美国CLSI抗菌药物敏感试验标准进行药物敏感试验鉴定MRSA,此传统检测方法为本实验的参考方法,结果准确可靠,另一种将标本直接接种于MRSA选择性显色培养基上,根据判定说明书观察在培养基上金黄色葡萄球菌的生长情况鉴定MRSA,此为快速检测方法,并进行两种方法MRSA检出效果的比较。结果传统检测方法检出手标本有5株MRSA,44株甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（MSSA）,鼻咽前庭拭子标本有3株MRSA,22株MSSA;快速检测方法检出手标本有6株MRSA,43株MSSA,鼻咽前庭拭子标本有3株MRSA,22株MSSA。结论采用MRSA选择性显色培养基方法与传统检测方法比较,手标本检出MRSA的总符合率为95.9%,鼻咽前庭标本检出MRSA的总符合率为100%,两种检测方法对于MRSA及MSSA检出结果均无显著性差异（P〉0.05）,由于其操作简便,特异性高,适合于在各级临床实验室广泛推广用于鉴定MRSA。     

三种检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌方法的比较

[摘要]目的:对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)3种检测方法的可靠性和临床实用性进行评价。方法：用检测mecA基因的PCR扩增法、苯唑西林纸片扩散法、头孢西丁制片扩散法对临床分离的84株金黄色葡萄球菌进行检测并作比较。结果:苯唑西林纸片扩散法检的敏感性、特异性分别为97.6%、95.3%,mecA基因的PCR扩增法和头孢西丁纸片扩散法的敏感性、特异性均为100.0%。结论:PCR技术检测MRSA具有快速、敏感和特异的特点,是一种非常有效的鉴别方法。纸片扩散法简便易行,成本低廉, 尤其是头孢西丁纸片扩散法的敏感性和特异性较苯唑西林纸片扩散法更高,值得在临床实验室中推广应用。 [关键词]　耐甲氧西林金黄色葡萄球菌；mecA基因；PCR；苯唑西林；头孢西丁     

头孢西丁诱导试验证实一株苯唑西林敏感的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌

目的研究不同浓度的头孢西丁对1株苯唑西林敏感的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）体外抗菌活性的影响和青霉素结合蛋白（PBP）2a的诱导作用。方法利用不同浓度的头孢西丁诱导1株苯唑西林敏感的MRSA,测定诱导前后苯唑西林的药敏直径、最低抑菌浓度（MIC）和出现PBP2a阳性时的菌液浓度。结果在低浓度头孢西丁诱导前后苯唑西林的药敏直径和MIC变化不大,高浓度则出现较大变化,在诱导前后出现PBP2a凝集试验阳性的菌液浓度有明显变化。结论头孢西丁可诱导金黄色葡萄球菌产生PBP2a。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌快速显色检测及评价

目前,临床上检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)主要有两大类方法:一类是对MRSA的表型检测;另一类是对MRSA的m ecA基因检则。我们根据金黄色葡萄球菌代谢特点,参考文献[1]探讨了刃天青和硝酸钾还原2种M IC快速显色法,结果如下。1材料与方法1.1试剂刃天青钠盐、N-萘基-茶碱乙烯     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药机制及检测方法研究进展

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)广泛传播是全球重要的公共卫生问题。葡萄球菌染色体mec基因盒元件(SCCmec)在金黄色葡萄球菌中转移是导致MRSA广泛传播的重要原因。SCCmec中的mecA和mecC基因分别编码PBP2a和PBP2c,其结合β-内酰胺类抗菌药物能力低下,是导致MRSA发生的关键因素,而且mecA和mecC介导的耐药表型存在一定差异。本文就SCCmec的基本结构与功能、mecA与mecC介导的耐药机制与表型以及MRSA的检测方法等方面做以下综述。     

评价头孢西丁和苯唑西林纸片扩散法测定耐甲氧西林金黄色葡萄球菌

目的 评价头孢西丁和苯唑西林纸片扩散法检测耐甲氧两林金黄色葡萄球菌（MRSA）的临床价值。方法用头孢西丁和苯唑西林纸片扩散法检测临床分离的200株金黄色葡葡球菌，以测定PBP2a的MRSA-乳胶凝集试验作为“金标准”。结果92株PBP2a阳性金黄色葡萄球菌巾．头孢西丁和苯唑西林纸片扩散法分别检出MRSA91株和84株：108株PBP2a阴性中，头孢西丁纸片扩散法全部为阴性，苯唑西林纸片扩散法阴性为103株。以PBP2a检测结果为标准．头孢西丁和苯唑西林纸片扩散法检测MRSA的特异性分别为100．0％和95．4％．敏感性分别为98．9％和91.3％。5株苯唑西林纸片扩散法检测为中介的菌株。经PBP2a检测结果证实，3株为MRSA，2株为MSSA。结论头孢西丁比苯唑西林更适合检测MRSA．并能提高测定MRSA的可靠性，是临床实验室常规检测MRSA的首选方法。     

头孢西丁诱导试验证实一株苯唑西林敏感的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌

目的研究不同浓度的头孢西丁对1株苯唑西林敏感的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)体外抗菌活性的影响和青霉素结合蛋白(PBP)2a的诱导作用。方法利用不同浓度的头孢西丁诱导1株苯唑西林敏感的MRSA,测定诱导前后苯唑西林的药敏直径、最低抑菌浓度(MIC)和出现PBP2a阳性时的菌液浓度。结果在低浓度头孢西丁诱导前后苯唑西林的药敏直径和MIC变化不大,高浓度则出现较大变化,在诱导前后出现PBP2a凝集试验阳性的菌液浓度有明显变化。结论头孢西丁可诱导金黄色葡萄球菌产生PBP2a。     

评价头孢西丁和苯唑西林纸片扩散法测定耐甲氧西林金黄色葡萄球菌

目的评价头孢西丁和苯唑西林纸片扩散法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的临床价值.方法用头孢西丁和苯唑西林纸片扩散法检测临床分离的200株金黄色葡葡球菌,以测定PBP2a的MRSA-乳胶凝集试验作为″金标准″.结果92株PBP2a阳性金黄色葡萄球菌中,头孢西丁和苯唑西林纸片扩散法分别检出MRSA 91株和84株;108株PBP2a阴性中,头孢西丁纸片扩散法全部为阴性,苯唑西林纸片扩散法阴性为103株.以PBP2a检测结果为标准,头孢西丁和苯唑西林纸片扩散法检测MRSA的特异性分别为100.0%和95.4%,敏感性分别为98.9%和91.3%.5株苯唑西林纸片扩散法检测为中介的菌株,经PBP2a检测结果证实,3株为MRSA,2株为MSSA.结论头孢西丁比苯唑西林更适合检测MRSA,并能提高测定MRSA的可靠性,是临床实验室常规检测MRSA的首选方法.     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌多重耐药基因检测

目的 了解金黄色葡萄球菌（金葡菌）β内酰胺类、氨基糖苷类、大环内酯类、四环素类抗生素耐药基因的分布特点，评估耐药性基因型与表型测定法的相关性。方法 聚合酶链反应（PCR）测定本地分离100株金葡菌的β内酰胺类耐药基因mecA、氨基糖苷修饰酶基因aae（6′）／aph（2″）、aph（3′）-Ⅲ、ant（4′，4″）、大环内酯类23s rRNA甲基化酶基因erm、四环素类核糖体保护蛋白基因tetM的发生率，纸片扩散法测定苯唑西林、庆大霉素、红霉素、四环素的耐药性。结果 100株受试菌中mecA阳性66株（MRSA），最常见的耐药基因是erm＋tetM，存在于89．4％的MRSA中，最少见的是ant（4′，4″），存在于4．5％的MRSA中，MRSA的aae（6′）／aph（2″）、aph（3′）-Ⅲ、erm、tetM检出率分别为97．.％、72．7％、100％、89．4％，明显高于MSSA的11．8％、2．9％、44．1％、8．8％；66株MRSA中，43株（65．2％）同时检出aae（6′）／aph（2″）、aph（3′）-Ⅲ、erm、tetM4种基因，58株（87．9％）同时检出aae（6′）／aph（2″）、erm、tetM3种基因，34株MSSA中，仅2株（5．9％）同时检出aae（6′）／aph（2″）、erm、tetM3种基因；苯唑西林、庆大霉素、红霉素、四环素与其相应的耐药基因mecA、age（6′）／aph（2″）、erm、tetM的符合率分别为96％、99％、96％、84％，81株红霉素表型耐药菌中79株（97．5％）为大环内酯．林可霉素．链霉菌素B（MLS8）结构型耐药。结论耐药基因在金葡菌中均可检出，金葡菌对氨基糖苷类、大环内酯类、四环素类抗生素耐药与苯唑西林耐药紧密相关，大环内酯类主要是结构型耐药，基因型与表型测定有较高的符合率。     

头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌

目的评价头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRsA)在临床的应用价值。方法用头孢西丁纸片扩散法检测临床分离的94株金黄色葡萄球菌，并与苯唑西林纸片扩散法、琼脂稀释法及mecA基因检测进行比较。结果mecA基因阳性的77株金黄色葡萄球菌，头孢西丁纸片扩散法均显示耐药。结论头孢西丁纸片扩散法与mecA基因检测高度一致，是筛选和确认MRSA的一种可靠的试验方法。     

Management of healthcare-associated methicillin-resistant Staphylococcus aureus

Healthcare-associated methicillin-resistant Staphylococcus aureus is a major cause of nosocomial infections worldwide, with significant attributable morbidity and mortality in addition to pronounced healthcare costs. Treatment results with vancomycin – the current recommended antibiotic for serious methicillin-resistant S. aureus infections – have not been impressive. The recent availability of effective antimicrobial agents other than glycopeptides, such as linezolid and daptomycin, as well as the anticipated approval of newer agents with diverse mechanisms of action, has somewhat ameliorated the threat posed by this organism. However, these drugs are expensive, and there is still no overall satisfactory strategy for reducing the incidence of healthcare-associated methicillin-resistant S. aureus in endemic regions. Although early results with the Society for Healthcare Epidemiology of America guidelines give cause for cautious optimism, long-term experience is lacking, and it is likely that these guidelines will have to be adapted according to local conditions and resources before implementation. Trends to keep in mind when considering the problem of healthcare-associated methicillin-resistant S. aureus include the advent of community-associated methicillin-resistant S. aureus, and the propensity of S. aureus to evolve and acquire resistance determinants over time. This was last vividly demonstrated by the handful of vancomycin-resistant S. aureus isolated recently, which had acquired the vancomycin resistance gene from vancomycin-resistant enterococci.     

纸片法头孢西丁敏感的青霉素耐药葡萄球菌分析

目的 评估不同检测方法 对纸片法头孢西丁敏感,苯唑西林耐药葡萄球菌耐药性状的检测能力,并对非mecA基因介导苯唑西林耐药的匍萄球菌进行药敏谱分析.方法 收集2007年1月至2009年5月间复旦大学附属华山医院就诊患者呼吸道、尿、分泌物和无菌体液标本中分离得到的255株金黄色葡萄球菌,采用苯唑西林纸片法、苯唑西林MIC法、头孢西丁纸片法、头孢西丁MIC法枪测金黄色葡萄球菌对苯唑西林的敏感性:用苯唑西林MIC法和头孢西丁纸片法检测75株凝固酶阴性萄萄球菌对苯唑西林的敏感性:将所有葡萄球菌进行mecA基因检测,结合试验结果 分析葡萄球菌苯唑西林耐药原因,并对非mecA基因介导的苯唑西林耐药葡萄球菌用MIC法进行抗菌药敏谱分析.结果 255株纸片法头孢西丁敏感、青霉素耐药的金黄色葡萄球菌苯唑西林纸片法检测出6株中介,4株耐药;头孢西丁纸片法、头孢西丁MIC法、苯唑西林MIC法全敏感、mecA基因检测全阴性.75株纸片法头孢西丁敏感、青霉素耐药的凝固酶阴性葡萄球菌,苯唑西林MIC法59株敏感,16株耐药;mecA基因阴性为71株,阳性为4株.12株非mecA基因介导苯唑西林耐药的葡萄球菌庆大霉素敏感为10株,克林霉素8株、环丙沙星11株、红霉素6株、甲氧苄啶/磺胺甲噁唑11株,头孢菌素类、替考拉宁、万古霉素、哌拉西林/他唑巴坦、四环素12株.结论 金黄色葡萄球菌用头孢西丁检测mecA基因介导的苯唑西林耐药,具有很好的可靠性.凝固酶阴性葡萄球菌最好同时使用头孢西丁纸片法和苯唑西林MIC法检测mecA基因介导的苯唑西林耐药,以提高检出率.非mecA基因介导的苯唑西林耐药,临床可依据实际药物敏感实验结果 选择性使用β内酰胺酶稳定的青霉素、β内酰胺酶抑制剂复合药、头孢类和碳青霉烯类药物治疗.     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染的临床流行特点及耐药率监测

目的探讨耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)感染的临床流行特点及其耐药率的监测,以期指导临床用药的合理性。方法采用回顾性方法对2001～2007年本院住院患者(2003年由于非典流行未做统计)痰、尿、血标本培养结果进行统计分析,并对其中金黄色葡萄球菌菌型分布、耐药性、MRSA的流行趋势进行评定。结果①分离出金黄色葡萄球菌3754株(15.2%),为球菌感染的第2位。其中MRSA3480株(92.7%),来源于60岁以上患者3360株(89.5%);甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌(MSSA)274株(7.3%)。MRSA标本的构成为院内感染2718株(78.1%);院外感染762株(21.9%);标本分布为痰3303株(94.9%),尿71株(2.0%),血106株(3.0%);②MRSA阳性检出率由2001年的7.3%增加至2007年的17.1%,有逐年增长的趋势(趋势χ2=115.276,P=0.000),而MSSA的阳性检出率变化不大(χ2=3.371,P>0.05)。③MRSA对20种常用抗生素的平均耐药率2001～2007年分别为79.9%、83.2%、78.4%、80.6%、77.1%、79.6%;M...     

一种PCR检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌株新方法的建立

目的建立一种PCR检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌株新方法。方法收集2016年1月至2018年12月入住本院ICU的重症患者的脓液、分泌物、血液等标本中分离培养病原菌株,共43个样本,且均为初次分离所得。以mecA基因检测呈阳性为"金标准",对样本分别进行实时荧光PCR检测和纸片扩散法检测。结果实时荧光PCR方法检测法准确度高于头孢西丁及苯唑西林纸片扩散法;所有耐甲氧西林葡萄球菌对青霉素和苯唑西林药耐药性最强,对红霉素和克林霉素次之,对万古霉素、利奈唑胺、替加环素、利福平均表现为敏感,对四环素、庆大霉素等具备一定的敏感性。结论新建立的荧光PCR检测法相比头孢西丁纸片扩散法和苯唑西林纸片扩散法不仅准确度高,而且特异性好,能够准确检测出耐甲氧西林金黄色葡萄球菌。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌SCCmec基因分型与耐药性分析

目的 了解本地区MRSA菌株SCCmec基因型分布和各种基因型的耐药特征.方法 用PCR扩增SCCmec分型的特征性基因,对MRSA菌株分型;采用Vitek 32微生物分析仪检测MRSA对抗菌药物敏感性.结果 84株MRSA菌株中包括SCCmecⅡ型9株（10.7%）,SCCmecⅢ型70株（83.3%）,SCCmecⅣ型5株（6.0%）.所有菌株对利福平的耐药率均较低,对万古霉素和利奈唑烷完全敏感,各型别间无显著差异（P＞0.05）,对其他非β-内酰胺类抗菌药物的耐药率由高到低分别为SCCmecⅢ型、SCCmecⅡ型和SCCmecⅣ型,SCCmecⅡ型和Ⅲ型MRSA菌株表现为多重耐药,其耐药率显著高于SCCmecⅣ型（P＜0.05）.结论 SCCmecⅢ型菌株为本地区MRSA主要流行菌株,该型菌株对抗生素呈多重耐药.     

甲氧西林耐药／敏感金黄色葡萄球菌基因分型和毒力基因检测

目的：分析耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（金葡菌）（MRSA）和甲氧西林敏感金葡菌（MSSA）临床分离株基因分型及毒力基因分布特征是否存在差异,了解金葡菌耐药性演变与毒力变迁之间的相关性。方法采用脉冲场凝胶电泳（PFGE）方法和多位点序列分型（MLST）方法对呼和浩特地区住院患者中分离的30株 MRSA 和30株 MSSA 进行分子分型,同步采用聚合酶链反应（PCR）方法检测菌株毒力基因。结果60株金葡菌 PFGE 分型共分19个型,MSSA 菌株分布在 I 和 H 型等16个基因型中,而 MRSA 株主要集中分布在 K 和 M 2个基因型中。20株不同 PFGE 型菌株 MLST 分型结果显示,MRSA 株主要为 ST-239型;MSSA 株呈多样性分布特征,主要以 ST-5型、ST-7型、ST-15型为主。毒力基因在 MRSA 和 MSSA 中分布差异显著。MSSA 毒力基因整体携带率明显高于 MRSA（53．9％对40．0％,χ2＝32．7,P ＜0．01）。MRSA 株 sea、cna 和 cap 8基因携带率明显高于 MSSA 携带率（P ＜0．01）,而 sec、seg 、sei、sem、sen、seo、fnbB、ebpS、cap5基因携带率明显低于 MSSA（P＜0．05）。结论呼和浩特地区金葡菌临床分离株基因型呈现多样化分布特点,MRSA 主要以 ST-239型为主。MSSA 毒力基因携带率高,特定毒力因子在 MRSA 和 MSSA 株中呈现一定聚集分布特征,金葡菌特定耐药性的获得可能伴随特定毒力特征的变化。     

头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌

目的　评价头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 (MRSA)在临床的应用价值。方法　用头孢西丁纸片扩散法检测临床分离的 94株金黄色葡萄球菌 ,并与苯唑西林纸片扩散法、琼脂稀释法及mecA基因检测进行比较。结果　mecA基因阳性的 77株金黄色葡萄球菌 ,头孢西丁纸片扩散法均显示耐药。结论　头孢西丁纸片扩散法与mecA基因检测高度一致 ,是筛选和确认MRSA的一种可靠的试验方法。     

252株金黄色葡萄球菌的临床分布及耐药性分析

目的了解金黄色葡萄球菌(SA)的临床分布及耐药性特征。方法收集该院2009年1月至2010年12月临床分离的SA,采用WHONET5.4软件进行分析。结果共分离SA252株,其分离出的SA标本以痰为主,占47.62%,其次为分泌物和脓液。检出率前3位的科室为ICU、骨外科和呼吸内科。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)78株,占30.95%,其中ICU的MRSA检出52株,检出率高于非ICU。除万古霉素、利奈唑胺、利福平及氯霉素对其保持较低耐药率外,对其他抗菌药物耐药率均较高。ICU内SA耐药率高于非ICU。结论通过分析SA的临床分布及耐药性特征,有利于采取措施控制NRSA的流行和指导临床用药。