缺氧对血管内皮细胞内钙离子浓度的影响及金钠多的保护作用

将血管内皮细胞(VEC)分为对照组、单纯缺氧组和金钠多 缺氧组,应用激光共聚焦显微镜定量测量各组VEC内游离钙离子(Ca2 )浓度.发现单纯缺氧组同对照组比较细胞内Ca2 浓度明显增加(P<0.01);金钠多 缺氧组同单纯缺氧组比较Ca2 浓度显著降低(P<0.01),但仍明显高于对照组(P<0.05).认为缺氧可以导致人大动脉VEC内Ca2 浓度升高,金钠多对缺氧所致的细胞内Ca2 浓度的升高具有保护作用.     

高浓度氧对猪肺动脉内皮细胞钙离子浓度的影响

目的 探讨高浓度氧对原代培养的猪肺动脉内皮细胞钙离子浓度的影响.方法 原代培养的猪肺动脉内皮细胞分别用高氧刺激不同时间,用双波长荧光分光光度计观察细胞质内钙离子浓度的变化.结果 经高浓度氧刺激后内皮细胞生长状态不良,和常氧状态相比,胞内钙离子浓度随刺激时间的延长和氧分压的升高而增高.结论 猪肺动脉内皮细胞对高浓度氧刺激耐受性好,高浓度氧能够升高原代培养的猪肺动脉内皮细胞的胞内钙离子浓度.     

表皮生长因子对鼠肝Kupffer细胞、肝窦内皮细胞胞内游离Ca~(2+)浓度的影响

表皮生长因子(EGF)能促进肝细胞的再生,临床上已用于重症肝炎的治疗。作者发现EGF可加强Kupffer细胞分泌细胞分裂素、IL-1,参与肝脏的病理生理过程。本研究从细胞内Ca~(2+)水平探讨了EGF对Kupffer细胞、肝窦内皮细胞作用的可能机理。材料和方法:正常Wistar雄性大鼠,暴露门脉插管,用含HEPES的无钙Hanks平衡盐水(HBSS)灌流,继之用含0.05％胶原酶、0.1％链霉菌蛋白酶E的HBSS液灌流。然后摘出肝脏,在含0.05％链霉菌蛋白酶E的HBSS液中,振荡培养消化20分钟。把所     

普伐他汀对2型糖尿病患者血管内皮细胞的保护作用研究

目的观察普伐他汀对2型糖尿病伴高脂血症患者血管内皮细胞的保护作用。方法将68例2型糖尿病伴有高脂血症患者随机分为降糖组(只服降糖药物,32例)和普伐他汀组(在服用降糖药基础上加服普伐他汀20mg,1次/晚,36例),治疗时间为1个月;对照组为正常查体者(30例)。测定对照组以及降糖组和普伐他汀组治疗前后血糖、血脂、内皮素(ET)、一氧化氮(NO)、C-反应蛋白(CRP)水平和循环内皮细胞(CEC)计数的改变。结果治疗前降糖组和普伐他汀组ET、CRP水平和CEC计数均较对照组高,而NO水平低。治疗1个月后普伐他汀组总胆固醇(TC)和低密度脂蛋白(LDL)水平明显降低,ET、CRP水平和CEC数均下降,NO水平升高,且与降糖组比较差异有显著意义。降糖组上述各指标无明显改变。CEC计数与TC、LDL、ET和CRP水平呈正相关,与NO水平呈负相关。结论普伐他汀通过降脂和恢复ET/NO比例对糖尿病伴高脂血症患者血管内皮细胞发挥保护作用,抗炎作用可能参与其中。     

硝酸甘油对人脐血管内皮细胞内钙离子浓度的影响

目的 探讨不同剂量硝酸甘油对体外培养人脐血管内皮细胞内钙离子浓度的影响。方法分离人脐静脉内皮细胞，体外原代培养，细胞经钙荧光探针Fluo-3-AM染色后，在激光共聚焦显微镜下观察培养液中分别加入三种浓度硝酸甘油后，细胞内游离钙离子浓度[Ca^2 ]i的动态变化情况。结果 低浓度和高浓度硝酸甘油作用后，[Ca^2 ]i呈现不同的变化曲线。10μg／ml NTG持续缓慢下降；30μg／mlNTG先明显下降，然后缓慢上升；1000／μg／mlNTC持续缓慢上升。结论 硝酸甘油的药理作用与内皮细胞有关，不同浓度的硝酸甘油可能通过不同的信号传导路径发挥不同的生理作用。     

硝酸甘油对人脐血管内皮细胞内钙离子浓度的影响

目的探讨不同剂量硝酸甘油对体外培养人脐血管内皮细胞内钙离子浓度的影响.方法分离人脐静脉内皮细胞,体外原代培养,细胞经钙荧光探针Fluo-3-AM染色后,在激光共聚焦显微镜下观察培养液中分别加入三种浓度硝酸甘油后,细胞内游离钙离子浓度[Ca2+]i的动态变化情况.结果低浓度和高浓度硝酸甘油作用后,[Ca2+]i呈现不同的变化曲线.10 μg/ml NTG持续缓慢下降;30 μg/ml NTG先明显下降,然后缓慢上升;1000 μg/ml NTG持续缓慢上升.结论硝酸甘油的药理作用与内皮细胞有关,不同浓度的硝酸甘油可能通过不同的信号传导路径发挥不同的生理作用.     

血管内皮细胞生长因子与糖尿病微血管并发症

随着人们对糖尿病诊断和治疗水平的提高 ,各种糖尿病慢性并发症已成为糖尿病患者致死与致残的主要原因。如何防治与减少糖尿病慢性并发症的发生已成为治疗糖尿病的关键环节。近年来 ,人们对糖尿病慢性并发症的发病机制有了进一步的认识 ,尤其是阐明了促血管形成因子在糖尿病微血管并发症发病中的作用。在糖尿病状态下 ,许多组织因高糖和缺氧等因素使一些具有促血管生成能力的细胞因子的表达增加 ,这些因子在增加血管通透性 ,细胞外基质生成的同时 ,促发血管生成 (ａｎｇｉｏｇｅｎｅ ｓｉｓ)的过程 ,从而导致组织损伤和糖尿病微血管病变的形…     

糖尿病血管内皮细胞代谢改变的研究进展

血管内皮细胞功能障碍是糖尿病（DM）血管并发症的始动环节。高血糖所致的氧化应激水平升高、异常糖代谢途径激活、晚期糖基化终产物（AGEs）累积和蛋白激酶C（PKC）通路活化等代谢改变均可介导内皮细胞损伤。如何抑制内皮细胞异常代谢并改善内皮细胞功能一直是DM血管并发症的研究重点。本文主要就DM患者血管内皮细胞的代谢改变作一综述。     

Exenatide改善糖尿病大鼠血管内皮功能障碍

目的初步探讨胰高血糖素样肽1(GLP-1)受体激动剂Exenatide对糖尿病大鼠血管内皮功能障碍的影响,为其临床应用提供实验依据。方法 34只健康雄性Wistar大鼠随机分成4组:对照组、糖尿病组、小剂量Ex-enatide治疗组(0.3125μg/日)和大剂量Exenatide治疗组(0.625μg/日)。后3组大鼠脂肪乳灌胃14天后,进行口服葡萄糖耐量试验和空腹胰岛素水平检测,之后腹腔注射链脲佐菌素复制糖尿病模型,以空腹血糖≥11.8mmol/L作为模型成功标志。Exenatide皮下注射治疗45天。检测大鼠空腹血糖水平;制作离体胸主动脉环,观察动脉环对不同浓度去甲肾上腺素、乙酰胆碱和硝普钠的舒缩反应;免疫组织化学法观察胸主动脉组织血管性假血友病因子的表达情况。结果脂肪乳灌胃14天后高脂组大鼠口服葡萄糖耐量出现异常,各时间点血糖水平均较对照组明显升高(P<0.01);空腹胰岛素水平[(49.2±13.0)×10-3μU/L]、稳态模式评价胰岛素抵抗指数(11.7±3.5)较对照组[(35.7±4.7)×10-3μU/L,7.7±1.1]明显升高(均P<0.05),出现明显的胰岛素抵抗现象。糖尿病组大鼠空...     

缺氧预处理对缺氧复氧乳鼠心室肌细胞游离钙的影响

观察缺氧预处理对缺氧复氧乳鼠心室肌细胞游离钙的影响。建立培养乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤模型。设正常对照组(A组)、缺氧复氧组(B组)、缺氧预适应组(C组)。经Flou-3/AM负载染色后,采用流式细胞分析技术,测定细胞内钙离子浓度;利用膜片钳技术,观察L型钙通道和钠钙交换电流的变化。结果:①与A组比较,B组可显著增加细胞内的游离钙离子浓度(P<0.01);L型钙电流密度明显下降,I-V曲线上移,半数失活电压(V1/2)减小,ICa,L失活曲线明显左移,而Na+/Ca2+交换电流显著增加。②与B组比较,C组可减轻缺氧再灌注时[Ca2+]i增加(P<0.01);可减轻再灌注对L型钙电流的抑制,使I-V曲线下移程度减轻,V1/2增加及稳态失活曲线的右移;减少Na+/Ca2+交换电流的增加;③与A组比较,C组钙内流和Na+/Ca2+交换电流有轻度增加(P<0.05)。结论:缺氧预处理使缺氧/复氧造成的[Ca2+]i增高的程度减轻,是通过抑制Na+/Ca2+交换电流的增加实现的。     

叶酸对2型糖尿病大鼠胸主动脉内皮功能的影响

目的探讨长期补充叶酸对2型糖尿病大鼠胸主动脉内皮功能的影响及其作用机制。方法将2型糖尿病大鼠37只分为模型组(12只)、小剂量叶酸组(12只)和大剂量叶酸组(13只),另11只正常大鼠为正常对照组,叶酸干预11周后,剪尾采血分别检测血清一氧化氮、超氧化物歧化酶及丙二醛水平,并取胸主动脉制备主动脉环进行离体血管环反应性测定。结果模型组大鼠血清一氧化氮和超氧化物歧化酶水平明显低于正常对照组(P<0.01),而血清丙二醛水平明显高于正常对照组(P<0.01);补充叶酸11周后,小剂量叶酸组及大剂量叶酸组血清一氧化氮及超氧化物歧化酶水平均较模型组有明显增高(P<0.05或P<0.01),而血清丙二醛水平较模型组明显降低(P<0.01)。在每一个乙酰胆碱累积浓度下,模型组大鼠胸主动脉环的舒张度均较正常对照组明显减低(P<0.05或P<0.01),而小剂量叶酸组和大剂量叶酸组大鼠胸主动脉环的舒张度则均较模型组明显增高(P<0.05或P<0.01),小剂量叶酸组大鼠胸主动脉环的舒张度与大剂量叶酸组相比差异无显著性。结论长期补充叶酸对2型糖尿病大鼠血管内皮功能损伤具有明显预防作用,叶酸可能通过增加机体一氧化氮合成从而提高血清一氧化氮活性和提高机体抗氧化能力来预防2型糖尿病大鼠血管内皮功能损伤的发生。     

罗格列酮对高糖诱导的血管内皮细胞炎症的抑制作用

目的 阐明罗格列酮对糖尿病血管并发症保护作用的分子机制.方法 用凝胶迁移分析和免疫荧光法测定不同浓度罗格列酮干预前后高糖诱导的血管内皮细胞核因子κB激活和血管细胞黏附分子1表达的改变.结果 25 mmol/L D-葡萄糖刺激30 min可诱导细胞核因子κB向核内迁移(与基础水平相比,P<0.001);5、25 μmol/L罗格列酮以剂量依赖的方式抑制了D-葡萄糖诱导这种效应,抑制率分别为25.17%(P=0.001)和51.79%(P<0.001).罗格列酮还抑制了D-葡萄糖诱导的血管细胞黏附分子1高表达.结论 罗格列酮通过抑制血管内皮细胞炎症起到直接保护血管作用,可能是其延缓和改善糖尿病血管并发症的机制之一.     

内皮抑素和血管内皮生长因子与2型糖尿病大血管病变的关系

目的探讨内皮抑素和血管内皮生长因子与2型糖尿病大血管病变发生的关系。方法用酶联免疫吸附测定法检测100例2型糖尿病患者(34例2型糖尿病无合并症、40例伴发一种大血管病变、26例伴发多种大血管病变)和30例正常对照者血清内皮抑素和血管内皮生长因子表达水平的变化。结果内皮抑素和血管内皮生长因子在2型糖尿病大血管病变各组(包括合并一种大血管病变组、合并两种以上大血管病变组)血清含量分别显著高于2型糖尿病无合并症和正常对照组(内皮抑素为32.4±15.6μg/L和35.1±20.2μg/L比11.2±8.6μg/L和9.9±6.7μg/L;血管内皮生长因子为133.5±36.8ng/L和302.1±52.4ng/L比90.2±42.4ng/L和81.3±33.5ng/L,P<0.01),两者在正常对照和2型糖尿病无合并症组间比较差异不显著;血管内皮生长因子在伴发一种大血管病变、多种大血管病变组间比较表达水平显著上调(133.5±36.8ng/L比302.1±52.4ng/L,P<0.01),而内皮抑素的表达差异不显著;在2型糖尿病伴发一种大血管病变组,内皮抑素和血管内皮生长因子成显著正相关(r=0.540,P<0.01)。结论血管内皮生长因子的表达水平与2型糖尿病大血管病变程度密切相关,内皮抑素和血管内皮生长因子可能以自稳态调节机制参与动脉粥样硬化的发生和发展。     

阿托伐他汀对2型糖尿病患者内皮细胞微粒和颈动脉内膜中膜厚度的影响

目的观察阿托伐他汀对2型糖尿病患者内皮细胞微粒水平及颈动脉内膜中膜厚度(IMT)的影响。方法选取2型糖尿病住院患者90例,年龄45~75岁,随机分为阿托伐他汀组和辛伐他汀组。所有患者均在生活方式干预的同时给予口服降糖药和(或)胰岛素治疗,肠溶阿司匹林0.1 g qd,阿托伐他汀组每晚加服阿托伐他汀片20 mg,辛伐他汀组每晚加服辛伐他汀片20 mg,总疗程24周,观察治疗前后内皮细胞微粒、低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)及颈动脉IMT的变化,并分析它们之间的相关性。结果与治疗前相比,阿托伐他汀组和辛伐他汀组IMT、内皮细胞微粒及LDLC水平均明显下降(P0.05),阿托伐他汀降低IMT、内皮细胞微粒及LDLC的作用强于辛伐他汀(P0.05),两组降低幅度差异有统计学意义(P0.05),治疗前后两组内皮细胞微粒及LDLC的变化值与IMT的变化值呈正相关关系(P0.05)。结论他汀类药物能够降低2型糖尿病患者颈动脉IMT、内皮细胞微粒及LDLC水平,其抗动脉粥样硬化作用除与降脂作用有关外,可能还与抑制内皮细胞微粒释放有关。阿托伐他汀不仅在降低LDLC上优于辛伐他汀,而且在降低内皮细胞微粒上同样优于辛伐他汀,由此推测阿托伐他汀的抗动脉粥样硬化作用强于辛伐他汀可能与此相关。     

葡萄糖对血管内皮细胞小凹蛋白1和血管内皮生长因子表达的影响

为了探讨高浓度葡萄糖损伤血管内皮细胞及其对小凹蛋白-1和血管内皮生长因子表达的影响。将人脐静脉内皮细胞株ECV304．分别培养在对照组和含5.5mmol／L、11.1mmol／L、22.0mmol／L、33.0mmol／L葡萄糖的培养基中。经葡萄糖培养24h后，噻唑蓝法测定细胞增殖活性，硝酸还原酶法测定培养上清液中一氧化氮浓度，免疫组织化学和免疫印迹方法检测细胞中小凹蛋白-1和血管内皮生长因子的表达。结果发现，随着葡萄糖浓度的增加，内皮细胞增殖活性呈浓度依赖性抑制(r=-0.776，P=0.000)；一氧化氮浓度呈浓度依赖性增加(r=0.698，P=0.000)；小凹蛋白-1和血管内皮生长因子为棕黄色颗粒，主要分布于胞浆中；血管内皮生长因子的表达呈浓度依赖性增加(r=0.645，P=0.009)；小凹蛋白-1的表达也呈浓度依赖性增加(r=0.808，P=0.000)。提示高糖可诱导血管内皮细胞的血管内皮生长因子和小凹蛋白-1的表达，此变化可能与糖尿病患者高糖致血管病变有关。     

细胞内游离钙离子在神经肽Y刺激血管平滑肌细胞增殖中的作用

为探讨细胞内游离钙离子在神经肽Ｙ刺激血管平滑肌细胞增殖过程中的变化,以体外培养的血管平滑肌细胞模型为研究对象,运用激光共聚焦显微镜和免疫荧光组织化学技术,定量和动态观察了神经肽Ｙ对血管平滑肌细胞内游离钙离子浓度与血管平滑肌细胞增殖间的相互关系。结果发现,神经肽Ｙ组中血管平滑肌细胞的增殖活度（ＭＴＴ法）和增殖细胞核抗原的表达较对照组明显增强;与此同时,神经肽Ｙ作用下体外培养的血管平滑肌细胞内游离钙离子浓度也逐渐升高。此结果提示,神经肽Ｙ刺激血管平滑肌细胞增殖的细胞内信号传导机制与神经肽Ｙ提高细胞内游离钙离子浓度有关。     

氧化型高密度脂蛋白对细胞凋亡及细胞内钙离子浓度的影响

目的通过研究氧化型高密度脂蛋白对培养的内皮细胞致凋亡以及细胞内钙离子浓度的影响,阐述其致动脉粥样硬化机理,并探讨其引起细胞损伤的机制.方法用铜离子引发脂质过氧化过程,制备氧化型高密度脂蛋白,用MTT检测法检测细胞活性,PI染色法检测细胞凋亡.结果氧化型高密度脂蛋白可诱导内皮细胞发生凋亡;细胞内钙离子浓度则随氧化型高密度脂蛋白浓度的升高呈现逐渐下降的趋势.结论氧化型高密度脂蛋白引起细胞损伤的机制可能与钙离子浓度升高有关,体内氧化型高密度脂蛋白通过内皮细胞凋亡的途径损伤血管内皮,引发动脉粥样硬化.