动脉粥样硬化斑块中细胞凋亡及其相关基因的表达

目的 :研究动脉粥样硬化 (AS)病灶中细胞凋亡的发生情况及其相关基因的表达情况 ,探讨细胞凋亡与bcl 2、p5 3、C myc基因表达的内在联系。方法 :选择因AS住院手术患者 2 0例作为研究对象〔其中男 17例 ,女 3例 ,平均年龄 (6 6 .8± 9.86 )岁 ,主要取患者的股动脉〕 ,及因意外伤害手术患者的 10例〔其中男 8例 ,女 2例 ,平均年龄 (5 1.6± 11.97)岁〕作为正常对照。采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记 (TUNEL)技术检测两组动脉标本的细胞凋亡情况 ,采用免疫组化的方法检测bcl 2、p5 3及C myc基因的表达情况 ,应用透射电镜进行两组动脉标本的细胞形态学观察。结果 :AS病灶中 ,细胞凋亡的发生率明显高于正常对照血管 (P <0 .0 1) ,bcl 2蛋白的表达明显降低 ,p5 3蛋白及C myc蛋白的表达明显升高 (P <0 .0 1) ;透射电镜证实AS病灶中有大量的平滑肌细胞发生凋亡。结论 :细胞凋亡是AS病灶中细胞死亡的一种主要形式 ,bcl 2、p5 3及C myc基因的表达可能对细胞凋亡的发生起重要的调控作用。     

血管平滑肌细胞凋亡与动脉粥样硬化

细胞凋亡是细胞死亡的一种特殊形式,其过程受遗传基因及其他多种因素调控,最近研究表明,在动脉粥样硬化斑块中发现血管平滑细胞凋现象,本文着重介绍血管平滑肌细胞凋亡的相关基因,诱导因素,在动脉粥样硬化发生中的病理意义及未来研究展望。     

血管平滑肌细胞凋亡与动脉粥样硬化

血管平滑甩细胞凋亡参与了弱样硬化的形成过程。本文简述了血管平滑肌细胞凋亡在动脉粥样硬化中的意义，血管平骨肌细胞凋亡的有关诱导因素、信号传递、基因调控及与部分动脉粥样化临床并发症的关系。     

血管平滑肌细胞凋亡与动脉粥样硬化研究进展

血管平滑肌细胞是构成血管壁的重要组成成分,其凋亡参与了动脉粥样硬化及再狭窄的发生发展,现就最近研究对血管平滑肌细胞凋亡诱导因素、相关基因、及其在动脉粥样硬化发生发展作用作一综述。     

血管平滑肌细胞凋亡与动脉粥样硬化及其中药防治

细胞凋亡在动脉粥样硬化形成的发病和治疗中具有重要意义。随着对动脉粥样硬化研究的深入，发现血管平滑肌细胞增生是其中重要因素。本文着重论述血管平滑肌细胞凋亡在动脉粥样硬化疾病中的作用，以及目前应用中药单体及中药复方调节血管平滑肌细胞凋亡的研究进展，同时对中医药防治动脉粥样硬化的前景进行展望。     

动脉粥样硬化和再狭窄中平滑肌细胞凋亡

细胞凋亡调节着人体生理和病理方面的细胞数目的平衡,其对动脉粥样硬化和再狭窄过程的发生发展具有重要影响,细胞凋亡有多种诱发因素和基因调控机制,其中生长因子是最重要的调节因素之一。     

中药对动脉粥样硬化血管平滑肌细胞凋亡基因调控作用的研究进展

细胞凋亡(apoptosis)是普遍存在于人体组织细胞内的细胞死亡的形式之一,是不同于坏死的正常生理性的程序性细胞死亡。它参与体内细胞数量的调节,并清除体内无功能的细胞、对机体有害的细胞、突变的细胞以及受到损伤后不能存活的细胞。平滑肌细胞(SMC)是构成血管壁的重要成分,血管平滑肌细胞(VSMC)增殖形成AS,动脉粥样斑块病变是AS发生、发展的重要过程,但后期较严重的AS斑块中由于发生了细胞凋亡,而使纤维帽中的细胞大大减少,使斑块更易破裂。凋亡的发生需要外部信号和内部相关基因共同调控,外部信号通过第二信使进行传递。已经有研究…     

动脉粥样硬化时平滑肌细胞凋亡的研究进展

动脉粥样硬化斑块中平滑肌细胞的凋亡随斑块发展不同程度而定。斑块沉亡及残作清除不足，可破坏纤维帽组织结构的平衡，影响斑块的稳定，使之易于破裂从而诱发临床事件（如心肌硬塞和碑苑）；凋亡可影响血管管腔的重的过程，例如对动脉狭窄部位行球囊扩张水后，设法加快内皮修复，促进凋亡，则对再狭窄的防治有积极意义二动脉凋亡可通过P53依赖性及非依赖性通路发生，还受自力无反调节和生长因子的问给调节．     

牛磺酸对兔动脉粥样硬化血管平滑肌细胞凋亡的影响

目的:探讨牛磺酸对兔动脉粥样硬化血管平滑肌细胞凋亡及凋亡相关基因bcl-2、bax和caspase-3蛋白表达的影响.方法:将24只日本大耳白兔随机分为正常对照组、高脂模型组和牛磺酸组,14周后观察各组主动脉组织病理形态学改变,透射电镜观察斑块内平滑肌细胞超微结构变化,流式细胞术检测动脉粥样斑块内平滑肌细胞凋亡率,免疫组化染色法检测凋亡相关基因bcl-2和bax蛋白表达,Western blot蛋白印记法检测caspase-3蛋白表达.结果:高脂模型组与正常对照组比较,动脉内膜出现典型的斑块,管腔极度狭窄,典型的凋亡平滑肌细胞明显增多,平滑肌细胞凋亡率、bax及caspase-3蛋白表达升高(P<0.01),bcl-2蛋白表达降低(P<0.05).牛磺酸组与高脂模型组比较,主动脉斑块缩小,动脉管腔狭窄减轻,凋亡平滑肌细胞不典型且较少,平滑肌细胞凋亡率、bax蛋白表达及caspase-3蛋白表达降低(P<0.01),bcl-2蛋白表达升高(P<0.05).结论:牛磺酸可能通过对bcl-2、bax及caspase-3蛋白表达的调控而降低动脉斑块内过度凋亡的平滑肌细胞,从而抑制粥样斑块的形成.     

平滑肌细胞和动脉粥样硬化

动脉粥样硬化过程是动脉壁多种损伤因素的慢性炎症反应过程，其特点是炎性组织来源于血管平滑肌细胞，在动脉粥样硬化硬化形成过程中，平滑肌细胞的表型，功能，基因表达等均发生明显的改变，参与间质形成，脂质沉积，斑块钙化，并于血栓机化，血管痉挛，管壁增厚等改变有关，平滑肌细胞的表型，功能改变是在多种刺激因素的作用下发生的，并受到多种细胞因子和生长因子的调控，其中最主要是血小板衍化生长因子和转化生长因子β。     

家兔腹主动脉球囊导管损伤后血管平滑肌细胞凋亡和一氧化氮合成酶基因表达

采用脱氧核苷酸转移酶介导的缺口末端标记法，观察兔腹主动脉经球囊导管损伤后０、８、２４ｈ，３天和５天时血管中膜平滑肌细胞和外膜细胞凋亡的变化。提取血管组织ＲＮＡ菜用反转录－多聚酶链反应测定一氧化氮合成酶基因表达。     

家兔腹主动脉球囊导管损伤后血管平滑肌细胞凋亡和一氧化氮合成酶基因表达

采用脱氧核苷酸转移酶介导的缺口末端标记法，观察兔腹主动脉经球囊导管损伤后0、8、24h，3天和5天时血管中膜平行肌细胞和外膜细胞凋亡的变化．提取血管组织RNA，采用反转录一多聚酶链反应测定一氧化氮合成酶基因表达。结果表明，血管损伤后8h可见中膜平滑肌细胞凋亡增加，24h达高峰，3天和5天仍维持在较高水平，外膜细胞凋亡无明显改变。而诱导型一氧化氮合成酶基因表达亦于8h明显增加，在24h达最高，与细胞凋亡存在平行关系。提示中膜平滑肌细胞凋亡是球囊导管损伤血管的一个早期反应，诱导型一氧化氮合成酸可能参与了此过程。     

野生型P53基因导入诱导血管平滑肌细胞凋亡

为观察野生型P53基因诱导血管平滑肌细胞凋亡的现象，探讨对生型P53基因导入抑制平滑肌细胞增殖的作用机理，构建了野生型P53基因的重组腺病毒载体，体外转染兔主动脉血管平滑肌细胞。应用流式细胞议分析细胞周期，氚标胸腺嘧啶脱氧核苷掺入试验检测DNA合成，琼脂糖凝胶电泳观察DNA区带图谱，末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP切口末端标记技术原位检测细胞凋亡。结果发现，野生型P53基因重组腺病毒载体转梁平滑肌细胞后，细胞内DNA合成减少。流式细胞仪分析显示77％的平滑肌细胞生长停滞在G0／Gl期，约45％的细胞发生细胞凋亡。dUTP切口末端标记阳性细胞百分率为40％～50％。DNA在琼脂糖凝胶电泳中呈现阶梯状区带图谱。以上结果提示，野生型P53基因通过诱导细胞凋亡对血管平滑肌细胞增殖起抑制作用。     

内皮素促进细胞增殖相关基因的表达和血管平滑肌细胞增殖

通过３Ｈ－ＴｄＲ掺入实验和ＲＮＡ印迹分析，观察了内皮素－１对大鼠血管平滑肌细胞ＤＮＡ合成及细胞增殖相关基因表达的影响。结果表明，内皮素－１作用于血管平滑肌细胞１２ｈ，３Ｈ－ＴｄＲ掺入开始增加，２４ｈ达到峰值。在内皮素－１作用下，原癌基因ｃ－ｆｏｓ和ｃ－ｊｕｎ进行快速瞬间表达，其表达活性在３０ｍｉｎ达到峰值，３ｈ后恢复到原来水平；Ｐ３４＾激酶基因在内皮素－１刺激１２ｈ后表达活性开始增加，至２４ｈ仍维     

神经肽Y对血管平滑肌细胞凋亡相关基因表达的诱导作用

为探讨神经肽Ｙ对血管壁平滑肌细胞凋亡相关基因表达的诱导作用,以体外培养血管平滑肌细胞模型为研究对象,运用免疫荧光组织化学技术和激光共聚焦显微镜定量研究神经肽Ｙ因管平滑肌细胞凋亡基因ｂｃｌ－２,ｂａｘ和ｆａｓ表达的影响,以阐明神经肽Ｙ参与高血压和动脉粥样硬化等心血管疾病发生的分子机制。     

内皮细胞脂质过氧化损伤增强主动脉平滑肌细胞表达细胞周期素D

为探讨细胞周期素Ｄ在主动脉平滑肌细胞中的表达规律，揭示动脉粥样硬化中平滑肌细胞的增殖机制，在培养在兔主动脉平滑肌细胞中分别加入了同程度的内皮细胞损伤后的条件培养在２４ｈ分别收集各组的平滑肌细胞，进行免疫组织化学染色和细胞核的增殖试验，结果发现，主动脉平滑肌细胞可表达细胞周期素Ｄ，其免疫反应产物主要位地细胞核内，内皮细胞损伤后的条件的培养基能量产滑有细胞表达细胞促进平滑肌细胞的增殖，以上结果提示主动     

内皮细胞脂质过氧化损伤增强主动脉平滑肌细胞表达细胞周期素D

为探讨细胞周期素D在主动脉平滑肌细胞中的表述规律，揭示动脉粥样硬化中平滑肌细胞的增殖机制，在培养的免主动脉平滑肌细胞中分别加入不同程度的内皮细胞损伤后的条件培养基，24h后分别收集各组的平滑肌细胞，进行免疫组织化学染色和细胞核的增殖试验。结果发现，主动脉平滑肌细胞可表达细胞周期素D，其免疫反应产物主要位于细胞核内。内皮细胞损伤后的条件培养基能明显促进平滑肌细胞表达细胞周期素D，同时细胞核增殖实验显示，该条件培养基亦能促进平滑肌细胞的增殖．以上结果提示主动脉平滑肌细胞的增殖与细胞周期素D的表达密切相关，损伤后的内皮细胞可通过促进血管平滑肌细胞表达细胞周期素D而诱导平滑肌细胞增殖。     

Chinese Yellow Wine Inhibit Production of Homocysteine-induced Extracellular Matrix Metalloproteinase-2 in Cultured Rat Vascular Smooth Muscle Cells

Objectives Regular consumption of moderate amounts of Chinese yellow wine is associated with a reduced risk of coronary disease. Matrix metalloproteinases (MMPs) that participate in extracellular matrix degradation have been involved in atherosclerotic plaque growth and instability. The present research aimed to study the effects of Chinese yellow wine on the production of homocysteine-induced extracellular MMP-2 in cultured rats' vascular smooth muscle cells. Methods The effects of different homocysteine levels (0-1000 ?滋mol/l) on MMP-2 production, and the effects of Chinese yellow wine with low alcohol concentrations (12-19%) on homocysteine-induced MMP-2 in cultured rat vascular smooth muscle cells (VSMCs) were examined using gelatin zymography and western blotting. The changes of MMP-2 under various treatments for 12 h, 24 h and 48 h were further compared. Results Homocysteine (50-1000 ?滋mol/l) increased the production of MMP-2 significantly in a dose-dependent manner. Increased production of MMP-2 induced by homocysteine was reduced by extracellularly added Chinese yellow wine. Production of MMP-2 under various treatments for 48 h increased more than 12 h and 24 h. Conclusions Extracellularly added Chinese yellow wine decreased homocysteine-induced MMP-2 secretion. The inhibitory effect of yellow wine on the activation of MMP-2 might contribute to their beneficial effects on the cardiovascular system.     

动脉粥样硬化血管平滑肌细胞中干细胞因子mRNA的表达水平增加

目的：分析比较干细胞因子（ＳＣＦ）、ＴＧＦ－α及某些膜蛋白、核蛋白基因在不同病理状态下血管平滑肌细胞中的表达水平,探讨这些基因产物在动脉粥样硬化及高血压发病过程中所起的作用。方法：从维生素Ｄ３ 诱导动脉粥样硬化和一侧肾动脉结扎的高血压大鼠取出主动脉,在体外培养收集血管平滑肌细胞,抽提细胞总ＲＮＡ,以同位素标记的核酸探针作Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ分析。结果：动脉粥样硬化及高血压血管平滑肌细胞中干细胞因子ｍ ＲＮＡ 表达比正常时高出许多倍,ＴＧＦα在高血压血管平滑肌细胞中有较高表达,而ｅｒｂＢ２ 表达无明显变化。结论：生长因子在血管的损伤修复中起重要作用,实验提示ＳＣＦ参与了动脉粥样硬化和高血压时动脉平滑肌细胞的增殖调控过程,可能通过干细胞因子这一系统参与血管损伤修复。这是干细胞因子除影响造血细胞等增殖外的又一重要功能     

TFPI基因转染对血管平滑肌细胞中细胞凋亡抑制蛋白的调控

目的研究组织因子途径抑制物(TFPI)基因转染对大鼠血管平滑肌细胞中细胞凋亡抑制蛋白(IAP)表达的影响,探讨TFPI诱导细胞凋亡的可能机制。方法将含有人TFPI基因的重组腺病毒或含β-半乳糖苷酶(LacZ)基因的重组腺病毒或DMEM在体外分别转染大鼠血管平滑肌细胞,用ELISA方法测定转染后细胞中TFPI蛋白的表达水平,用RT-PCR方法测定基因转染后不同时间点细胞中c-IAP1mRNA的表达,用Western-blot方法检测基因转染后不同时间点细胞中survivin的表达。结果基因转染后1天在血管平滑肌细胞中即可检测到TFPI蛋白表达,峰值出现在转染后第3天;基因转染后3天和7天,TFPI组c-IAP1 mRNA的表达与对照组相比明显减少(P0.05);基因转染后3、5、7天,TFPI组survivin的表达与对照组相比明显减少(P0.05),且具有明显的时间依赖性。结论 TFPI可能通过抑制IAP的表达来发挥诱导平滑肌细胞凋亡的作用,从而抑制冠状动脉介入治疗后再狭窄发生。