应用严格精子形态学测定法评估精子形态对体外受精率的影响

在体外受精(IVF)的治疗实践中发现,受精率低下(<30%的卵子受精)和受精失败(所有卵子都不受精)的患者很常见(20%~30%)[1],常规IVF技术已不能完全适应临床需要。导致这些受精失败的原因未完全清楚,精子形态异常可能是常规IVF率低下的一个重要因素。为此,笔者采用严格精子形态学测定法对精液标本进行分析并按正常精子形态百分率分组,观察体外受精-胚胎移植(IVF-ET)周期中不同正常精子形态百分率对IVF的影响。1资料与方法1.1标本来源选择2005年6月~2005年10月在天津市中心妇产医院生殖医学中心和唐山市妇幼保健院生殖医学中心进行常规IV…     

精子形态对体外受精-胚胎移植治疗结局及新生儿的影响

目的:探讨正常形态精子百分率对体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗结局及新生儿的影响。方法:采用WHO严格标准法将精液标本分为3组:中度畸形组:正常形态精子百分率5%～10%,轻度畸形组:10%<正常形态精子百分率<15%,正常组:正常形态精子百分率≥15%,比较各组间正常受精率、卵裂率、优质胚胎率、种植率、临床妊娠率及新生儿情况。结果:各组间患者年龄(男、女方)差异不显著(P>0.05);中度畸形组正常受精率显著低于轻度畸形组(63.70%vs73.74%,P<0.05),但与正常组差异无统计学意义(63.70%vs68.05%,P>0.05);正常组的优质胚胎率最高,显著高于中度畸形组(44.83%vs35.75%,P<0.05),其他各指标3组间差异无统计学意义(P>0.05);280个移植周期共分娩125个婴儿,其中单胎分娩73例,双胎分娩26例,出生婴儿未见先天异常,3组间流产率、异位妊娠率、孕周、早产率、出生体重差异无统计学意义(P>0.05)。结论:正常形态精子百分率为5%～10%对常规体外受精的受精率无影响,但显著降低优质胚胎率,而10%<正常形态精子百分率<15%对常规体外受精治疗结局的各项指标均无明显影响;正常形态精子百分率在预测IVF-ET的助孕结局及新生儿情况方面存在一定局限性。     

正常形态精子百分率与体外受精率的关系分析

近年来,随着生殖医学的发展,体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization-embryo transportation,IVF-ET)和卵细胞胞质内单精子注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)已成为临床上常用的、重要的人类辅助生殖技术,而ICSI为临床上难治性男性不育症以及体外受精率低下或受精完全失败治疗的重要手段[1-2].在临床生殖医学上,如何根据精液各项参数及精子功能来选择合适的辅助生殖技术(IVF或ICSI),避免IVF受精失败,是一直困扰着生殖医学临床医生的难题.为此,本文对IVF-ET中正常形态精子百分率与体外受精率的关系研究报道如下.     

正常形态精子百分率对单卵患者常规体外受精临床结局的影响

目的:探讨常规体外受精(IVF)正常形态精子百分率是否会影响获单卵患者的临床结局。方法:选择2013年1月至2015年1月在本院生殖中心接受常规IVF治疗且获卵数为1的256对夫妇,根据正常形态精子百分率的不同分为两组,其中正常形态精子百分率4%组134例,正常形态精子百分率≥4%组122例,比较两组间的无可移植胚胎周期发生率、受精率、卵裂率、正常受精率、异常受精率、优胚率及可用胚胎率。其中新鲜移植周期共75例,正常形态精子百分率4%组43例,正常形态精子百分率≥4%组32例,比较两组间的种植率、临床妊娠率及流产率。结果:正常形态精子百分率4%组和正常形态精子百分率≥4%组的无可移植胚胎周期发生率、受精率、卵裂率、正常受精率、异常受精率、优胚率及可用胚胎率差异无统计学意义(P0.05)。新鲜移植周期中,正常形态精子百分率4%组和正常形态精子百分率≥4%组的种植率、临床妊娠率及流产率差异也无统计学意义(P0.05)。结论:正常形态精子百分率不影响单卵患者常规体外受精的临床结局。     

精子形态变化对体外受精率的影响

目的:通过对ICSI和IVF受精率的统计,比较精子形态中的精子正常形态率、头部畸形率、畸形精子指数(TZI)和精子畸形指数(SDI)对受精结果的影响。方法:用Krger's严格标准法分别计算每组样本的精子正常形态率、头部畸形率、TZI和SDI值,与受精率进行比较。结果:①IVF组和ICSI组的受精率,与精子正常形态率、头部畸形率、TZI、SDI均无相关性。②IVF组和ICSI组中SDI>1.6和SDI<1.6的受精率、优质胚胎率和临床妊娠率差异均无统计学意义(P>0.05)。③IVF组和ICSI组中精子正常形态率≤15%与精子正常形态率>15%的二组间受精率、优质胚胎率和临床妊娠率的差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:精子形态在体外受精时对受精率无影响,不能用精子形态来直接评价体外受精的结果。     

精子DNA碎片对体外受精-胚胎移植胚胎发育的影响

正近来有研究发现,男性生育能力可能会随精子DNA碎片指数(DNA fragmentation index,DFI)的升高而下降,且无论在自然受孕还是通过辅助生殖技术(ART)助孕时均有体现[1-2],精子DFI被认为是较常规精液参数更为有效的男性不育指标[3]。人类胚胎最早期发育由母源mRNA调控,来自胚胎的基因组到4细胞期才被激活,来自父源基因的影响在6~8细胞期才能体现,因而大部分学者认为精子     

人卵泡液诱导的顶体反应、精子形态与体外受精率的关系

目的:探讨人卵泡液诱导的顶体反应、精子形态及体外受精率3者之间的相互关系。方法:应用Spearm an法对79对不育患者的人卵泡液诱导的顶体反应、精子形态(采用结晶紫染色及精子形态严格分类标准)及体外受精率等指标进行等级相关分析。结果:人卵泡液诱导的顶体反应率与正常形态精子百分率之间存在极显著正相关(n=49,r=0.376 3,P<0.01),但人卵泡液诱导的顶体反应率与体外受精率以及正常形态精子百分率与体外受精率之间均未见显著相关性(n分别为21和50,r分别为0.266 6和0.001 8,P均>0.05)。结论:人卵泡液诱导的顶体反应率与正常形态精子百分率之间存在极显著正相关,但两者与体外受精率之间均未见显著相关性。     

精子形态与体外受精胚胎移植临床妊娠结局的关系

目的:当前精子形态对体外受精(IVF)的影响尚存争议,本研究旨在评估正常形态精子百分率在体外受精-胚胎移植(IVF-ET)中的应用价值。方法:选择生殖遗传中心659对IVF-ET治疗夫妇,按正常形态精子百分率分为4组,A组(2%)112个周期,B组(≥2%~4%)180个周期,C组(≥4%~5%)74个周期,D组(≥5%)293个周期。比较各组间的受精率、正常受精率、卵裂率、优胚率以及新鲜移植周期的生化妊娠率、临床妊娠率、流产率及活产率等指标。结果:4组间的受精率、正常受精率和可移植胚胎率有差异。C组(71.90%)和D组(72.89%)的受精率均显著高于A组(57.97%)和B组(63.29%)(P均0.05),C组与D组间、A组和B组间均无显著差异(P均0.05)。D组的正常受精率(57.16%)显著高于A组(46.52%)和B组(50.89%)(P均0.05),C组正常受精率(54.67%)显著高于A组(P0.05),其余组间无显著差异(P均0.05)。D组的可移植胚胎率(55.62%)显著高于B组(45.75%)(P0.05),其余组间均无显著差异(P均0.05)。D组的无可移植胚胎患者比例(8.87%)显著低于A组(20.54%)和B组(18.89%)(P均0.05),C组(12.16%)与其余组间均无显著差异(P均0.05)。各组间新鲜移植周期的生化妊娠率、临床妊娠率、种植率、流产率和活产率均无显著差异(P均0.05)。结论:正常形态精子百分率对IVF-ET的受精率及胚胎形成有一定影响,用于评估IVF受精结局时,5%临界值略优于4%。     

不育男性精子形态与体外受精妊娠结局的相关性研究

目的 探讨不育男性精子形态与体外受精妊娠结局的关系.方法 按照WHO《人类精液及精子-宫颈粘液相互作用实验室检验手册》要求对573例接受辅助生殖技术治疗的男性不育患者的精子形态进行分析,根据患者正常精子形态百分比分为2组(＜1 5％:≥1 5％),分别采用体外受精(IVF)或卵泡浆内单精子注射(ICSI)的受精方式,观察精子形态对IVF及ICSI的受精率、卵裂率、优质胚胎率、妊娠率和流产率等的影响.结果采用IVF(327例)受精方式下,两形态组精子的受精率、卵裂率、优质胚胎率和妊娠率差异均有统计学意义(P＜0.05),但流产率差异无统计学意义(P＞0.05);而采用ICSI(246例)受精方式下,两形态组精子的上述指标比较差异均无统计学意义(P＞ 0.05).结论不育男性精子形态异常影响IVF治疗结局,但对ICSI治疗结局无影响,对于精子形态异常的患者应采用ICSI的受精方式.     

Sperm morphology training in India

Sperm morphology is regarded as possibly the most consistent sperm variable that is related to in vitro and in vivo fertilisation success or failure. There is also a re‐emerging awareness of andrology, particularly in developing countries where healthcare resources are often limited. This study aimed to record the importance of hands‐on training on the sperm morphology reading skills among 174 Indian infertility workers. During a series of five workshops presented by the Indian Academy of Clinical Embryologists, delegates were requested to record the percentage normal spermatozoa on pre‐stained Diff Quick slides. A total of four slides each containing different percentages normal spermatozoa were used during the workshops. The delegates were requested to record the percentage normal spermatozoa prior and after training. The results were expressed as the percentage difference between the reference value and the pre‐training and post‐training values reported by the workshop delegates. The percentage difference indicated a significant improvement in the reading skills, for example from 253 ± 244% to 20 ± 93% for slide 1. Similar values were recorded for slide 2, 3 and 4. If we consider the present findings as representative of medical laboratory scientist's sperm morphology reading skills, clinicians should be concerned about the diagnostic quality as far as male infertility is concerned.     

Human sperm morphology and in vitro fertilization: sperm tail defects are prognostic for fertilization failure

Summary. The aim of this study was to determine the relationship between sperm morphology and fertilization rates in vitro. Semen samples were obtained from 50 couples undergoing IVF treatment. Sperm morphology was classified by strict criteria (Tygerberg) according to head, midpiece and tail defects in neat semen and after sperm selection by Percoll gradient centrifugation. Percoll preparation significantly increased the percentage of sperm with normal morphology from 13 to 20%. However, the greatest single regression coefficient was observed with the percentage of sperm with tail defects and correlated negatively with fertilization rates in vitro both before and after Percoll preparation. Therefore, tail morphology may be of value as a prognostic factor in assisted conception both before and after Percoll preparation.—     

体外受精与胚胎移植34例报告

本文是我院开展人类体外受精与胚胎移植技术研究的初步报道。1990年1～12月收治不孕妇女34例,42治疗周期,采用固定的 Fertilin/Pergonal/Profasi 超刺激排卵方案,B 型超声监测卵泡发育并指导经阴道取卵。每周期有6.97±4.1个卵泡发育,获得卵子4.7±4.6个,受精率为71％,卵裂率64％,移植率87.8％。每周期移植的胚胎总分与移植后妊娠率有显著相关性(r=0.8823,P=0.009),移植胚胎评分高,数量多,则妊娠率越高。在未建立胚胎冻存技术之前,4个以上的胚胎移植是处理过剩胚胎的权宜方法。本组大部分病人在门诊接受治疗,可减轻精神与经济负担。     

淋病奈瑟菌体外对人精子运动参数的影响

目的 :阐明淋病奈瑟菌体外对人精子的运动参数有无直接影响。　方法 :将淋病奈瑟菌制成活菌悬液 ,在体外与生育男性经上游优化处理的精子孵育。细菌 /精子比为 5 0∶1,分别孵育 0、2、4h ,采用计算机辅助的精子分析系统检测人精子运动参数 (前向性运动百分率、直线速度、曲线速度、平均路径速度、直线性、前向性 )。　结果 :细菌与精子的比例为 5 0∶1,孵育 0、2和 4h后 ,人精子运动参数无明显变化。　结论 :淋病奈瑟菌与精子的比例为5 0∶1,孵育 4h内 ,淋病奈瑟菌体外对人精子运动参数无直接影响     

Sperm count and motility influence the results of human fertilization in vitro

In order to select sperm characteristics that can predict the outcome of in-vitro fertilization-embryo transfer (IVF-ET), semen samples delivered in conjunction with this treatment were studied carefully. We have analysed these data retrospectively in relation to the outcome of treatment. Ninety-one couples were treated for tubal infertility by IVF-ET. Fifteen women became pregnant. Sperm were isolated from semen using a swim-up technique and in most cases 40-80 x 10(3) (range 20-120 x 10(3)) motile sperm per ovum were used for insemination. The couples were divided into three groups: group A who achieved pregnancies, group B who achieved cleaved ova but no pregnancies, and group C who achieved no ova that were cleaved 48 h after oocyte recovery. Comparisons between these groups showed that some characteristics of the native semen samples and the swim-up preparations were significantly different: the sperm concentration (P = 0.001) and total sperm count (P = 0.003) in the native sample, the number of sperm recovered during 30 min of swim-up (P = 0.001), and the specific progressive motility of sperm in the swim-up preparation, both at the time of insemination and on each day, up to 5 days thereafter (P = 0.002-0.028). No pregnancy was achieved with a sperm concentration below 26 x 10(6) ml-1 in the native sample. Some of the sperm characteristics studied in this paper may be of value in the pretreatment evaluation for IVF treatment.     

金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌体外对人精子运动功能的影响

目的 :研究金黄色葡萄球菌 (SA)和表皮葡萄球菌 (SE)体外对人精子的运动功能有无直接影响。　方法 :将泌尿生殖系感染病人中分离培养的SA和SE制成活菌悬液 ,体外与 10例健康成年男性手淫获得并经上游优化处理的精子孵育。按细菌 /精子比 5 0∶1分别孵育 0、2、4h后 ,采用计算机辅助的精子分析系统检测人精子活率、运动参数 (前向性运动百分率、直线速度、曲线速度、平均路径速度 )和精子形态及凝集情况。　结果 :SA与精子体外孵育 2、4h后 ,精子活率和运动参数明显降低 (P <0 .0 5 )。SE体外对精子的活率和运动功能则无明显影响。　结论 :SA与精子的比例为 5 0∶1,体外孵育 2h后 ,能显著降低精子活率和抑制精子运动功能。SE对精子运动功能无直接影响。     

首乌还精胶囊体外对人精子运动能力和受精能力的影响

目的 :研究首乌还精胶囊含药血清体外对人精子运动能力和受精能力的影响。　方法 :通过人精子与首乌还精胶囊含药血清共培养 ,观察首乌还精胶囊对人精子运动能力 (精子运动CASA分析 )、精子顶体反应和穿透去透明带仓鼠卵能力的影响。　结果 :含药血清加入共培养可显著提高人精子运动速度 [精子运动路径速度(VAP)、精子轨迹速度 (VCL)、精子前向运动速度 (VSL) ](P <0 .0 1)、精子头部侧置振幅 (ALH)和鞭毛摆动频率(BCF)及前向运动精子密度 (P <0 .0 5 ) ,精子顶体反应发生率 (P <0 .0 0 1) ,卵子受精率 (FR)及受精指数 (FI) (P <0 .0 1)。且含药血清刺激作用呈现出一定的量效关系。　结论 :首乌还精胶囊具有提高人精子运动能力和受精能力的作用。     

超声检查早期诊断体外受精-胚胎移植术后复合妊娠

目的探讨超声检查早期诊断体外受精-胚胎移植术(IVF-ET)后复合妊娠(HP)的价值。方法回顾性分析81例IVF-ET后临床确诊为复合妊娠患者的超声和手术情况,并随访宫内妊娠结局。结果超声诊断HP的时间为IVFET后20~49天,平均(29.08±5.74)天。81例中,术前超声诊断为宫内合并输卵管妊娠70例,宫内合并宫角妊娠8例,宫内合并宫颈妊娠、宫内合并肌壁间妊娠、单侧输卵管妊娠各1例;术前超声误诊3例,漏诊1例;超声诊断符合率为95.06%(77/81)。对77例宫内妊娠情况进行随访,其中60例已分娩或继续妊娠,6例术后宫内胚胎停育而接受清宫术,1例因21-三体高风险而接受引产,10例失访。结论超声检查可早期诊断IVF-ET后HP,指导临床及时治疗。     

存在受精失败风险中应用分半IVF/ICSI治疗的精液参数分析

目的 通过回顾性分析采用分半治疗的患者,探讨体外受精低下及受精失败的精子参数.方法 收集2011年1月至11月采用分半治疗的患者47例,按照受精正常和受精失败分为两组,分析精液参数变化.结果 两组比较,在不受精组,正常精子形态百分比及精子顶体酶活性低于正常受精组(P＜0.05),分别为(8.33％±3.72％)和(12.01％±7.39％)；顶体酶活性低于正常组,分别为42.66±24.84和64.66±35.59.不育年龄、不育年限及精子密度、精子活力无明显差异.结论 正常精子形态结合顶体酶活性可估计体外受精的成功率.