顺铂诱导颊癌细胞凋亡及凋亡分子（Apo—1）表达的实 …

目的：研究细胞毒类化疗药－顺铂诱导人颊癌细胞凋亡发生的规律以及凋亡分子Ａｐｏ－１表达,探讨口腔癌化疗的细胞凋亡机制。方法：以建株人颊癌细胞系ＢｃａＣＤ８８５为对象,采用光镜,电镜以及流式细胞术等手段观察顺铂诱导颊癌细胞凋亡的形态特征及规律,同时检测顺铂对颊癌细胞Ａｐｏ－１表达的影响。结果：顺铂作用后的颊癌细胞出现典型的凋亡细胞形态学特征;顺铂诱导颊癌细胞凋亡呈现时间及剂量依赖性效应关系;顺铂能上调     

化疗药诱导颊癌细胞凋亡的原位组织学研究

目的 :探讨化疗药诱导颊癌细胞凋亡及其相关机制。方法 :选择临床行术前化疗患者的颊癌组织进行原位DNA末端标记 (TUNEL法 )显示凋亡细胞以及免疫组化SP法检测Fas蛋白的表达。结果 :凋亡细胞及凋亡小体散在分布于颊癌组织中 ,化疗后颊癌凋亡细胞发生率增加 ,凋亡指数 (AI)均值为 0 .91,明显高于化疗前AI( 0 .38) (P <0 .0 1) ;与化疗前相比 ,化疗后颊癌细胞Fas表达强度增加 (P <0 .0 1)。结论 :细胞凋亡途径可能是化疗药杀灭颊癌细胞的重要机制 ,Fas系统在化疗药诱导颊癌细胞凋亡发生中发挥关键性作用。由此 ,应用凋亡诱导分子FasL有可能成为一种新的抗癌方法。     

顺铂诱导Tca8113细胞凋亡及周期特异性

目的探化疗药物顺铂（ＣＤＤＰ）对口腔鳞癌细胞凋亡及细胞周期特异性的诱导作用。方法选用人舌鳞状细胞癌细胞系Ｔｃａ８１１３为研究对象,应用倒置显微镜、荧光显微镜、透射电镜、流式细胞仪等方法进行观察。结果ＣＤＤＰ作用Ｔｃａ８１１３细胞后,细胞增殖变慢,增殖指数下降,细胞变小,变圆,失去贴壁性,从附着处脱落。ＤＮＡ染色后荧光显微镜下观察,细胞核呈现橙红色,半月形,不规则块状等凋亡形态变化。透射电镜观察,细     

高温诱导颊癌细胞凋亡的相关机理研究

目的：探讨热诱导BcaCD885细胞凋亡的分子机理。方法：水浴加温诱导BcaCD88产生调亡。通过FCM－DNA、FCM－抗体检测技术,观测热诱导颊癌细胞凋亡过程中bcl-2及bax基因蛋白表达的动态变.:地亡率与bcl-2蛋白表达水平存在负相关关系,与bax蛋白表达存在正相关关系。结论：高温作为一种外来刺激信号通过下调bcl-2基因的表达、上调bax基因的表达、上调bax基因的表达,诱导BcaCD885细胞凋亡的发生。     

热诱导颊癌细胞凋亡与Bcl-xL蛋白表达的关系

目的：探讨热诱导颊BcaCD885细胞凋亡与Bcl-xL蛋白表达变化的关系。方法：43℃40min水浴加温诱导BcaCD885细胞产生死亡。采用流式细胞仪（FCM）及抗体检测技术分别测定细胞凋亡率及Bcl-xL蛋白表达量，观测诱导颊癌细胞凋亡过程中Bcl-xL蛋白表达的动态变化，探讨二者间的关系。结果：凋亡组内Bcl-xL蛋白表达量明显低于对照组（P＜0．05），凋亡率与Bcl-xL蛋白表达水平存在负相关关系（r=-0.89，P＜0．05）。结论：Bcl-xL在热诱导BcaCD885细胞凋亡的调控中起重要作用。     

Survivin基因在顺铂诱导Tca8113舌鳞癌细胞凋亡中的作用

目的体外观察顺铂（DDP）诱导Tca8113舌鳞癌细胞株凋亡的作用, 同时检测在此过程中凋亡蛋白抑制因子Survivin mRNA表达和蛋白表达的变化。方法将人Tca8113舌鳞癌细胞株进行传代培养,MTT法检测顺铂不同浓度和不同时间对Tca8113舌鳞癌细胞生长的抑制作用,通过RT- PCR检测凋亡过程中Survivin基因mRNA的表达,免疫细胞化学观察Survivin基因的蛋白表达,以及流式细胞术观察顺铂诱导各组Tca8113细胞的凋亡率。结果顺铂可明显抑制Tca8113舌鳞癌细胞的增殖, 其增殖抑制率呈浓度和时间依赖性,细胞凋亡率也呈同样的趋势,最高可达34.1%。1.0 μg/mL DDP处理Tca8113舌鳞癌细胞,Survivin mRNA和蛋白表达水平随时间的增加而降低,在24h达到最低,随后又升高。结论抗凋亡蛋白Survivin在Tca8113舌鳞癌细胞高表达,顺铂可有效诱导Tca8113舌鳞癌细胞凋亡, Survivin mRNA表达在化疗早期随作用时间的延长而降低,Survivin基因的抑制在顺铂诱导的Tca8113舌鳞癌细胞的细胞凋亡中起着重要的作用。     

浅蓝菌素诱导口腔鳞状细胞癌细胞凋亡的实验研究

目的 :观察浅蓝菌素诱导口腔鳞状细胞癌细胞凋亡作用 ,探讨浅蓝菌素抗癌的可能性。方法 :TCA 83细胞经浅蓝菌素 (10 μg/ml)处理 2 4h后 ,提取基因组DNA ,行DNA凝胶电泳。舌癌新鲜组织经浅蓝菌素(10 μg/ml)处理 2 4h后 ,行原位细胞凋亡染色 (TUNEL)。 结果 :DNA凝胶电泳得到典型的梯状DNA电泳图 ,TUNEL分析显示 ,浅蓝菌素处理组癌细胞凋亡率明显高于未经浅蓝菌素处理的癌细胞凋亡率 (P <0 .0 0 0 1) ,浅蓝菌素诱导高分化鳞状细胞癌凋亡的作用更强。结论 :浅蓝菌素可直接诱导口腔鳞状细胞癌细胞发生凋亡 ,为脂肪酸合酶抑制剂的临床应用提供了直接的参考。     

临时冠单体诱导颊黏膜上皮细胞凋亡的动物实验研究

目的:研究4种临时冠桥材料戴用后的单体释出对颊黏膜上皮细胞的凋亡行为的影响.方法:选用4种临时冠桥材料(丙烯酸自凝树脂、丙烯酸热凝树脂、DMG-TEMP树脂、松风SWIFT-TEMP树脂) 对犬的右侧后牙进行临时冠修复,在牙备前、戴冠时、戴冠1周、2周、1个月5个时间点,收集临时冠对应区域的颊黏膜上皮细胞,并应用流式细胞仪检测其凋亡情况.结果:自凝塑料及热凝塑料组的颊黏膜上皮细胞的凋亡率大小排序为戴冠1周>戴冠2周>戴冠1个月>牙备前、戴冠时,差异有统计学意义(P < 0.01).DMG-TEMP树脂及松风SWIFT-TEMP树脂组的颊黏膜上皮细胞凋亡率在戴冠前后均维持较低水平,差异无统计学意义(P >0.05).颊黏膜上皮细胞的凋亡率与自凝塑料及热凝塑料中的残余单体释出量呈正相关(P < 0.01).结论:自凝塑料冠及热凝塑料冠在戴冠早期均有明显的残余单体释出,并加速诱导了颊黏膜上皮细胞的凋亡.     

顺铂诱导的自噬在口腔鳞癌Tca83细胞中的作用

目的:探讨顺铂诱导的自噬在口腔鳞癌Tca83细胞中的作用。方法:利用顺铂作用于口腔鳞癌Tca83细胞,不同时间后MTT法检测细胞生存率的变化,激光共聚焦显微镜观察细胞胞浆中自噬体的形成情况,Annexin V-FITC流式细胞术检测细胞凋亡率的变化。结果:顺铂作用于Tca83细胞2h即可出现明显的自噬性变化。细胞凋亡率随顺铂作用时间的延长而逐渐增加。结论:顺铂可以诱导口腔鳞癌Tca83细胞发生自噬,过度激活的自噬作为细胞的一种死亡程序,可以与凋亡一起促进细胞死亡。     

高温诱导BcaCD885颊癌细胞凋亡及检测

目的　探讨热诱导 Bca CD885颊癌细胞凋亡的动力学改变及热杀伤肿瘤细胞的机理。方法　水浴加温诱导Bca CD885细胞产生凋亡。通过细胞形态观察、原位末端标记、DNA电泳及流式细胞术 DNA测定 ,从形态学、生物化学、分子生物学以及细胞学水平确定凋亡细胞特征。结果　Bca CD885细胞经 43°C40 min加热 ,呈现细胞凋亡形态改变 ,TUNEL标记见明显的凋亡小体 ,DNA电泳呈现有一定间隔的梯状条带。同时细胞周期发生了明显的特异性改变 :G0 / G1 期百分比增加 ,S期百分比下降 ,G2 / M期百分比在加热后 3 h时也发生了明显的下降。 45°C 40 min加热则出现明显的坏死改变。结论　高温杀伤 Bca CD885细胞存在细胞坏死和细胞凋亡两种方式 ,治癌温度是通过诱导细胞凋亡发挥作用。高温诱导 Bca CD885细胞的凋亡具细胞周期特异性     

颊癌微血管分支类型的动物实验研究

通过扫描电镜观察了２０只金黄地鼠颊囊癌微血管铸型，根据肿瘤内血管形态，结构的不均一性，提出了肿瘤微血管的分类方案，结果显示，正常地鼠颊囊微血管的排列均匀一致，空间筑合理，颊囊癌内微血管构成系乱，畸形血管多见，分支形式复杂，微血管分支角是判定囊癌内微血管分级的主要指标。采用离心分级方案，从主要供养和引流血管到毛细血管共分１０级。小动，静脉位于１～３级血管，微动脉位于４～６级，微静脉位于４～７级，毛细     

颊黏膜鳞癌cN_0患者的颈部处理

目的　探讨颊黏膜鳞癌cN0 患者的颈部处理原则。方法　对四川大学华西口腔医院颌面外科1 980～ 2 0 0 0年收治的 1 0 1例颊黏膜鳞癌cN0 患者进行回顾性研究。所有患者均行原发灶切除加同期或二期颈清扫术 ,有的患者还兼行化疗、放疗。术后淋巴结作病理学检查 ,随访 3年以上。结果　 101例颊黏膜鳞癌cN0 患者中有17例发生颈淋巴结转移 ,淋巴结隐匿性转移 (OM)率为16.83% ,且随临床T分期的增高而增高 ,T3和T4期的隐匿性转移率分别为18.18%和 52.00% ;转移淋巴结主要分布于颌下淋巴结组 (41.18% )和颈深上淋巴结组(29.41%)。结论　颊黏膜鳞癌颈部隐匿性转移率较高 ,对T3,4 期的cN0 颊黏膜鳞癌患者应考虑行选择性同期全颈清扫术。     

口腔鳞状细胞癌Fas基因表达与细胞凋亡关系的研究

目的　探讨Fas基因mRNA及蛋白表达水平与人口腔鳞状细胞癌细胞凋亡的关系。方法　应用Northern 杂交、双参数流式术(TUNEL法)检测人口腔鳞状细胞癌中Fas mRNA及蛋白的表达,鳞癌细胞的细胞周期与凋亡水平。结果　5例正常口腔黏膜标本中均有Fas mRNA及蛋白的表达。在口腔鳞癌组织中,Fas mRNA及蛋白的表达与口腔鳞癌组织病理学分级有关(P<0·005),与口腔鳞癌组织分化程度和凋亡指数呈正相关。结论　口腔鳞癌中 Fas基因的表达与组织病理学分级及细胞凋亡之间关系密切。     

过表达IL-18诱导舌鳞癌细胞凋亡机制的初步研究

目的:探究白介素18(IL-18)的过表达对舌鳞癌细胞活性和凋亡的影响。方法:构建稳定转染人IL-18cDNA的舌鳞癌CRL1623细胞系,免疫荧光、qPCR和Western Blot证实IL-18的过表达;流式细胞术、吉姆萨染色和MTT法检测转染后CRL1623细胞活性的改变;qPCR检测凋亡相关基因的表达;用稳转的CRL1623细胞建立舌鳞癌细胞裸鼠移植瘤模型,体内观察IL-18过表达对移植瘤生长的影响。结果:过表达的IL-18可以诱导CRL1623细胞凋亡。与对照组相比,实验组IL-18的表达量上调,caspase 3、7和9的表达量增加并被活化,IFN-γ和细胞色素C的mRNA表达量上调。与对照组裸鼠相比,实验组裸鼠移植瘤的生长受到了抑制(P<0.05)。结论:IL-18能够通过启动经典的凋亡途径诱导舌鳞癌细胞凋亡。     

低氧诱导因子-1α在原发性颊黏膜鳞癌中的表达及意义

目的探讨低氧诱导因子- 1α（HIF- 1α）在原发性颊黏膜鳞癌中的表达变化及其意义。方法通过免疫组织化学方法，了解HIF- 1α在60例原发性颊黏膜鳞癌中的表达，分析其阳性表达水平与颊癌临床分期、病理分级以及预后等临床病理因素之间的关系。结果不同分化程度的颊癌组织中HIF- 1α的阳性表达水平差异没有统计学意义（P>0.05）；而早、晚期颊癌组织中，HIF- 1α阳性表达水平的差异存在统计学意义（P<0.05）；有淋巴结转移的患者，其原发灶肿瘤组织中HIF- 1α的阳性表达水平高于无淋巴结转移者（P<0.05）；预后差的颊癌组织中，HIF- 1α的阳性表达水平明显高于预后好组（P<0.05）。结论颊癌中HIF- 1α的阳性表达水平与疾病发展进程密切相关，其是颊癌患者预后不良的重要生物学指标。     

隐形顺铂聚乳酸纳米微粒对口腔鳞癌原发灶的靶向性研究

目的　研究隐形顺铂聚乳酸纳米微粒(CDDP-PLA-PEG-NP)的物理特性及对口腔鳞癌原发灶的靶向性。方 法　用乳化溶剂蒸发法制备CDDP-PLA-PEG-NP;建立地鼠口腔颊鳞癌模型,并随机将64只动物分为实验组和对照 组,每组各32只。实验组和对照组分别静脉注射CDDP-PLA-PEG-NP(6·6 mg/kg)和CDDP(1 mg/kg),每组于给药后 0·083、0·5、1、2、4、6、12、24 h各处死4只动物。用高效液相色谱仪测定两组各时间点血浆和癌组织中药物浓度,求 出CDDP-PLA-PEG-NP对口腔鳞癌原发灶的靶向指数、选择性指数和口腔鳞癌原发灶对CDDP-PLA-PEG-NP的相对摄 取率。结果　CDDP-PLA-PEG-NP的平均粒径为(143·2±1·8)nm,粒径分布范围为103·5 ~175·8 nm,载药量和包封 率分别为(15·2±0·9)%、(89.0±0·8)%;在8个时间点的靶向指数和选择性指数均远大于1,口腔癌组织对CDDP- PLA-PEG-NP的摄取量是CDDP的10·36倍。结论　CDDP-PLA-PEG-NP在动物体内对口腔鳞癌原发灶具有良好的靶 向性,是具有发展前途的口腔癌纳米靶向给药系统。     

化疗对舌癌细胞增殖和细胞凋亡及Bcl-2表达的影响

目的:探讨舌癌化疗的作用机制。方法:60例患者的术后石蜡标本分为3组,其中舌癌化疗组10例,舌癌组30例,舌乳头状瘤组20例。采用原位末端标记法和免疫组织化学染色,并检测舌癌化疗后的细胞增殖、细胞凋亡及Bcl-2表达。结果:舌癌组细胞增殖指数(PI)显著高于乳头状瘤组(P<0.05),而细胞凋亡指数(AI)低于乳头状瘤组(P<0.05);舌癌化疗组与舌癌组比较,AI显著升高(P<0.05),PI显著降低(P<0.05);舌癌化疗组与舌癌组比较,Bcl-2阳性细胞指数明显降低(P<0.05);舌癌化疗组中PI与AI呈负相关(r=-0.739),Bcl-2阳性细胞指数与AI呈负相关(r=-0.787)。结论:化疗药物抑制肿瘤生长的机制可能与抑制肿瘤细胞增殖和诱导肿瘤细胞凋亡有关,这种作用可能是通过下调Bcl-2表达水平实现的,提示舌癌术前化疗对肿瘤的预后有重要意义。     

细胞周期因子Cyclin Ds的表达水平与口腔鳞癌对顺铂敏感性的关系

目的:寻找口腔鳞癌对顺铂耐药的相关基因,以预测临床化疗效果并指导临床化疗。方法:收集口腔鳞癌标本,根据其体外药敏测试(改良MTT法)进行分组,同时用免疫组化法检测这些标本中CyclinDs(CCND1、CCND3)、P鄄gp和GST鄄Pi的表达情况。结果:根据药敏测试结果,最后收集到顺铂耐药标本23例,顺铂敏感标本20例。对免疫组化结果采用SAS5.0统计软件分析,发现只有CCND1和CCND3的表达水平与标本顺铂敏感性有关,CCND1阳性率高往往提示肿瘤细胞对顺铂不敏感。结论:细胞周期因子CyclinDs的表达异常与口腔鳞癌顺铂耐药性相关,可被纳入口腔鳞癌顺铂耐药相关基因表达谱。