尼莫地平抗急性铅染毒大鼠海马神经元损伤的形态学研究

目的：了解尼莫地平对急性铅染毒大鼠海马神经元损伤的干预作用。方法：48只2月龄SD大鼠随机等分为4组，即染铅组（40mg／kg PbAc）、尼莫地平组（1mg／kg Nim）、铅-尼莫地平组（40mg／kg PbAc＋1mg／kg Nim）和对照组（等量生理盐水），每日腹注1次，连续3d。用TUNEL法原位检测海马神经元凋亡情况，并用电镜观察海马神经元超微结构变化。结果：各组海马神经元凋亡指数由高到低依次为染铅组、铅-尼莫地平组、对照组和尼莫地平组，染铅能显著增高海马神经元凋亡指数（P〈0．01），尼莫地平与铅存在交互作用（P〈0．01），在铅染毒的前提下，尼莫地平能明显降低神经元凋亡指数。电镜观察显示，染铅组海马神经元有核固缩现象，而铅-尼莫地平组神经元未见明显异常。结论：急性铅染毒能引起海马神经元损伤，促进细胞凋亡；尼莫地平可能具有抗急性铅染毒海马神经元损伤的作用。     

脑心通对大鼠脑缺血海马CA1区神经元损伤的保护作用

OBJECTIVE: To examine the neuroprotective effects of Naoxintong and Zhongfenghuichunwan on neuronal injury in CA1 region of rat hippocampus following transient forebrain ischemia. METHODS: Transient rat forebrain ischemia for 15 min was induced by modified four-vessel occlusion method. The density of survived pyramidal cells (neurons per 1 mm linear length) in CA1 region of the hippocampus was measured under light microscope. RESULTS: In Naoxintong or nimodipine-treated rats, the density of survived pyramidal cells in CA1 region was significantly greater than that of saline group (P<0.05, P<0.001, respectively), but oral administration of Zhongfenghuichunwan had no obvious effect on ischemia-induced neuronal damage in CA1 region. CONCLUSION: Naoxintong can protect CA1 neurons against ischemic insult in rats.     

脑心通对大鼠脑缺血海马CA1区神经元损伤的保护作用

目的研究脑心通、中风回春丸对大鼠前脑缺血海马CA1区神经元损伤的保护作用。方法采用改良的Pulsinelli四血管闭塞法制作前脑缺血模型,光镜下观察并计CA1区存活锥体细胞密度;并与尼莫地平对照。结果脑心通及尼莫地平灌胃给药组大鼠海马CA1区存活锥体细胞密度明显高于生理盐水组(P<0.05,P<0.001),但脑心通与尼莫地平组之间无明显差异;中风回春丸无明显的神经保护作用。结论脑心通具有明显的神经保护作用。     

CBD和尼莫地平对培养大鼠皮层神经元损伤的保护作用

目的 研究一种神经营养物质ＣＢＤ和尼莫地平（Ｎｉｍｏｄｉｐｉｎｅ,Ｎｉｍ）联合应用对培养大鼠皮层神经元损伤的保护作用。方法 分别采用谷氨氨酸化学或机械划痕创伤性损伤培养大鼠皮层神经元,根据培养细胞台盼蓝活力计数和培养上清乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）检测评估损伤程度。结果ＣＢＤ和Ｎｉｍ单独应用时,对谷氨酸和创伤介导的培养皮层神经元损伤有中等程度的保护作用,与单独损伤未加保护性药物组相比较有显著性差异（Ｐ〈０．０１）。ＣＢＤ和Ｎｉｍ联合会用时,保护作用比单独应用明显增强（Ｐ〈０．０１）。结论 ＣＢＤ和Ｎｉｍ联合应用有明显的协同作用。     

芍药甙对大鼠海马神经元的保护作用

目的: 观察缺氧对大鼠海马神经元的影响及芍药甙的保护作用. 方法: 采用细胞培养方法获取10～14 d的海马神经元,将药物加入到培养液中,4 h后建立950 mL/L NO2 50 mL/L CO2混合气体急性缺氧模型,台盼蓝染色细胞计数并做流式细胞仪检测,以及酶法测定抗氧化酶(超氧化物岐化酶SOD)的抗氧化能力及丙二醛(MDA),NO的含量. 结果: 离体条件下芍药甙组较对照组SOD活性升高,MDA及NO含量降低(P＜0.01),且成量效比例关系,同时细胞凋亡率显著降低. 结论: 芍药甙在体外有抗缺氧损伤的作用,其作用机制可能是通过抑制细胞凋亡,提高抗氧化酶的活力,清除自由基而发挥作用.     

苦参素对脂多糖诱导的海马神经元凋亡的保护作用

目的 探讨苦参素(OMT)对脂多糖(LPS)诱导的海马神经元凋亡的影响及其可能机制。 方法 根据海马神经元乳酸脱氢酶(LDH)释放率选择OMT的浓度进行实验分组。分为7组:正常对照组;脂多糖组;阿司匹林+脂多糖组;苦参素组;苦参素低剂量+脂多糖组;苦参素中剂量+脂多糖组;苦参素高剂量+脂多糖组。流式细胞仪检测细胞凋亡率;免疫荧光观察NF-κB/P65核易位情况;酶联免疫吸附(ELISA)技术测定海马神经元培养上清中炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)的水平。 结果 LPS组海马神经元凋亡率显著高于正常对照组(P<0.01),OMT预处理可以显著减少LPS刺激引起的海马神经元凋亡率(P<0.05)。LPS可以促进海马神经元NF-κB/P65由胞浆转位到胞核,提高海马神经元培养上清中TNF-α和IL-1β水平;而OMT预处理能显著减少LPS对海马神经元NF-κB/P65核易位作用及降低TNF-α和IL-1β的水平(P<0.05)。 结论 LPS诱导海马神经元NF-κB/P65核易位,导致炎症因子TNF-α和IL-1β的含量增加;OMT预处理可以抑制海马神经元NF-κB/P65核易位,减少TNF-α和IL-1β的分泌,从而抑制海马神经元的凋亡。      

自由基对海马神经元的损害及人参皂甙保护作用的免疫组化研究

目的：探讨自由基对海马神经元胆囊收缩素（ Ｃ Ｃ Ｋ）的损害及人参皂甙的抗损害作用。方法：对１８ ｄ Ｗｉｓｔａｒ 大鼠胚胎海马神经元进行培养。培养第４ 天随机分为正常组、自由基组和人参皂甙组。采用免疫组化结合图像分析检测其灰度值,进行统计学分析及处理。结果：自由基作用２４ ｈ,自由基组 Ｃ Ｃ Ｋ８ 含量明显低于正常组（ Ｐ ＜００１）,而人参皂甙组 Ｃ Ｃ Ｋ８ 含量接近正常组（ Ｐ＜ ００５）。结论：自由基可降低海马神经元 Ｃ Ｃ Ｋ 含量,人参皂甙可增加 Ｃ Ｃ Ｋ 含量。说明自由基具有影响 Ｃ Ｃ Ｋ 等多肽合成,人参皂甙具有较强的抗氧化作用。     

葛根素对喹啉酸致海马神经元损伤的保护作用

目的研究葛根素对喹啉酸(qinolinic acid,QA)诱导原代培养乳鼠海马神经元兴奋毒损伤的保护作用。方法乳鼠海马神经元原代培养后用QA诱导损伤,采用MTT法测定细胞活力,同时测定培养上清液中乳酸脱氢酶 (LDH)活性和丙二醛(MDA)的含量。结果葛根素(3×10-4mol／L、10-4 mol／L)剂量能明显提高QA致损伤的原代培养乳鼠海马神经元的细胞活力,降低其上清液中LDH活性和MDA含量,与模型组比较差异均具有显著性(P <0．01)。结论葛根素(3×10-4moL／L,10-4 mol／L)对QA所致的原代培养乳鼠海马神经元损伤有明显保护作用。     

人参皂苷对体外培养低氧海马神经元的保护作用

目的 观察人参皂苷（Rg2）对大鼠低氧海马神经元的保护作用及其机制。方法 取新生Wistar大鼠海马神经元体外培养14d,随机分为对照组、5μmol/L尼莫地平组（尼莫地平组）、Rg2 0．025mmol/L组（Rg2 1组）、Rg2 0．050mmol/L组（Rg2 2组）。将相应药物加入到培养液中孵育4h后,连续充以体积分数0．95N2＋体积分数0．05CO2混合气体,建立急性低氧细胞模型。台盼蓝染色计数存活细胞,吉姆萨染色观察细胞形态,荧光分光光度计法测细胞内Ca^2＋浓度。结果 尼莫地平组、Rg2两个剂量组的细胞死亡率均明显低于对照组,以Rg2 2组最低,差异均有显著性（X^2=3．37,P〈0．05）。海马神经元细胞内Ca^2＋浓度在尼莫地平组、Rg2两个剂量组均明显低于对照组,以Rg2 2组最低,差异均有显著性（F=466．58,q=6．76～48．82,P〈0．01）。结论 Rg2可显著降低体外培养大鼠低氧海马神经元的细胞死亡率,其机制可能是通过减少Ca^2＋内流而发挥作用。     

ROCK2-shRNA转染对VaD大鼠海马神经元的保护作用

探讨不同滴度ROCK2-shRNA腺相关病毒(AAV9-ROCK2-shRNA)转染对血管性痴呆（VaD）大鼠海马神经元的保护作用。方法 选取成年SPF级健康雄性SD大鼠40只,随机分为正常组、PBS对照组、低滴度组、中滴度组、高滴度组（n=8）。采用双侧颈总动脉永久性结扎法制备VaD模型,将AAV9-ROCK2-shRNA按原液(高滴度)、2倍(中滴度)、10倍(低滴度)稀释后,采用脑立体定位术注射至大鼠海马组织周围。于1周及4周后,进行Morris水迷宫测试大鼠学习和记忆能力变化,并于第4周行为学观察后取材,采用HE与尼氏染色观察神经元形态、分布及数量变化,免疫组化检测IL-1β阳性细胞数,荧光显微镜检测绿色荧光蛋白(GFP)的转染情况。结果 与正常组比较,PBS对照组术后1周与4周逃避潜伏期延长、跨越平台次数显著减少,神经元损伤明显,尼氏小体显著减少,差异有统计学意义(均P＜0.05);与PBS对照组比较,术后1周,低、中、高滴度组大鼠逃避潜伏期、跨越平台次数差异无统计学意义(均P＞0.05);术后4周,低、中、高滴度组较PBS对照组逃避潜伏期时间缩短、跨越平台次数增加,神经元排列整齐、形态更规则,尼氏小体增多,IL-1β阳性细胞数明显减少(均P＜0.05);与中滴度组比较,术后1周,低、高滴度组的潜伏期、跨越平台次数差异无统计学意义(均P＞0.05);术后4周,低、高滴度组大鼠逃避潜伏期延长、跨越平台次数减少,海马神经元受损更严重,尼氏小体数减少,IL-1β阳性细胞数增多,GFP转染率显著降低(均P＜0.05)。结论 中滴度AAV9-ROCK2-shRNA能高效、稳定、低毒地转染大鼠海马组织,对VaD大鼠海马神经元保护作用最优     

鹅膏蕈氨酸对一氧化氮含量的影响及尼莫地平的保护作用

目的：观察兴奋性氨基酸（ＥＡＡ）作用于小鼠海马后一氧化氮（ＮＯ）含量的变化以及尼莫地平的保护作用。方法：将鹅膏蕈氨酸（ＩＢＡ）直接注射至小鼠右侧海马，以及在注射ＩＢＡ前２０ｍｉｎ腹腔注射尼莫地平。用酶法检测了不同组的小鼠海马部位的ＮＯ含量。结果：实验显示ＩＢＡ注射后小鼠海马的ＮＯ含量显著升高，用尼莫地平预处理的小鼠海马ＮＯ含量显著低于单用ＩＢＡ组，且其自身双侧海马ＮＯ含量无差别。结论：ＥＡＡ注入海马是制备老年性痴呆模型方法之一，该模型小鼠的海马ＮＯ含量异常增高可能与老年性痴呆发病机制有关。Ｃａ２＋通道拮抗剂尼莫地平有拮抗ＥＡＡ造成的ＮＯ含量变化的作用。     

异丙酚对缺氧复氧后培养海马神经元的抗损伤影响

目的观察异丙酚对培养海巴神经元缺氧复氧后损伤反应的影响.方法培养12d海巴神经元,随机分为正常对照组(Nor组)、缺氧4h后复氧24h组(Ano组),加异丙酚500μmoL/L缺氧4h后复氧24h组(Pro组).MTT法测定细胞存活率及用流式细胞仪测定C-fos含量和神经元凋亡率.结果经流式细胞仪测定显示,缺氧后Ano组G-fos蛋白表达的λm值及细胞凋亡率明显增加(P＜0.01),Pro组能减少阳性率的改变,λm值和细胞凋亡率较Ano组减少(P＜0.05),但与Nor组仍有差异(P＜0.01).MTT法测定的细胞存活率同凋亡的测定结果一致.结论异丙酚能提高体外海马神经元的抗缺氧能力,减少C-fos蛋白过度表达和细胞的凋亡.     

异丙酚对缺氧复氧后培养海马神经元nNOS的影响

目的 观察异丙酚对培养海马神经元缺氧复氧后损伤反应的影响.方法 培养12d海马神经元,随机分为正常对照再培养24h组(Nor组)、缺氧4h后复氧24h组(Ano组)、加异丙酚500μmol/L缺氧4h后复氧24h组(Pro组).采用MTT法测定细胞存活率,免疫组化方法 测定nNOS蛋白含量,应用流式细胞仪测定神经元凋亡率.结果 缺氧后Ano组nNOS蛋白表达及细胞凋亡率明显增加(P＜0.01),加入异丙酚后能减少nNOS蛋白含量(P＜0.01)和细胞凋亡率(P＜0.05),Pro组细胞存活率较Ano组增加(P＜0.05),但与Nor组比仍下降(P＜0.05).结论 异丙酚能提高体外海马神经元的抗缺氧能力,减少nNOS蛋白过度表达和细胞的凋亡.     

脑益康含药血清对D-半乳糖诱导海马神经细胞损伤的保护作用

目的:研究脑益康对D-半乳糖(D-gal)诱导新生大鼠海马神经细胞损伤的保护作用。方法:运用血清药理学方法采集脑益康含药血清,D-gal复制海马神经细胞损伤模型,通过倒置显微镜观察海马神经细胞形态,MTT法测定海马神经细胞的活性。结果:脑益康保护组海马神经细胞数显著高于D-gal损伤组,受损的细胞数较少。结论:脑益康对D-gal损伤的海马神经细胞具有保护作用。     

尼莫地平对大鼠缺氧缺血性脑神经细胞损伤的保护作用研究

为探讨尼莫地平对脑神经细胞的保护作用 ,将 2 4只雌性 SD大鼠的大脑皮层神经细胞经试管内培养后 ,分为正常对照组、缺氧缺血组和尼莫地平处理组 ,每组各 8只 ,观察并比较 3组动物神经细胞胞浆总钙(TCa2 )和游离钙 (Ca2 i)的变化。结果 :缺氧缺血组神经细胞 TCa2 和 Ca2 i分别为 6 .70± 1.15 μg/ m l cell和 1.0 8± 0 .14F331.2 / F382 .4,均明显高于正常组 (TCa2 3 .10± 1.15 μg/ ml cell和 Ca2 i0 .83± 0 .13F331.2 / F382 .4)(P<0 .0 5 ) ;尼莫地平处理组 TCa2 和 Ca2 i分别为 3.5 3μg/ ml cell± 1.74和 0 .89± 0 .0 5 F331.2 / 382 .4,均明显低于缺氧缺血组 (P<0 .0 5 ) ,但与正常组比较则无显著性差异 (P>0 .0 5 )。由此提示 ,尼莫地平可阻滞脑神经细胞缺氧缺血性损伤时的钙超载 ,能有效地保护脑神经细胞。     

氯胺酮和利多卡因对缺氧后海马神经细胞钠钾电流的影响

目的 本实验用全细胞膜片钳技术研究氯胺酮与利多卡因对缺氧的培养大鼠海马神经元细胞Na+/K+电流的影响,从电生理角度为二者合用于临床而产生神经保护作用提供依据.方法 取培养12d的海马神经元,随机分为正常对照N组,缺氧4h A组,加氯胺酮后缺氧4h K组,加利多卡因后缺氧4h L组,加氯胺酮及利多卡因后缺氧4h KL组...     

模拟高强度推拉动作对大鼠海马神经元损伤的实验研究

目的　探讨大鼠经高强度模拟推拉动作暴露后,海马不同区域神经元的损伤程度和时相变化规律。方法　健康雄性Wistar大鼠 20只,随机分为正常对照组 5只,实验组( 8Gz→ +8Gz组)15只。正常对照组不做任何处理,实验组大鼠分别在暴露后 30min、6h、24h取材,灌流固定;石蜡切片,HE染色,光镜观察;超薄切片,透射电镜观察。结果　±8Gz暴露后 6h和 24h海马各区可见到一定数量形态发生改变的神经元,以CA1区损伤最重。结论　高强度推拉动作可造成海马神经元的损伤。     

尼莫地平治疗外伤性蛛网膜下腔出血的疗效观察

目的 探讨尼莫地平治疗外伤性蛛网膜下腔出血的疗效.方法 将151例外伤性蛛网膜下腔出血病例随机分为三组,治疗Ⅰ组46例,人院时在常规药物治疗的基础上立即使用尼莫地平,治疗Ⅱ组50例,在常规药物治疗的基础上,人院72h后开始用尼莫地平,对照组55例,仅使用常规药物治疗,通过治疗,比较其临床症状消失时闻、头颅CT出血吸收时间及预后的情况.结果 治疗Ⅰ组、治疗Ⅱ组和对照组临床症状消失时间分别为(6±3.6)d、(13±2.5)d、(14±3.3)d,头颅CT出血吸收时间分别为(11±9.2)d、(19±3.0)d、(21±2.5)d,总有效率分别为93.5%、78.0%、70.9%.结论 尼莫地平治疗外伤性蛛网膜下腔出血有明显的疗效,宜早期使用,值得推广.