糖尿病大鼠视网膜中缺氧诱导因子-1α和血管内皮生长因子表达的研究

目的:检测缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)与血管内皮生长因子(VEGF)在糖尿病大鼠视网膜中的表达,探讨其在糖尿病视网膜病变(DR)发生发展中的作用。方法:SD大鼠120只随机分为对照组与DR组,DR组采用链脲佐菌素(STZ)一次性建立糖尿病模型。应用免疫组化SP法和RT-PCR技术分别于1,3,6mo检测视网膜中HIF-1α与VEGF蛋白及其mRNA的表达变化。结果:HIF-1α与VEGF蛋白及其mRNA在对照组视网膜中不表达,在DR组中呈进行性表达增强(P<0.05);DR组中HIF-1α与VEGF的表达呈正相关(r=0.605,P<0.05)。结论:DR视网膜中HIF-1α与VEGF表达增强,与DR的发生发展密切相关。     

糖尿病大鼠视网膜中缺氧诱导因子-1α的表达与超微结构研究

目的 研究糖尿病大鼠视网膜中缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）的表达与超微结构变化。方法 将132只SD大鼠随机分为对照组与糖尿病视网膜病变（DR）组，DR组采用链脲佐菌素（STZ）一次性腹腔注射建立糖尿病模型。应用免疫组织化学SP法和RT-PCR技术分别于1、3、6个月检测视网膜中HIF-1α蛋白及其mRNA的表达，透射电镜观察视网膜的超微结构。结果 免疫组织化学与RT-PCR检测结果均显示，HIF-1α蛋白及其mRNA在对照组视网膜中不表达，在DR组中呈进行性表达增强（P〈0．05）；透射电镜观察：正常对照组大鼠视网膜血管未见异常，DR组随着病程发展逐渐出现视网膜血管内皮细胞肿胀，基底膜厚薄不均。结论 DR中HIF-1α的异常表达和超微结构改变与视网膜缺氧关系密切，两者与DR的发生发展密切相关。     

缺氧诱导因子-1α在早期糖尿病大鼠角膜上皮细胞中的表达

目的:观察缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在早期糖尿病大鼠角膜上皮细胞中的表达以探讨其在糖尿病性角膜上皮细胞病变发生及发展中的作用。方法:用链脲佐菌素(STZ)制作糖尿病大鼠模型,在制模成功后1,2,4,6,8,10及12wk取眼球组织,以年龄匹配正常大鼠作为对照组,分别以免疫组织化学染色及Westernblotting方法检测角膜上皮细胞中HIF-1α表达的位置及表达量。结果:糖尿病模型诱导成功后1wk,角膜上皮细胞中即有HIF-1α表达,主要位于基底细胞的细胞核内,4wk时阳性细胞数大于1wk(21.80±1.93vs15.30±2.05),6～10wk达到高峰(6,8和10wk分别为49.00±2.82,90.80±4.23,51.40±5.21),12wk下降(14.40±2.06)。Westernblotting分析显示HIF-1α蛋白表达模式与免疫组织化学相似,1wk时即有表达,6～10wk达到高峰,12wk下降。结论:HIF-1α在早期糖尿病角膜上皮细胞中的瞬时高表达而不是持续表达,可能是早期糖尿病角膜上皮细胞病变的原因。     

缺氧时视网膜血管内皮细胞缺氧诱导因子-1α及其mRNA的时序性表达

目的探讨在缺氧状态下视网膜血管内皮细胞缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)及其mRNA表达的时空规律.方法对分离的牛视网膜血管内皮细胞分别进行常规和CoCl2模拟缺氧培养,采用免疫组化和逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测不同缺氧时间HIF-1α及其mRNA的表达.结果正常对照组HIF-1α有极低表达,在缺氧1h时表达量显著上升,4h达到高峰,16h后下降.与对照组比较,各缺氧组HIF-1α的表达均有显著性差异(P＜0.01).但各缺氧组HIF-1αmRNA的表达无明显差异.结论视网膜血管内皮细胞在缺氧早期HIF-1 α表达有短暂、迅速的增加,但其mRNA的表达无明显变化,提示缺氧可以促进视网膜血管内皮细胞HIF-1α的表达,但不是在基因的转录水平.     

缺氧诱导因子-1α与血管内皮生长因子在视网膜新生血管中的表达及相关性

目的:检测视网膜新生血管中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达,研究其与血管内皮生长因子(VEGF)表达的相关性。方法:以高浓度氧诱导C57BL/6J小鼠建立视网膜新生血管模型,取对照组和给氧组幼鼠眼球作荧光素血管灌注,病理切片及免疫组织化学检测,分别观察视网膜血管的改变,视网膜新生血管内皮细胞数目及HIF-1α,VEGF蛋白的表达。结果:给氧组视网膜可见大量新生血管形成,新生血管内皮细胞核数为(23.38±1.07)个,与对照组相比差异有极显著性(P<0.01)。HIF-1α蛋白表达在神经节细胞层和突破视网膜内界膜的新生血管。VEGF蛋白表达在内核层,神经节细胞层和突破视网膜内界膜的新生血管。两者表达呈显著正相关(r=0.931,P<0.01)。结论:在视网膜新生血管形成中存在HIF-1α,VEGF的高表达,且两者表达密切相关。     

HIF-1α及VEGF在增生性糖尿病视网膜病变视网膜前膜中的表达

目的:研究缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)及其靶基因血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在增殖型性糖尿病视网膜病变(proliferative diabetic retinopathy,PDR)视网膜前膜的表达,探讨其在PDR发生发展中的作用。方法:针对26例PDRⅤ～Ⅵ期患者,行玻璃体切除+剥膜术(有合并视网膜脱离者加行视网膜复位术),术中取出视网膜前膜行免疫组织化学染色,观察视网膜前膜中HIT-1α与VEGF和血管内皮标志物CD34的表达。同时行术前血糖、甘油三脂、糖化血红蛋白、是否合并视网脱进行分类并行多因素Logistic回归分析。结果:PDRⅤ～Ⅵ期视网膜前膜血管内皮细胞中,表达HIT-1α者24例(92.3%),VEGF者15例(57.7%),血管内皮标志物CD34者26例(100%)。血管内皮标志物CD34分别与HIT-1α(r=0.556,P=0.028)和VEGF(r=0.745,P=0.001)直线相关。术前血糖、甘油三脂、糖化血红蛋白、是否合并视网脱是PDR视网膜前膜中表达因子HIT-1α,VEGF和CD34表达的相关因素。结论:HIT-1α和VEGF在糖尿病视网膜病变视网膜前膜中明显表达。HIT-1α和VEGF可能在PDR的发病中起重要作用。     

缺氧诱导因子-2α在增生型糖尿病视网膜病变新生血管形成中的作用

目的观察HIF-2α在增生型糖尿病视网膜病变(PDR)纤维血管膜中的表达,初步探讨HIF-2α在PDR新生血管形成中的作用。方法回顾性临床研究。2014年7月至2015年7月于青岛大学附属医院眼科行玻璃体切割手术的PDR患者57例60只眼纳入研究。根据手术前是否行玻璃体腔注射抗VEGF药物治疗将患眼分为PDR未注药组和PDR注药组,分别为30例32只眼、27例28只眼。PDR注药组患眼手术前2~7 d玻璃体腔注射10 mg/ml雷珠单抗0.05 ml(含雷珠单抗0.5 mg)。选取同期特发性黄斑前膜患者18例18只眼作为对照组。于玻璃体切割手术中获得PDR纤维血管膜、黄斑前膜病理标本。免疫组织化学染色法及荧光定量PCR(RT-PCR)检测各组病理标本中HIF-2α、Delta样配体4(Dll4)、VEGF的表达。多组间相关因子表达差异比较采用Kruskal-Wallis检验。两变量间关系行Spearman相关性分析。结果免疫组织化学染色结果显示,PDR未注药组、PDR注药组纤维血管膜中HIF-2α、Dll4、VEGF蛋白表达均呈阳性。PDR未注药组HIF-2α、Dll4、VEGF蛋白相对表达量均高于PDR注药组,差异均有统计学意义(t=4.36、6.01、4.82,P=0.000、0.008、0.016)。RT-PCR检测结果显示,PDR未注药组、PDR注药组、对照组纤维血管膜、黄斑前膜中HIF-2α、Dll4、VEGF mRNA相对表达量比较,差异均有统计学意义(H=18.81、19.60、20.50,P=0.000、0.000、0.000)。其中,PDR未注药组、PDR注药组HIF-2α、Dll4、VEGF mRNA相对表达量均显著高于对照组;与PDR未注药组比较,PDR注药组HIF-2α、Dll4、VEGF mRNA相对表达量均降低。Spearman相关性分析结果显示,HIF-2α与Dll4、VEGF mRNA相对表达量呈显著正相关(r=0.95、0.87,P<0.05)。结论PDR患眼纤维血管膜中HIF-2α表达高于对照组,且与DLL4、VEGF的表达均呈显著正相关。     

缺氧时视网膜血管内皮细胞HIF-1α及其mRNA的表达

目的探讨在缺氧状态下视网膜血管内皮细胞缺氧诱导因子-1 α（HIF-1 α）及其mRNA表达的时空规律。方法对分离的牛视网膜血管内皮细胞分别进行常规和CoCl2模拟缺氧培养，采用免疫组织化学和逆转录多聚酶链反应（RT—PCR）检测不同缺氧时间HIF-1 α及其mRNA的表达。结果正常对照组HIF-1 α有极低表达，缺氧1h表达量显著上升，4h达到高峰，16h后下降。与对照组比较，各缺氧组HIF-1 α的表达均有显著统计学差异（P〈0．01）。但各缺氧组HIF-1 αmRNA的表达无显著统计学差异。结论视网膜血管内皮细胞在缺氧早期HIF-1 α表达有短暂、迅速的增加，但其mRNA的表达无明显变化，提示缺氧可以促进视网膜血管内皮细胞HIF-1 α的表达，但不是在基因的转录水平。     

缺氧诱导因子-1α小片段干扰性RNA对人血管内皮细胞缺氧诱导因子-1α表达的调控

目的探讨缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)小片段干扰性RNA(siRNA)对人血管内皮细胞HIF-1α表达的影响。方法构建HIF-1αsiRNA重组质粒。将体外培养的人血管内皮细胞(HUVEC-12)分成常氧(20%)组和低氧(1%)组。低氧组又分为对照组、空载体组和HIF-1α组。采用脂质体LipofectamineTM 2000分别转染空载体质粒(空载体组)、HIF-1αsiRNA(HIF-1α组),对照组不作转染。采用SP免疫细胞化学法检测各组细胞中HIF-1α蛋白表达的变化,并进行计算机图像分析。结果对照组和空载体组细胞HIF-1α蛋白表达较常氧组增强,而HIF-1α组较对照组明显减弱。结论HIF-1αsiRNA能显著抑制HIF-1α的表达,为视网膜新生血管的基因治疗提供了新方法。     

缺氧诱导因子1α在慢性高眼压下大鼠视网膜中的表达

目的了解缺氧诱导因子1((hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)在实验性慢性高眼压大鼠视网膜中的表达并探讨其在青光眼视网膜损伤中的作用。方法60只大鼠随机分为假手术对照组;高眼压3d组;高眼压7d组;高眼压14d组;高眼压21d组;高眼压28d组。浅层巩膜静脉烧灼法制成慢性高眼压模型,通过逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法和蛋白印迹法(Western-blot)研究HIF-1在慢性高眼压下不同时段视网膜中的表达情况。结果HIF-1αmRNA和蛋白在高眼压的视网膜表达较正常视网膜明显提高(P<0.05)。高眼压后7天达到高峰,可维持28天。结论HIF-1参与了慢性高眼压的视网膜的损伤的信号转导过程,为青光眼视神经损伤的缺氧学说提供了直接证据。     

缺氧诱导因子-1α和环氧合酶-2在视网膜新生血管中的表达及意义

目的探讨缺氧诱导因子-1α(hypoxia-induciblefactor-1α,HIF-1α)和环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)在视网膜新生血管中的表达和意义。方法以高浓度氧诱导C57BL/6J小鼠建立视网膜新生血管模型。取对照组和给氧组幼鼠眼球作荧光素血管灌注、病理切片及免疫组织化学检测,分别观察视网膜血管的改变、视网膜新生血管内皮细胞数目及HIF-1α、COX-2蛋白的表达。结果给氧组视网膜可见大量新生血管形成,新生血管内皮细胞核数为(23.38±1.07)个,与对照组相比差异有极显著性(P<0.001)。HIF-1α蛋白表达在神经节细胞层和突破视网膜内界膜的新生血管,COX-2蛋白表达在内核层、神经节细胞层和突破视网膜内界膜的新生血管,二者表达呈显著正相关(r=0·363,P<0.01)。结论在视网膜新生血管形成中存在HIF-1α、COX-2的高表达,且二者表达密切相关。     

缺氧诱导因子-1α、血管内皮生长因子在视网膜母细胞瘤中的表达及意义

肿瘤的生长和转移依赖肿瘤细胞对缺氧的适应和新生血管的形成,而肿瘤新生血管的形成受多种因子的调控.缺气门诱 导因子-1α（HFIF-1α)是缺氧条件下肿瘤细胞生长的一种转录因子.     

氧诱导鼠视网膜病变中低氧诱导因子-1α和血管内皮生长因子的表达

目的:探讨HIF-1α和VEGF在早产儿视网膜病变鼠模型中的表达及意义。方法:建立氧诱导的早产儿视网膜病变新生鼠模型。Western-blot检测视网膜HIF-1α的表达,并以计算机图像分析仪进行分析;ELISA方法检测视网膜VEGF的表达。结果:与正常对照组比较,视网膜病变组在鼠出氧箱后5,10,15d视网膜HIF-1α表达逐渐增加(P<0.01),呈时间依赖关系。视网膜VEGF的表达分别为381.5±3.1,431.8±1.3和443.9±1.2ng/L,与对照组比较,均有显著增加(P<0.01)。结论:氧诱导视网膜病变中的HIF-1α和VEGF上调。     

大鼠视网膜胚胎发育过程中低氧诱导因子-1α及血管内皮生长因子的表达

背景研究发现低氧诱导因子-1（HIF-1）与机体缺氧的生理反应有关,并在胚胎发育过程中发挥作用。此外人视网膜胚胎发育过程中血管内皮生长因子（VEGF）呈高表达。但二者在胚胎期缺氧环境中的作用及相互关系仍有待研究。目的观察大鼠视网膜胚胎发育过程中HIF-1α和VEGF的表达变化,探讨HIF-1α和VEGF在视网膜胚胎发育过程中的作用和相互关系。方法30只清洁级SD孕鼠剖腹取出胚胎10、12、14、16、20d鼠,每组取5只孕鼠,每只孕鼠随机选取2只胎鼠进行观察。摘除胎鼠一侧眼球,分离视网膜并制备切片,用免疫组织化学法检测视网膜组织中HIF-1α、VEGF蛋白的阳性表达,采用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）法分别检测不同胎龄大鼠及成年大鼠视网膜组织中HIF-1α mRNA及VEGF mRNA的表达。结果免疫组织化学染色表明,在大鼠视网膜胚胎早期（10～12d）即可检测到HIF-1α和VEGF蛋白均呈高表达,二者的表达强度均随胎龄的增加而减弱（F=56．70,P〈0．01;F=60．78,P〈0．01）,各胎龄组视网膜中HIF-1α和VEGF蛋白的表达量均明显高于成年鼠,差异均有统计学意义（P〈0．01）,随胎龄的增加HIF-1α蛋白在视网膜中的表达变化与VEGF蛋白表达呈正相关（r=0．96,P=0．00）。RT—PCR检测结果表明,大鼠胚胎早期（10～12d）即可检测到HIF-1α mRNA和VEGF mRNA在视网膜中均呈高表达,二者的表达均随胎龄的增加而减弱（F：68．84,P〈0．01;F=96．49,P〈0．01）,各胎龄组视网膜中HIF-1α和VEGF蛋白的表达量均明显高于成年鼠,差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论大鼠视网膜胚胎发育过程中HIF-1α及VEGF的表达随着胎龄的增加均呈先高后低的动态变化趋势,提示HIF-1α／VEGF通路参与大鼠视网膜的胚胎发育过程。     

臭氧对STZ诱导的糖尿病大鼠视网膜表达VEGF, HIF-1α与PEDF的影响

目的：通过测定经臭氧灌肠治疗后的糖尿病大鼠视网膜及血清中血管内皮生长因子（ VEGF ）、缺氧诱导因子－1α（ HIF－1α）与色素上皮衍生因子（ PEDF）的表达差异,了解臭氧在早期糖尿病视网膜病变治疗的作用。方法：选取70只雄性SD大鼠中的10只做为正常对照组,予以正常饮食;余大鼠经适应性喂养后通过腹腔一次性注射链脲佐菌素（50mg／ml）制作糖尿病模型。将造模成功的大鼠模型随机分成模型对照组（B组）、氧气治疗组（C组）及臭氧治疗组（D组）,其中臭氧治疗组给予臭氧灌肠治疗（2次／wk,共计1mo）,氧气治疗组给予同等剂量及频次的氧气进行灌肠治疗,治疗1mo 后取视网膜及血清,使用免疫组化法检测视网膜中 VEGF 的表达,使用ELISA及RT－PCR的方法检测视网膜及血清中 VEGF、HIF－1α与PEDF的含量。结果：免疫组化结果显示VEGF主要在内层视网膜表达,而臭氧治疗组VEGF表达接近于空白对照组;血清与视网膜中VEGFmRNA 表达在四组间均有统计学差异（F ＝23．923;P＝0．000）,其中臭氧治疗组VEGF的表达接近于空白对照组,但差异仍有统计学意义（P＜0．05）;而模型对照组同氧气治疗组的 VEGF 表达亦无统计学差异（ P＞0．05）;相对于空白对照组,臭氧治疗组HIF－1α表达下降（P＜0．05）,而在模型对照组与氧气治疗组间无统计学差异（ P＞0．05）。 PEDFmRNA在四组间的表达均有差异,但差异均无统计学意义（P＞0．05）。结论：臭氧灌肠治疗可以有效的降低血清及视网膜中VEGF和HIF－1α的表达,可以一定程度的抑制早期糖尿病视网膜病变的发展。     

早期糖尿病鼠视网膜HIF1α及VEGF表达的意义

目的 探讨缺氧诱导因子1α（hypoxia-inducible factor 1α,HIF-1α）和血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）在早期糖尿病大鼠视网膜上的表达及意义.方法 用链尿佐菌素（streptozotocin,STZ）腹腔注射制作大鼠早期糖尿病视网膜病变（diabetic retinopathy,DR）模型.于模型建立后1个月处死大鼠,取眼球做石蜡切片及视网膜铺片.用免疫组化法检测HIF-1α及VEGF在视网膜的表达.用胰酶消化视网膜并行PAS视网膜血管染色,观察管视网膜血管形态变化.结果 早期糖尿病大鼠视网膜的HIF-1α可能由高浓度血糖诱导,从而上调VEGF的表达.结论 HIF1α和VEGF在糖尿病视网膜新生血管的发生过程中可能起着重要的作用.     

低氧诱导因子-1与糖尿病视网膜病变

低氧诱导因子(HIF)是乏氧应答中起重要作用的转录因子,由α亚基和β亚基组成,α亚基包括HIF-1α、HIF-2α和HIF-3α,其中α亚基因诱导条件不同通过选择性剪接产生不同变体.β亚基包括ARNT、ARNT2和ARNT3.α与β亚基在乏氧等应激反应时形成二聚体HIF,启动靶基因转录表达,参与多种细胞生物学功能的调控.目前,HIF-1在糖尿病视网膜病变中有着较广泛深入的研究.本文简述HIF-1在糖尿病视网膜病变中的表达、调控、作用及其意义.     

缺氧诱导因子-1α小干扰RNA对糖尿病大鼠视网膜血管内皮生长因子mRNA抑制作用的动态观察

目的 观察缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)特异性小干扰RNA(siRNA)对糖尿病大鼠视网膜组织中血管内皮生长因子(VEGF)mRNA表达的抑制作用.方法 随机对照研究.以pSilencer 2.1-U6neo为质粒载体,构建HIF-1α siRNA重组质粒.雄性Sprague-Dawley大鼠54只,随机分为正常对照组和实验组,分别为15、39只大鼠.实验组大鼠尾静脉注射链尿佐菌素(STZ)诱导建立糖尿病动物模型,再分为糖尿病模型组、空载体组和基因治疗组,分别为15、12、12只大鼠.脂质体Lipofectamine TM 2000介导,空载体组和基因治疗组分别转染pSilencer空载体质粒和HIF-1αsiRNA重组质粒,糖尿病模型组和正常组对照组不做转染.采用实时逆转录(RT)-聚合酶链式反应(PCR)检测各组大鼠VEGF mRNA的表达.分别于干扰后24、48、72 h,1周时计算VEGF mRNA的抑制效率.采用单因素方差分析和LSD-t检验进行统计学分析.结果 HIF-1α siRNA重组质粒经酶切、测序鉴定,确定为目的 序列.实时RT-PCR检测结果显示,正常对照组仅见弱的VEGF mRNA表达,糖尿病模型组及空载体组表达明显上调,基因治疗组表达下调;各时间点空载体组与糖尿病模型组比较,差异无统计学意义(t=0.669,0.142,0.151,0.025;P=0.514,0.889,0.882,0.980),基因治疗组较糖尿病模型组及空载体组表达下调,差异有统计学意义(t=8.768、13.695、11.285、8.253,t=9.437、13.554、11.436、8.228;P值均=0.000);VEGF mRNA抑制率24、48、72 h和1周时分别为32.76%、43.60%、47.70%、50.86%.结论 HIF-1α siRNA重组质粒能有效抑制糖尿病大鼠视网膜中VEGFmRNA的表达.

Abstract：

Objective To observe the inhibition effect of the hypoxia inducible factor-1α(HIF-1α)specific siRNA on the expression of vascular endothelial growth factor(VEGF)mRNA in retinal tissues in diabetic rat.Methods This is a randomized controlled study.HIF-1α specific siRNA recombinant plasmid was built in pSilencer2.1-U6neo vector.Fifty-four healthy Sprague Dawley(SD)rats were divided into control group(15 rats)and experimental group(39 rats).The experimental rats were induced with streptozotocin injection for diabetic retinopathy model,and then randomly divided into diabetic retinopathy (DR)group(15 rats),vector group(12 rats)and gene therapy group(12 rats).LipofectamineTM2000mixed with pSilencer2.1-U6neo plasmid or HiF-1α siRNA plasmid were injected into the vitreous in the vector group and gene therapy group respectively.Nothing was transfected into DR and control group.The expression of VEGF mRNA in retinas was measured by real-time RT-PCR.The inhibition efficiency of VEGFmRNA was calculated at 24,48,72 hours and 1 week after injection respectively.Significant differences between groups were evaluated by one-way analysis and LSD-t analysis.Results HIF-1 α siRNA recombinant plasmid was confirmed by enzyme digestion and sequence analysis.Real-time RT-PCR revealed that the expression of VEGFmRNA was faint in the control group.increased obviously in the DR and vector group,decreased in the gene therapy group.There was no statistically significant between DR and vector group(t=0.669,0.142,0.151,0.025;P=0.514,0.889,0.882,0.980).The expression of VEGFmRNA in the gene therapy group were obviously decreased compared with DR and vector group(t=8.768,13.695,11.285,8.253;P=0.000).The inhibition efficiency of VEGFmRNA was 32.76% ,43.60% ,47.70% ,50.86% at 24,48,72 hours and 1 week after injection.Conclusions The expression of VEGFmRNA can be efficiently inhibited by HIF-1α siRNA recombinant plasmid.     

缺氧诱导因子-1α在大鼠角膜发育过程中的表达

目的　观察大鼠角膜在胚胎期及生后发育期缺氧诱导因子-１α（ｈｙｐｏｘｉａ-ｉｎｄｕｃｉｂｌｅｆａｃｔｏｒ-１ａｌｐｈａ,ＨＩＦ-１α）的表达,探讨ＨＩＦ-１α与角膜发育之间的关系。方法　取实验用Ｗｉｓｔａｒ大鼠分为８组:胚胎１２ｄ（Ｅ１２）、胚胎１６ｄ（Ｅ１６）、胚胎２０ｄ（Ｅ２０）、生后１ｄ（Ｐ１）、生后７ｄ（Ｐ７）、生后１５ｄ（Ｐ１５）、生后２１ｄ（Ｐ２１）、成年组,每组３只鼠６眼,共４８眼。每只鼠取一眼,采用免疫组织化学方法检测ＨＩＦ-１α的表达,另一眼采用实时荧光定量ＰＣＲ方法检测角膜组织中ＨＩＦ-１αｍＲＮＡ的表达（Ｅ１２、Ｅ１６时鼠胚眼球较小,无法分离角膜组织,未行ＰＣＲ检测）。结果　免疫组织化学染色结果显示,大鼠在角膜发育过程中,ＨＩＦ-１α的表达存在时空变化。Ｅ１２时,由表面外胚层分化的两层细胞内可见明显棕黄色颗粒。Ｅ１６时,分化形成的上皮层、基质层、内皮层中ＨＩＦ-１α阳性表达显著。Ｅ２０时,棕黄色颗粒集中表达在上皮层、内皮层,基质层染色较弱。Ｐ１、Ｐ７时,大鼠眼睑粘连,角膜各层中ＨＩＦ-１α维持少量表达,上皮、内皮细胞较基质细胞染色明显。Ｐ１５时,ＨＩＦ-１α在上皮层阳性着色尤其强烈,细胞核、细胞浆棕黄色颗粒明显,基质层未见阳性着色,内皮层见少量细胞核着染。Ｐ２１时,ＨＩＦ-１α的阳性表达更加集中在上皮层基底细胞,基质层、内皮层表达阴性。成年组,角膜中仅在上皮基底细胞见ＨＩＦ-１α阳性表达,余未见阳性。实时荧光定量ＰＣＲ显示ＨＩＦ-１αｍＲＮＡ在角膜发育期各组表达量不同,差异有统计学意义（Ｆ＝９７．００、Ｐ＜０．０５）。Ｐ１组与Ｅ２０组之间,成年组与Ｐ２１组之间比较,差异均无统计学意义（Ｐ＝０．２０、０．０５）,其余各组间差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０５）。结论　ＨＩＦ-１α在大鼠角膜发育过程中存在阳性表达,且随发育时期不同表达部位、表达量发生变化。ＨＩＦ-１α可能在角膜各层分化、细胞分裂过程中发挥重要作用。     

低氧诱导因子-1与缺血性视网膜病变

低氧诱导因子-1（HIF-1）是一种转录活化因子,在低氧状态下充当基因表达的主要调节者。由HIF-1调节的基因广泛存在于氧平衡调节和葡萄糖新陈代谢中,轻度缺氧时可使HIF-1的复合物稳定,引起血管内皮生长因子（VEGF）、胰岛素样生长因子（IGF-1）、促红细胞生成素（EPO）等基因的表达,保障细胞存活。但持续严重缺氧时,使细胞内P53水平增加,引起细胞凋亡。对HIF-1的深入研究可能为缺血性视网膜病变提供新的有效治疗途径。