Expression of type-Ⅰ collagen and matrix metalloproteinase-9 mRNA in bone of castrated adult female rats:effects of estrogen

ＥｘｐｒｅｓｉｏｎｏｆｔｙｐｅⅠｃｏｌａｇｅｎａｎｄｍａｔｒｉｘｍｅｔａｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ９ｍＲＮＡｉｎｂｏｎｅｏｆｃａｓｔｒａｔｅｄａｄｕｌｔｆｅｍａｌｅｒａｔｓ：ｅｆｅｃｔｓｏｆｅｓｔｒｏｇｅｎＺｈａｏＨａｉｂｏ赵海波，ＸｉａＺｈｉｄａ...     

尼尔雌醇对去势大鼠骨组织白介素—6mRNA表达水平的调节

目的：探讨细胞因子在绝经后骨质疏松发病中的分子机制。方法：通过复制大鼠骨质疏松的模型,直接从成熟的骨组织中提取RNA,采用半定量逆转录－聚合酶链式反应（RT－PCR）技术检测骨组织IL－6mRNA的表达水平,采用放免法测定雌激素水平,研究雌激素对IL－6基因表达的调节作用,结果：尼尔雌醇治疗组大鼠骨组织IL－6mRNA表达水平显著低于切除卵巢组,与假手术组差异无显著性。结论：尼尔雌醇可以抑制IL－6基因表达,从而抑制破骨细胞骨吸收,减少骨量丢失。     

Expression of Matrix Metalloproteinase-9 mRNA in Osteoporotic Bone Tissues

Withcontinuinggrowthinger0ntalpopulati0ninChina,0steop0rosisandos-teop0roticbonefractureshavebecomecom-m0ndiseasesseriouslyaffectingthehealthofoldpeopleeventhreateningtheirlivesandtheirincidencesareincreasinglyhighinrecentyears['].Themaincauseof0steo-porosisisboneresorpti0nexceedingboneformationandconsequentb0nemassl0ss,especial1yin0ldpeopleandw0menwithmen0pause.0steoclastsaremultinucleatedgiantcellswhichplaykeyxrolesinbonere-sorption.Andoneofmainmechanismsofboneresorptionisthedegradation0fbon…     

淫羊藿总黄酮对去卵巢大鼠下丘脑和海马雌激素受体α及β mRNA表达的影响

目的:观察淫羊藿总黄酮对去卵巢大鼠下丘脑和海马雌激素受体α及β mRNA表达的影响,探讨其治疗绝经后骨质疏松的作用机制.方法:将10～11 月龄SD雌性大鼠48只, 随机分为假手术组、去卵巢模型组、淫羊藿总黄酮组和雌二醇(E2)组.以双侧卵巢切除法建立大鼠骨质疏松模型.淫羊藿总黄酮组、E2组分别用淫羊藿总黄酮、E2给药...     

绝经前后妇女骨密度测定

目的研究妇女绝经后骨质疏松与雌激素的关系。方法收集了２５５例年龄在３２～７３岁之间的绝经前后的妇女。分成４组：月经正常、月经紊乱、自然绝经和人工绝经（双侧卵巢切除术）。用双能Ｘ线骨密度测定仪进行测量。结果妇女月经紊乱后,骨密度就明显下降,而绝经后的５年内显著下降。手术切除卵巢后,５年内骨密度也显著下降。结论绝经前切除卵巢或过早的闭经易导致骨质疏松,即妇女绝经后骨质疏松与雌激素下降有显著关系（Ｐ＜０．００１）。     

Effects of Bushen Zhuanggu Formul on interleukin-6 production and bone metabolism of the ovariectomized rats

Objective： To observe the effects of Bushen Zhuanggu Formul on intedeukin 6 （IL-6） level and bone metabolism of the ovariectomized rats, and to explore the possible mechanism of preventing and treating postmenopausal osteo porosis by traditional Chinese Formul. Methods： SD rats were randomly divided into 4 groups： normal control group （N）, ovariectomized control group （OVX）, estrogen-treated group （OVX＋E） traditional and Chinese medicine-treated group （OVX＋ CM）. After treaanent, IL-6 levels in rat bone tissue media and serum were examined by ELISA. The proximal tibias（PTM） of rats were undecalcified for quantitative bone histomorphometry. Results： Compared with OVX group, both Bushen Zhuanggu medicine and estrogen decreased IL-6 level in rat bone tissue media. However, the effects of Bushen Zhuanggu Formul were weaker than those of estrogen. Furthermore, Bushen Zhuanggu Formul and estrogen produced a reduction in bone turnover by inhibiting bone formation and bone resorption at the same time. Conclusion： Bushen Zhuanggu Formul prevents ovariectomic bone loss by inhibiting IL-6 production in rat bone tissues.     

MMP-9mRNA及P53蛋白在声门上喉癌表达及与颈淋巴结转移的关系

目的探讨金属基质蛋白酶（MMP）及P53蛋白在声门上喉癌表达及与颈淋巴结转移的关系。方法采用分子原位杂交和免疫组织化学方法对声门上喉癌癌组织中的MMP-9mRNA及P53蛋白的表达进行检测。结果喉癌组织中MMP-9mRNA及P53蛋白表达的阳性率分别为60．7％，64．3％，MMP-9mRNA及P53阳性者淋巴转移率均高于阴性者（均为P〈0．05），在声门上喉癌组织中，MMP-9mRNA及P53其淋巴结转移率高于一项表达阳性者和两项均不表达者，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论MMP-9mRNA及P53蛋白的异常表达与声门上喉癌淋巴结转移过程密切相关，对判断预后有重要意义.     

Effect of estrogen on gene expression of fatty acid synthase in periosteum

Background Estrogen deficiency contributes to postmenopausal osteoporosis. Periosteum might be a potential target of estrogen, but the underlying mechanism at gene level is far from being elucidated. The objective of this study was to investigate the correlation between estrogen and fatty acid synthase （FAS） expression in periosteum. Methods Human periosteum cells were cultured in vitro. Expressed genes in the substrated cDNA library were verified using semi-quantitative PCR and real-time PCR. The expression of FAS in periosteum of ovarectomized （OVX） SD rats was investigated. Results FAS gene was most significantly expressed in the subtracted cDNA library of periosteal cells screened by semi-quantitative PCR. Low FAS expression was verified by real-time PCR in the estrogen exposed human periosteum rather than in the control. The estradiol levels were （20.81±12.62） pg/ml, （19.64±4.35） pg/ml and （13.47±1.84） pg/ml in the sham group, the control, and the OVX group, respectively. The estradiol levels in the OVX group was significantly lower （P=-0.0386）. The FAS gene expression in periosteum in the OVX group, sham group, and control group was 3.09±1.97, 1.33±0.47 and 1.51±1.32, respectively. The gene expression in the OVX group was significantly higher （P=0.0372）. Conclusion Estrogen modulates FAS gene expression in in vitro human perisoteum as well as in in vivo rat periosteum.     

长期雌激素替代治疗对大鼠子宫内膜bcl-2和H-ras基因与蛋白表达的影响

目的：探讨长期雌激素替代治疗对子宫内膜bcl-2和H-ras基因和蛋白表达的影响。方法：将30只5月龄雌性SD大鼠随机分成3组：对照组（假手术+注射溶剂,n=10）、去势组（双侧卵巢切除术+注射溶剂,n=10）和雌激素替代组（双侧卵巢切除术+注射雌二醇,n=10）。第13周处死动物,取其子宫称重,HE染色进行病理分析,测量子宫内膜厚度。用原位杂交和免疫组织化学的方法检测子宫内膜bcl-2 mRNA, H-ras mRNA及Bcl和H-ras蛋白的表达。结果：去势组子宫湿重、内膜厚度均低于假手术组（P<0.01）和雌激素替代组（P<0.01）。替代组出现1例单纯性增生和1例鳞状细胞化生。替代组bcl-2和H-ras mRNA和Bcl和H-ras蛋白表达量明显高于去势组（P<0.01）,与假手术组差异无统计学意义。结论：长期雌激素替代治疗能抑制子宫内膜萎缩,且会出现单纯性增生或鳞状细胞化生,具有潜在增加子宫内膜癌的发病风险。雌激素可通过增加bcl-2和H-ras mRNA及Bcl和H-ras蛋白的表达,抑制子宫内膜细胞的凋亡,促进细胞增殖。     

基质金属蛋白酶-9及其mRNA在胃癌中的表达与血管新生的关系

目的　观察基质金属蛋白酶 9(MMP 9)与MMP 9mRNA在胃癌组织及细胞中的表达与作用特点 ,及其与肿瘤浸润、转移及血管新生之间的关系。方法　利用 74例胃癌标本及体外培养人胃低分化腺癌细胞BGC82 3,经连续切片免疫组织化学染色、原位杂交、侵袭实验、酶谱分析及形态定量分析方法 ,进行金属蛋白酶 (MMP) 9、MMP 9mRNA、CD34、α SMA、VEGFR 1、VEGFR 2的检测 ,并结合临床病理参数进行综合分析。结果　MMP 9及其mRNA的表达均与癌组织的浸润深度、分化程度、淋巴结转移密切相关 ;MVD与癌组织的浸润深度、淋巴结转移关系密切 ;BGC82 3细胞MMP 9,MMP 9mRNA ,VEGFR 2染色均为阳性 ,VEGFR 1染色阴性 ;MMP 9抗体可使BGC82 3细胞侵袭细胞数由 6 9± 5个 /40 0倍下降为 (18± 4 )个 /40 0倍 ;直接培养于培养皿表面的BGC82 3细胞有稳定的MMP 9,MMP 2酶原表达 ,但培养于I型胶原包被培养皿表面的BGC82 3细胞MMP 2表达明显增强并出现活化形式 ;BGC82 3细胞与VEGF共孵育 ,条件培养基中MMP 9酶原含量以VEGF剂量依赖的方式增加。结论　胃癌细胞自身具有产生与分泌MMP 9的能力 ,MMP 9对肿瘤的浸润、转移及间质血管新生具有促进作用。     

雌激素对去卵巢大鼠骨组织中骨保护素、破骨细胞分化因子和巨噬细胞集落刺激因子mRNA表达的影响

目的观察雌激素对去卵巢大鼠骨组织中骨保护素(OPG)、破骨细胞分化因子(ODF)和巨噬细胞集落刺激因子 (M-CSF)mRNA表达的影响,探讨雌激素预防和治疗绝经后骨质疏松(PMO)的可能细胞因子途径。方法健康3月龄雌性SD大鼠30只,随机等分为假手术组,去卵巢组和雌激素组(已烯雌酚片,0．0225 mg·kg-1·d-1,灌胃)。假手术组仅牵动卵巢,其余两组均行卵巢切除术。12周后取第3-6腰椎做骨密度检查。取股骨提总RNA。实时定量PCR法检测上述因子mRNA的表达情况。结果 (1)相对于去卵巢组,雌激素组大鼠腰椎骨密度增高,差异有统计学意义。(2)相对于去卵巢组,雌激素组大鼠骨组织OPG的mRNA表达增高,M-CSF的mRNA表达下降,ODF／OPG值下降。结论雌激素治疗绝经后骨质疏松的效应可能与其调控OPG,M-CSF的表达和ODF／OPG值有关。     

雌、孕激素对去卵巢大鼠骨代谢及肾脏1,25-(OH)2D3受体mRNA表达的影响

目的:观察雌孕激素替代治疗对去卵巢大鼠骨组织计量学参数变化及大鼠肾脏1,25-(OH)2D3受体(VDR)mRNA 表达的影响,并探讨其可能的机制.方法:25只成年SD雌性大鼠,随机分为为5组,假手术组、单纯去势组以及去势 补充雌激素组、去势 补充孕激素组、去势 补充雌、孕激素组,每组5只.喂养3个半月后处死,取出肾脏,RT-PCR方法检测VDR mRNA的表达;取胫骨上段不脱钙骨制片,应用半自动图像数字化分析仪检测各组大鼠骨组织计量学参数.结果:与假手术组、雌激素及雌孕激素组相比,去卵巢大鼠松质骨骨量明显减少,伴有骨结构变差,骨形成和骨吸收的参数值增加(P<0.05);与去卵巢组相比,孕激素组大鼠无显著改变.去卵巢组大鼠肾脏VDR mRNA的相对表达量显著低于假手术组、雌激素组及雌孕激素组(P<0.05);而与孕激素组无显著差异.结论:雌激素能有效地抑制去卵巢大鼠的骨吸收和骨形成,降低骨转换,可能与促进去卵巢大鼠肾脏VDR mRNA的表达有关.     

基质金属蛋白酶9基因在骨肉瘤中表达及意义

目的:研究骨肉瘤组织中基质金属蛋白酶(MMP)-9的表达情况,探讨它与骨肉瘤侵袭的关系和临床意义。方法:对29例骨肉瘤和19例正常骨组织分别提取RNA行RT-PCR,观察各组MMP-9 mRNA转录改变,了解MMP-9 mRNA与骨肉瘤侵袭的相关性。结果:正常骨组织中MMP-9 mRNA的表达与β-actin比值为0.39±0.12,在骨肉瘤组织中比值为0.78±0.04。两组间比较显示,骨肉瘤组织MMP-9 mRNA的表达明显升高(P<0.05)。结论:MMP-9在正常骨组织中呈低表达,而在骨肉瘤中的表达明显上调,MMP-9可能成为诊断或治疗骨肉瘤中一个有用的指标。     

尿激酶型纤溶酶原活化物和基质金属蛋白酶类在腹主动脉瘤组织中的表达

目的探讨尿激酶型纤溶酶原活化物（u-PA）和明胶酶A（MMP-2）、明胶酶B（MMP-9）在腹主动脉瘤（AAA）组织中的表达及产生的源泉.方法用u-PA和MMP-2、MMP-9单克隆抗体以免疫组织化学方法在30例AAA组织和30例正常腹主动脉组织切片上检测u-PA和MMP-2、MMMP-9抗原（蛋白）;用u-PA的寡核苷酸探针和MMP-2、MMP-9的cDNA探针以原位杂交方法,在上述AAA组织和正常腹主动脉组织的冰冻切片上探测u-PA和MMP-2、MMP-9的mRNA.结果u-PA和MMP-9主要在AAA组织中层和外膜巨噬细胞表达,在正常腹主动脉组织中无表达;MMP-2在AAA组织中主要由中层平滑肌细胞表达,在正常腹主动脉组织中无表达.结论由巨噬细胞产生的u-PA直接激活原MMP-2和原MMP-9,在AAA形成和扩张中起着关键性作用.     

Effect of 1,25-Dihydroxyvitamin D3 on Regulatory T Cells in Ovariectomized Mice

ObjectiveTo investigate thecorrelation betweenregulatory T(Treg) cellsand postmenopausal osteoporosis andthe antiosteoporotic effect of 1,25-dihydroxyvitamin D3[1,25(OH)2D3] in relation to Treg cells. ...     

去卵巢和抗骨质疏松干预后大鼠尿脱氧吡啶啉的变化

目的观察大鼠去卵巢及予以不同的干预后尿脱氧吡啶啉/肌酐比率(urinarydeoxypyridinolinecrosslink/creatinine,UDpd/Cr)的变化,了解其在骨质疏松的诊断和治疗中的应用价值。方法将40只Wister大鼠于6月龄时行去卵巢手术(OVX,n=32)和假手术(Sham,n=8)。手术后6周分别予以不同的干预如下:OVX组(Ovx,n=8)和Sham组不做干预;雌激素干预组(O+E,n=9)予以17β雌二醇20μg/(kg·d),皮下注射;英卡膦酸钠干预组(O+C,n=7)予以Cimadronate0.2mg/(kg·d),经胃肠给药。手术后14周将大鼠处死,处死前收集24h尿液和血液测定血清及尿液中生化指标;处死后留取右侧股骨标本,进行股骨外周定量CT骨密度及股骨远端凹入实验生物力学测定。结果OVX组大鼠的骨吸收指标UDpd/Cr比Sham组增加了133.3%(P<0.01),OVX组大鼠尿钙/肌酐比率亦有增加,但与Sham组相比差异无显著性(P>0.05)。雌激素和英卡膦酸钠干预组UDpd/Cr比OVX组显著降低,分别减少了54.6%和51.8%(P均<0.01),并与Sham组接近。UDpd/Cr与骨量、骨密度及骨生物力学等指标的相关分析表明,其与以上指标之间存在显著负相关。结论UDpd/Cr是敏感的骨吸收指标,在OVX和予以雌激素、二膦酸盐干预后均有显著变化,其改变与骨密度及骨骼力学特性的改变密切相关。     

Expression and Cellular Localization of Interleukin-6 mRNA in Ovariectomized Rats

Deficiency of the female hormone, caused by either menopause or removal of the ovaries, results inan accelerated bone loss by stimulating osteoclasticbone resorption over bone formation. Consequently,bone mass declines after menopause, which is themajor factor contributing to the high rate of disablingbone fracture in postmenopausal women. Indeed,about one--third of all postmenopausal women will experience at least one osteoporostic fracture duringtheir livesll]. The molecular mechanism by whi…     

绝经后妇女血清MMP-13、TIMP-1水平与骨密度的相关性研究

目的检测绝经后妇女血清基质金属蛋白酶-13（MMP-13）和组织金属蛋白酶抑制因子-1（TIMP-1）水平,探讨与骨密度（BMD）和骨代谢指标的相关性。方法选取武汉地区48～65岁绝经后女性120例,按照wHO标准将入选女性分为骨密度正常组、低骨量组和骨质疏松组,双能X线吸收法（DEXA）测定腰椎正位、股骨颈、华氏区和大粗隆的BMD,ELISA测定血清MMP-13、TIMP-1以及雌二醇（E2）、骨保护蛋白（OPG）、骨保护蛋白配体（OPGL）、I型原胶原N端前肽（P工NP）和I型胶原交联c末端肽（CTx）的水平,计算MMP-13／TIMP-1。结果与正常组比较,骨质疏松组和低骨量组患者血清MMP-13水平显著升高,MMP-13／TIMP-1升高（P〈0．05）。骨质疏松组患者血清MMP-13与骨密度、血清E2、OPGL水平存在明显负相关（P〈0．05）,与OPG、P工NP和CTX存在明显正相关（P〈0．05）。结论绝经后骨质疏松症和低骨量患者血清MMP-13和MMP-13／TIMP-1升高,可能为绝经后骨质疏松症和绝经后妇女早期骨代谢转换过程增快的表现。     

MMP-9表达在不同方法获得破骨细胞的比较研究

目的比较基质金属蛋白酶9（matrix metailoproteinase 9,MMP-9）表达在机械法获得破骨细胞（osteoclasts,OC）和诱导法获得破骨样细胞（osteoclast like cells,OLC）的差异,为体外培养OC提供实验依据．方法采用机械分离方法,从1d龄sD大鼠四肢长骨获得成熟OC;利用RANKL（100ng／mL）和M—CSF（100ng／mL）诱导RAW264．7细胞形成OLC．采用免疫细胞化学和原位杂交技术检测不同方法获得的OC和OLC MMP-9蛋白及其mRNA的表达．结果诱导法12d组的积分光密度和平均光密度均明显高于机械法3d组．结论诱导12d的OLC MMP-9及其mRNA表达的明显高于机械法3d,为OLC提供了进一步的实验数据．