免疫组织化学实验技术的体会

免疫组织化学技术是在组织化学的方法上结合免疫学的理论和技术发展起来的一门新技术.它具有较高的敏感性、精确性、特异性强和操作简单等优点.其原理是利用抗原与抗体间的特异性结合原理和特殊的标记技术,对组织和细胞内的特定抗原与抗体进行定位、定性,通过化学反应使标记物显示一定的颜色,并借助显微镜等对其颜色进行观察,以达到检测抗原物的目的.在科研和临床病理诊断应用广泛.但在实验操作过程中经常会出现脱片、假阳性或者假阴性等问题,所以,科学地规范免疫组织化学技术的操作对保证结果的准确判读,实验的重复性有着重要意义.工作质量时控制的关键是:抗原的高压修复,抗原的阴性阳性对照设置[1].现从按免疫组织化学操作流程对各步骤中的注意事项进行总结,以提高免疫组织化学化技术水平.     

汗孔汗腺瘤的组织病理学与免疫组织化学研究

汗孔汗腺瘤(PH)是一种较小汗腺汗孔瘤(EP)更少见的汗孔瘤(PN)亚型。此前未进行过有关本病的免疫组织化学研究。本研究包括6例PH患者(4例仅患PH、2例PH伴其他类型PN),15例EP患者作为对照。用苏木素-伊红(H E)、M asson-Zim m erm an银及多种免疫组化染色。显微镜下观察发现,PH不     

人体内耳冰冻切片免疫组织化学染色技术探讨

目的 通过对人内耳冰冻切片免疫组织化学染色制作过程中防脱片和抗原修复方法的探讨,寻找获得满意染色效果的最佳技术方法。 方法 取无已知耳科疾病的尸检颞骨标本,经取材、固定、脱钙、脱水、包埋后,行冰冻切片,-20 ℃冷冻保存。染色前的防脱片处理分为Ⅰ组(后固定组)、Ⅱ组(烤片组)和Ⅲ组(后固定联合烤片组)。处理后,每组再行抗原修复,分别分为A组(热修复组)、B组(酶消化组)和C组(Triton组)。应用间接荧光免疫组织化学技术检测WARP、NF200、CD68及IBA1这4种抗体在各组中的表达,激光共聚焦显微镜下观察,并对其脱片情况进行结果分析。 结果 在防脱片处理的3组中,Ⅲ组(后固定联合烤片组)的防脱片效果最佳,基本无脱片现象。抗原修复的3组中,A组和C组的抗原修复作用较为满意,B组修复作用不佳,且对组织的细胞结构产生了破坏作用。 结论 应用后固定联合烤片法防止脱片和应用热修复或Triton进行抗原修复在本研究中取得了良好的效果,适当的防脱片处理和抗原修复方法对提高内耳冰冻切片免疫组织化学染色的敏感性和制片质量起着至关重要的作用。     

医学免疫学研究中激光共聚焦显微镜的应用

激光扫描共聚焦显微镜(laser scanning confocal microscope, LSCM)在普通光学显微镜的基础上对成像原理作了改进,加装了激光扫描装置,同时利用计算机的图像处理技术,把光学成像的分辨率提高了30%~40%,是光学显微镜发展历史上的重大突破.     

DC诱导的抗肿瘤免疫及其在肾癌治疗中的研究进展

上世纪70年代初,Steinman和Cohn从小鼠淋巴器官中分离获得树突状细胞(dendritic cell,DC),并对其形态、功能作了较深入的研究,发现这类细胞是具有提呈抗原和激活T淋巴细胞作用的特殊免疫细胞.随着分子生物学技术和肿瘤免疫治疗基础理论研究的发展,利用DC免疫特性对肿瘤进行生物治疗已成为当今研究的热点[1～3].