积雪草酸与噻唑烷二酮的拼合及活性研究

糖尿病是由体内糖、蛋白质和脂肪代谢紊乱而造成的一种慢性进行性终生疾病[1].由于现有抗糖尿病药物长期应用继发性无效率较高,因此迫切需要研制新的治疗糖尿病药物. 积雪草酸,是中药积雪草的有效成分之一[2].现代研究表明,积雪草酸具有显著的降血糖活性,其作用机制包括抑制糖原磷酸化酶GP、抑制蛋白酪氨酸磷酸酶1B、抑制胰脂酶,以及阻碍脂肪酸吸收等[3-5].     

积雪草酸的成份研究及药理作用

积雪草酸为积雪草的主要成分,具备多种有效的药理作用,但受到多种因素的限制,需进一步进行研究,以探究积雪草酸所具备的作用.     

羟基积雪草酸的镇痛活性及其作用机制研究

目前对积雪草的功效成分研究主要集中在三萜皂苷类成分,对其他成分的药理活性研究较少。本研究采用小鼠醋酸扭体实验、热板法实验和福尔马林实验,对羟基积雪草酸的镇痛活性进行探究。实验分为对照组、阳性药阿司匹林组和低(10 mg/kg)、中(20 mg/kg)、高(40 mg/kg)剂量的羟基积雪草酸(MA)组。同时,还采用阿片受体阻断实验,辣椒素和谷氨酸诱导的小鼠舔爪实验,对其镇痛机制进行研究。结果显示：MA在醋酸扭体实验和福尔马林实验的Ⅱ阶段表现出显著的镇痛活性;在醋酸扭体实验和福尔马林实验中,MA的镇痛活性没有被纳洛酮明显减弱;中、高剂量的MA均能有效地减轻由辣椒素所引起的疼痛,抑制率分别为29.5%和64.4%,还能有效地缩减由谷氨酸所引起的舔爪时间,抑制率分别为30.9%和56.1%。研究结果表明：MA可通过作用于外周神经系统发挥较好的镇痛作用;该化合物产生的镇痛活性可能涉及谷氨酸能系统和TRPV1的调节,但不涉及阿片能系统。     

积雪草中积雪草酸的分离、纯化及其含量测定

目的分离纯化积雪草中积雪草酸,并建立高效液相色谱法(high-performance liquid chromatography,HPLC)测定积雪草酸的含量。方法超声提取积雪草中积雪草酸,将粗提物用石油醚-丙酮体系在硅胶柱上梯度洗脱,HPLC法测定积雪草酸的含量。色谱条件:采用Waters Symmetry C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-10 mmol.L-1乙酸铵溶液(38∶62,V/V),检测波长为210 nm,流速为1.0 mL.min-1,柱温25℃,进样体积为20μL。结果积雪草酸在浓度10～200 mg.L-1线性关系良好(R2=0.999 5),其日内、日间RSD均小于5.4%,回收率为100.5%。积雪草中积雪草酸含量为0.99 g.kg-1。经提取、分离、纯化得到积雪草酸白色粉末,纯度为79.0%。结论本实验所用分析方法简便、准确、重复性好,可用于积雪草酸的含量测定;所用提取分离及纯化积雪草酸的方法可使中药中积雪草酸得到有效富集。     

积雪草酸对小鼠骨折愈合的影响研究

目的:探讨高低2种剂量积雪草酸对小鼠骨折愈合的影响。方法:对36只12周龄C57小鼠麻醉后行右侧股骨骨折术。骨折术后实验分为3组,每组12只,分别是:空白对照组,给予生理盐水(0.2 mL)每周2次皮下注射;低剂量积雪草酸组,给予低剂量积雪草酸水溶液(5μg/g,0.2 mL)每周2次皮下注射;高剂量积雪草酸组,给予高剂量积雪草酸水溶液(15μg/g,0.2 m L)每周2次皮下注射。术后给药前和给药后8周行右下肢X线摄像。给药后8周进行取材,行微型计算机断层扫描分析、三点弯曲力学测试和脱钙骨组织形态学分析。结果:经过8周治疗后,各组均呈现不同程度愈合。X线影像结果提示,空白对照组和低剂量积雪草酸治疗组骨痂生长不完全,高剂量积雪草酸治疗组骨痂形成较完整,骨小梁密度均匀;微型计算机断层扫描分析定量结果显示,与空白对照组相比,低剂量积雪草酸治疗组骨组织体积百分数和骨密度分别升高13.0%(P=0.264)或7.6%(P=0.215),而高剂量积雪草酸组骨组织体积百分数和骨密度分别升高28.3%(P=0.020)或15.8%(P=0.009)。股骨生物力学结果提示,与空白对照组相比,积雪草酸...     

积雪草酸对糖尿病大鼠心脏及其线粒体的保护作用

目的:探讨积雪草酸(asiatic acid,AA)对糖尿病(diabetes mellitus,DM)大鼠心脏保护作用及其可能机制.方法:用65 mg/kg链脲佐菌素(streptozocin,STZ)腹腔注射建立糖尿病大鼠模型,分为DM组,10 mg/kg AA(DM+AA1)组和40 mg/kg AA(DM+AA2)组.灌胃给药8周后心脏彩超检测心脏功能,检测心肌组织及其线粒体的超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)和ATP酶(ATPase)含量或活力,检测心肌线粒体膜电位(Δψm),HE染色观察心肌形态.不同浓度AA预处理线粒体,检测其对羟自由基(*OH)引起线粒体损伤的影响.结果:DM组左室射血分数和左室缩短分数显著升高,心肌出现肌浆凝集、间质水肿等病理情况;DM组大鼠心脏组织SOD活性显著下降、MDA含量显著升高;心肌线粒体Δψm、ATPase、SOD、CAT活性显著下降.AA能够一定程度上抑制以上指标的变化.此外,AA还能阻止Fe2++VitC诱导的线粒体脂质过氧化作用.结论:AA对DM大鼠心脏损伤的改善作用可能与保护线粒体、抑制线粒体脂质过氧化,调节心脏氧化还原平衡有关.     

积雪草酸诱导大鼠肝星状细胞凋亡

目的 探讨积雪草酸诱导大鼠肝星状细胞系 HSC-T6 凋亡的作用。方法 用乳酸脱氢酶 (LDH) 法和 MTT 法检测积雪草酸对 HSC-T6 细胞的细胞毒性和增殖的影响。不同浓度积雪草酸作用外源性β-转化生长因子 (TGF-β) 激活的 HSC-T6 细胞,通过 Western blotting 方法检测 HSC-T6 细胞凋亡信号分子 Caspase-3 以及Ⅰ型胶原蛋白表达。结果 积雪草酸 (≤30 μmol/L) 对 HSC-T6 细胞无显著的细胞毒性且对细胞增殖无明显作用。积雪草酸可上调 HSC-T6 细胞 cleaved-caspase-3,同时抑制Ⅰ型胶原蛋白表达。结论 积雪草酸可通过诱导 HSC-T6 细胞凋亡达到抑制肝纤维化的作用。     

积雪草酸对肝癌细胞增殖作用的影响

目的: 研究积雪草酸(asiatic acid,AA)对人肝癌细胞株(HepG2)的抑制作用,并探讨其与线粒体之间的关系.方法: 采用MTT法检测AA对HepG2细胞增殖的影响,倒置显微镜观察细胞形态的变化;荧光探针MitoTracker检测线粒体数目;荧光探针JC-1检测线粒体膜电位;荧光探针DCFH-DA检测胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量;ATP试剂盒检测胞内ATP水平;RT-PCR和Western Blot法分析电压依赖性阴离子通道(voltage-dependent anion channel,VDAC)表达量的变化.结果: AA能够剂量依赖性抑制肿瘤细胞株的增殖,30 μmol/L AA作用细胞24 h后细胞突起消失、胞体皱缩、变圆.AA能够使HepG2细胞线粒体膜电位下降,胞内ROS含量增加,降低胞内ATP水平,50 μmol/L AA能够增加VDAC蛋白的表达量.结论: AA抑制肿瘤细胞增殖的作用与线粒体有关,线粒体VDAC参与人肝癌细胞凋亡的调控过程.     

新型糖原磷酸化酶抑制剂熊果酸衍生物的合成及其生物活性

目的:通过研究五环三萜类新型糖原磷酸化酶抑制剂的构效关系,发现新型降血糖药物。方法:以熊果酸为先导化合物,对其进行结构修饰和抑制兔肌肉糖原磷酸化酶活性的测试。结果:共合成15个熊果酸衍生物,其结构经IR、1H NMR、MS和元素分析确证;生物活性测试显示:熊果酸(IC50=9μmol/L)是一个中等强度的糖原磷酸化酶抑制剂,大部分合成衍生物都显示出一定的抑制糖原磷酸化酶的活性。结论:抑制肝糖原降解是熊果酸的降血糖作用机制之一,对熊果酸C-28位的结构改造值得进一步研究。     

积雪草酸与化疗药物联用抗肿瘤效应的初步研究

目的:研究积雪草酸(asiatic acid,AA)与化疗药物环磷酰胺(CTX),5-氟尿嘧啶(5-Fu)联用的抗肿瘤作用。方法:采用在体与离体实验相结合的方法,观察AA与5-Fu或CTX联用对肝癌细胞株HepG2增殖和Heps肝癌腹水瘤、实体瘤生长的影响。用MTT法检测联用AA和5-Fu的抗肿瘤效果。结果:10,15,20,25μmol/L AA与50,7.5,1μmol/L5-Fu联用,具有显著的抗肿瘤作用,AA不降低5-Fu对HepG2细胞增殖的抑制作用。AA和CTX联用于Heps腹水瘤小鼠,发现AA(50,100 mg/kg)和CTX(20 mg/kg)联用与单用CTX一样,能抑制腹腔积液的增生,且可延长Heps腹水瘤小鼠的寿命;AA和CTX联用于Heps实体瘤小鼠,有明显的抑瘤作用,而且AA能对抗CTX诱导的谷胱甘肽(GSH)水平的降低,可能对肝脏的抗氧化能力有一定的保护作用。结论:AA与化疗药物联用,可以减弱化疗药物的毒副作用。     

五环三萜皂苷的药理作用研究进展

五环三萜皂苷是天然产物中重要的成分之一,大多具有广泛的药理活性,临床应用前景十分诱人。随着五环三萜皂苷研究的不断深入,对其药理学作用机制的阐明和新药研发已成为此类化合物研究的热点之一。就国内外学者对五环三萜皂苷抗肿瘤、护肝、抗炎、以及机体免疫调节等药理学作用的研究进展做一综述。     

积雪草酸对糖尿病大鼠肾脏c-Jun氨基末端激酶信号通路的影响

目的:探讨积雪草酸(AA)对糖尿病(DM)大鼠肾脏c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号通路及足细胞的影响。方法:链脲佐菌素诱导糖尿病大鼠模型,将糖尿病大鼠随机分为糖尿病组(DM组)和AA干预组(AA组),并以正常组(NC组)作对照。干预8周后测各组血尿素氮(BUN)、肌酐(SCR)、尿白蛋白排泄率(UAER)、血糖、肾皮质超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平;透射电镜观察足细胞超微结构;Western blot法测肾脏p-JNK、JNK蛋白的表达;免疫组化法测足细胞nephrin蛋白的表达。结果:与NC组比较,DM组血BUN、SCR、UAER、血糖均显著增加(均P<0.01);肾皮质MDA含量显著增加(P<0.05),SOD活性显著降低(P<0.05);透射电镜示:DM组足突增宽,肾小球基底膜增厚,系膜基质增多。肾脏p-JNK、JNK表达均显著增加(均P<0.01);nephrin的表达显著降低(P<0.01)。与DM组比较,AA组血BUN、SCR、UAER、MDA含量均显著降低(均P<0.05),SOD活性显著增加(P<0.05);足细胞超微结构明显改善;肾脏p-JNK、JNK表达均显著降低(均P...     

番红花化学成分及生物活性研究进展

着重对番红花柱头所含的化学成分及其代谢途径进行了综述。根据化合物的结构特点、理化性质及代谢途径,番红花中的化学成分可归纳为水溶性色素、脂溶性色素、挥发油及挥发油前体苷类几种类型,研究表明这些结构多样的成分均是由脂溶性的玉米黄质降解产生。此外,还对国内外有关番红花花被以及侧芽等不同部位化学成分的研究进展,以及番红花提取物及番红花苷成分在心脑血管、肝脏、肾脏、免疫系统、肿瘤以及抗氧化方面的广泛药理活性进行了全面综述,为全面开发利用番红花资源提供参考。     

咖啡酸衍生物的生物活性与化学结构的改造

咖啡酸是一种常见酚酸,广泛分布在水果、谷物和中药植物当中.咖啡酸及其衍生物具有抗氧化、抗菌、抗肿瘤、保肝等多方面的生物活性.近年来,咖啡酸衍生物的生物活性已引起人们广泛关注和研究,不断有新的生物活性被发现.由于其结构的多样性,人们进行了以咖啡酸衍生物为前体的化学合成的探索,并取得了一定成果.本文旨在结合我们课题组对咖啡...     

重组溶葡萄球菌蛋白的原核表达、纯化及生物学活性研究

目的 原核表达重组溶葡萄球菌蛋白并检测其杀菌效力.方法 在成熟溶葡萄球菌蛋白编码序列的基础上,设计重组序列,采用PCR技术扩增,克隆至大肠埃希菌表达载体,IPTG诱导表达,用微量稀释法研究其对金黄色葡萄球菌(简称金葡菌)的杀菌效果.结果 目的DNA片段克隆至表达载体后经测序鉴定正确,在大肠埃希菌中获得高效表达,经免疫印迹鉴定重组蛋白表达正确.重组溶葡萄球菌蛋白对金葡菌的最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)和最小杀菌浓度(minimum bactericidal concentration,MBC)均小于传统抗生素.结论 成功表达重组溶葡萄球菌蛋白,其对金葡菌有强大的杀菌效力.     

甘草酸及其苷元甘草次酸的盐皮质激素样作用研究进展

甘草酸在体内水解成甘草次酸,甘草次酸的化学结构类似于甾体激素,因此甘草酸是甘草次酸的前体药物。甘草酸和甘草次酸是甾体激素代谢失活酶（尤其是Ⅱ型11β-羟化甾体脱氢酶）抑制剂,可提高内源性和外源性皮质激素的活性。甘草酸和甘草次酸又可作为配体,与皮质激素受体结合呈现出糖皮质激素、盐皮质激素样作用。因此长期使用甘草或甘草酸类药物产生的盐皮质激素样作用可用于艾迪生病的治疗,但用于其他疾病治疗时,盐皮质激素样作用就有可能成为不良反应（主要表现为假性醛固酮增多症或高血压）,约占甘草和甘草酸类药物不良反应的50%以上;并对其引起假性醛固酮增多症或高血压的机制进行了讨论。     

甘草酸及其衍生物的抗炎和抗变态反应研究进展

甘草酸是甘草的有效成分,其选择性诱导成熟的T淋巴细胞凋亡,调节淋巴细胞数量和功能,纠正外周血T淋巴细胞亚群的紊乱,具有抗炎、抗变态反应的药理作用;其机制为抑制抗体（IgG、IgE）生成,多靶点地抑制补体系统,抑制炎性细胞因子和炎症介质生成,以及对抗炎症介质的致炎作用。综述了近年来国内外对甘草酸及其衍生物抗炎、抗变态反应的药理作用及其机制的研究进展。