紫杉醇耐药与β微管蛋白Ⅲ研究进展

 紫杉醇依赖于促进微管聚合,抑制微管解聚,诱导肿瘤细胞凋亡,但肿瘤细胞对紫杉醇的耐药性是限制其临床应用的重要因素。一些基础、临床研究均证实β微管蛋白Ⅲ高表达与紫杉醇耐药、预后不良密切相关。     

Survivin、BRCA1及class Ⅲ β-tubulin在非小细胞肺癌组织中的表达及与紫杉醇耐药的关系

[目的]探讨Survivin、BRCA1及class Ⅲ β-tubulin蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及与紫杉醇耐药的关系.[方法]应用免疫组织化学法检测64例NSCLC患者Survivin、BRCA1及class Ⅲ β-tubulin蛋白的表达;给予紫杉醇为基础的化疗方案,分析上述蛋白表达与紫杉醇化疗敏感性的关系.[结果]Survivin阳性与class Ⅲβ-tubulin阳性患者对紫杉醇方案治疗的有效率(RR)分别低于Survivin阴性患者(27.8％vs 71.4％,P＜0.05)与class Ⅲ β-tubulin阴性患者(23.5％ vs 73.3％,P＜O.01);而BRCA1阳性患者对紫杉醇方案治疗的RR高于BRCA1阴性患者(60.0％ vs 31.0％,P＜O.05).多因素分析表明class Ⅲ β-tubulin是NSCLC紫杉醇治疗无进展生存期(PFS)的独立影响因素(x2=4.852,P=0.027),分期是与总生存期(OS)相关的独立影响因素(x2=4.105,P=0.035).[结论]NSCLC患者Survivin、class Ⅲ β-tubulin蛋白表达阳性及BRCA1蛋白表达阴性预示对紫杉醇治疗相对不敏感.     

LRP及β-Tubulin在非小细胞肺癌组织中表达及其与肿瘤耐药的关系

目的探讨肺耐药蛋白(LRP)及β-微管蛋白(β-Tubulin)与肿瘤多药耐药的关系,为非小细胞肺癌(NSCLC)患者化疗方案的选择和改进提供理论依据。方法应用免疫组织化学技术(SP法),检测NSCLC组织中LRP及β-Tubulin表达情况。结果 LRP在NSCLC中阳性表达率为73.33%,其中鳞癌表达率(54.55%)低于腺癌(76.92%),但两者之间无显著性差异;LRP表达与肺癌分化程度有明显关系(P<0.05),高、中、低分化表达率分别为53.85%、66.67%、91.30%;分化程度越低,LRP表达越强;βⅢ-tubulin在NSCLC中阳性表达率为76.67%。LRP及βⅢ-tubulin阳性表达与患者性别、是否吸烟、病理类型、临床分期均无明显关系;LRP与βⅢ-tubulin表达间呈明显正相关关系(γ=0.293,P<0.05)。结论 LRP及βⅢ-Tubulin在NSCLC组织中呈高表达,LRP表达与肺癌分化程度有关。LRP及βⅢ-Tubulin表达与患者性别、是否吸烟、病理类型、临床分期均无明显关系;LRP与βⅢ-tubulin表达呈正相关,耐药相关蛋白表达规律可能有助于NSCLC化疗...     

非小细胞肺癌组织中β-tubulinⅢ的表达及与含紫杉方案化疗敏感性的关系

目的分析非小细胞肺癌(NSCLC)组织中β微管蛋白Ⅲ(β-tubulinⅢ)的表达,及其对肿瘤预后和辅助化疗方案的预测作用。方法应用免疫组化二步法检测123例NSCLC组织中β-tubulinⅢ的表达情况,并对其中行肺癌根治术后用含紫杉类辅助化疗的32例预后进行分析。设良性组(15例炎性假瘤)做对照。结果 NSCLC组织中β-tubulinⅢ表达阳性率为62.6%,显著高于良性对照组(P0.05)。β-tubulinⅢ在低分化和Ⅲ~Ⅳ期患者中表达明显(P0.05)。32例术后化疗患者中,β-tubulinⅢ表达阳性者的生存率较全阴性者低(P0.05)。结论β-tubulinⅢ表达阳性预示着NSCLC的恶性程度较高,对含紫杉类化疗药物的敏感性较差,术后预后较差。     

ERCC1β-tubulinⅢ与ⅢA-N2期非小细胞肺癌辅助化疗的临床研究

目的:探讨ERCC1、β-tubulin Ⅲ在ⅢA-N2期非小细胞肺癌中的表达与辅助化疗药物铂类、紫杉类的相关性,为非小细胞肺癌个体化辅助化疗提供依据.方法:应用免疫组化方法检测ERCC1、β-tubulin Ⅲ在89例手术完全切除并行含铂辅助化疗的ⅢA～N2期非小细胞肺癌中的表达.应用统计学软件SPSS 16.0行数据处理,回顾性分析ERCC1、β-tubulin Ⅲ的表达与患者预后的关系.结果:本组ⅢA～N2期非小细胞肺癌中ERCC1、β-tubulin Ⅲ阳性表达率分别为46.1%,53.9%.ERCC1表达阴性者在含铂化疗组有更长的无瘤生存期(P=0.000)和总生存期(P=0.000);β-tubulin Ⅲ表达阴性者在含紫杉类化疗药物组有更长的无瘤生存期(P=0.003)和总生存期(P=0.004).ERCC1和β-tubulin Ⅲ表达均阴性者在铂类联合紫杉类化疗组有更长的无瘤生存期(P=0.000)和总生存期(P=0.001).结论:ERCC1表达阳性、组织病理分化低、全肺切除是影响ⅢA～N2期非小细胞肺癌预后的危险因素.ERCC1的表达与铂类化疗相关,β-tubulin Ⅲ的表达与紫杉类化疗相关,表达阴性者预后较好;ERCC1、β-tubulin Ⅲ表达均阴性者在铂类联合紫杉类化疗组中预后最好.     

卵巢上皮癌组织MyD88和β-Ⅲ微管蛋白表达生物学意义分析

目的:探讨髓样分化因子88(MyD88)和β-Ⅲ微管蛋白(β-tubulinⅢ)在卵巢上皮癌组织中的表达及其与临床病理参数的关系。方法:采用免疫组织化学SP法检测50例卵巢上皮癌(化疗敏感组和耐药组各25例)和15例正常卵巢组织中MyD88和β-Ⅲ微管蛋白的表达。结果:50例卵巢癌组织中MyD88和β-Ⅲ微管蛋白的阳性表达率分别为36.0%和60.0%,明显高于正常对照组的0和13.3%,差异有统计学意义,P<0.05。MyD88和β-Ⅲ微管蛋白在耐药组中的阳性率分别为52.0%和80.0%,明显高于敏感组的20.0%和40.0%,差异有统计学意义,P<0.05。MyD88与组织分化程度和FIGO分期有关,r分别为-0.302和-0.330,P<0.05。β-Ⅲ微管蛋白与组织分化程度及有无淋巴结转移有关,r分别为-0.323和0.323,P<0.05。MyD88和β-Ⅲ微管蛋白表达呈正相关性,r=0.357,P<0.05。结论:MyD88和β-Ⅲ微管蛋白与卵巢上皮癌化疗耐药密切相关,可预测卵巢上皮癌患者的化疗敏感性。     

紫杉类药物在乳腺癌治疗中的耐药机制

目前研究提示紫杉类耐药可能与多药耐药相关蛋白(MRP)表达增高、Ⅲβ-微管过表达、微管相关蛋白tau的过表达有关,而与HER2的表达成负相关.针对这些耐药靶点可逆转或者延缓紫杉类药物耐药的发生,为临床上更好地使用紫杉类药物提供一定参考.     

Ⅲ型β-微管蛋白和多药耐药基因1蛋白表达与非小细胞肺癌生物学特性的相关性

目的 探讨Ⅲ型β-微管蛋白(Ⅲβ-tubulin)和多药耐药基因1(MDR1)蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达特征及临床意义.方法 应用免疫组化法检测158例NSCLC组织中Ⅲβ-tubulin和MDR1蛋白的表达,应用Western blot检测新鲜NSCLC组织及相应癌旁正常组织中Ⅲβ-tubulin和MDR1蛋白的表达,并分析其表达与NSCLC生物学特性的关系.结果 Ⅲβ-tubulin和MDR1蛋白在NSCLC中的阳性表达率分别为65.2%和51.3%.Western blot结果显示,Ⅲβ-tubulin和MDR1蛋白在NSCLC组织中的表达明显高于癌旁正常肺组织(P＜0.01).Ⅲβ-tubulin在中、高分化腺癌中的表达明显低于低分化腺癌(P＜0.01),肺腺癌中MDR1蛋白的表达明显高于鳞癌和大细胞未分化癌(P＜0.01).Ⅲβ-tubulin在Ⅲ～Ⅳ期NSCLC中的表达高于Ⅰ～Ⅱ期(P＜0.05),而MDR1蛋白的表达差异无统计学意义(P＞0.05).Ⅲβ-tubulin和MDR1蛋白阳性表达与患者年龄、性别、肿瘤大小及淋巴结状态无明显相关性(P＞0.05).结论 Ⅲβ-tubulin和MDR1蛋白在NSCLC的发生、发展中有一定作用,可作为判断NSCLC预后的重要指标.     

miRNA对肺癌化疗耐药调控研究进展

目的:总结miRNA对肺癌耐药调控的研究状况,并探讨其在预测肺癌对药物敏感性和耐药性中的作用。方法:应用PubMed及CNKI期刊全文数据库检索系统,以"miRNA和肺癌"等为关键词,检索2007-01-2013-01的相关文献,共检索到英文文献732篇,中文文献88篇。纳入标准:1)肺癌耐药相关机制;2)miRNA在肺癌耐药中的作用;3)miRNA预测肺癌细胞的药物敏感性。根据纳入标准,符合分析的文献33篇。结果:肺癌耐药机制包括药物吸收降低或排出增多、药物靶点改变、细胞修复功能增强及细胞凋亡的减弱等,涉及药物作用各个环节关键基因突变可能导致耐药发生。而miRNA为一类高度保守的非编码RNAs,通过对上述各环节关键基因表达的调控进而调节肺癌细胞对化疗药物的敏感性。在肺癌化疗耐药的患者中,肺癌细胞miRNA突变或表达异常,导致miRNA对靶基因如药物转运相关基因、细胞解毒功能相关基因、细胞损伤后自我修复能力相关基因、细胞凋亡相关基因及肿瘤上皮间质化相关基因等表达的异常调控,致使肺癌细胞化疗耐药产生。同时,根据这些miRNA表达情况可预测肺癌患者对药物的反应。结论:miRNA对肺癌细胞耐药调控发挥着重要作用,从而为肺癌化疗耐药预测提供了新的思路和手段。     

胃癌患者应用紫杉醇类药物的疗效与β-微管蛋白-Ⅲ表达的相关性

 目的　观察肿瘤组织β-微管蛋白-Ⅲ表达与晚期胃癌患者采用含紫杉醇方案化疗疗效的相关性。方法　应用免疫组织化学检测晚期胃癌肿瘤组织中β-微管蛋白-Ⅲ表达。依据β-微管蛋白-Ⅲ表达情况分为低表达组（30例）和高表达组（30例）。入选者均行紫杉醇联合替吉奥方案化疗,每2个周期评价1次疗效。随访并记录总生存期及肿瘤进展时间。结果　低表达组与高表达组患者客观反应率（RR）分别为 53.3 %（16／30）、36.7 %（11／30）;总生存期（OS）分别为364、345 d;肿瘤进展时间（TTP）分别为198、146 d;低表达组RR率及TTP均优于高表达组,差异有统计学意义（P＜0.05）;两组OS差异无统计学意义（P＞0.05）。结论　β-微管蛋白-Ⅲ可作为晚期胃癌含紫杉醇方案化疗疗效的预测指标;β-微管蛋白-Ⅲ低表达的胃癌患者,可能是含紫杉醇化疗方案的优势人群。     

紫杉醇耐药细胞与敏感细胞分泌蛋白差异凝胶电泳分析

背景与目的 紫杉醇是用于肺癌临床一线治疗的作用于微管蛋白的化疗药物,而耐药是影响其疗效的关键因素.本研究应用蛋白组学技术整体比较紫杉醇耐药细胞与敏感细胞分泌蛋白表达谱,以期发现肺癌紫杉醇耐药相关分泌蛋白标志物,为临床选择有针对性的化疗药物提供依据.方法 收集A549亲代及耐药细胞培养液中的蛋白,应用差异凝胶电泳(DIGE)进行分离,Decyder 6.5软件分析后获得的差异蛋白点通过基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)进行鉴定.结果 应用DIGE进行分离后,成功获得了蛋白质组分辨率高、重复性好的双向凝胶电泳图谱,Decyder 6.5软件分析获得差异>2倍以上的蛋白质点共有76个,经质谱鉴定了19种蛋白,鉴定的蛋白涉及代谢酶类、细胞外基质降解酶类、粘附分子、细胞因子和信号转导相关蛋白质.结论 本研究首次应用双向电泳技术整体展示了紫杉醇耐药细胞株及敏感细胞株的分泌蛋白表达谱,并分析、鉴定、筛选出与紫杉醇耐药相关的差异分泌蛋白.该研究为非小细胞肺癌血清耐药标志物的筛选提供了新的方法和候选分子.     

晚期和局部晚期NSCLC患者βⅢ-tubulin和p53表达与紫杉醇敏感性的关系

目的 观察晚期和局部晚期NSCLC患者βⅢ-tubulin和p53表达情况与含紫杉醇化疗方案敏感性关系.方法 北京协和医院胸外科2009年11月至2010年11月收治的33例病理学诊断的晚期和局部晚期NSCLC患者,在化疗前对肿瘤组织采用免疫组化法检测βⅢ-tubulin和p53表达情况,对所有患者选用紫杉醇+铂类或...     

晚期胃癌中β-微管蛋白Ⅲ表达与多西紫杉醇疗效关系研究

目的 对晚期胃癌中β-微管蛋白Ⅲ表达与多西紫杉醇疗效关系进行研究.方法 选取以多西紫杉醇方案为主要治疗方案的200例晚期胃癌患者为研究对象,检测其肿瘤组织中β-微管蛋白Ⅲ的表达情况,并对β-微管蛋白Ⅲ表达水平与患者的不良反应以及疗效进行分析.结果 200例晚期胃癌患者中,β-微管蛋白Ⅲ阳性患者的有效率低于β-微管蛋白Ⅲ阴性的患者,差异有统计学意义(P﹤0.05).在治疗中消化道反应和骨髓抑制是最常见的不良反应,在给予患者对症治疗后,其耐受性良好,两组患者不良反应发生情况比较,差异无统计学意义(P﹥0.05).结论 β-微管蛋白Ⅲ表达情况可以作为以多西紫杉醇为主要治疗方案治疗晚期胃癌的疗效预测指标之一,但此结论还需更大样本临床研究证实.     

荧光定量聚合酶链反应检测癌组织β-微管蛋白Ⅲ基因表达方法学的建立

 目的 建立荧光定量聚合酶链反应RT-PCR检测癌组织β－微管蛋白Ⅲ（β-tubulinⅢ）表达的方法。方法 提取组织标本的总RNA，反转录合成cDNA，PCR扩增产物连接到T载体，筛选重组体，将重组体再培养纯化，制备β-tubulinⅢ和看家基因β-actin的标准品，测序验证读码框的正确性。结果 以Ct值为纵坐标，5 ~ 7个不同浓度的β-tubulinⅢ和β-actin标准品的浓度对数值为横坐标制作标准曲线，线性相关系数均为0.99。结论 构建的两个基因β- tubulinⅢ和β-actin的标准品可以得到良好的标准曲线，且标准曲线显示好的线性关系。该法特异性好，灵敏度高，重复性好，可作为临床标准化的检测方法。     

肺癌常用化疗药物相关的抗药标志研究进展

化疗是肺癌治疗的主要手段,耐药是影响化疗疗效的重要因素。研究表明一些基因的突变或表达水平增高及多态性使肿瘤对药物产生耐药是影响药效的一个重要因素。以下对肺癌常用化疗药物铂类、紫杉类、吉西他宾抗药相关的分子标志如XPD,β-tubulin,RRM1等近年来的研究进展进行综述。     

非小细胞肺癌分子预测标志物

药物基因组学和肿瘤分子生物学研究提示非小细胞肺癌(NSCLC)治疗疗效差异与肿瘤分子标志物关系密切;现有研究认为切除修复交叉互补基因1(ERCC1)、核苷酸还原酶(RRM1)、胸苷合成酶(TS)、β-微管蛋白Ⅲ(β-tubulin Ⅲ)、DNA错配修复基因(hMLH1、hMSH2)、乳腺癌易感基因(BRCA1)、K-r...     

β-tubulin-Ⅲ基因表达与Ⅱ期非小细胞肺癌患者化疗敏感度的关系

目的探讨Ⅱ期非小细胞肺癌(NSCLC)中Ⅲ型β微管蛋白(β-tubulin-Ⅲ)mRNA表达与诺维本+顺铂(NP)方案化疗敏感度的关系。方法单基因定量法检测已手术Ⅱ期NSCLC患者肿瘤组织中β-tubulin-ⅢmRNA表达,所有患者行NP方案化疗,并随访患者的无瘤生存时间(DFS)和总体生存率(OS),统计学分析β-tubulin-ⅢmRNA表达水平与患者DFS和OS的关系。结果 73例患者的OS与β-tubulin-Ⅲ的表达有关(P<0.01),患者的DFS与β-tubulin-Ⅲ的表达及淋巴结转移情况有关(P<0.01)。β-tubulin-Ⅲ低表达者的OS、DFS均高于β-tubulin-Ⅲ高表达者(P<0.05)。结论Ⅱ期NSCLC患者肿瘤组织中β-tubulin-Ⅲ表达水平可能是预测患者预后及化疗敏感度的一个指标,为选择合适化疗药物提供参考。     

β-tubulinⅢ在非小细胞肺癌中的研究进展

肺癌的发病率在常见肿瘤中占首位,非小细胞肺癌已占到肺癌80%左右,且发病率仍在增长。绝大部分患者确诊非小细胞肺癌时已失去手术治疗的最佳时机,因此化疗是治疗晚期非小细胞肺癌的主要手段。经验性化疗方案或不规范的化疗易导致患者耐药性的产生,以至化疗客观有效率低。随着新型抗肿瘤药物问世及分子生物学/基因遗传学的快速发展,已发现β-tubulinⅢ基因的表达水平与非小细胞肺癌化疗及预后密切相关,将可能成为指导个体化治疗、预测预后的重要生物标志物。根据β-tubulinⅢ基因表达水平、药物敏感情况及以β-tubulinⅢ为介导调控其上下游基因等针对个体化的基因治疗、生物免疫治疗、靶向治疗将是肿瘤学研究和临床肿瘤药物治疗的趋势。     

应用长春新碱分离与鉴定U87细胞系中的胶质瘤干细胞

背景与目的:研究表明,肿瘤干细胞具有化疗抵抗性.本研究拟利用肿瘤干细胞对化疗药物耐受的特性,在培养基中添加长春新碱的方法从人胶质瘤细胞系U87中分离鉴定肿瘤干细胞.方法:U87细胞于含血清培养基中贴壁后,换用含有5 ng/ml长春新碱的神经干细胞培养基培养,获得第一代肿瘤细胞球后,将单细胞接种于神经干细胞培养基中,获得第二代肿瘤细胞球.免疫荧光检测巢蛋白(nestin)、胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)、β-微管蛋白Ⅲ(β-tubulin Ⅲ)、髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)在第二代肿瘤细胞球及其分化细胞中的表达.结果:成功地获得了第一代肿瘤细胞球以及来源于单细胞的第二代肿瘤细胞球;细胞间紧密相贴,表面较光滑;神经干细胞标志物nestin在第二代肿瘤细胞球中呈阳性表达;第二代肿瘤细胞球分化细胞中可检测到nestin、GFAP、β-tubulin Ⅲ、MBP的表达.结论:U87细胞系中存在具有自我更新及多向分化能力的胶质瘤干细胞,采用神经干细胞培养基中添加长春新碱的方法能简单有效地从胶质瘤细胞系中分离培养出胶质瘤干细胞.     

恶性胸腹水中肿瘤细胞BRCA1和β-tubulin Ⅲ的表达与多西紫杉醇药物敏感性的关系

目的:疗效相关分子生物标记的探索是实现个体化治疗的关键所在。由于肿瘤原发灶与转移灶肿瘤细胞在分子水平的显著差异及转移性恶性肿瘤的难治性,本研究旨在探索肿瘤特殊转移灶即恶性胸/腹水中肿瘤细胞的BRCA1和β-tubulinⅢmRNA表达水平与多西紫杉醇(TXT)药物敏感性的关系。方法:前瞻性地收集41例进展期肿瘤的恶性胸水/腹水,分离肿瘤细胞后ATP-TCA方法检测TXT敏感性;实时荧光定量RT-PCR检测的BRCA1和β-tubulinⅢmRNA表达。结果:在非小细胞肺癌(NSCLC)组(P=0.008)和胃癌组(P=0.032)的恶性胸/腹腔积液中肿瘤细胞的BRCA1 mRNA表达与TXT体外药物敏感正相关。β-tubulinⅢmRNA表达仅在NSCLC患者的恶性胸腔积液中肿瘤细胞与TXT药物敏感负相关(P=0.022)。联合检测BRCA1和β-tubulinⅢ对于TXT药物敏感性的预测没有交互作用(P>0.05)。结论:在NSCLC和/或胃癌患者的恶性胸/腹腔积液中,BRCA1和β-tubulinⅢ表达与TXT敏感性相关且前者可能比后者更有意义。对于伴有恶性积液的进展期NSCLC和/或胃癌患者,恶性积液有可能成为一合适的标本进行分子生物标记的检测。