骨桥蛋白及白细胞介素-18在寻常型银屑病患者血清中的表达及临床意义

目的:检测寻常型银屑病患者外周血骨桥蛋白(OPN)、白细胞介素-18(IL-18)的表达水平,并探讨其临床意义。方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测30例寻常型银屑病患者(其中进行期18例,静止期12例)及30例对正常照者血清OPN、IL-18的表达水平。结果:寻常型银屑病组患者血清骨桥蛋白和IL-18的表达水平明显高于正常对照组(P<0.001);进行期银屑病患者骨桥蛋白和IL-18的表达水平明显也高于静止期(P<0.001),且骨桥蛋白、IL-18的表达水平和银屑病的活动性均呈显著正相关(P均<0.001);骨桥蛋白和IL-18的表达水平也呈显著正相关(P<0.001)。结论:OPN与IL-18在寻常型银屑病中的表达上调提示它们可能参与了寻常型银屑病的发病过程,且二者在该病的发生中起着协同作用。联合检测血清OPN、IL-18可以作为诊断银屑病活动性的有效的指标之一。     

痤疮患者外周血CD14~＋单核细胞TLR2的表达及其与IL-8和TNF-α的相关性

目的：研究痤疮患者外周血CD14＋单核细胞Toll样受体2（Toll-like receptor 2,TLR2）的表达及其与IL-8、TNF-α浓度的相关性,初步探讨TLR2在痤疮发病中的作用。方法：应用流式细胞术检测50例痤疮患者和20例正常人外周血CD14＋单核细胞TLR2的表达,并采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清IL-8、TNF-α的浓度。结果：痤疮患者外周血中单核细胞TLR2的表达、血清IL-8、TNF-α浓度较正常人对照组明显增高（P〈0.01）,TLR2的表达与血清IL-8、TNF-α浓度变化呈正相关（P〈0.01）。结论：TLR2及其介导的天然免疫应答在痤疮发病机制中起重要作用,其机制可能是通过上调TLR2的表达促使炎症因子产生和分泌而介导痤疮的发病。     

TLR4表达在大鼠小肠缺血再灌注损伤中的改变及意义

目的:观察大鼠小肠缺血再灌注（I/R）损伤后小肠组织TLR4的表达及其与炎症因子水平变化的关系。方法:雄性SD大鼠90只,随机分为正常对照（N）组、假手术（S）组、小肠部分缺血/再灌注损伤（肠I/R）组。分别于缺血再灌注后6，12，24,48 h检测各组小肠组织TLR4mRNA的表达，门静脉血清中TNF-α和IL-6水平，并进行相关性分析。用免疫组化法观察TLR4在小肠组织中的表达和分布。结果:（1）肠I/R组TLR4mRNA表达上调,于I/R12 h最强,阳性细胞主要是小肠黏膜细胞;（2）I/R组门静脉血清中IL-6及TNF-α浓度与N组相比各时点均明显增高（P<0.01）;在I/R24 h后达到峰值，与S组比较差异亦有显著性 (P< 0.01);（3） 肠I/R组门静脉IL-6及TNF-α浓度的增高与小肠TLR4mRNA表达的上调呈正相关（r=0.752，r=0.812;均P<0.01）;（4）免疫组化法显示小肠黏膜细胞表面TLR4表达明显增强。结论:大鼠小肠I/R损伤后,小肠组织TLR4的表达上调可能是导致肠黏膜免疫屏障功能下降的机制之一，也可能是系统性炎症反应的始动环节。     

HLA-DR、HLA-DQ分子在瘢痕疙瘩患者外周血单个核细胞中的变化

目的探讨瘢痕疙瘩患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)HLA-DR和HLA-DQ分子的含量及其基因型的变化.方法采用免疫细胞化学方法检测10例瘢痕疙瘩患者、10例扁平瘢痕患者及10例正常人外周血单个核怂细胞中HLA-DR、HLA-DQ分子的含量;应用聚合酶链反应-序列特异性引物(polymerase chain reaction-sequence specific primers,PCR-SSP)方法检测60例瘢痕疙瘩患者和110例正常人外周血单个核细胞HLA-DR和HLA-DQ的基因位点.结果①瘢痕疙瘩患者外周血单个核细胞HLA-DR、HLA-DQ分子含量的变化瘢痕疙瘩组HLA-DR 、HLA-DQ 细胞的积分光密度(813.16±62.77,420.12±94.25)高于扁平瘢痕组(636.22±1 33.95,302.77±89.77)和正常人组(597.88±166.36,308.57±44.05)(P＜0.01);②瘢痕疙瘩患者外周血单个核细胞中HLA-DR和HLA-DQ基因位点的变化瘢痕疙瘩组HLA-DR14和HLA-DQ5位点的抗原频率(0.16,0.28)明显高于对照组(0.06,0.15)(P＜0.05),HLA-DR17和HLA-DQ8位点的抗原频率(0.02,0.03)明显低于对照组(0.13,0.15)(P＜0.05).结论HLA-DR和HLA-DQ分子含量在瘢痕疙瘩患者外周血单个核细胞中增高提示瘢痕疙瘩患者机体可能处于高免疫应答状态;基因型检测结果则提示HLA-DR14、HLA-DQ5可能是瘢痕疙瘩的易感基因,HLA-DR17、HLA-DQ8可能是抵抗基因.     

狼疮肾炎患者白细胞介素13的血浆水平和基因表达

目的探讨狼疮肾炎(LN)患者外周血单个核细胞(PBMC)中白细胞介素13(IL-13)mRNA表达及IL-13血浆水平变化及其意义.方法选择10名正常对照者和16名LN患者.采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)技术,对LN患者PBMCIL-13mRNA表达量进行分析.同时应用IL-13特异的酶联免疫吸附法(ELISA)测定IL-13血浆水平.结果LN患者PBMC中IL-13mRNA表达量及IL-13血浆水平均较正常对照组增高(IL-13mRNA表达量为1.99±0.29比0.68±0.15,P＜0.001IL-13血浆水平为68.8±14.65比25.92±7.60,P＜0.001).IL-13血浆水平与抗-dsDNA抗体滴度、血清C3浓度、血浆γ球蛋白水平、肾小球活动性指数(GAI)及肾小管间质活动性指数(IAI)均呈一定的等级相关关系(rs分别为0.757、-0.809、0.652、0.854和0.846,P均＜0.01).结论IL-13可能参与LN发病机制.IL-13基因表达及蛋白质分泌水平增高在LN活动性病变中起一定的作用.     

外周血单个核细胞TLR4的表达在慢性乙型重型肝炎患者中的意义

目的 检测慢性重型肝炎患者外周血单个核细胞(PBMC)中TLR4蛋白及其mRNA的表达情况,探讨其在慢性重型肝炎发病机制中的作用.方法 采用流式细胞学技术及RT-PCR分别检测慢性重型肝炎患者、慢性乙型肝炎患者及健康对照者PBMC TLR4蛋白及其mRNA的表达,同时检测患者肝功能、血常规及HBV DNA水平.结果 重型肝炎患者外周血PBMC中TLR4蛋白及其mRNA的表达均明显高于慢性乙型肝炎组及健康对照组.TLR4表达水平与患者ALT、AST、TBil及中性粒细胞百分比之间呈正相关性.结论 慢性重型肝炎患者外周血TLR4表达与患者的肝脏损害程度密切相关,监测TLR4值的动态变化有助于指导治疗及预后判断.     

LFA-1共刺激诱导狼疮性肾炎外周血单个核细胞IL-1O表达的研究

目的:探讨淋巴细胞功能相关抗原-1(LFA-1)对活动性狼疮肾炎(LN)外周血单个核细胞(PBMC)白介素10(IL-10)的调节作用.方法:利用半定量RT-PCR技术观察LFA-1共刺激对活动性LN患者PBMC IL-10 mRNA表达的影响.结果:单独抗CD3抗体(30 ng/m1)能诱导LN患者PBMC IL 10 mRNA轻微表达(0.43+0.03vs 0.55±0.44,P＜0.05)而在抗CD3抗体(30 ng/m1)存在的情况下,抗LFA-1抗体(2μg/m1,相当于LFA-1配体)共刺激时明显增加了PBMC IL 10 mRNA表达(1.31±0.08vs 0.55+0.04,P＜0.01).LFA-1中和抗体明显抑制了这种共刺激诱导的IL-10 mRNA表达(1.31±0.08vs0.64±0.03,P＜0.01).抗LFA-1抗体单独刺激时并不引起IL-10 mRNA表达变化(P＞0.05).结论:LFA-1作为共刺激分子诱导IL-10 mRNA表达可能是其参与LN发病的机制之一.     

尿毒症血清对外周血单个核细胞IL-18表达及分泌水平的影响

目的 :探讨尿毒症血清对正常人和尿毒症患者外周血单个核细胞 (PBMCs)IL - 18表达及分泌水平的影响。方法 :用Ficoll密度梯度离心分离 17例非透析慢性肾衰竭患者 (尿毒症期 )和 16例正常人PBMCs,分别加入尿毒症血清或正常人血清共同培养 72h ,用酶联免疫吸附分析 (ELISA)法检测血清和培养上清IL - 18水平 ,反转录多聚酶链反应 (RT -PCR)检测PBMCsIL - 18mRNA的表达。结果 :(1)尿毒症血清IL - 18水平较正常人血清明显升高 ,分别是 (5 35 .6 2± 2 6 4 .6 9) pg/mL和 (90 .4 1± 96 .6 3)pg/mL ,有统计学差异 (P <0 .0 0 1)。 (2 )与正常人血清相比 ,尿毒症患者及正常人PBMCs经尿毒症血清刺激后其表达和分泌IL - 18的水平均明显增高 ,有统计学差异 (P <0 .0 5 )。(3)在同一种血清中培养 ,尿毒症患者PBMCs表达和分泌IL - 18的水平较正常人PBMCs高 ,但无统计学差异 (P >0 .0 5 )。结论 :尿毒症患者PBMCs是预活化的 ,尿毒症血清可刺激PBMCs使IL - 18产生增加。     

Th17细胞及相关因子IL-17与绝经后骨质疏松的相关性研究

目的观察辅助性T细胞17(T helper cell 17,Th17)及及相关因子白细胞介素17(interleukin 17,IL17)在绝经后骨质疏松(Postmenopausal osteoporosis,PMOP)患者外周血及血清中的表达水平,并探讨IL-17细胞与绝经后骨质疏松的发病的关系。方法选取2011年7月~2014年7月在我院确诊的绝经后骨质疏松患者(60例)为研究组,选取同期来我院体检的绝经后骨量正常人群为对照组(60例),采用流式细胞术检测绝经后骨质疏松患者及骨质正常人外周血中Th17细胞水平,采用ELISA法检测两组人群外周血中IL-17、IL-6及TGF-β的蛋白水平;采用RT-PCR法检测两组人群外周血中转录因子T孤独核受体(retinoid-related orphan receptor gamma t,RORγT)的mRNA水平。通过Pearson相关分析绝经后骨质疏松患者中IL-17水平与骨密度(bone mineral density,BMD)以及血清钙可能存在的关系。结果绝经后骨质疏松患者外周血中Th17细胞比例为(2.17±0.41)%,显著高于健康对照组人群的(0.61±0.45)%,差异有统计学意义(P0.001);绝经后骨质疏松患者血清IL-17水平(31.51±10.09)pg/ml,显著高于对照组人群的(16.61±9.93)pg/ml,差异有统计学意义(P0.001);绝经后骨质疏松患者外周血RORγT mRNA的表达水平显著高于正常人群,差异有统计学意义(P0.001)。绝经后骨质正常对照组人群外周血血清中IL-6及TGF-β水平均显著低于绝经后骨质疏松患者,差异有统计学意义(t=8.99,P=0.000;t=4.71,P=0.000);此外,Pearson相关分析结果显示,绝经后骨质疏松患者血清中IL-17与BMD呈显著负相关(r=0.788,P0.05)。结论Th17细胞可能通过分泌IL-17促进绝经后骨质疏松的产生,IL-17可能作为治疗绝经后骨质疏松的重要靶点。     

小剂量脂多糖诱导血管内皮细胞TLR4的表达

目的:观察小剂量脂多糖(LPS)对人脐静脉内皮细胞(ECV304)TOLL样受体4(TLR4)表达的影响。方法:体外培养ECV304细胞,分别与LPS及LPS+TLR4抗体进行孵育。MTT法检测细胞的增殖活性,免疫组化染色法检测细胞表面TLR4的表达,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞核核内TLR4-mRNA及IL-8mRNA的表达。结果:LPS(10～50ng/mL)刺激ECV304细胞24h内,细胞增殖活性无明显变化(P>0.05);而以100ng/mL刺激24h后,细胞增殖活性明显降低(P<0.05),TLR4抗体对此无明显拮抗作用。LPS能明显上调ECV304表达TLR4、TLR4-mRNA及IL-8mRNA,其中10ng/mL的LPS在24h时、50ng/mLLPS在6～24h时,TLR4表达具有统计学意义(P<0.05);50ng/mL的LPS刺激ECV304细胞在4h及8h时,细胞核内TLR4mRNA表达均明显升高(P<0.05),而IL-8mRNA表达在8h时明显升高(P<0.05)。TLR4抗体对ECV304表达TLR4及TLR4-mRNA有拮抗作用(P<0.05),对IL-8mRNA表达无明显拮抗作用(P>0.05)。结论:小剂量LPS可诱导ECV304细胞表达TLR4并引起细胞活化,TLR4抗体可抑制TLR4的表达,但不能抑制细胞的活化。     

目前国内普通外科临床科研中存在的主要问题

自1978年恢复研究生招生工作以来,同其他临床医学学科一样,普通外科的临床科研工作取得了长足进步,获得了一些有创造性的科研成果,为推动我国普通外科事业的发展作出了较大的贡献。近年,我国普通外科领域的科研论文数量增长较快,但不可否认的是,目前我国普通外科研究领域仍存在     

2015年乳腺癌辅助化疗进展

【摘要】〓乳腺癌是危害我国女性健康的头号杀手,尽管近年来辅助化疗的研究进展突飞猛进,但临床中仍有不少问题未能明确,如辅助化疗的合适人群、化疗的开始时间、蒽环及紫杉类的地位和用法、强化维持治疗的作用、疗效及预后的生物标志物等。本文结合乳腺癌辅助化疗在临床上的常见问题和2015年各大乳腺癌会议阐述乳腺癌辅助化疗的最新进展。     

Changes in neuroendocrine elements in bronchial mucosa in chronic lung disease in adults.

BACKGROUND--It is not clear whether there is any association between metaplasia of the bronchial epithelium and changes in the distribution of neuroendocrine cells. This study examined, by immunohistological techniques, the distribution of neuroendocrine cells and juxtamucoscal nerve fibres in bronchial biopsies showing metaplastic changes. METHODS--Bronchial biopsies from 12 subjects with epithelial metaplasia associated with bronchiectasis and diffuse pulmonary fibrosis were examined by conventional light microscopy and immunohistological techniques for protein gene product 9.5 (PGP), chromogranin A and B (CAB), serotonin, vasoactive intestinal peptide (VIP), substance P (SP), calcitonin gene-related peptide (CGRP), calcitonin (CT), and gastrin releasing peptide (GRP). RESULTS--Regions of non-metaplastic epithelium contained numerous PGP and serotonin immunoreactive cells. Sub-populations of these cells displayed CAB, CGRP, CT, and GRP immunoreactivity. Metaplastic epithelium contained only a few weakly stained PGP, serotonin, CAB, GRP, CT and CGRP immunoreactive cells in six cases. Metaplastic epithelium was characterised by a high number of CAB-containing cells in six cases and in these biopsies prominent PGP-containing nerve bundles were seen in the subepithelial layer beneath the metaplastic epithelium. CONCLUSIONS--The distribution patterns of neuroendocrine cells and neuronal elements vary between areas of normal and metaplastic epithelium and within areas of metaplastic epithelium. Neuronal hyperplasia was associated with an increase in the number of CAB-containing cells within the metaplastic epithelium.     

Thoracoplasty in scoliosis in children

The article presents results of resection of costal humpback in 102 patients with scoliosis. Subperiosteal resection of the costal humpback without a fixation of the spine gave insufficient results, while resection of the humpback with a fixation of the spine with the Harrington distractor gave satisfactory results. Methods of decompressive thoracoplasty of the concave side of the chest in scoliosis were developed and used in 22 operations. Satisfactory cosmetic and functional results were obtained. No progress of scoliosis was noted. Within a year the lung volume became 2,8% greater as compared with the initial parameters.