p53与BNIP3在胶质母细胞瘤中表达及其相关性

突变型p53不仅在胶质母细胞瘤中表达增加,而且参与了胶质母细胞瘤对化疗药物的耐药机制[1],且突变型p53可显著抑制BNIP3诱导的细胞凋亡,从而导致肿瘤发生.我们通过免疫组织化学检测p53与bcl-2腺病毒E1B 19 kD结合蛋白( BNIP3)在胶质母细胞瘤中的表达及其相关性.     

放射性配体结合实验检测人脑胶质瘤细胞表皮生长因子受体的数目和活性

胶质瘤是中枢神经系统最常见的恶性肿瘤,经过各种综合治疗后疗效依然欠佳[1].部分胶质瘤存在表皮生长因子受体(EGFR)的扩增,抗EGFR治疗有助于抑制EGFR异常的肿瘤的增殖和进展[2].我们应用放射性配体结合实验(RBA)检测EGFR的数目和活性.     

抗前列腺特异抗原/抗CD3双特异性单链抗体四聚体的制备

本实验旨在构建人IgG3上游铰链区/p53四价功能域融合基因和抗前列腺特异抗原/抗CD3双特异性单链抗体的基础之上[1],进一步制备该双特异性单链抗体的四聚体.     

SD大鼠胰腺癌模型制作及其癌基因K-ras和抑癌基因p53、Smad4的表达

胰腺癌恶性程度高,预后差,其病因及发病机制尚未完全明了[1].我们通过6、9 mg两种不同剂量化学致癌剂二甲基苯并蒽(DMBA)诱导Sprague-Dawley(SD)大鼠原位胰腺癌模型,并比较其优劣,寻找出一个较理想的胰腺癌模型制作方法[2],用免疫组织化学方法动态检测大鼠胰腺组织标本K-ras、p53、Smad4的表达[3],探讨胰腺癌的发病机制.     

原癌基因Wip1在胶质瘤细胞瘤株中的表达及其临床意义

野生型p53-诱导的蛋白磷酸酶1(Wild-type p53-induced phosphatase 1,Wip1)属PP2C蛋白磷酸酶家族一员,与Ras、Myc和Neu1等原癌基因具有协同作用,证实它是一种原癌基因[1],在肿瘤细胞分化、增殖、抗凋亡等方面具有重要作用.我们通过免疫细胞化学、流式细胞、逆转录-聚合酶链反应( RT-PCR)、Western blot检测Wip1在SHG44、U87和U251细胞中的表达.     

P53、P16、TGF-α、EGFR、VEGF在膀胱移行细胞癌组织中的表达及意义

目的探讨P53、P16、TGF-α、EGFR、VEGF在膀胱移行细胞癌组织中的表达及意义。方法采用免疫组化法,对膀胱移行细胞癌P53、P16、TGF-α、EGFR、VEGF表达、缺失及生物学意义进行了研究。结果60例膀胱移行细胞癌患者中有68.3%（41/60）TGF-α阳性表达,EGFR阳性表达率35%（21/60）,VEGF阳性表达率50%（30/60）,P53阳性表达率38.3%（23/60）,P16阳性表达率30%（18/60）。结论P16阳性表达率与患者的性别无明显相关性、随肿瘤分级和分期增高而降低,而P53、P16、TGF-α、EGFR、VEGF的表达率随肿瘤分级、分期的升高而明显增高,并且多个基因的共同表达也随着肿瘤分级、分期的升高而明显增高。     

早期阴茎癌中p53、p16、EGFR、cyclinD1的表达

目的研究免疫组化指标p53、p16、EGFR、cyclinDl在早期阴茎癌中的表达及其与肿瘤复发的关系。方法回顾性分析2006年3月至2010年5月实施局部广泛切除术的早期阴茎癌33例。采用EnV确on／HRP两步法检测p53、p16、EGFR和cyclingD1的表达。结果33例中可获得完整病例资料的18例,平均年龄47．7（32-70）岁,平均随访时间21．9（5--45）个月。其中L期1例、T1a期12例、T1b期3例、T2期2例。由于样本量问题四项指标均无统计学意义。结论p53蛋白高表达是早期阴茎癌发生术后复发的可能危险因素,尚需进一步大样本研究证实。     

p53在黑素细胞对抗紫外线或H2O2诱导的氧化应激中的作用

目的 通过紫外线照射(UVR)或过氧化氢(H2O2)对人黑素细胞p53的表达影响,并使用p53激活剂顺式咪唑啉衍生物-3(nutlin-3)和p53抑制剂(PFT-α)对人黑素细胞UVR或H2O2的氧化应激脱氧核糖核酸(DNA)损伤的影响,探讨p53在人黑素细胞对抗氧化应激中的作用.方法 Western印迹法测定UVR、不同浓度H2O2、nutlin-3和PFT-α处理后的人黑素细胞p53表达；单细胞电泳实验(彗星分析)测定nutlin-3或PFT-α对人黑素细胞UVR或H2O2氧化应激DNA损伤的影响；γ-H2AX免疫荧光实验测定nutlin-3对人黑素细胞UVR氧化应激DNA损伤的影响.结果 Western印迹结果显示UVR、H2O2可以增加人黑素细胞总p53的表达,并且是伴随着15丝氨酸磷酸化p53的增高而增高,nutlin-3和PFT- α分别增加和减少人黑素细胞内p53表达；彗星分析显示,预先使用nutlin-3可以明显减少UVR或H2O2造成的DNA损伤的尾素,PFT- α明显增加UVR或H2O2造成的DNA损伤的尾素,差异具有统计学意义(P＜0.05)；流式细胞仪分析显示预先使用nutlin-3可以减少UVR造成的γ-H2AX表达.结论 p53在人黑素细胞对抗UV或H2O2诱导的氧化应激中起着重要的作用.     

p53联合伽玛刀治疗对C6胶质瘤细胞生长的抑制作用

有研究表明，转染野生型p53基因可以提高恶性胶质瘤的放射治疗敏感性，p53联合伽玛刀（单次大剂量）治疗胶质瘤的研究报道尚少，本实验对此进行了研究。 一、材料和方法 1．材料：C6鼠脑胶质瘤细胞系（经证实无p53突变）；293包装细胞系；野生型p53重组腺病毒载体（Ad-053）及空载腺病毒（Ad-βgal）。[第一段]     

HBeAg、p53及Ki-67在肝癌患者血清和组织中的表达及其意义

目的探讨血清HBeAg和肝癌组织中p53、Ki-67的表达情况及其临床意义。方法应用酶联免役吸附试验(ELISA)检测57例肝癌患者及27例正常对照者血清HBeAg,免疫组织化学方法检测57例肝癌组织及27例癌旁肝组织芯片中p53、Ki-67的表达情况,并探讨肝癌患者3项指标之间的关系及其与肝癌临床病理参数间的相关性。结果肝癌患者和正常对照者血清中HBeAg表达比较差异无统计学意义(P0.05);肝癌组织中p53和Ki-67表达较癌旁组织增高,差异有统计学意义(P均0.01);在57例患者中,HBeAg阳性者25例,占43.9%;p53阳性44例,占77.2%;HBeAg阳性同时伴有p53突变者23例。HBeAg的表达与肿瘤分期、p53阳性表达及Ki-67表达有关(P均0.05);p53突变与肿瘤分化程度、分期及Ki-67表达相关(P均0.05)。结论肝癌患者HBeAg阳性、p53突变及Ki-67表达增高在肝癌的发展中起到协同作用。     

膀胱移行细胞癌组织中端粒酶活性和p53的相关性研究

我们通过PCR及免疫组化技术同时检测了53例膀胱癌标本中端粒酶活性及p53的表达，以探讨p53异常表达对膀胱癌端粒酶激活的作用及其在临床中的应用价值。     

腺病毒介导的野生型P53对前列腺癌细胞系PC3M的影响

目的探讨腺病毒介导的野生型p53在前列腺癌基因治疗中的可能性及其机制。方法培养前列腺癌细胞系PC3M,转染腺病毒介导的野生型p53,检测其增殖和凋亡水平变化,并检测其bax蛋白及mRNA水平。结果腺病毒介导的野生型p53可高水平地转染入PC3M细胞,转染后的PC3M细胞增殖受到抑制、凋亡水平增高,细胞中bsx蛋白及mRNA水平皆增高。结论腺病毒介导的野生型p53可抑制PC3M细胞增殖并促进其细胞凋亡。其促进凋亡的机制可能是通过促进bax表达而实现的。     

胃癌中p53蛋白K370位点甲基化在新辅助化疗的作用和临床意义

目的研究胃癌患者外周核细胞p53蛋白K370位点甲基化在新辅助化疗的判断的作用和临床意义。方法应用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)方法分别检测胃癌组织及外周血有核细胞p53蛋白K370位点甲基化和化疗疗效以及病理分期的相关性,并通过Pearson统计学方法分析其相关性。结果 110例胃癌患者中,K370的甲基化在胃癌组织及全血中的表达具有正相关性,K370的甲基化率随着病理分期增高而增高,胃癌外周血中p53蛋白K370甲基化表达情况与病理分期密切相关;胃癌患者经过新辅助化疗治疗后,甲基化平均敏感性阴性组为60.6%,阳性组为25.3%,甲基化阴性组的敏感性高于阳性组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论胃癌全血标本中p53蛋白K370位点甲基化状态有望作为胃癌新辅助化疗方案敏感性的依据。     

多烯紫杉醇靶向增敏放疗对结肠癌细胞凋亡相关蛋白表达的影响

目的探讨免疫脂质化的多烯紫杉醇在LoVo细胞放射增敏过程中对其凋亡相关蛋白表达的影响。方法制备偶联癌胚抗原（CEA）抗体的多烯紫杉醇脂质体,作用于LoVo细胞后,再经2 Gy照射,用流式细胞仪检测p53、Bax和Bcl-2;免疫组化检测Fas、FasL、survivin的表达;Western蛋白印迹分析表皮生长因子受体（EGFR）的表达。结果多烯紫杉醇免疫脂质体联合放射提高了Bax的表达（P＜0.05）,对p53和Bcl-2表达均没有明显影响。Fas和FasL的表达明显上调（P＜0.01）,survivin及EGFR的表达下调（P＜0.05）。结论免疫脂质化的多烯紫杉醇通过多种通路调节细胞凋亡,增加肿瘤细胞的放疗敏感性。     

直肠癌p53基因表达及功能状态的研究

直肠癌的病因尚不清楚,现认为直肠癌是多基因异常积累而致的恶变[1].本研究旨在mRNA水平观察p53及p21基因在直肠癌中表达,了解p53的功能状态.     

同源盒基因PBX1和p53基因在食管鳞癌中的表达及其临床意义

近来研究表明,一些肿瘤的发生、发展与调控细胞分化的同源盒基因(homeoboxgene)家族的异常表达密切相关。PBX1基因是同源盒基因家族成员,首次在人类急性白血病染色体易位形成的融合癌蛋白中被发现[1],除了B和T系淋巴细胞外,PBX1在胚胎和成年组织中也广泛表达,其功能尚不明确,多项体外和转染实验表明,它可能参与HOX蛋白的细胞恶性转化,此外在一定条件下还能诱导细胞的凋亡[2]。我们采用免疫组织化学方法检测食管癌组织中PBX1和p53的表达,探讨它们两者之间及与食管鳞癌的临床病理的相关性。一、材料与方法1.研究对象:收集北京肿瘤医院胸…     

GnRHR与EGFR在原发性肝癌组织中表达及意义

目的研究促性激素释放激素受体（GnRHR）和表皮生长因子受体（EGFR）在原发性肝癌组织中的表达及临床意义。方法应用免疫组织化SP及原位定量法,对30例原发性肝癌组织中GnRHR、EGFR的表达进行检测及半定量分析。结果在原发性肝癌各种不同分化的癌组织均显示不同程度的GnRHR和EGFR阳性免疫反应,原位定量显示GnRHR表达阳性27例（90.00%）,EGFR表达阳性15例（50.00%）,原位定量显示GnRHR的表达高分化13例、中分化9例、低分化5例,随着组织分化程度增高而增高,EGFR的表达高分化3例、中分化5例、低分化7例,随着组织分化程度增高而降低（P〈0.05）,并且GnRHR较EGFR阳性免疫反应强。结论 GnRHR与EGFR的表达量可能与原发性肝癌的发生及发展有关。     

P53、C-erbB-2基因蛋白和EGFR在泌尿系移行细胞癌中的表达及相互关系

应用免疫组化技术研究65例泌尿系移行细胞癌（包括47例膀胱癌和18例肾盂癌）组织中P53、C－erbB－2基因蛋白和表皮生长因子受体（EGFR）的表达及相互关系。结果显示P53在膀胱癌中阳性率为57．5％（27／47），在肾益癌中为50．0％（9／18）；C－erbB－2基因蛋白在膀胱癌和肾盂癌中的表达率分别为40．4％和38．9％；EGFR的表达率分别为42.6％和44．4％。P53、C－erbB－2基因蛋白和EGFR表达均与膀胱癌和肾盂癌的分级和分期有关，P53、C－erbB－2基因蛋白和EGFR有显著相关关系。结果表明P53、C－erbB－2基因蛋白和EGFR对膀胱癌和肾盂癌的恶性程度和预后评估具有重要参考意义。     

成纤维细胞生长因子受体3和p53基因突变与膀胱癌复发关系的研究

目的 研究膀胱移行细胞癌组织中成纤维细胞生长因子受体3(FGFR3)、p53基因突变与膀胱癌预后的关系.方法 应用变性高压色相分析(DHPLC)及PCR产物测序方法 检测98例膀胱癌组织和10例正常膀胱黏膜组织中FGFR3第7、10、15外显子及p53第5、6、7、8外显子基因突变情况,采用Kaplan-Meier生存分析法分析FGFR3及p53基因突变与肿瘤复发预后关系,Log-rank检验无复发生存率.结果 经DHPLC初步筛选,DNA测序发现癌组织FGFR3突变44例(44.9%),p53突变34例(34.6%).FGFR3突变表达率T_a～T_1为75.6%(34/45)、T_2～T_4为26.6%(10/53),G_1 84.6%(11/13)、G_2 61.4%(27/44)、G_3 14.6%(6/41),组间差异均有统计学意义(P<0.05).随肿瘤分期分级增高,突变率降低.p53突变率T_a～T_1为20.0%(9/45)、T_2～T_4为47.2%(25/53),G_1 7.7%(1/13)、G_2 18.2%(8/44)、G_58.1%(25/41),组间差异有统计学意义(P<0.05).随肿瘤分期分级增高,突变率增加.正常膀胱黏膜组织中FGFR3、p53突变表达率为0(0/10).生存分析结果 显示:FGFR3突变组复发间隔长于未突变组,差异有统计学意义(P<0.05).p53突变组复发间隔短于未突变组,差异有统计学意义(P<0.05).FGFR3mut/p53wt组复发间隔长于FGFR3wt/p53wt及FGFR3wt/p53mut 2组(P<0.05),其他2组之间差异无统计学意义.结论 FGFR3突变多见于低分期分级的膀胱肿瘤,其突变提示复发间隔较长,预后较好.p53突变多见于高分期分级的膀胱肿瘤,其突变提示复发间隔较短,预后较差.     

肿瘤标志物 p53、Ki67在不同分型腺性膀胱炎组织中阳性表达率的相关性分析

腺性膀胱炎(cystitis glandularis,CG)是一种膀胱黏膜组织转化性病变,随着医学科学的发展,对其发病机制的认识有了进一步的提高.膀胱内部某些刺激因素(感染、结石、阻塞和毒素)导致膀胱移行上皮增殖化生学说[1]现被普遍接受,除此之外,胚胎残留学说也被广为关注.CG 与癌变的关系目前尚无肯定证据.随着膀胱镜的广泛使用,CG 的检出率不断增高,但膀胱腺癌的发病率并未发现明显增高,仅占膀胱原发肿瘤的2％,极大的反差说明 CG 的生物学特性尚待更加深入研究.大部分学者认为 CG 与膀胱腺癌的发生关系密切,CG 如果广泛弥散存在细胞巢和囊肿则更被视为癌前病变的先兆,所以,目前治疗 CG 的手段常与治疗膀胱肿瘤一致,一般为经尿道膀胱肿瘤电切术,术后表柔比星、羟喜树碱等化疗药物灌注化疗预防复发.但仍有学者持相反态度,认为 CG 与膀胱癌发生并无直接关系,临床治疗 CG 时可能存在“过度治疗”的情况.本文通过分析 CG 与膀胱腺癌肿瘤标志物阳性表达率的相关性,为不同分型 CG 术后的灌注化疗提供治疗依据.因 p53与 Ki67在恶性肿瘤中阳性表达率较高,膀胱腺癌中 p53与 Ki67的表达更为显著[2],故收集了我院2011年1月至2014年6月 CG 手术患者120例及膀胱腺癌患者30例,对其 p53、Ki67的阳性表达率进行了相关性分析研究.现报告如下。