益气活血中药复方对CVB_3大鼠心肌细胞感染模型核糖体蛋白L27a表达的影响

目的:研究益气活血中药复方对CVB3大鼠心肌细胞感染模型核糖体蛋白L27a(ribosomal protein L27a)表达的作用机制,进一步证实益气活血中药复方是治疗CVB3病毒性心肌炎的有效方剂。方法:本实验用新生2～3天大鼠心肌细胞建立柯萨奇病毒B3(CVB3)感染模型,通过改良的抑制性消减杂交技术(SSH),克隆了受CVB3攻击的宿主细胞中被中药(益气活血中药复方)调控的基因。结果:核糖体蛋白L27a在中药组中呈高表达,病毒组中表达减弱或被抑制。结论:益气活血中药复方能够影响受CVB3攻击的宿主细胞核糖体蛋白L27a的表达,有效保护心肌、阻断病程进度,实现治疗病毒性心肌炎的目的。     

益气活血中药复方对CVB3乳鼠心肌细胞感染模型线粒体核糖体蛋白L51表达的影响

目的 研究益气活血中药复方对CVB3乳鼠心肌细胞感染模型线粒体核糖体蛋白L51(mitochondrial ribosomal protein L51,MRPL51)表达的影响,以期从基因水平揭示CVB3心肌炎的发病机制及益气活血中药复方治疗病毒性心肌炎的作用机制,并进一步证实益气活血中药复方治疗CVB3病毒性心肌炎的有效性.方法 通过乳鼠心肌细胞培养,建立病毒组和益气活血中药复方组心肌细胞模型,以改良的抑制性消减杂交技术(suppression subtractive hybridization,SSH),分离两组差异表达的基因,并通过荧光RT-PCR对上述结果进行验证.结果 SSH结果显示,MRPL51基因在益气活血中药复方组为低表达,而在病毒组则呈高表达状态,荧光RT-PCR结果显示益气活血中药复方组中MRRPL51基因达到阈值的循环数(Ct)明显多于病毒组,提示MRPL51在病毒组中的表达较中药组中高.结论 MRPL5基因表达上调可能是CVB3致病毒性心肌炎机制之一;益气活血中药复方通过下调MRPL5基因的表达而实现治疗病毒性心肌炎的目的 .     

益气活血中药复方对CVB3乳鼠心肌细胞感染模型线粒体核糖体蛋白L51表达的影响

目的 研究益气活血中药复方对CVB3乳鼠心肌细胞感染模型线粒体核糖体蛋白L51(mitochondrial ribosomal protein L51,MRPL51)表达的影响,以期从基因水平揭示CVB3心肌炎的发病机制及益气活血中药复方治疗病毒性心肌炎的作用机制,并进一步证实益气活血中药复方治疗CVB3病毒性心肌炎的有效性.方法 通过乳鼠心肌细胞培养,建立病毒组和益气活血中药复方组心肌细胞模型,以改良的抑制性消减杂交技术(suppression subtractive hybridization,SSH),分离两组差异表达的基因,并通过荧光RT-PCR对上述结果进行验证.结果 SSH结果显示,MRPL51基因在益气活血中药复方组为低表达,而在病毒组则呈高表达状态,荧光RT-PCR结果显示益气活血中药复方组中MRRPL51基因达到阈值的循环数(Ct)明显多于病毒组,提示MRPL51在病毒组中的表达较中药组中高.结论 MRPL5基因表达上调可能是CVB3致病毒性心肌炎机制之一;益气活血中药复方通过下调MRPL5基因的表达而实现治疗病毒性心肌炎的目的 .     

益气活血中药复方对CVB3乳鼠心肌细胞感染模型NADH脱氢酶亚基1和2表达的影响

目的:研究益气活血中药复方对CVB乳鼠心肌细胞感染模型NADH脱氢酶亚基1和2表达的影响,以期从基因水平揭示益气活血中药复方治疗CVB3心肌炎的作用机制,进一步证实益气活血中药复方是治疗CVB3病毒性心肌炎的有效方剂。方法:通过改良的抑制性消减杂交技术(suppression subtractive hybridization,SSH),分离大鼠心肌细胞病毒组和益气活血中药复方给药组差异表达的基因,并通过荧光RT-PCR对上述结果进行验证。结果:SSH结果显示中药组中NADH脱氢酶亚基1和NADH脱氢酶亚基2基因的表达均比病毒组中低,这一结果通过荧光RT-PCR得到验证。结论:益气活血法能够通过调节NADH脱氢酶亚基1和2的表达而实现治疗病毒性心肌炎的目的。     

益气活血中药复方与CVB3对乳鼠心肌细胞基因表达的影响

目的:克隆和筛选CVB3乳鼠心肌细胞感染相关基因,以期从基因水平揭示CVB3心肌炎的发病机制,同时探索益气活血中药复方治疗病毒性心肌炎的作用机制.方法:通过改良的抑制性消减杂交技术(suppression subtractive hybridization,SSH),分离大鼠心肌细胞CVB3感染组和益气活血中药复方给药...     

益气活血中药复方对CVB3病毒性心肌炎心肌细胞actin、Cx43表达及GJIC功能的影响

目的观察益气活血中药复方对柯萨奇病毒B组3型(Coxsackie virus B3,CVB3)病毒性心肌炎心肌细胞间缝隙连接结构及通讯功能的影响。方法以免疫组化法检测正常组、病毒组、益气活血中药复方组心肌细胞肌动蛋白(actin)及连接蛋白(connexin43,Cx43)表达;,并以激光扫描共聚焦显微镜法检测各组心肌细胞荧光漂白恢复率。结果益气活血中药复方能上调CVB3病毒性心肌炎心肌细胞actin及Cx43表达,能显著改善细胞间缝隙连接通讯(GJIC)功能。结论益气活血中药复方具有对抗CVB3致心肌细胞骨架蛋白损伤,修复CVB3病毒性心肌炎心肌细胞间缝隙连接通道结构,改善CVB3攻击后心肌细胞GJIC功能的作用。     

益气活血中药复方对CVB_3大鼠心肌细胞感染模型细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ、Ⅱ表达的影响

目的:研究益气活血中药复方调控CVB3大鼠心肌细胞感染模型细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ(cytochromeC oxidase subunitⅠ)及细胞色素C氧化酶亚基Ⅱ(cytochrome C oxidase subunitⅡ)表达的作用机制。方法:本实验用Wistar大鼠心肌细胞建立柯萨奇病毒B3(CVB3)感染模型,通过改良的抑制性消减杂交技术(SSH),克隆受CVB3攻击的宿主细胞中被中药(益气活血中药复方)调控的基因。结果:细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ、Ⅱ在中药组中呈高表达,病毒组中表达减弱或被抑制。结论:益气活血中药复方能够影响受CVB3攻击的宿主细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ、Ⅱ的表达,有效保护心肌,阻断病程进度,实现治疗病毒性心肌炎的目的。     

益气活血中药复方对病毒性心肌炎模型大鼠趋化因子CXCL12 SASH1表达的影响

目的：研究益气活血中药复方影响病毒性心肌炎模型大鼠趋化因子CXCL12（CXC chemokine ligand-12）、Sash1（SAM and SH3 domain containing 1 protein）表达的作用机制。方法：通过改良的抑制性消减杂交技术（SSH）,克隆了受CVB3攻击的宿主细胞中被中药调控的基因,并通过荧光rt-PCR对上述结果进行验证。结果：趋化因子CXCL12、Sash1在中药组中呈高表达,病毒组中表达减弱或被抑制。结论：益气活血法能够影响受CVB3攻击的宿主细胞趋化因子CXCL12、Sash1表达,阻断心肌肥大进程,防止向心衰进展。     

中药防治CVB_3病毒性心肌炎实验研究进展

CVB3是病毒性心肌炎的主要致病因素,目前西医对CVB3病毒性心肌炎的治疗尚无特效药物。近年来,中医药对CVB3的治疗取得了一定的成就。大量的动物实验表明,单味药和复方广泛用于CVB3的治疗,具有部分直接杀灭病毒、抑制病毒复制、抗氧化、保护心肌细胞,调节免疫功能以及参与心肌细胞的凋亡等。文章对近年中药防治CVB3病毒性心肌炎从实验研究的角度做一综述。     

抗柯萨奇B病毒性心肌炎胶囊复方新制剂抗CVB3作用

目的 通过体内外实验观察抗柯萨奇B病毒性心肌炎胶囊K-CoXB-JN复方新制剂对柯萨奇B3(CVB3)病毒感染的心肌细胞和病毒性心肌炎(VMC)小鼠的保护作用.方法 体外实验用1000 TCID50的CVB3感染心肌细胞后,分别加入不同浓度的K-CoXB-JN复方新制剂和利巴韦林,并设定正常对照组和模型对照组,当细胞病变达到75％后,测定细胞上清液中肌酸激酶(CK)、天冬氨酸转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)活性;体内实验用CVB3感染Balb/c小鼠造成病毒性心肌炎模型,分别予K-CoXB-JN复方新制剂高、中、低剂量,利巴韦林和纯水连续灌胃14 d,记录小鼠死亡数,观察药物对小鼠的死亡保护情况.结果 K-CoXB-JN复方新制剂可降低CVB3感染的心肌细胞培养上清液中CK、AST、LDH含量,降低病毒性心肌炎小鼠的死亡率,给药组和模型对照组相比较P＜0.05.结论 K-CoXB-JN复方新制剂对CVB3感染的心肌细胞和病毒性心肌炎小鼠具有保护作用.     

益气活血中药复方对CVB3病毒性心肌炎心肌细胞损伤的影响

目的观察益气活血中药复方对CVB3病毒性心肌炎心肌细胞损伤的影响。方法以体外细胞培养方法,建立CVB3病毒性心肌炎心肌细胞感染模型。将细胞分为正常组、病毒组、中药组。采用荧光探针Hoechst33258染色法检测心肌细胞凋亡;采用激光共聚焦显微镜检测心肌细胞内钙离子浓度;采用SABC免疫组化法检测心肌细胞心肌肌钙蛋白（cTnI）表达;采用透射电镜检测各组心肌细胞超微结构。结果病毒组与正常组心肌细胞相比,细胞超微结构损伤严重,并可见明显的凋亡细胞核形态,而中药组心肌细胞形态及细胞器结构接近正常组,未见明显的凋亡细胞核形态;正常组心肌细胞cTnI呈阴性表达,病毒组cTnI呈强阳性表达,与正常组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）,中药组cTnI呈弱阳性表达,与病毒组比较,差异有统计学意义（P〈0.01）;正常组心肌细胞经中药干预后,钙离子荧光强度无明显变化（P〉0.05）,而病毒组心肌细胞经中药干预后,钙离子平均荧光强度升高（P〈0.01）,与正常组比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论益气活血中药复方可抑制CVB3感染后细胞凋亡发生,抑制cTnI蛋白表达,防御并减轻CVB3造成的心肌损伤,具有修复损伤心肌细胞超微结构、改善心肌细胞舒缩功能和血液动力学作用。     

益心康对柯萨奇B_(3m)病毒性心肌炎小鼠作用的实验研究

目的 :实验观察中药复方益心康 ,对实验性病毒性心肌炎小鼠心肌细胞保护作用和对心肌细胞内病毒复制的抑制作用。方法 :诱导Balb/c小鼠形成病毒性心肌炎模型 ,分别予益心康、病毒唑稀释液、生理盐水灌胃。测每个小鼠血清磷酸肌酸激酶 (CK)及其同功酶MB(CK -MB) ,测心肌细胞感染CVB3mRNA量。结果 :中药治疗组小鼠的血清CK和CK -MB明显低于其它两个治疗组。中药治疗组小鼠的心肌细胞含有的病毒RNA量明显少于其它两个治疗组。结论 :益心康对柯萨奇B3m病毒性心肌炎小鼠有保护作用 ,并抑制柯萨奇病毒B3m在心肌细胞中的复制。     

茱萸颗粒体外抗CVB3病毒的实验研究

茱萸颗粒是我院心内科李七一教授经临床多年摸索,拟定治疗病毒性心肌炎的有效良方.目的:观察茱萸颗粒对CVB3病毒的作用.方法:采用体外抗CVB3病毒和大鼠心肌细胞感染CVB3实验.结果:茱萸颗粒20mg/ml对CVB3感染Vero细胞具有明显保护作用,同时可抑制CVB3毒力.茱萸颗粒0.5mg/ml至4mg/ml可减轻CVB3感染心肌细胞CPE,心肌酶谱显示:茱萸颗粒可明显降低感染CVB3心肌细胞中LDH,LDH1,AST和HBDH释放,减少心肌细胞损坏.结论:茱萸颗粒具有抗CVB3感染和保护心肌细胞的作用.     

心乐胶囊对病毒性心肌炎小鼠Bcl-2及Bax蛋白的影响

目的:观察心乐胶囊对CVB3病毒性心肌炎Balb/c小鼠Bcl-2及Bax的影响.方法:Balb/C小鼠随机分为6组,空白对照组、模型对照组、阳性药对照组、心乐胶囊高、中、低计量组,每组30只,利用免疫组织化学技术观察心乐胶囊对柯萨奇B3型(CVB3)致病毒性心肌炎小鼠Bcl-2及Bax水平的影响.结果:心乐胶囊各剂量组及阳性药对照组均能提高CVB3致病毒性心肌炎Balb/C小鼠心肌组织Bcl-2蛋白表达,降低Bax蛋白的表达.心乐胶囊各剂量组与模型组相比有显著差异P＜0.01,其中以心乐胶囊高剂量组最为明显.结论:1心乐胶囊能够明显地提高CVB3致病毒性心肌炎Balb/c小鼠Bcl-2蛋白表达,降低Bax蛋白的表达.2心乐胶囊可以抑制病毒性心肌炎小鼠心肌细胞的凋亡,保护心肌组织.     

益气活血中药复方治疗CVB3病毒性心肌炎疗效及对血清NT-proBNP、NK活性、sIL-2R和IL-8水平的影响

目的:探讨益气活血中药复方治疗CVB3病毒性心肌炎的疗效,以及其对脑钠肽(NT-pro BNP)、自然杀伤细胞(NK)活性、可溶性白细胞介素-2受体(s IL-2R)、白细胞介素-8 (IL-8)水平的影响。方法:选择我院2013年7月~2017年1月收治的CVB3病毒性心肌炎患者94例,按照随机数字表法分为对照组(n=47)和观察组(n=47),对照组给予抗病毒、抗感染、液体补充等治疗,观察组在对照组治疗基础上给予益气活血中药复方治疗,比较两组治疗效果,治疗前后证候积分,NT-pro BNP、NK活性、s IL-2R和IL-8水平变化,心肌酶谱[谷草转氨酶(AST)、肌酸磷酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)],不良反应。结果:治疗后,观察组发热、咽痛、心悸和胸痛积分均显著低于对照组(P0. 05);治疗后,观察组NT-pro BNP、NK活性水平均显著高于对照组(P0. 05),s IL-2R、IL-8水平均显著低于对照组(P0. 05);观察组治疗显效率93. 62%显著高于对照组的78. 72%(P0. 05);两组不良反应发生率无显著差异(P0. 05)。结论:益气活血中药复方治疗CVB3病毒性心肌炎疗效显著,可有效升高NT-proB NP、NK活性水平,降低sI L-2R、IL-8水平。     

益气活血中药复方治疗CVB3病毒性心肌炎疗效及对血清NT-proBNP、NK活性、s IL-2R和IL-8水平的影响

目的:观察益气活血中药复方治疗CVB3病毒性心肌炎的疗效,以及其对脑钠肽(NT-pro BNP)、自然杀伤细胞(NK)活性、可溶性白细胞介素-2受体(s IL-2R)、白细胞介素-8 (IL-8)水平的影响。方法:选择我院2013年7月～2017年1月收治的CVB3病毒性心肌炎患者94例,按照随机数字表法分为对照组(n=47)和观察组(n=47),对照组给予抗病毒、抗感染、液体补充等治疗,观察组在对照组治疗基础上给予益气活血中药复方治疗,比较两组治疗效果,治疗前后证候积分,NT-pro BNP、NK活性、s IL-2R和IL-8水平变化,心肌酶谱[谷草转氨酶(AST)、肌酸磷酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)],不良反应。结果:治疗后,观察组发热、咽痛、心悸和胸痛积分均显著低于对照组(P0. 05);治疗后,观察组NT-pro BNP、NK活性水平均显著高于对照组(P0. 05),s IL-2R、IL-8水平均显著低于对照组(P0. 05);观察组治疗显效率93. 62%显著高于对照组的78. 72%(P0. 05);两组不良反应发生率无显著差异(P0. 05)。结论:益气活血中药复方治疗CVB3病毒性心肌炎疗效显著,可有效升高NT-pro BNP、NK活性水平,降低s IL-2R、IL-8水平。     

参松养心胶囊对病毒性心肌炎小鼠模型心肌细胞凋亡及其调控基因的影响

目的:探讨病毒性心肌炎(viral myocard itis,VMC)与心肌细胞凋亡及其相关调控基因的关系,以及参松养心胶囊对其的防治作用。方法:以腹腔接种嗜鼠心肌柯萨奇B3病毒(CVB3)0.1 mL建立VMC模型;将VMC小鼠随机分为模型对照组30只、中药防治1组(参松养心胶囊0.3 g/20 g)30只、中药防治2组(参松养心胶囊0.6 g/20 g)30只、中药防治3组(参松养心胶囊0.9 g/20 g)28只、另设正常对照组小鼠28只;在接种后3,7,14,20,30 d动态对照观察心肌细胞凋亡和相关调控基因C-myc及Bcl-2蛋白的表达情况,并观察不同剂量的参松养心胶囊对心肌细胞凋亡和相关调控基因C-myc及Bcl-2蛋白的表达情况的影响。结果:CVB3可引起VMC心肌细胞凋亡,C-myc及Bcl-2蛋白的阳性表达支持心肌细胞凋亡情况;与对照组对比,中药组心肌细胞凋亡检出率显著下降。结论:心肌细胞凋亡及其相关调控基因可能参与VMC的发生和发展,参松养心胶囊对其过程有良好的防治作用。     

中药防治柯萨奇B_3病毒性心肌炎实验研究进展

综述了近年关于中医药防治柯萨奇 B3 病毒性心肌炎(CVB3 - VMC) 的实验室研究。其中单味中药以黄芪、人参、苦参等为主 ,中药复方则以多种自制方药 ,通过离体细胞培养和柯萨奇 B3 病毒亲心肌株 (CVB3 m) 诱导 VMC的整体动物实验模型 ,采用微量细胞培养、同位素示踪、细胞微电极、血清药理学、分子杂交等技术和方法 ,从抑制 CVB3 m繁殖、调节细胞免疫作用、保护心肌细胞的角度进行较深入的实验室研究。     

茱萸颗粒体外抗CVB3病毒的实验研究

茱萸颗粒是我院心内科李七一教授经临床多年摸索，拟定治疗病毒性心肌炎的有效良方。目的：观察茱萸颗粒对CVB3病毒的作用。方法：采用体外抗CVB3病毒和大鼠心肌细胞感染CVB3实验。结果：茱萸颗粒20mg／ml对CVB3感染Vero细胞具有明显保护作用，同时可抑制CVB3毒力。茱萸颗粒0．5mg／ml至4mg／ml可减轻CVB3感染心肌细胞CPE，心肌酶谱显示：茱萸颗粒可明显降低感染CVB3心肌细胞中LDH，LDH1，AST和HBDH释放，减少心肌细胞损坏。结论：茱萸颗粒具有抗CVB3感染和保护心肌细胞的作用。     

生黄合剂对病毒性心肌炎小鼠心肌细胞的保护作用

目的:观察生黄合剂对病毒性心肌炎小鼠心肌细胞的保护作用。方法:对昆明种小鼠采用柯萨奇病毒(CVB3)腹腔注射染毒,制成病毒性心肌炎动物模型,根据使用药物的不同对病毒性心肌炎小鼠进行分组,观察生黄合剂对模型鼠的生存率的影响及对心肌细胞的保护作用。结果:各治疗组小鼠的生存率明显高于病毒对照组,实验所试药物对CVB3感染鼠均有保护作用,生黄合剂1∶1、1∶2组对感染鼠的治疗作用要好于利巴韦林药物组,尤其是1∶1液组的治疗作用最佳。结论:生黄合剂对实验性病毒性心肌炎小鼠具有治疗作用。