蛇毒复合酶对人肝癌细胞BEL-7402的抑瘤研究

观察蛇毒复合酶对人肝癌细胞 BEL - 74 0 2体外生长的抑制作用。经体外细胞培养 ,采用台盼兰染法、细胞形态观察和流式细胞术 ,检测人肝癌细胞的生长抑制率 ,以及细胞形态和细胞周期的变化。结果 ,蛇毒复合酶对人肝癌细胞有极强的抑瘤作用 ,8h和 12 0 h抑瘤率分别达 79.5%和 94 .5%。镜检及涂片染色发现癌细胞胞膜破裂、胞质外溢。流式细胞术分析显示蛇毒复合酶主要杀伤 G0 / G1期人肝癌细胞 ,同时 ,阻滞 S期细胞进入 G2 / M期。说明 :蛇毒复合酶对人肝癌细胞具有一定体外抑瘤作用 ,其作用机理与破坏细胞胞膜和干扰细胞生长周期有关。     

双苓扶正抗癌胶囊对小鼠肝癌的影响

目的：研究双苓扶正抗癌胶囊对小鼠肝癌的抑制作用及作用机制。方法：建立小鼠肝癌（Heps）实体瘤及腹水癌模型，观察抑瘤率和生长延长率，并用流式细胞术（FCM）检测小鼠肝癌实体瘤的细胞周期及癌细胞凋亡率。结果：双苓扶正抗癌胶囊在15g和30g/kg剂量下，对小鼠肝癌实体瘤有显著抑制作用，也能延长荷腹水型肝癌小鼠的生存期；还可引起小鼠肝癌瘤细胞S期及G2-M期细胞减少，G0-G1期细胞及凋亡细胞增加。结论：双苓扶正抗癌胶囊对小鼠移植性肝癌具有抑制作用，其作用机制可能与抑制细胞周期中S期DNA合成、干扰细胞的分裂增殖速度及诱导癌细胞凋亡有关。     

九香虫三氯甲烷浸提物对两种癌细胞增殖和周期的影响

目的研究九香虫三氯甲烷浸提物对胃癌细胞SGC-7901和肝癌细胞HepG2细胞增殖和细胞周期的影响。方法本研究采用冷浸法获得九香虫的三氯甲烷浸提物;MTT法分析三氯甲烷浸提物对两种癌细胞体外增殖的抑制作用;流式细胞术分析三氯甲烷浸提物对两种癌细胞的细胞周期的影响。结果九香虫三氯甲烷浸提物能抑制SGC-7901细胞和HepG2细胞的体外增殖并呈明显的剂量依赖性,IC50分别为1 193.52和964.34μg/mL;流式细胞术分析表明,三氯甲烷浸提物作用后HepG2细胞的S期和G2/M期细胞比例明显降低,G0/G1期细胞比例明显升高。结论九香虫三氯甲烷浸提物能抑制两种肿瘤细胞的体外增殖,对HepG2细胞抗肿瘤活性可能是由于通过其细胞周期的阻滞引起。     

九香虫粗提物对SGC-7901和HepG2细胞增殖及细胞周期的影响

目的 研究九香虫粗提物对人胃癌SGC-7901细胞和肝癌HepG2细胞体外增殖和细胞周期的影响.方法 以乙醇为溶剂采用冷浸法获得九香虫的粗提物;利用倒置显微镜观察给药后两种癌细胞的形态变化;MTF法分析粗提物对两种癌细胞体外增殖的抑制作用;流式细胞仪分析粗提物对两种癌细胞周期的影响.结果 九香虫粗提物对SGC-7901和HepG2细胞生长有抑制作用,并呈明显的剂量依赖性;九香虫粗提物作用24 h后,对SGC-7901和HepG2细胞的半数抑制浓度(IC50)分别为1 281.62μg/ml和582 μg/ml;流式细胞仪分析结果显示,与对照组细胞相比,HepG2细胞在细胞周期的分布上呈现显著的变化,即S期和G2/M期细胞比例明显降低、G0/G1期细胞比例明显升高.结论 乙醇粗提物能抑制两种肿瘤细胞的体外增殖,对HepG2细胞抗肿瘤活性可能是由于通过其细胞周期的阻滞引起.     

四味肝泰软胶囊对人肝癌细胞株SMMC-7721细胞周期及凋亡影响的初步研究

目的:初步探讨不同浓度四味肝泰软胶囊对人肝癌细胞株SMMC-7721细胞周期及凋亡的影响。方法:采用流式细胞仪PI染色法和Annexin V-EGFP/PI双染法研究不同浓度四味肝泰软胶囊作用于人肝癌细胞株SMMC-7721后细胞周期DNA含量变化及对细胞凋亡率的影响。结果:各浓度四味肝泰软胶囊均可以调节G1/S转换,使肿瘤细胞发生S期阻滞,造成S期细胞堆积,阻断细胞的DNA合成和复制,阻滞肿瘤细胞进入G2/M期,从而起到抑制肿瘤细胞的增殖,诱导SMMC-7721细胞凋亡,且这种诱导效应具有明显的时间-剂量-效应关系。结论:四味肝泰软胶囊对人肝癌细胞株SMMC-7721具有明显的抑制作用,其作用机制可能与抑制肿瘤细胞DNA的合成和诱导细胞凋亡有关。     

表没食子儿茶素没食子酸酯对结肠癌细胞株抑制作用的体外研究

目的探讨绿茶提取物表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对结肠癌细胞株(LoVo细胞、SW480细胞、HT29细胞、HCT-8细胞)增殖的抑制作用及对细胞凋亡和细胞周期的影响,研究其对结肠癌的抑癌机制。方法体外培养结肠癌细胞株,采用不同浓度的EGCG(10,20,35μg/ml)对其进行干预,MTT法检测EGCG对结肠癌细胞株增殖的抑制作用;用流式细胞仪检测EGCG对结肠癌细胞株凋亡和细胞周期的影响。结果 MTT法检测EGCG对结肠癌细胞株的抑制作用均具有浓度依赖性,且HT29细胞株尚具有时间依赖性。流式细胞仪检测EGCG能增强结肠癌细胞株的凋亡率,且剂量与凋亡率呈正相关。EGCG能将SW480细胞和LoVo细胞细胞周期阻滞在G0/G1期,阻碍其向S期转换,将HCT-8细胞阻滞在G2/M期,阻碍其向M期转换,将HT29细胞阻滞在S期,阻碍其向G2期转换,抑制结肠癌细胞株的增殖。结论EGCG对体外培养的结肠癌细胞株的增殖有明显抑制作用,其作用机制与增强细胞凋亡和影响细胞周期有关,具体作用机制有待进一步研究。     

熊果酸抑制人肝癌SMMC-7721细胞生长及凋亡的实验研究

目的:探讨熊果酸对人肝癌细胞株SMMC-7721的抑制作用.方法:将不同浓度的熊果酸分别与人肝癌细胞SMMC-7721共同培养24,72 h后,采用中性红染色法测定吸光度(A),评定熊果酸对肝癌细胞株的增殖抑制作用;流式细胞术测定其对肝癌细胞凋亡及细胞周期的影响.结果:不同浓度熊果酸对SMMC-7721细胞的增殖有明显的抑制作用(P＜0.05或P＜0.01),呈时间和剂量依赖关系;24,72 h的半数抑制浓度(IC50)为12.59,8.32 mg·L-1.流式细胞仪检测结果表明,熊果酸12.5 mg·L-1对肝癌SMMC-7721细胞凋亡率14.07％,凋亡率随药物浓度的增加而上升;SMMC-7721细胞阻滞S期,作用与药物剂量呈正相关.结论:熊果酸对肝癌细胞株SMMC-7721增殖有明显的抑制作用,抗肿瘤作用机制可能与诱导细胞凋亡及细胞周期阻滞于S期有关.     

瑞香狼毒药效组分诱导人肝癌细胞凋亡及对细胞周期依赖性蛋白激酶CDK2的影响

目的:探讨瑞香狼毒药效组分Zp1111对人肝癌细胞的增殖抑制与诱导凋亡作用及机制。方法:MTT法比较瑞香狼毒药效组分Zp1111对体外培养的人来源肝癌细胞与正常肝细胞LO2抑制作用,采用流式细胞术检测用药前后BEL-7402细胞凋亡的变化并分析Zp1111对DNA周期分布的影响,荧光共振能量转移法检测Zp1111对细胞周期依赖性蛋白激酶CDK2的抑制作用。结果:Zp1111对体外培养的肝癌细胞HepG2、BEL-7402、SMMC-7721均有较好的抑制作用,IC50分别为37.75μg/ml、28.60μg/ml、29.22μg/ml,而对正常肝细胞LO2抑制作用不明显,在25μg/ml及以下的浓度对LO2细胞反而有一定促进作用。Zp1111能诱导BEL-7402细胞发生凋亡,一定药物浓度范围内凋亡率具有药物浓度依赖关系;Zp1111还能调控体外培养的BEL-7402细胞周期分布,显著下调S期的细胞比例,并且对CDK2具有较好的抑制作用。结论:瑞香狼毒药效组分Zp1111具有一定诱导凋亡作用,可使BEL-7402细胞周期阻滞在G1期,其作用机制可能与抑制CDK2有关。     

健脾化瘀方对胃癌细胞SGC-7901凋亡和周期的影响

目的:观察健脾化瘀方体外对人胃癌细胞株SGC-7901增殖、凋亡及细胞周期的影响。方法:①采用MTT法观察不同浓度健脾化瘀方体外对人胃癌细胞株SGC-7901增殖的抑制作用;②用Annexin V/PI荧光双染法检测健脾化瘀方诱导肿瘤细胞进入凋亡的影响;③用流式细胞仪检测健脾化瘀方对SGC-7901细胞周期的阻滞效应。结果:①健脾化瘀方能抑制人胃癌细胞SGC-7901增殖,随着药物浓度的增大以及作用时间的延长,其对细胞的抑制率也明显增强,呈现剂量及时间依赖性。②当2mg/ml和4mg/ml健脾化瘀方作用于人胃癌SGC-7901细胞48h可显著诱导细胞凋亡的产生。③细胞周期方面,健脾化瘀方作用于人胃癌细胞SGC-7901后G2/M期比例与阴性对照组相较显著上升,G0/G1期稍有上升,而S期比例下降,表明细胞被阻滞于G2/M期。结论:健脾化瘀方可明显抑制人胃癌细胞SGC-7901的增殖作用并能够诱导该细胞凋亡,改变细胞周期。     

氧化白藜芦醇对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭和自噬的研究

目的:探讨氧化白藜芦醇对人肝癌细胞的抑制作用。方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法和CCK-8法检测氧化白藜芦醇对人肝癌Hep G2、SMMC-7721细胞增殖的影响;划痕实验、Transwell侵袭实验观察氧化白藜芦醇对肝癌细胞迁移、侵袭能力的影响; Western Blot检测氧化白藜芦醇处理肝癌细胞后p62和LC3蛋白的表达。结果:氧化白藜芦醇对人肝癌Hep G2、SMMC-7721细胞的IC50值分别为38. 5μg/m L、20. 6μg/m L,且增殖抑制效果呈剂量依赖性。氧化白藜芦醇12. 5μg/m L以上剂量能够显著抑制肝癌细胞的迁移、侵袭和自噬。结论:氧化白藜芦醇能够显著抑制体外人肝癌Hep G2、SMMC-7721细胞增殖、迁移、侵袭,抗癌作用与自噬无关。     

乳腺癌患者淋巴细胞功能相关抗原表达水平的临床研究

目的：探讨乳腺癌患者血、癌组织、引流淋巴结中淋巴细胞功能相关抗原ＣＤ１１a、ＣＤ １８、ＣＤ５４蛋白表达水平及化疗和中药益气养血冲剂对其表达水平的影响。方法：免疫组化法和流式细胞检血冲剂后的改变。结果：乳腺癌患者血中ＣＤ５４水平与良性对照组比较明增高，癌组织淋巴细胞ＣＤ１１a、ＣＤ１８、ＣＤ５４水平明显增高，乳腺癌细胞Ｃ Ｄ５４表达阳性率１００％，阴性淋巴结ＣＤ１１a、ＣＤ１８、ＣＤ５４水平明显高于阳     

无花果残渣中抗肿瘤成分的超临界CO2萃取和抑瘤试验

目的:研究无花果残渣中抗肿瘤功效成分的超临界CO₂萃取技术及萃取物的体内外抗肿瘤效果。方法:采用MTT法检测萃取物质的体外抗肿瘤活性,研究残渣中抗肿瘤功效成分的最佳萃取条件;采用MTT法研究萃取物质对U937细胞、95D细胞和AGS细胞3株肿瘤细胞株的体外抑制作用;以小鼠移植性肝癌Heps为对象,研究萃取物对体内肿瘤的抑制作用。结果:超临界CO₂提取的最佳工艺条件为:粉碎度100目,萃取压强30MPa,萃取温度45℃,萃取时间6h,气体流量12L.h^-1,萃取得率为25.3g.kg^-1,得到的萃取物在体外对U937细胞、95D细胞和AGS细胞具有一定的抑制作用,IC₅₀分别为70.125,127.957,116.000μg.mL^-1。萃取物对小鼠移植性肝癌Heps在25mg.kg^-1的剂量时抑瘤率为49.3%。结论:本萃取工艺合理、稳定。可以为无花果残渣和无花果中抗肿瘤功效成分的提取提供参考。     

健脾益气法对结直肠炎病变后诱发结直肠癌小鼠的影响研究

目的:观察健脾益气中药对结直肠炎病变后诱发结直肠癌小鼠白细胞介素(Interleukin,IL)-6和表皮细胞生长因子(Epidermal Growth Factor,EGF)蛋白的影响。方法:将30只雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组和治疗组,每组10只。采用偶氮氧化甲烷/葡聚糖硫酸钠方法建立结直肠炎相关结直肠癌小鼠模型,治疗组以加减四君子汤颗粒加蒸馏水配成溶液,药物质量浓度19.92%,3.32 g/kg灌胃,模型组以蒸馏水灌胃。4周后处死各组小鼠并留取血液和结直肠组织组织标本,酶联免疫吸附试验(Enzyme-linked immunosorbent method,ELISA)法检测血清IL-6浓度,苏木精-伊红染色法(Hematoxylin-eosin Staining,简称HE染色法)染色镜下观察小鼠结肠组织病理变化,Western-blot法检测EGF蛋白表达。结果:健脾益气治疗组小鼠的体质量较模型组明显增加,差异有统计学意义(P<0.01);治疗组小鼠血清IL-6表达量比模型组显著下降,差异有统计学意义(P<0.01);治疗组小鼠的EGF蛋白表达显著降低,与模型组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:健脾益气中药能增加结直肠炎病变后诱发结直肠癌小鼠的体质量,减少炎症因子IL-6的表达和降低EGF蛋白表达,可为健脾益气中药抗结肠癌临床应用提供科学依据。     

不同治则对非小细胞肺癌患者调节性T 细胞、髓源抑制性细胞的影响

目的：通过研究扶正（益气养阴方）、祛邪（清热解毒方）、扶正祛邪（益气养阴解毒方）三种治则对非小细胞肺癌患者调节性T 细胞（Regulatory T cell,Treg）、髓源抑制细胞（Myeloid-derived suppressor cells, MDSC）免疫指标的作用,探究不同治则对非小细胞肺癌患者的免疫功能的影响。方法：采用完全随机、平行对 照的实验设计,将166例非小细胞肺癌患者按照随机数字表纳入研究,完成益气养阴方组（A组）39例、清热解 毒方组（B组）46例、益气养阴解毒方组（C组）49例,分别给予相应的中药汤剂,4周为一个疗程,治疗3个疗程 （12周）后观察对Treg和MDSC的影响。结果：治疗前非小细胞肺癌患者外周血Treg、MDSC水平明显高于健康 人群组,具有统计学意义（P＜0.001）。治疗后,B组和C组能够显著降低肺癌患者的Treg、MDSC,改善机体免疫 功能（P＜0.05）。治疗后,A组对非小细胞肺癌患者外周血Treg、MDSC无显著调节作用（P＞0.05）。治疗后,三 组之间比较,B组对降低非小细胞肺癌患者的Treg、MDSC水平更有优势。结论：祛邪和扶正祛邪治则均可调控 肺癌患者的免疫功能,而祛邪治则在抑制MDSC和Treg方面作用更强。     

益气养阴活络法治疗2型糖尿病50例

目的观察益气养阴活络法治疗2型糖尿病50例临床疗效。方法将临床2型糖尿病患者100例随机分为治疗组和对照组,在对照组治疗基础上加益气养阴活络中药治疗。结果两组显效率比较,差异均有显著性意义(P0.05),治疗组优于对照组;两组治疗前后各项指标比较提示益气养阴活络法结合西药常规治疗糖尿病疗效优于单纯西药常规治疗。讨论中医药益气养阴活络法能有效改善糖尿病患者临床症状、降低血糖疗效优于单纯西药常规治疗。     

益气生血汤防治乳腺癌化疗毒副反应的临床观察

目的:探讨益气生血汤在乳腺癌患者化疗中减轻毒副反应的疗效。方法:共纳入乳腺癌术后患者70例,随机分为两组,其中西药对照组35例,化疗后予利血生、鲨肝醇、VitB4服用;治疗组35例,化疗后予利血生、鲨肝醇、VitB4服用的同时给予中药益气生血汤口服。结果:经统计学分析,治疗组(中药加西药)在减轻乳腺癌化疗后血液学毒性方面(白细胞减少方面)优于西药对照组(P<0.01);治疗组相比于西药对照组,可以明显减少集落细胞刺激因子粒生素的使用量(P<0.01);此外,治疗组患者的副反应症状明显低于对照组差异。结论:益气生血汤可明显减轻乳腺癌患者化疗毒性反应。     

益气养阴方对卵巢癌术后患者化疗不良反应及生存质量的影响

目的:观察益气养阴方对卵巢癌术后患者行化疗治疗的不良反应及生存质量的影响。方法:将经全面手术的64例卵巢癌术后Ⅰ-Ⅲ期患者采用简单随机化分组法分为观察组和对照组各32例。对照组予紫杉醇+铂类静脉给药,治疗6个疗程,观察组在对照组治疗的基础上在化疗间歇期内口服益气养阴方。每次化疗前及化疗后第3天测血常规及肝肾功能,并记录胃肠道反应以测定患者不良反应(白细胞、中性粒细胞、血红蛋白降低; 腹泻、恶心呕吐等)情况。并采用卡氏评分(Karnofsky)及癌症生命质量评分(EORTC QLQ-C30)评价两组患者化疗前后生存质量,同时观察两组的中医证候积分变化情况。结果:观察组不良反应(白细胞、中性粒细胞、血红蛋白降低、腹泻、恶心呕吐等)均明显低于对照组(P<0.05); 两组化疗后在卡氏评分、QLQ-C30评分差异均具有统计学意义(P<0.05); 治疗后观察组在气阴两虚证证侯积分及血瘀证证候积分上均低于对照组(P<0.05)。结论:益气养阴方可降低卵巢癌术后化疗患者的化疗不良反应,提高患者生活质量与人体功能,改善患者中医证候。     

基于中医症征积分探讨益气活血方调节微栓子对急性缺血性脑卒中患者生活质量的影响

目的:通过随机、对照的研究方法,运用中风中医症征积分量表客观地评价益气活血颗粒对急性缺血性卒中(AIS)并微栓子(MES)阳性的患者生活质量的影响。方法:将120例AIS患者分为益气活血颗粒试验组和安慰剂对照组,每组各60例。试验组在单纯西医常规治疗的基础上,给予益气活血颗粒联合西药为一体的中西医结合综合治疗方案; 对照组为西医常规治疗,疗程为14 d,客观评价中西医结合综合方案可明显缓解AIS患者中医症状的临床表征以及对患者个体日常生活能力改善的临床疗效。结果:益气活血颗粒在改善AIS患者中医症状积分及临床症状对日常生活影响程度积分方面明显优于对照组(P<0.05)。结论:益气活血颗粒能明显减少AIS患者颅内MES数目,有效改善患者的中医症征积分,并可能因此而改善患者的临床症状使其获益,此种中西医结合治疗AIS的方法值得应用。     

解毒益气活血方抑制血管生成的实验研究

目的:探讨解毒益气活血方对体外血管形成的抑制作用。方法:采用MTT法观察解毒益气活血方对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)增殖的影响。结果:解毒益气活血方在10%～20%浓度范围内,具有抑制血管内皮增殖作用(内皮存活率在63.8%～58.5%),且均与对照组有显著差异。结论:解毒益气活血方(10%～20%)在体外具有抑制血管增殖作用。     

芪参益气滴丸对缺血性心肌病心力衰竭患者 心功能及NT-proBNP的影响

目的:观察芪参益气滴丸在缺血性心肌病心力衰竭治疗中的疗效及对左室功能、血浆N端脑钠肽前体(NT-proBNP)水平的影响.方法:80例符合缺血性心肌病心力衰竭诊断标准的患者,随机分为治疗组和对照组各40例,对照组采用常规西医治疗,治疗组在对照组治疗基础上加用芪参益气滴丸口服,观察两组治疗前及治疗后8周的心功能分级,6 min步行距离,心脏超声指标和NT-proBNP水平变化,评估其有效性.结果:治疗组较对照组能显著改善患者的左室功能并延长6 min步行距离(P＜0.05),显著降低血浆NT-proBNP水平,增加左心室射血分数(P＜0.05).结论:芪参益气滴丸可明显改善缺血性心肌病心力衰竭患者的心脏功能,提高运动耐量及生活质量,改善心室重构,不良反应少.