益气活血复方对慢性心衰大鼠心肌重构影响的实验研究

目的 研究中医药治疗慢性心衰的疗效机理.方法 利用冠脉结扎法配合力竭式游泳与减食法,模拟慢性心衰大鼠模型,使用益气活血复方与赖诺普利对照治疗观察,用蛋白印迹法和免疫组化法检测和心室重构关系密切的金属蛋白酶基质-1(MMP-1)和Ⅰ型胶原蛋白含量.结果 模型组MMP-1蛋白表达明显升高,经药物干预后各治疗组MMP-1蛋白表达明显下降,其西药组效果最为明显;模型组Ⅰ型胶原蛋白表达明显降低,经药物干预后各治疗组Ⅰ型胶原蛋白表达明显升高,中药组最为明显.结论 益气活血复方组总体治疗效果优于赖诺普利组,说明中医药治疗慢性心衰有着毒副作用小,疗效突出等优势,为中医药治疗慢性心衰提供了理论支持和实验依据.     

益气活血复方联合运动疗法对慢性心力衰竭大鼠心肌组织MMP-1及Ⅲ型胶原表达的影响

目的 探讨益气活血复方联合运动疗法对心肌梗死后慢性心力衰竭(chronic heart failure,CHF)大鼠心室重构的影响及其作用机制。     

益气活血复方对慢性心力衰竭大鼠心肌组织MMP-1、Ⅰ型胶原、BNP的影响

目的观察益气活血复方对心力衰竭大鼠血清脑钠素（BNP）、基质金属蛋白酶-1（MMP-1）及Ⅰ型胶原的影响,探讨其防治慢性心力衰竭的作用机制。方法以冠脉结扎法配合力竭式游泳、减食等造成大鼠慢性心力衰竭动物模型,对造模成功大鼠分为中药组、西药组、模型组,另设空白对照组（正常组）。中药组灌服益气活血复方9.2 g生药/（kg.d）;西药组灌服赖诺普利1.5 mg生药/（kg.d）。利用免疫组化法及蛋白印迹方法检测MMP-1及Ⅰ型胶原的变化情况。酶联免疫法测定大鼠血清BNP。结果与正常组相比,模型组BNP、MMP-1水平显著升高（P〈0.05或P〈0.01）;与模型组相比,中药组、西药组BNP、MMP-1明显降低（P〈0.05）,西药组MMP-1比中药组降低明显（P〈0.05）;模型组Ⅰ型胶原蛋白表达较正常组明显下降（P〈0.01）,与模型组相比,中药组、西药组Ⅰ型胶原蛋白表达明显升高（P〈0.01）,中药组较西药组升高明显（P〈0.01）。结论益气活血复方能够降低血清BNP水平,从而防止慢性心力衰竭的发展,改善心功能,对心肌组织MMP-1有抑制作用,对Ⅰ型胶原具有升高作用,可抑制或逆转心室重构的过程,从而有抗心力衰竭的作用。     

益气活血复方对慢性心衰大鼠心肌能量代谢mi-CK mRNA及蛋白的影响

目的:通过观察益气活血复方对心衰大鼠心肌组织mi-CK mRNA及蛋白表达的影响,从能量代谢角度研究中药在慢性心衰治疗中的作用。方法:本实验以冠脉结扎法配合力竭式游泳、减食等方法造成大鼠慢性心衰动物模型,对造模成功大鼠分为模型组、西药组、中药组,没有进行左冠脉结扎手术的假手术大鼠为正常组。检测各组大鼠±dp/dt max、心肌组织mi-CK mRNA及蛋白表达水平。结果:与模型组比较,各药物组±dp/dt max、mi-CK mRNA及蛋白表达均升高,差异有统计学意义(P0.05)。与西药组比较,中药组±dp/dt max升高明显,差异有统计学意义(P0.05)。在mi-CK mRNA及蛋白表达方面,两治疗组间比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论:益气活血复方可以增加心衰大鼠心肌mi-CK mRNA及蛋白的表达、改善ATP转运穿梭效率,起到修复心衰心肌能量代谢的作用。     

益气活血复方对慢性心衰大鼠NRF-1影响的实验研究

目的:对造模成功的慢性心衰动物进行实验观察,探究参草通脉颗粒通过对SD大鼠慢性心衰时核呼吸因子-1(NRF-1)的影响。方法:实验选取60只健康雄性12周龄的SD大鼠,建造大鼠慢性心衰动物模型,用随机数字表法将造模成功的大鼠随机分为4组,分别为中药参草通脉颗粒组、西药赖诺普利组、模型组、空白组对照组,每组取8只大鼠。造模成功后给药6周,观察与测试各组大鼠的NRF-1的表达水平及心功能变化。结果:中药参草通脉颗粒组与西药赖诺普利组,心功能的改善基本相同(P>0.05);中药参草通脉颗粒组对慢性心衰大鼠NRF-1水平的影响和西药赖诺普利组相当(P>0.05)。结论:中药参草通脉颗粒组、西药赖诺普利组均能干预NRF-1的表达,证明参草通脉颗粒是能够改善心肌能量代谢的方药,通过增加NRF-1的表达,起到改善心肌能量代谢,调节心肌内能量重构的作用。     

益气活血中药对心力衰竭大鼠MMP-1、TIMP-1影响的实验研究

[目的]观察益气活血复方对慢性心力衰竭大鼠心肌组织基质金属蛋白酶1(MMP-1)和基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)表达的影响.[方法]选用雄性SD大鼠,采用冠状动脉结扎术配合饥饿、游泳等方法造成慢性心力衰竭的动物模型.将造模成功的大鼠随机分为3组:模型组、中药组和西药对照组;中药干预6周后,将动物处死,取其心肌组织,利用实时定量荧光聚合酶链反应(PCR)技术和蛋白印迹分析法(Western blot)分别检测心肌组织中MMP-1、TIMP-1基因表达和蛋白表达.[结果]与对照组比较,大鼠模型组MMP-1的表达高于正常组(P＜0.01),而TIMP-1的表达明显低于正常组(P＜0.01);中药组和西药组MMP-1的表达均低于模型组(P＜0.01),TIMP-1的表达明显高于模型组(P＜0.01).[结论]益气活血中药可以下调MMP-1的表达,增加TIMP-1的表达,从而阻止MMP-1对心肌细胞外基质结构的破坏作用,延缓心肌重塑,改善心脏功能,从而阻止CHF的发展.     

益气活血复方对慢性心衰大鼠心肌组织AngⅡ及PKC的影响

目的:旨在通过动物实验观测中药益气活血复方对慢性心衰大鼠心肌组织血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)和蛋白激酶C(PKC)介导的信号传导的影响,进而阐明益气活血复方治疗慢性心衰的作用机制.方法:选用健康雄性SD大鼠,采用冠状动脉结扎术配合饥饿、游泳等方法造成慢性心衰的动物模型.将造模成功的大鼠随机分为4组:模型组、中药大剂量组、中药中剂量组和西药组,每组8只;另设一组作为正常组.喂养8周后,采用ABC免疫组化方法测定心肌组织中Ang Ⅱ和PKC的含量;用透射电镜观察心肌细胞超微结构的变化.结果:与正常组比较,模型组心肌局部组织的Ang Ⅱ、PKC含量高于正常组(P＜0.01).中药组和两药组Ang Ⅱ、PKC含量均低于模型组(P＜0.01),左心室超微结构较之模型组有明显改善.结论:益气活血复方可能通过降低Ang Ⅱ水平达到抑制RAS系统作用,下调PKC水平,影响其传导通路,以此来改善和纠正心衰.     

益气活血利水不同配伍对慢性心衰大鼠MMP-9影响的实验研究

目的 通过研究基质金属蛋白酶(MMP-9)在慢性心衰中的作用,从分子生物学角度探讨中药不同配伍对慢性心衰心室重构的影响,并进一步阐明其作用机理.方法 以冠脉结扎法配合力竭式游泳、减食等方法造成大鼠慢性心衰动物模型,分成模型组、西药组、益气中药组、活血中药组、益气活血中药组、益气活血利水中药组和正常组.利用实时荧光定量PCR技术及SABC免疫组化法检测慢性心衰大鼠MMP-9的变化情况.结果 慢性心衰动物模型组大鼠心肌MMP-9表达明显升高,与假手术组比较,差异有统计学意义(P＜0.01);经过治疗,各用药组大鼠心肌组织MMP-9表达明显降低,其中益气活血组、益气活血利水组中药与西药组比较,差异无统计学意义(P＞0.05),且益气活血利水组疗效明显优于益气活血组(P＜0.01).结论 证明益气活血利水中药可通过抑制心肌组织中MMP-9的表达,抑制或逆转心室重构的过程,从而达到治疗慢性心衰的目的.     

参草通脉颗粒影响慢性心衰大鼠心肌重构的作用机制研究

目的:分析参草通脉颗粒对心力衰竭大鼠心肌重构的作用机制。方法:取80只大鼠,予左冠状动脉前降支结扎,同时配合力竭式游泳、节食等方法做成慢性心衰模型,设正常组20只,将成功造模的大鼠分为模型组、中药组、西药组3组,以灌胃给药或蒸馏水28 d。以实时荧光定量PCR技术及SABC免疫组化法分别检测MMP-1、MMP-2、MMP-9蛋白的基因表达情况,及Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原的蛋白表达情况。结果:相对于正常组,其余3组大鼠MMP-1、MMP-2及MMP-9蛋白的基因表达水平显著升高(P0.01),模型组Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原的蛋白表达显著下降(P0.01);相对于模型组,中药组和西药组MMP-1、MMP-2、MMP-9蛋白的基因表达水平明显下降(P0.05),Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原的蛋白表达明显升高(P0.01);在西药组与中药组的心肌组织中,MMP-1、MMP-2及MMP-9蛋白含量无明显差异(P0.05),Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原的表达中药组较西药组升高明显(P0.05)。结论:参草通脉颗粒抑制慢性心衰心肌重构的机制可能与Ⅰ、Ⅲ型胶原和基质蛋白酶的表达有关。     

芪参健脾方对SHR大鼠心肌组织中MMP-1,MMP-2,MMP-9和Ⅰ,Ⅲ型胶原蛋白表达的影响

目的:观察芪参健脾方对自发性高血压大鼠(SHR)心肌组织内基质金属蛋白酶1,2,9(MMP-1,MMP-2,MMP-9)和Ⅰ,Ⅲ型胶原蛋白(collagen Ⅰ,collagenⅢ)表达的影响,探讨其改善高血压心肌纤维化的可能机制.方法:采用随机对照法将60只24周龄的SHR分为模型组、培哚普利组、培哚普利联合芪参健脾方组、芪参健脾方高、中、低剂量组,以同龄同种系的京都种大鼠(WKY) 10只作为正常组.正常组和模型组给予蒸馏水;培哚普利组用药量为0.4 mg·kg-1,中药治疗组采用标准水煎工艺,浓缩生药量4 g·mL-1,高、中、低剂量组ig给药剂量分别为40,20,10 g·kg-1;培哚普利联合中药组用药为培哚普利0.4 mg·kg-1+芪参健脾方20 g·kg-1.每日ig 1次,连续治疗6周后处死大鼠.免疫组化法检测各组大鼠心肌组织中Ⅰ,Ⅲ型胶原蛋白的表达;采用逆转录-多聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测各组大鼠心肌组织中MMP-1,MMP-2,MMP-9的mRNA表达,采用Western免疫印迹(Western blot)法测定各组大鼠心肌组织中MMP-1,MMP-2和MMP-9的蛋白表达.结果:与正常组比较,SHR组心肌呈典型心肌纤维化改变;与SHR模型组比较,培哚普利联合中药组、培哚普利组和芪参健脾方高剂量组中collagen Ⅰ和collagenⅢ的表达显著下降(P＜0.01,P＜0.05),中剂量组中collagenⅢ的表达也明显减少(P＜0.05);与模型组比较,培哚普利组、培哚普利联合中药组和芪参健脾方高剂量组中MMP-1,MMP-2和MMP-9的mRNA和蛋白的表达量都显著增加(P ＜0.01,P＜0.05),芪参健脾方中剂量组MMP-1蛋白的表达量也明显增加(P＜0.05).结论:芪参健脾方可通过调节MMP-1,MMP-2,MMP-9和collagen Ⅰ,collagenⅢ的水平,从而改善SHR大鼠心肌功能,这可能是其抑制SHR大鼠的心肌纤维化的机制之一.     

不同中药复方对慢性心衰大鼠MMP-2、TIMP-2影响的实验研究

目的:通过研究基质金属蛋白酶(MMP-2)及内源性基质金属蛋白酶组织抑制剂(TIMP-2)在慢性心衰中的作用,从分子生物学角度探讨中药不同配伍对慢性心衰心室重构的影响,并进一步阐明其作用机理。方法:本实验以冠脉结扎法配合力竭式游泳、减食等方法造成大鼠慢性心衰动物模型,分成模型组、西药组、益气中药组、活血中药组、益气活血中药组、益气活血利水中药组和正常组。利用实时荧光定量PCR技术及SABC免疫组化法检测慢性心衰大鼠MMP-2、TIMP-2表达的变化情况。结果:慢性心衰动物模型组大鼠心肌MMP-2表达明显升高,TIMP-2表达降低,与假手术组比较,差异有统计学意义(P<0.01);经过治疗,各用药组大鼠心肌组织MMP-2表达明显降低,TIMP-2表达升高,其中益气活血组、益气活血利水组中药与西药组比较,差异无统计学意义(P>0.05),且益气活血利水组疗效明显优于益气活血组(P<0.01)。结论:证明益气活血利水中药可通过作用于心肌组织中MMP-2、TIMP-2的表达,抑制或逆转心室重构的过程,从而达到治疗慢性心衰的目的。     

参附汤对慢性心衰患者血清MMP-9、TIMP-1和血浆NT-proBNP水平的影响

目的 探讨中西医结合对慢性心衰患者血基质金属蛋白酶(MMP-9)、基质金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP-1)、B型脑钠肽前体(NT-proBNP)水平的影响.方法 选取2018年1月～2019年12月青岛市即墨区人民医院住院及门诊86例慢性心衰患者为本次研究对象,患者按照随机数表法分成两组,西药治疗43例为对照组,在对...     

参附汤对慢性心衰患者血清MMP-9、TIMP-1和血浆NT-proBNP水平的影响

目的 探讨中西医结合对慢性心衰患者血基质金属蛋白酶(MMP-9)、基质金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP-1)、B型脑钠肽前体(NT-proBNP)水平的影响.方法 选取2018年1月～2019年12月青岛市即墨区人民医院住院及门诊86例慢性心衰患者为本次研究对象,患者按照随机数表法分成两组,西药治疗为对照组,在对照组基...     

益气活血中药对肾间质纤维化大鼠肾组织中I、Ⅲ型胶原,MMP-1和TIMP-1表达的影响

目的探讨益气活血中药抗肾间质纤维化的作用机制。方法采用单侧输尿管结扎致肾间质纤维化大鼠模型。应用免疫组化等技术,通过医学病理图像分析系统检测I、Ⅲ型胶原蛋白,基质金属蛋白酶1（MMP-1）,金属蛋白酶组织抑制因子1（TIMP-1）在肾间质纤维化大鼠肾组织中的表达。结果模型组Ⅲ型胶原蛋白的表达较假手术组显著增强;MMP-1在模型组表达较假手术组显著减弱且分布面积减少,同时模型组TIMP-1的表达与假手术组比较显著增强;中药治疗组与西药蒙诺治疗组都能逆转I、Ⅲ型胶原蛋白,MMP-1和TIMP-1的表达,但两组间无显著差异,中药大剂量的治疗效果明显优于中、小剂量。结论益气活血中药与血管紧张素转换酶抑制剂的治疗效果和机制较为一致,可能通过恢复MMP/TIMP间的网络平衡来减少细胞外基质中胶原蛋白的合成,增加其降解,从而达到减轻或抑制肾小管间质纤维化进程的目的。     

益气活血中药对肾间质纤维化大鼠肾组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原,MMP-1和TIMP-1表达的影响

目的 探讨益气活血中药抗肾间质纤维化的作用机制.方法 采用单侧输尿管结扎致肾间质纤维化大鼠模型.应用免疫组化等技术,通过医学病理图像分析系统检测Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白,基质金属蛋白酶1(MMP-1),金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP-1)在肾间质纤维化大鼠肾组织中的表达.结果 模型组Ⅲ型胶原蛋白的表达较假手术组显著增强;MMP-1在模型组表达较假手术组显著减弱且分布面积减少,同时模型组TIMP-1的表达与假手术组比较显著增强;中药治疗组与西药蒙诺治疗组都能逆转Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白,MMP-1和TIMP-1的表达,但两组间无显著差异,中药大剂量的治疗效果明显优于中、小剂量.结论 益气活血中药与血管紧张素转换酶抑制剂的治疗效果和机制较为一致,可能通过恢复MMP/TIMP间的网络平衡来减少细胞外基质中胶原蛋白的合成,增加其降解,从而达到减轻或抑制肾小管间质纤维化进程的目的.     

中药复方对慢性心力衰竭大鼠心肌组织AngⅡ、BNP的影响

目的观察益气活血复方对慢性心力衰竭大鼠血清脑钠素（BNP）、血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）的影响,探讨其防治慢性心衰的作用机制。方法以冠脉结扎法配合力竭式游泳、减食等造成大鼠慢性心衰动物模型;分为中药组、西药组、模型组及正常组。中药组灌服益气活血复方9.2g/（kg.d）;西药组灌服赖诺普利1.5mg/（kg.d）。利用实时荧光定量PCR技术及蛋白印迹法检测AngⅡ;。酶联免疫法测定大鼠血清BNP。结果与正常组相比,模型组血清BNP水平显著升高;与模型组相比,各给药组血清BNP明显降低,其差异有统计学意义;各给药组血清BNP水平比较无显著差异。模型组AngⅡmRNA表达明显升高;各给药组AngⅡmRNA表达较模型组有显著差异;中药组AngⅡ蛋白表达高于西药组。结论冠状动脉结扎法可成功复制实验性慢性心衰模型;益气活血复方能够降低血清BNP水平,抑制心肌组织中AngⅡ的表达,这可能是其防治慢性心衰的作用机制之一。     

益气活血中药对慢性心衰临床疗效及预后分析研究

目的:观察益气活血中药对慢性心衰气虚血瘀水停型患者的临床疗效及远期预后的影响。方法:选择80例慢性心衰属气虚血瘀水停型患者,随机分为治疗组和对照组,两组均给予基础西药治疗,治疗组在基础西药治疗的基础上加服益气活血中药颗粒剂,疗程1个月,随访9个月,治疗前后分别记录患者心衰疗效(Lee氏)记分、心功能分级(NYHA)、中医症状疗效积分、6 min步行试验、生活质量调查表评分、氢氯噻嗪片停减率、再住院率等指标。记录患者治疗前后血、尿常规、肝功能(AST、ALT)、肾功(CR、BUN)等指标。结果:治疗前后两组患者心功能分级、心衰疗效积分,均较前改善(P<0.05);中医症状疗效积分、6 min步行试验、生活质量调查表评分、氢氯噻嗪片停减率、再住院率较治疗前比较均明显改善,且治疗组优于对照组(P<0.05)。结论:益气活血中药可明显改善CHF患者心功能分级,提高心衰疗效,改善临床症状,增加患者运动耐量,提高生活质量,减少氢氯噻嗪使用量,降低其再住院率。     

桂参通脉胶囊对心衰大鼠心室重构MMP-1及TIMP-1的表达研究

目的:研究桂参通脉胶囊对心衰大鼠心室重构MMP-1以及TIMP-1表达。方法:腹腔注射盐酸阿霉素(ADR)制备大鼠心衰模型。将60只成年雄性SD大鼠随机分为正常对照组、心衰模型组和桂参通脉低、中、高剂量组及卡托普利组,每组10只,干预4周后,提取小鼠心肌组织,采用蛋白免疫印迹法,以凝胶成像系统分析MMP-1及TIMP-1的水平。结果:MMP-1在心衰模型组的表达程度显著升高,采用桂参通脉胶囊干预后发现,中、高剂量组可显著降低MMP-1蛋白表达,且明显低于卡托普利组(P<0.05)。TIMP-1的蛋白表达在正常组最高,心衰组表达最低,通过药物干预后发现,卡托普利组、桂参通脉中、高剂量组均能上调TIMP-1的表达,其中以桂参通脉高剂量组上调最明显(P<0.05)。结论:桂参通脉胶囊能降低CHF大鼠MMP-1水平,提高TIMP-1的表达,降低MMP-1/TIMP-1比值,延缓CHF发展,逆转心室重构。