牛珀至宝微丸对内毒素急性肺损伤胶原纤维表达的影响

目的 观察牛珀至宝微丸对内毒素急性肺损伤时胶原纤维表达的影响。方法 静脉注射内毒素(LPS)1．5mg／kg、腹腔注射D-氨基半乳糖(D-GalN)100mg／kg造成内毒素休克模型，用牛珀至宝微丸和AG作对照干预处理，Van Gieson法染色检测胶原纤维在肺组织内的表达。结果 内毒素造成严重的急性肺损伤，肺组织胶原纤维染色显著增强；牛珀至宝微丸能减轻肺损伤，肺组织胶原纤维染色明显减弱。结论 牛珀至宝微丸能减轻内毒素急性肺损伤和纤维化，可能有治疗急性肺损伤纤维化的作用。     

牛珀至宝微丸对内毒素肺损伤纤维化大鼠信号转导蛋白smads表达的影响

目的:观察牛珀至宝微丸对内毒素肺损伤纤维化大鼠中转化生长因子-β下游胞内信号转导蛋白Smads表达的影响.方法:气管内两次滴注脂多糖内毒素(1.5mg/kg,3.0mg/kg)、腹腔注射脂多糖内毒素(3.0mg/kg)造成内毒素大鼠急性肺损伤纤维化模型,设正常组对照,用牛珀至宝微丸作干预处理,以HE染色法观察肺组织损伤的形态学改变,Van Gieson法染色检测胶原纤维在肺组织内的表达,并用Western Blot、免疫组化方法检测在肺组织内TGF-β下游胞内信号转导蛋白Smads的表达.结果:内毒素造成严重的急性肺损伤,牛珀至宝微丸可以使内毒素肺损伤纤维化大鼠的smad2/3表达得到抑制,smad4和smad7表达得到不同程度的增强.结论:牛珀至宝微丸减轻内毒素肺纤维化的机理可能与其对TGF-β下游smads通路的调节表达相关.     

牛珀至宝微丸对内毒素休克肺组织热休克蛋白70表达的调控

目的 :观察 :牛珀至宝微丸对内毒素休克肺损伤时热休克蛋白 70 (heatshockprotein ,HSP70 )表达的影响及其与一氧化氮 (nitricoxide,NO)的关系。方法 :静脉注射内毒素 (LPS) 1.5mg/kg ,腹腔注射D -氨基半乳糖 (D -GalN) 10 0mg/kg造成内毒素休克模型 ,用牛珀至宝微丸和AG作对照干预处理 ,检测血浆一氧化氮 (NO)浓度 ,免疫组化方法检测HSP70在肺组织内的表达。结果 :牛珀至宝微丸增强内毒素休克时肺组织HSP70表达 ,降低血浆NO浓度 ,肺损伤减轻。结论 :证实牛珀至宝微丸能增强内毒素休克时肺组织HSP70表达 ,提示牛珀至宝微丸对内毒素休克造成的肺损伤的保护作用可能是通过刺激肺组织HSP70表达增强来调节血浆NO浓度而产生的。     

牛珀至宝微丸对内毒素肺损伤纤维化大鼠信号转导蛋smads表达的影响

目的：观察牛珀至宝微丸对内毒素肺损伤纤维化大鼠中转化生长因子-β下游胞内信号转导蛋白Smads表达的影响。方法：气管内两次滴注脂多糖内毒素（1．5mg／kg,3．0mg／kg）、腹腔注射脂多糖内毒素（3．0mg/kg）造成内毒素大鼠急性肺损伤纤维化模型,设正常组对照,用牛珀至宝微丸作干预处理,以HE染色法观察肺组织损伤的形态学改变,Van Gieson法染色检测胶原纤维在肺组织内的表达,并用Western Blot、免疫组化方法检测在肺组织内TGF-β下游胞内信号转导蛋白Smads的表达。结果：内毒素造成严重的急性肺损伤,牛珀至宝微丸可以使内毒素肺损伤纤维化大鼠的smad2／3表达得到抑制,smad4和smad7表达得到不同程度的增强。结论：牛珀至宝微丸减轻内毒素肺纤维化的机理可能与其对TGF—β下游smads通路的调节表达相关。     

牛珀至宝微丸对内毒素急性肺损伤MDA和SOD的影响

目的观察牛珀至宝微丸对内毒素急性肺损伤时MDA和SOD的影响。方法静脉注射内毒素(LPS)1.5mg/kg、腹腔注射D-氨基半乳糖100mg/kg造成内毒素休克模型,牛珀至宝微丸作对照干预处理,用HE染色观察肺损伤,用硫代巴比妥酸法测定MDA,用黄嘌呤氧化酶法测定SOD活力,观察内毒素急性肺损伤时肺组织与血清的MDA和SOD变化。结果内毒素造成严重的急性肺损伤,肺组织及血浆中MDA含量增多,SOD活性减弱,牛珀至宝微丸能减轻肺损伤,并能减低MDA含量和增加SOD活性。结论牛珀至宝微丸能减轻内毒素急性肺损伤,其机理与MDA和SOD有关。     

牛珀至宝微丸对内毒素休克肝损伤iNOS表达的影响

全世界每年约有30万人患感染中毒性休克,虽然抗生素已广泛应用并且有重症监护的支持,但其死亡率仍高达35%～60%,死亡的主要原因多脏器衰竭[1].一氧化氮(nitric oxide,NO)具有较强的细胞毒和血管扩张作用,NO在内毒素诱导下主要是由诱导型一氧化氮合酶(induciblenitricoxide synthase,iNOS)催化底物左旋精氨酸(L-Arg)而生成[2,3].近年研究表明,内毒素休克与一氧化氮(NO)生成密切相关[4],牛珀至宝微丸具有通瘀、化浊、开窍等功能[5],本课题研究牛珀至宝微丸抗内毒素休克作用与调节NO水平相关,并可减轻多脏器的病理损伤[6～8],其对肝脏的影响,本文探讨报道如下.     

牛珀至宝微丸对内毒素急性肺损伤α-SMA表达的影响

目的:观察牛珀至宝微丸对内毒素急性肺损伤纤维化α-SMA表达的影响.方法:采用内毒素"三次打击"造模,用牛珀至宝微丸干预处理,HE染色观察肺损伤,Van Gieson法染色检测肺胶原纤维表达,免疫组化染色观察α-SMA表达.结果:内毒素造成严重的急性肺损伤,肺组织胶原纤维染色显著增强,α-SMA表达增强;牛珀至宝微丸能减轻急性肺损伤及肺组织胶原纤维表达,并能减轻α-SMA表达.结论:牛珀至宝微丸能减轻内毒素急性肺损伤所致的纤维化与调节α-SMA表达相关.     

牛珀至宝微丸对热应激反应内毒素休克大鼠TNF-α的影响

目的：研究牛珀室 宝微丸对热应激反应内毒素休克大鼠影响。方法：将雄性Wistar大鼠45只随机分成3组：a：热应激＋牛珀至宝微丸＋内毒素组;b：热应激＋NS＋内毒素组;C：NS＋内毒素对照组。分别予以热应急处理或热应激处理后灌注牛珀至宝微丸或单独灌注生理盐水后,静脉注射内毒素（LPS）然后取注射LPS前和后2h的动脉血分离血浆测定TNF－α,同时用二导生理仪记录血压等。结果：动物注射LPS后血压明显降低,TNF－α浓度明显升高,热激反应能降低其家度（P＜0．05）,而牛至宝微丸能加强其作用（P＜0．05）。结论：牛珀至社微丸能加强大鼠对热应激反应。     

牛珀至宝微丸对内毒素急性肺损伤水通道蛋白表达的影响

目的：观察牛珀至宝微丸对内毒素急性肺损伤纤维化水通道蛋白表达的影响。方法：静脉注射内毒素（LPS）、腹腔注射D-氨基半乳糖（D—GalN）造成内毒素休克模型，用牛珀至宝微丸干预处理，HE染色观察肺损伤，Van Gieson法染色检测肺胶原纤维表达，免疫组化染色观察AQP—1和AQP-5表达。结果：内毒素造成严重的急性肺损伤，肺组织胶原纤维染色显著增强，AQP-1和AQP-5表达减弱；牛珀至宝微丸能减轻急性肺损伤及肺组织胶原纤维表达，并能提高AQP-1和AQP-5表达。结论：牛珀至宝微丸能减轻内毒素急性肺损伤和纤维化的机理可能与调节AQP-1和AQP-5表达相关。     

牛珀至宝微丸对内毒素休克大鼠脑诱导型一氧化氮合酶表达的影响

目的：探讨牛珀至宝微丸对内毒素休克大鼠脑诱导型一氧化氮合酶(Inducible Nitric Oxide Synthase,iNOS)表达的影响。方法：静脉注射内毒素1.5mg／lg、腹腔注射D-氨基半乳糖(D-GaIN)100mg／kg造成内毒素休克模型,免疫组化方法检测iNOS在脑区的表达。结果：内毒素组iNOS阳性细胞分布于大脑皮质、纹状体、脑干、小脑等。而牛珀至宝微丸能明显降低内毒素所致iNOS表达,二者间比较,差异有显著性。结论：牛珀至宝微丸治疗内毒素休克脑损伤与下调iNOS表达相关。     

牛珀至宝微丸对内毒素休克肺组织热休克蛋白70表达的调控

目的：观察：牛珀至宝微丸对内毒素休克肺损伤时热休克蛋白70(heat shock protein，HSP70)表达的影响及其与一氧化氮(nitric oxide，NO)的关系。方法：静脉注射内毒素(LPS)1．5mg/kg，腹腔注射D-氨基半乳糖(D—GalN)100mg／kg造成内毒素休克模型，用牛珀至宝微丸和AG作对照干预处理，检测血浆一氧化氮(NO)浓度，免疫组化方法检测HSP70在肺组织内的表达。结果：牛珀至宝微丸增强内毒素休克时肺组织HSP70表达，降低血浆：NO浓度，肺损伤减轻。结论：证实牛珀至宝微丸能增强内毒素休克时肺组织HSP70表达，提示牛珀至宝微丸对内毒素休克造成的肺损伤的保护作用可能是通过刺激肺组织HSP70表达增强来调节血浆NO浓度而产生的。     

牛珀至宝微丸对内毒素致急性肺损伤纤维化大鼠中smurf1、smurf2、snoN表达的影响

目的：观察牛珀至宝微丸（牛丸）对内毒素致急性肺损纤维化大鼠模型中smurf1、smurf2、snoN表达的影响。方法：采用内毒素＂三次打击＂造成急性肺损伤纤维化模型,用牛丸干预处理,用Western Blot、免疫组化方法检测泛素化调节因子smurf1、smurf2及转录共抑制因子snoN在肺组织内的表达。结果：内毒素造成严重的急性肺损伤,牛珀至宝微丸可以使内毒素肺损伤纤维化大鼠的smurf2表达得到增强,snoN、smurf1表达得到抑制。结论：牛丸减轻内毒素肺纤维化的机理可能与其调节smurf2、snoN在肺组织内的表达有关,与smurf1表达无关。     

牛珀至宝微丸对局灶性脑缺血再灌注后 Nestin表达的影响

目的 :探讨牛珀至宝微丸对局灶性脑缺血再灌注后神经干细胞Nestin表达的影响。方法 :采用大脑中动脉线栓法造成局灶性脑缺血再灌注模型 ,应用免疫组织化学技术检测神经上皮干细胞巢蛋白 (Nestin)的表达 ,观察牛珀至宝微丸对脑缺血后神经上皮干细胞巢蛋白的影响。结果 :脑缺血再灌注后 ,牛珀至宝微丸组缺血侧室管膜、室管膜下区、皮层和纹状体Nestin阳性细胞数显著多于缺血对照组 (P <0 0 5 ) ,且神经病学评分明显低于缺血对照组 (P <0 0 5 )。结论 :牛珀至宝微丸能持续上调脑缺血再灌注后Nestin的表达 ,这可能是其治疗缺血性脑血管病的机理之一。     

益气活血中药对放射性肺损伤大鼠血清转化生长因子-β_1和γ-干扰素的影响

目的观察益气活血中药对小剂量重复照射下不同时相大鼠血清转化生长因子-β1（TGF-β1）、γ-干扰素（γ-IFN）的影响,探讨其对放射性肺损伤的防治作用及可能机制。方法12O只Wistar雌性大鼠随机分为照射加中药组30只、照射加氨溴索组30只、单纯照射组30只、正常对照组6只。用直线加速器对前3组大鼠右肺进行分次照射（5Gy／次,1次／周,累积剂量最高为30Gy）,于照射开始后第4、6、8、12、26周5个时间点分别处死大鼠,取血清标本进行ELISA检测,观察各组大鼠不同时相血清TGF-β1、γ-IFN的动态变化。结果单纯照射组大鼠血清TGF-β1于照射第4周增高,第12周达高峰,第26周略下降;而γ-IFN在第4周开始降低,第12周下降加快,至26周逐渐恢复。照射加中药组各时相大鼠血清TGF-β1表达均低于单纯照射组,而γ-IFN均高于单纯照射组（P〈0．05）;各时相值与照射加氨溴索组近似,差异无统计学意义（P〉0．05）。结论益气活血中药具有抑制TGF-β1分泌、促进γ-IFN分泌作用,提示其可能具有减轻早期放射性炎症反应和后期放射性肺纤维化的作用,对放射性肺损伤的防治具有-定作用。     

牛珀至宝丹及参麦液对内毒素休克大鼠肺损伤的保护作用

本实验用粗制大肠杆菌内毒素（ET）休克大鼠模型,依据中医开闭固脱治则,用牛珀至宝丹及参麦注射液治疗,观察其对ET休克大鼠肺脏损伤的保护作拥。结果表明牛珀至宝丹及参麦注射液可明显减轻ET休克大鼠肺组织损伤,表现为平均动脉压（MAP）下降程度减轻,肺泡腔内白细胞渗出及乳酸脱氢酶（LDH）释放减少,脂质过氧化损伤及肺组织学改变明显减轻。     

牛珀至宝微丸对骨髓间充质干细胞移植后转分化为神经元的影响

目的:观察牛珀至宝微丸对骨髓间充质干细胞(MSC)在脑缺血移植后的增殖与分化.方法:分离成年大鼠MSC并扩增,植入局灶性脑缺血大鼠纹状体内,并用牛珀至宝微丸干预治疗.于移植后1、2、3、4、6周取脑纹状体,用Brdu、NF免疫组化检测MSC移植后的增殖与分化.结果:移植后l周,移植区内可见Brdu、NF阳性表达,移植后2周达到高峰,移植后4周Brdu和NF表达减少,牛珀至宝微丸组(实验组)Brdu和NF表达不但增强,而且表达持续至移植后6周,与模型组比较差别有非常显著意义(P＜0.01).结论:牛珀至宝微丸不但能促进脑缺血移植MSC增殖,并且还能促进其分化为神经元.     

宣肺健脾法对哮喘大鼠转化生长因子-β1及其受体表达的影响

目的:观察宣肺健脾法中药哮逐平对支气管哮喘大鼠的治疗作用,探讨其可能的作用机制。方法:SPF级雄性Wistar大鼠32只随机分为正常对照组(A组)8只、哮喘模型组(B组)8只、地塞米松组(C组)8只、哮逐平组(D组)8只。除A组外,余组动物建立哮喘模型。HE染色,观察支气管-肺组织病理学改变,以医学图像分析软件测量支气管基底膜周径(Pbm)、支气管壁厚度(Wat)和平滑肌厚度(Wam),支气管肺泡灌洗液(BALF)细胞分类计数。免疫组化PV二步法染色,应用上述图像分析软件检测支气管-肺组织转化生长因子-β1(TGF-β1)及其受体Ⅰ(TβRⅠ)、受体Ⅱ(TβRⅡ)水平的积分光密度(IOD)。结果:与A组相比,B组EOS百分比、Wat、Wam和支气管-肺组织TGF-β1、TβRⅠ表达明显增加,具有非常显著性意义(P0.01)。经药物干预后,C和D组EOS百分比、Wat、Wam减少,支气管-肺组织TGF-β1、TβRⅠ表达显著降低(P0.05)。D组EOS百分比、Wat、Wam、TGF-β1和TβRⅠ减少尤为明显,与B组相比,均有显著差异(P0.05),其中Wat、Wam与A组相比,无显著性差异(P0.05)。与C组相比,D组EOS百分比、TGF-β1和TβRⅠ表达明显减少,具有非常显著性意义(P0.01)。结论:宣肺健脾法中药可能通过抑制哮喘大鼠支气管-肺组织TGF-β1及其受体的过度表达而影响平滑肌增殖、减轻气道壁增厚,干预气道重塑。     

通肾络胶囊对糖尿病肾病大鼠肾脏转化生长因子-β1及其Ⅱ型受体表达的影响

目的:观察中药通肾络胶囊对糖尿病肾病(DN)模型大鼠肾脏转化生长因子-β1(TGF-β1)及转化生长因子βⅡ型受体(TβRⅡ)表达的影响,探讨通肾络胶囊对DN大鼠肾脏保护作用的可能机制。方法:采用单侧肾脏切除并腹腔注射链脲佐菌素(STZ)的方法复制DN大鼠模型。50只大鼠随机分为5组:假手术组、模型组、缬沙坦组、糖适平组、通肾络胶囊组,每组10只。动态检测各组大鼠空腹血糖(FBG)、24h尿微量白蛋白(24h mALB),末次给药后测定大鼠血浆糖化血红蛋白(HblAc),计算肌酐清除率(Ccr),透射电镜观察各组大鼠肾脏超微结构改变,应用免疫组化技术及图像采集分析系统测定各组大鼠肾脏组织中TGF-β1和TβRⅡ的表达。结果:通肾络胶囊可显著降低DN大鼠FBG、HblAc、24h mALB的水平,延缓Ccr的下降,减轻肾小球基底膜(GBM)增厚程度,降低TGF-β1、TβRⅡ的表达。结论:通肾络胶囊可能通过降低TGF-β1、TβRⅡ的表达调节ECM代谢从而发挥对DN大鼠肾脏的保护作用。     

牛珀至宝微丸对局灶性脑缺血后大鼠脑组织一氧化氮合酶的影响

目的：探讨牛珀至宝微丸对大鼠局灶性脑缺血后脑组织一氧化氮合酶（NOS）的作用。方法：采用大脑中动脉线栓法造成局灶性脑缺血模型。应用免疫组织化学技术检测脑组织NOS3种亚型（eNOS,nNOS,iNOS)的表达。观察牛珀至宝微丸对脑缺血后NOS3种亚型表达的影响。并进行神经病学评分。结果：牛珀至宝微丸组的缺血侧大脑皮层nNOS,iNOS表达显著低于缺血对照组（P<0.05,P<0.01),eNOS表达高于缺血对照组（P<0.05)。并可减轻神经损伤症状（P<0.05)。结论：牛珀至宝微丸能下调脑缺血所致nNOS,iNOS的异常表达，上调eNOS表达，这可能是其治疗缺血性脑血管病的机理之一。     

补益脾肾方对阿霉素肾病大鼠肾间质转化生长因子-β1和结缔组织生长因子表达的影响

目的:探讨补益脾肾方对阿霉素肾病大鼠肾间质转化生长因子-β1(TGF-β1)和结缔组织生长因子(CT-GF)表达的影响。方法:将32只雄SD大鼠随机分为空白组、阿霉素肾病模型组、贝那普利治疗组、补益脾肾中药治疗组。采用一次性尾静脉注射阿霉素建立阿霉素肾病模型,于造模后第2周对阿霉素肾病大鼠分别用贝那普利和中药治疗。于造模后第6周处死所有大鼠,切片做Masson染色观察肾小管及间质的病理变化;应用免疫组织化学方法检测肾组织中TGF-β1、CTGF的蛋白质表达。结果:补益脾肾法可以下调阿霉素肾病大鼠肾间质TGF-β1及CTGF的表达(P<0.05),延缓间质纤维化的进展。结论:中医补益脾肾方可以通过下调肾间质TGF-β1及CTGF的表达,延缓阿霉素肾病大鼠肾小管间质纤维化的进展。