人支气管上皮细胞5-脂氧合酶介导4-氨基联苯的活化及DNA损伤

目的探讨人支气管上皮(HBE)细胞内5-脂氧合酶(5-LOX)对4-氨基联苯(4-ABP)的氧化活化及所致DNA损伤,为LOX作为前致癌物氧化活化的代谢途径提供依据。方法①体外酶系统实验:4-ABP在含有大豆脂氧合酶(SLO)的体外酶体系中反应,用分光光度法检测体系中反应产物生成。②细胞实验:4-ABP 100～800μmol.L-1染毒HBE细胞,MTT法检测HBE细胞存活率;Western印迹法检测5-LOX蛋白表达;单细胞凝胶电泳检测DNA损伤。同时,检测特异性5-LOX抑制剂AA861对5-LOX蛋白表达和多种酶抑制剂对细胞存活率和DNA损伤的影响。结果在过氧化氢参与下,SLO可以协同氧化4-ABP,LOX抑制剂去甲二氢愈创木酸可抑制该协同氧化作用。4-ABP可以使HBE细胞内5-LOX蛋白表达增加,AA861对5-LOX蛋白表达没有影响;4-ABP 400μmol.L-1可以使HBE细胞产生明显的DNA损伤,彗星细胞的阳性率达47.7%(P<0.01),AA861和萘普生可以抑制该浓度4-ABP所致的DNA损伤,最大保护率分别为58.1%和21.7%。结论 4-ABP上调HBE的5-LOX蛋白表达。5-LOX可能通过介导4-ABP协同氧化,导致DNA损伤,这可能是4-ABP致癌的机制之一。     

冠脉宁片对犬急性心肌缺血的保护作用研究

目的：观察冠脉宁片对犬急性心肌缺血的保护作用。方法：制备犬实验性急性心肌梗死模型后,十二指肠给药,阳性对照组给予丹参滴丸0．04g·kg^-1;实验低、中、高剂量组分别给予冠脉宁片相当于生药0．3,0．6,1．2g·kg^-1,考察心肌缺血范围、心肌缺血程度、血清酶学变化和心肌代谢物的变化。结果：冠脉宁片可改善心肌缺血程度,缩小心肌缺血范围,降低血清磷酸肌酸激酶和乳酸脱氢酶的活性,减少乳酸、游离脂肪酸和过氧化脂质的量。结论：冠脉宁片对犬急性心肌缺血具有一定的保护作用。     

贻贝多活素的药理学研究——Ⅰ 对实验性心肌缺血的保护作用及其机制的研究

用两种模型研究贻贝多活素((multibioactive substances of Mytilus edulis,MSM)对实验性心肌缺血的保护作用。在结扎冠脉致大鼠急性心肌梗死实验中,MSM(1.35、4.05、6.75g/kg)可明显降低缺血EKG中S-T段异常抬高的程度,ΣST分别为25.2、27.8和21.8mV,与NS对照组(62.9mV)差异非常显著(P<0.001),N-BT染色显示心肌梗死的范围明显缩小。MSM亦能减轻因快速静注垂体后叶素引起的大鼠EKG中缺血性损伤的变化,使心肌缺血阳性率明显降低。结果表明,MSM对实验性心肌缺血有保护作用,其作用机制可能与降低血中MDA浓度,提高CuZn-SOD、GSH-Px活性,防止心肌细胞脂质过氧化作用有关。     

参芪培元口服液保护急性心肌缺血损伤的机制研究

目的:研究参芪培元口服液预处理对急性心肌缺血大鼠心血管的保护作用.方法:设假手术组、模型对照组、维拉帕米组、参芪培元口服液组,建立急性心肌缺血模型.造模后2 h时采血测血浆内皮素(ET)、降钙素基因相关肽(CGRP)、循环内皮细胞(CEC)计数,并进行心肌病理形态学观察.结果:参芪培元口服液和维拉帕米均可显著降低急性心肌缺血大鼠血浆ET和CEC水平,减轻心肌病理形态学改变.同时两组的血浆CGRP均显著低于模型对照组(P＜0.05).参芪培元口服液组和维拉帕米组间的上述3指标无显著性差异.结论:参芪培元口服液预处理可减轻心肌及血管内皮细胞损伤,调节急性心肌缺血时所发生的ET,CGRP分泌失衡.     

红花黄素对大鼠心肌缺血-再灌注模型的作用及机制研究

目的　研究红花黄素对心肌缺血 -再灌注大鼠的影响。方法　建立大鼠冠脉结扎致心肌缺血 -再灌注损伤模型 ,观察红花黄素预防性给药对缺血大鼠血浆中肌酸磷酸激酶 (CPK)、乳酸脱氢酶 (LDH)活性及心肌和血浆中脂质过氧化物丙二醛 (MDA)含量 ,超氧化物歧化酶 (SOD)活性的影响。结果　红花黄素预防性给药能明显降低血浆CPK、LDH的活性及MDA含量 ,提高SOD的活性 ,具有明显的抗氧化性。结论　红花黄素对实验性心肌缺血 -再灌注大鼠具有明显的保护作用 ,其作用可能与其抗氧化有关     

新化合物TG6对心肌缺血/再灌注损伤的影响及机制研究

目的研究TG6对心肌缺血/再灌注损伤的保护作用及机制。方法采用整体大鼠心肌缺血/再灌注（I/R）实验,离体大鼠心脏低灌复灌实验和乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤（H/R）实验等模型,以血清CK、LDH、T-SOD、MDA等为指标,研究TG6对心肌缺血再灌注损伤的保护作用。结果在整体大鼠心肌缺血再灌注损伤实验中,TG6显著减少I/R损伤后心肌梗死面积,减少血清中CK活力和MDA含量,减少LDH活力,增加T-SOD活力;在离体大鼠心脏低灌复灌实验中,TG6显著增加低灌复灌后心肌冠脉流量,减少心肌组织中MDA含量和CK、LDH外漏,提高心肌组织中T-SOD活力;在乳鼠心肌细胞H/R损伤实验中,TG6对正常生长条件下的细胞没有明显影响,提高Na2S2O4制备的心肌细胞H/R模型下细胞的存活率、降低细胞CK的释放率及细胞[Ca^2＋]i的含量。结论 TG6对心肌I/R损伤有一定的保护作用。     

槲皮素对心肌缺血再灌注损伤的保护作用及机制研究

目的探讨槲皮素(QU)对心肌缺血再灌注(MI/R)损伤的保护作用及其作用机制。方法采用结扎左冠脉前降支30 min再灌注2 h的方法复制MI/R损伤大鼠模型,随机分为假手术组、模型组、QU组(25、50、100 mg/kg),每组10只,各组于术前1周开始灌胃给药,1次/d。再灌注后取心脏,染色法测定心肌梗死面积;免疫组化法测定心肌组织NF-κB和ICAM-1表达情况;取心肌匀浆,髓过氧化物酶(MPO)法测定中性粒细胞浸润情况。结果QU高、中剂量可分别缩小心肌梗死面积至25.00%、25.31%,与模型组(32.55%)比较差异有统计学意义(P<0.05);QU各剂量组心肌MPO活力分别降低至185.70、190.66、210.03 U/g,与模型组(311.72 U/g)比较差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01);QU各剂量组心肌组织ICAM-1阳性区面积百分比分别降至32.08%、32.65%、36.42%,与模型组(42.67%)比较差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);QU高、中剂量可使心肌NF-κB的表达水平分别降低至55.23%、54.90%,与模型组(61.05%)比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论QU预处理可保护MI/R所致心肌损伤,其机制与抑制中性粒细胞浸润、下调NF-κB和ICAM-1的表达等有关。     

阿托伐他汀钙纳米结构脂质载体对大鼠心肌缺血/再灌注损伤的保护作用研究

摘 要 目的：制备阿托伐他汀钙纳米结构脂质载体,并评价其对大鼠心肌缺血/再灌注损伤的保护作用。方法: 采用热熔乳化 高压均质技术制备阿托伐他汀钙纳米结构脂质载体,以粒径分布和包封率为评价指标,通过中心复合设计 效应面法优化阿托伐他汀钙纳米结构脂质载体的处方,并对纳米结构脂质载体的表面形态、粒径分布、Zeta电位、体外释药行为进行了评价。考察阿托伐他汀钙纳米结构脂质载体对大鼠心肌缺血/再灌注损伤的保护作用。结果: 阿托伐他汀钙纳米结构脂质载体的处方组成：山嵛酸甘油酯和油酸聚乙二醇甘油酯作为油相（4.0%,w/v）、大豆磷脂作为表面活性剂（1.5%,w/v）、脂药比为（20∶1,w/w）。透射电镜观察纳米结构脂质载体大小比较均匀,呈规则球形或类球形分布,平均粒径为（122.6±39.7）nm,Zeta电位为（-26.4±3.7）mV;阿托伐他汀钙纳米结构脂质载体24 h内累积释放度为（91.4±4.4）%;药效学研究表明阿托伐他汀钙纳米结构脂质载体可以显著提高大鼠心肌缺血/再灌注损伤的保护作用。结论:阿托伐他汀钙纳米结构脂质载体能够减少心肌缺血/再灌注损伤面积,对大鼠心肌缺血/再灌注损伤具有良好的保护作用。     

石斛碱对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用研究

目的 探讨石斛碱(Den)对大鼠心肌缺血再灌注损伤(MI/RI)的保护作用及核转录因子-κB/核转录因子-κB抑制剂激酶/核转录因子-κB抑制剂(NF-κB/IKK/IκB)信号通路机制。方法 将60只Wistar大鼠随机分为6组,分别为假手术组、模型组、对照组和低、中、高剂量实验组,每组10只,雌雄各半。假手术组和模型组均给予等量的0.5%羧甲基纤维素钠;对照组按300 mg·kg^-1的剂量给予3.0%复方丹参混悬液;低、中、高剂量实验组分别按10,20和40 mg·kg^-1的剂量给予0.1%,0.2%和0.4%Den混悬液。6组大鼠每天灌胃给药1次,连续14 d。末次给药后12 h,用左冠状动脉前降支阻断和复灌法建立大鼠心肌缺血再灌注损伤模型。用生化法测定血清肌酸激酶(CK)和肌酸激酶同工酶(CK-MB)水平,用Western blot法分析心肌组织NF-κB、IKKβ和IκBα蛋白的表达水平。结果 低、高剂量实验组和对照组、模型组、假手术组的CK分别为(228.59±7.46),(191.51±13.25),(173.41±14.87)...     

缺氧诱导因子-1/自噬在硫化氢预处理大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用与机制研究

目的 研究缺氧诱导因子-1/自噬在硫化氢预处理大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用与机制.方法 选取SD健康大鼠40只,将大鼠随机分为对照组(C组)、预处理组(H组)、模型组(I/R组)、预处理组+模型组(HI组),建模前H组给予5μmol/kg的硫化氢注射于大鼠左侧肾动脉,建模型成功后,HI组给予5μmol/kg的H2 S...     

芒果苷对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及其机制研究

目的 探讨芒果苷(MGF)预处理对大鼠心肌缺血再灌注(MI/R)损伤的保护作用及机制。方法 SD大鼠随机分为5组,即假手术组、模型组和MGF高、中、低剂量(40、20、10 mg/kg)组,采用结扎左冠脉前降支30 min再灌注2 h的方法制备大鼠MI/R损伤模型,于术前7 d开始ig给药。采用比色法测定血清肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)活性,ELISA法测定血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)水平;染色法测定心肌梗死面积(MIS);取心肌匀浆,比色法测定髓过氧化物酶(MPO)活性。结果 与模型组比较,MGF高、中剂量组MIS、血清LDH活性显著降低(P<0.05);MGF各剂量组血清CK活性、血清TNF-α和IL-1β水平、心肌MPO活性明显降低(P<0.05、0.01)。结论 MGF预处理通过抑制中性粒细胞浸润,下调TNF-α和IL-1β表达,抑制炎症反应,发挥对MI/R所致心肌损伤的保护作用。     

吗啡对急性心肌缺血大鼠的作用及机制研究北大核心CSCD

目的研究吗啡对急性心肌缺血大鼠心肌损伤的影响及其机制。方法按照体重将SD大鼠随机分为3组:假手术组、模型组、实验组,每组20只。以诱导局部心肌缺血再灌注法建立大鼠急性心肌损伤模型。在大鼠心肌缺血模型再灌注后,实验组大鼠静脉注射吗啡3 mg·kg^(-1),每天1次,连续5 d;假手术组和模型组静脉注射等量生理盐水。通过超声心动图确定射血分数和左心室缩短分数,氯化三苯基四氮唑(TTC)法检测心肌梗死面积,酶联免疫吸附实验检测大鼠血清中乳酸盐脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的含量,末端标记(TUNEL)染色法检测心肌细胞凋亡,蛋白质印迹法检测心肌组织中磷酸化的JNK(p-JNK)、磷酸化的p38(p-p38)的蛋白表达。结果假手术组、模型组、实验组大鼠心肌射血分数分别为(81.21±2.14)%,(42.56±3.84)%和(61.43±4.89)%;这3组大鼠左心室缩短分数分别为(67.51±5.14)%,(40.11±3.55)%和(50.18±4.78)%;这3组大鼠心肌梗死面积分别为(5.01±0.18)%,(57.34±3.64)%和(23.78±1.98)%;这3组大鼠血清中LDH的含量分别为(5.34±0.26),(28.79±1.67)和(15.64±1.24)nmol·mL^(-1);这3组大鼠血清中MDA的含量分别为(0.78±0.04),(1.89±0.14)和(1.13±0.10)nmol·mL^(-1);这3组大鼠血清中SOD的含量分别为(10.59±0.98),(3.85±0.27)和(6.52±0.43)U·mL^(-1);这3组细胞凋亡率分别为(10.21±0.98)%,(34.65±2.89)%和(26.46±2.34)%;这3组p-JNK蛋白水平分别为0.26±0.02,0.68±0.06和0.35±0.03;这3组p-p38蛋白水平分别为0.31±0.03,0.79±0.07和0.42±0.04。上述指标:模型组与假手术组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);实验组与模型组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论吗啡可减轻急性缺血大鼠的心肌损伤,其机制与抑制JNK/p38信号通路相关。     

匝迪-5味丸改善心肌缺血再灌注损伤的作用机制预测及验证

目的 探讨匝迪-5味丸改善心肌缺血再灌注损伤（MIRI）的作用机制。方法 通过网络药理学方法筛选匝迪-5味丸改善MIRI的潜在作用靶点和通路。将72只大鼠随机分为模型组、假手术组、丹参组[复方丹参滴丸80 mg/（kg·d）]和匝迪-5味丸高、中、低剂量组[1.6、0.8、0.4 g/（kg·d）],每组12只。各组大鼠灌胃相应药物,每天1次,连续14 d。末次给药后,结扎大鼠左冠状动脉前降支建立MIRI模型,假手术组大鼠只穿线不结扎。检测建模后各组大鼠血清中肌酸激酶（CK）、乳酸脱氢酶（LDH）、天冬氨酸转氨酶（AST）、心肌肌钙蛋白T(CTn-T)的含量,心肌细胞凋亡率,心肌组织中磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）、蛋白激酶B(Akt)、B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)及Bcl-2相关X蛋白（Bax）、胱天蛋白酶3(caspase-3)蛋白表达水平;观察心肌组织形态变化。结果 共获得匝迪-5味丸的活性成分177个,作用靶点220个,参与改善心肌缺血相关的靶点51个,其中核心靶点为AKT1,涉及PI3K-Akt、内质网、缺氧诱导因子-1等多个通路。与模型组比较,丹参组和匝迪-5味丸高剂量组大...     

基于细胞自噬的荭草苷抗心肌缺血/再灌注损伤的机制研究

目的本研究主要探讨荭草苷抗心肌缺血/再灌注损伤的保护作用与细胞凋亡和细胞自噬的关系。方法采用Langendorff法,建立大鼠离体心脏缺血/再灌注模型,缺血30min,再灌注120 min;随机将Wistar大鼠分为正常对照组、模型组、不同剂量荭草苷组(1.0、2.0、4.0 mg·kg~(-1))、自噬抑制剂组(2.0 mg·kg~(-1)荭草苷+渥曼青霉素)以及阳性对照药白藜芦醇组;采用多道生理记录仪采集血流动力学指标,全自动生化仪检测灌流液中心肌酶活性,电镜观察大鼠心肌细胞超微结构改变及自噬体,TUNEL法检测心肌细胞凋亡,Western blot法检测心肌细胞中自噬相关蛋白LC3和Beclin1水平。结果与模型组比较,荭草苷可明显改善大鼠血流动力学指标,降低乳酸脱氢酶和肌酸激酶水平,明显改善大鼠心肌细胞超微结构变化,同时能降低心肌细胞凋亡水平,增加细胞内自噬体数量以及自噬相关蛋白LC3Ⅱ和Beclin 1表达水平。结论荭草苷对大鼠心脏缺血/再灌注损伤具有明显保护作用,其机制可能与降低心肌细胞凋亡及增强细胞自噬有关。     

灵仙新苷对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及机制研究

目的 考察灵仙新苷对大鼠心肌缺血再灌注损伤（MIRI）的保护作用,并阐述可能的作用机制。方法 SD大鼠随机分为6组：假手术组、模型组、丹参酮Ⅱ_A（阳性药,16 mg/kg）组和灵仙新苷低、中、高（8、16、32 mg/kg）组,连续ig给药7 d;采用结扎冠状动脉左前降支法制备大鼠MIRI模型,缺血40 min再灌120 min;试剂盒法检测MIRI大鼠血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-1β（IL-1β）、白介素-6（IL-6）水平;TTC染色法检测心肌梗死率,流式细胞术检测心肌细胞凋亡率;Western blotting法检测心肌组织中Bcl-2、Bax、TNF-α及Caspase-3的蛋白表达水平。结果 与模型组比较,灵仙新苷（8、16、32 mg/kg）显著降低MIRI模型大鼠血清中TNF-α、IL-1β、IL-6水平,心肌梗死率和心肌细胞凋亡率;明显上调Bcl-2蛋白表达水平,下调Bax、TNF-α、Caspase-3蛋白表达水平,且均具有显著性差异（P<0.05、0.01）。结论 灵仙新苷对MIRI大鼠心肌具有保护作用,其机制可能与抑制TNF-α,调节Bcl-2/Bax蛋白平衡,减少MIRI诱导的心肌细胞凋亡有关。     

四氢生物蝶呤对大鼠急性心肌缺血再灌注损伤的保护作用及其机制研究

目的研究四氢生物蝶呤对大鼠急性心肌缺血再灌注损伤的保护作用,并探讨其作用机制。方法 Wistar大鼠随机分为对照组、假手术组、模型组及四氢生物蝶呤5、10 mg/kg组,每组10只。结扎左冠状动脉前降支,制备急性心肌缺血再灌注损伤模型。对照组、假手术组和模型组均ig生理盐水2 mL,四氢生物蝶呤组ig四氢生物蝶呤5、10 mg/kg。1次/d,连续给药14 d。导管法测定血流动力学指标:左心室舒张最大速率(-dp/dtmax)、左心室舒张期末压(LVEDP)、左室开始收缩至左室内压上升速率峰值时间(Tau);ELISA法测定血浆脑钠素(BNP)活性;按试剂盒说明测定心肌一氧化氮合酶(eNOS)活性、NO生成量;染色法测定心肌梗死面积,计算心肌梗死程度;免疫组化法测定β3水平。结果与模型组比较,四氢生物蝶呤5、10 mg/kg组-dp/dtmax显著增高,LVEDP显著降低,Tau明显缩短,差异均具有统计学意义(P0.05、0.01);血浆BNP显著下降,eNOS活性、NO生成量均显著升高(P0.01);心肌梗死面积更小,心肌梗死程度更轻(P0.01);β3表达水平升高(P0.01)。结论四氢生物蝶呤可以减少急性缺血再灌注损伤大鼠心肌梗死面积,改善心肌舒张功能,对大鼠急性缺血再灌注损伤具有保护作用,可能与激活eNOS活性、提高NO生成量和β3受体有关。     

玉郎伞查尔酮调控PI3K/Akt信号通路抗心肌缺血/再灌注损伤的作用及机制研究

目的探讨玉郎伞查尔酮(YLSC)调控PI3K/Akt信号通路抗心肌缺血/再灌注损伤的作用及机制。方法 40只♂SD大鼠随机分为5组:假手术组、模型组、YLSC组、YLSC+PI3K抑制剂wortmannin组(YLSC+WM组)、PI3K抑制剂wortmannin组(WM组),每组8只。除假手术组外,其它各组大鼠均结扎冠状动脉左前降支制备心肌缺血模型,缺血30 min,再灌注120 min。实验结束后,采用比色法测定大鼠血清中肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)及一氧化氮(NO)水平,ELISA法测定血清肿瘤坏死因子(TNF-α)的含量,Western blot法检测心肌组织中总Akt(t-Akt)、磷酸化Akt(p-Akt)及自噬相关蛋白LC3-Ⅱ的表达,FQ-PCR法分析内皮型一氧化氮合酶(eN OS)、凋亡因子caspase-3及自噬相关基因Beclin1的表达量变化。结果与I/R组比较,YLSC组CK-MB、LDH以及TNF-α血清含量明显降低,NO水平升高,Beclin1、caspase-3及LC3-Ⅱ的表达量均明显下降,同时Akt的磷酸化水平与eN OS mR NA表达增加,上述各项指标差异具有统计学意义(P<0.05),而上述变化能够被PI3K/Akt信号通路的特异性阻断剂wortmannin所阻断,且其差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 YLSC通过激活PI3K/Akt信号通路抑制缺血/再灌注所致的心肌细胞凋亡和过度自噬,从而发挥对心肌缺血/再灌注损伤的保护作用。     

表没食子儿茶素没食子酸酯通过抑制心肌细胞凋亡缓解心肌缺血再灌注损伤的机制研究

目的:探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对心肌缺血再灌注损伤的保护作用及其可能机制。方法:以叔丁基过氧化氢(TBHP)处理H9C2心肌细胞构建缺血再灌注细胞模型,采用MTS法考察经不同剂量(3.125、6.25、12.5、25、50、100、200μmol/L)EGCG预处理后细胞的存活情况,并计算细胞存活率;采用Western blotting法检测经不同剂量(100、200μmol/L)EGCG预处理后细胞中凋亡蛋白(Bcl-2、Bax)的表达情况。将雄性C57BL/6小鼠随机分为假手术组、模型组和EGCG组(5 mg/g),每组15只。假手术组和模型组小鼠均灌胃等体积生理盐水,EGCG组小鼠灌胃相应药物,每日1次,连续7 d。末次给药12 h后,采用前降支结扎法复制心肌缺血再灌注损伤小鼠模型。采用伊文思蓝和TTC双染色法观察各组小鼠的心肌梗死面积,并计算梗死面积占横截面积百分比,采用WST-1法检测其血清超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量,采用Western blotting法检测其心肌组织中凋亡蛋白的表达(Bcl-2、Bax)以及通路相关蛋白[磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、磷酸化PI3K(p-PI3K)、蛋白激酶B(Akt)、磷酸化Akt(p-Akt)]的磷酸化水平。结果:细胞试验结果显示,与对照组比较,模型组细胞存活率、Bcl-2的相对表达量均显著降低,Bax的相对表达量显著升高(P<0.05);与模型组比较,25、50、100、200μmol/L EGCG组细胞存活率以及100、200μmol/L EGCG组细胞Bcl-2的相对表达量均显著升高,100、200μmol/L EGCG组细胞Bax的相对表达量均显著降低(P<0.05)。动物实验结果显示,假手术组小鼠未见心肌组织缺血、心腔扩大等现象;模型组小鼠可见明显的心肌梗死现象,其梗死面积占横截面积百分比、血清MDA含量、心肌组织Bax的相对表达量和p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt值均较假手术组显著升高,SOD活性和Bcl-2的相对表达量均较假手术组显著降低(P<0.05);与模型组比较,EGCG组小鼠心肌梗死面积有所缩小,其梗死面积占横截面积百分比、血清MDA含量、心肌组织Bax的相对表达量和p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt值均显著降低,SOD活性和Bcl-2的相对表达量均显著升高(P<0.05)。结论:EGCG对心肌缺血再灌注损伤具有一定的保护作用,这种作用可能与抑制心肌细胞凋亡、改善机体氧化应激状态、调控凋亡蛋白表达、降低PI3K/Akt通路相关蛋白的磷酸化水平有关。     

基于PI3K/Akt/GSK3β信号通路的芥子酸抗Aβ1-42致PC12细胞损伤的机制研究

目的:基于磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/糖原合成激酶3β(GSK3β)信号通路探讨芥子酸(SA)抗β淀粉样蛋白1-42(Aβ_1-42)致PC12细胞损伤的作用机制。方法:将大鼠PC12细胞随机分为对照组、Aβ组(Aβ_1-422μmol/L)、Aβ+SA组(Aβ_1-422μmol/L+SA 100μmol/L)、Aβ+SA+LY组[Aβ_1-422μmol/L+SA 100μmol/L+LY294002(PI3K抑制剂)10μmol/L]、Aβ+LY组(Aβ_1-422μmol/L+LY294002 10μmol/L)、LY组(LY294002 10μmol/L)。除对照组、LY组外,其余各组细胞均以Aβ_1-42复制损伤模型。培养24 h后,使用显微镜观察各组细胞的形态,采用MTT法检测各组细胞的存活率;采用Western blotting法检测各组细胞PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt、GSK3β、p-GSK3β蛋白的表达情况...     

勒哲多糖粗提物体外抑制H2O2诱导HepG2细胞氧化损伤的作用及机制研究

目的:基于体外活性氧(reactive oxygen species, ROS)清除体系和H₂O₂诱导HepG2细胞氧化损伤模型探讨勒哲多糖粗提物(LZC)的体外抗氧化作用和机制。方法:测定LZC对羟基自由基、超氧阴离子、DPPH自由基、亚硝酸根离子的清除作用;试剂盒检测H₂O₂诱导HepG2细胞氧化损伤模型中细胞中丙二醛(malondialdehyde, MDA)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase, GSH-Px)水平,2’,7’-二氯荧光黄双乙酸盐(2’,7’-dichlorofluorescein diacetate, DCFH2-DA)荧光探针检测细胞内ROS水平和Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡情况,Western blot检测核因子E2相关因子2/血红素氧合酶-1(nuclear factor erythroid-2-related factor 2/heme oxygenase 1,Nrf2/HO-1)、肿瘤蛋白53(p53)、Bcl...