钩藤生物碱抑制高血压大鼠主动脉胶原沉积及对基质金属蛋白酶的影响

目的探讨钩藤碱、异钩藤碱和钩藤总生物碱抑制SHR(自发性高血压大鼠(spontaneous hypertension rats,SHR)胸主动脉胶原沉积的实验效应及相关机制。方法 40只SHR随机分为5组:模型组、卡托普利组、异钩藤碱组、钩藤碱组和钩藤总生物碱组;Wistar大鼠8只作为正常对照组。卡托普利组给药量为每天17.5 mg.kg-1,异钩藤碱组、钩藤碱组和钩藤总生物碱组的给药量分别为每天5、5、50 mg.kg-1,模型组和正常组给予等容量生理盐水。灌胃给药8周。取胸主动脉,通过Masson染色法、免疫组织化学染色法、原位杂交法并结合图像分析技术,观察钩藤碱、异钩藤碱和钩藤总生物碱对SHR胸主动脉胶原、ColⅠ、ColⅢ、MMP-9、MMP-2、TIMP-2表达的影响。结果钩藤碱、异钩藤碱和钩藤总生物碱能够降低SHR胸主动脉胶原含量,下调ColⅠ、ColⅢ的蛋白和mRNA表达水平,上调MMP-9和MMP-2蛋白表达水平,上调MMP-9 mRNA表达水平,下调TIMP-2蛋白和mRNA表达水平。结论钩藤碱、异钩藤碱和钩藤总生物碱具有抑制SHR胸主动脉胶原重塑的效应,部分机制与上调MMP-9和MMP-2、下调TIMP-2的表达有关。     

两色金鸡菊醇提物对自发性高血压大鼠尿液的代谢组学研究

目的研究两色金鸡菊醇提物对自发性高血压大鼠尿液内源性代谢产物的影响。方法将自发性高血压大鼠(SHR)分为模型组、两色金鸡菊醇提物高、中、低剂量组(3.2、1.6、0.8 g·kg-1)、卡托普利组(4 mg·kg-1)及杜仲平压片组(187.5 mg·kg-1),连续灌胃给药4周。采用无创血压计观察其对血压的影响;连续4周收集各组大鼠尿液,通过NMR核磁共振氢谱仪对尿液中内源性代谢物进行代谢谱分析,使用SIMCA-P软件进行PLS-DA分析。结果干预4周后,各给药组大鼠血压均明显下降(P<0.01);给药组与对照组相比,大鼠尿液代谢物异亮氨酸、肌酸酐、β-葡萄糖、鲨肌醇等有明显变化。结论两色金鸡菊醇提物灌胃对自发性高血压大鼠机体代谢产生了影响,而通过代谢组学发现的差异物质,可以作为标志物进一步阐释两色金鸡菊的药性研究工作并提供实验依据。     

基于网络药理学与分子对接技术的异钩藤碱抗肺纤维化的作用机制探究

目的 应用网络药理学与分子对接的方法阐明异钩藤碱抗肺纤维化的作用机制。方法 使用Swiss Target Prediction、DisGeNET等数据库预测异钩藤碱和肺纤维化的潜在靶点。通过拓扑分析筛选核心靶点,并对其进行基因本体论（GO）功能和京都基因和基因组百科全书（KEGG）通路富集分析。对筛选出的关键靶点进行分子对接实验验证结合活性。结果 靶点预测得到100个异钩藤碱和肺纤维化共同作用靶点,GO功能分析表明调节炎症反应、正向调节成纤维细胞增殖等多种生物过程参与肺损伤后的纤维化进程;得到了MAPK1、MAPK3、EGFR、VEGFA、PI3KCA、PI3KCD、AKT1、TNF等8个异钩藤碱治疗肺纤维化的预测靶点和以PI3K-Akt信号通路为主的潜在作用途径。分子对接结果表明异钩藤碱可以与选定的8个靶点进行结合。结论 异钩藤碱可以通过调节肺纤维化的某些生物过程,介导以PI3K-Akt信号通路为主的途径发挥肺损伤后的保护作用,为后续开展异钩藤碱抗肺纤维化的实验研究提供理论依据。     

异钩藤碱代谢产物的质谱鉴定及药理活性的探讨

目的研究异钩藤碱(Isorhy)在猫体内的代谢并同步观察其可能的药理活性。方法麻醉猫静脉注射异钩藤碱5 mg/kg后,观察家猫血压的变化,收集0～3 h的血浆样品,用氢氧化钠—乙醚(1∶5)提取异钩藤碱及其代谢物,高效液相色谱法(HPLC)分离收集色谱峰流分,以液相色谱/质谱(LC/MS)测定异钩藤碱代谢物1(metabolite 1)分子离子峰的质荷比(m/z);代谢物1以60 ℃减压蒸馏24 h,同法测定代谢物1裂解物(metabolite 2)的分子离子峰m/z,根据m/z推测二者的化学结构。结果异钩藤碱代谢物1的相对分子质量为386,其热裂解化合物(metabolite2)相对分子质量为300,代谢产物在降压方面的药理作用贡献不大。结论①异钩藤碱代谢物的相对分子质量为386,为异钩藤碱的加氢还原产物;②代谢物不稳定,加热易裂解,其相对分子质量为300;③代谢物没有表现出心血管药理活性。     

合生元益生菌治疗自发性高血压相关机制的代谢组学研究

目的 应用代谢组学相关技术,从表观水平探索合生元制剂通过调节肠道菌群达到降压效应的可能作用机制。方法 将14只自发性高血压大鼠随机分为2组,模型组和治疗组各7只,另取7只Wistar Kyoto大鼠作为对照组,采用超高效液相色谱-四级杆飞行时间串联质谱（UHPLC-Q-TOF/MS）技术对对照组、原发性高血压模型组和合生元制剂治疗组的大鼠模型回肠段进行代谢组学分析,筛选合生元制剂治疗自发性高血压的潜在生物学标志物。结果 通过对代谢组学的分析,确定了对照组与模型组之间具有显著差异的27种代谢物。在这些代谢物中,与模型组相比,治疗组中溶血磷脂酰乙醇胺（LysoPE）和磷脂酰胆碱（PC）可以显著被重新调节。结论 合生元制剂可以通过改变肠道微生物群的结构,调节LysoPE和PC相关信号通路,进而改善自发性高血压状态;代谢组学有助于从分子水平理解自发性高血压发病机制及合生元制剂的降压机制。     

基于代谢组学研究蒙药苏格木勒-4对失眠大鼠的改善作用机制

目的 研究蒙药苏格木勒-4对失眠大鼠的代谢影响,初步探讨其改善失眠的可能机制。方法 采用夹尾刺激和腹腔注射对氯苯丙氨酸溶液复合造模法建立慢性应激失眠大鼠模型。将24只雄性大鼠随机分为正常组、模型组、地西泮组（阳性对照,0.92 mg/kg）和苏格木勒-4组（5.2 g/kg）,每组6只。从夹尾刺激第7天开始,苏格木勒-4组、地西泮组大鼠开始灌胃给药,正常组、模型组大鼠灌胃等体积蒸馏水,每天灌胃1次,连续14 d。利用水迷宫实验测试大鼠的学习和记忆能力,利用无创睡眠活动监测系统对大鼠24 h睡眠时间进行监测。采用超高效液相色谱串联质谱技术对大鼠血清和海马组织进行代谢组学研究。使用多元统计分析方法对各组大鼠血清和海马组织中差异代谢物进行分析,筛选各组间的差异代谢物以及代谢通路。结果 与正常组比较,模型组大鼠的逃避潜伏期显著延长、穿越平台次数显著减少、平均24 h睡眠时间百分比显著降低（P<0.05）。与模型组比较,地西泮组和苏格木勒-4组大鼠上述指标水平均显著改善（P<0.05）。代谢组学研究发现,大鼠血清和海马组织中共鉴定出5-羟基吲哚乙酸、犬尿氨酸、犬尿喹啉酸、5-羟色胺、...     

口服钩藤总碱对高血压大鼠的肝毒性

<正>中药钩藤的主要有效部位是生物碱。研究表明[1],钩藤总碱有抗高血压作用。考虑到抗高血压治疗需长期用药并且钩藤总碱主要经肝代谢,实验考察了钩藤总碱对肝脏和肝功能的影响。1材料自发性高血压大鼠(SHR)40只,20周龄,♂,无创尾动脉测压收缩压不低于20.0 kPa。天麻钩藤饮颗粒(成都九芝堂金鼎药业有限公司,批号090418)。钩藤总碱(第88医院制剂室提取,总生物碱含量约95%,其中,钩藤碱含量11.9%,     

钩藤生物碱对自发性高血压大鼠胸主动脉平滑肌细胞凋亡和增殖的影响

目的研究钩藤碱、异钩藤碱和钩藤总生物碱对SHR胸主动脉平滑肌细胞凋亡和增殖的影响。方法分别给予SHR钩藤碱、异钩藤碱和钩藤总生物碱,并以Wistar大鼠作为正常对照。用流式细胞仪检测胸主动脉平滑肌细胞凋亡,用免疫组化法检测胸主动脉Bcl-2、Bax、c-myc、c-fos蛋白表达,采用原位杂交法检测胸主动脉平滑肌细胞PDGF mRNA及凋亡平滑肌细胞mRNA的表达。结果钩藤碱、异钩藤碱和钩藤总生物碱均能促进SHR胸主动脉平滑肌细胞凋亡,增强Bax蛋白及凋亡平滑肌细胞mRNA表达,抑制c-fos蛋白、c-myc蛋白和PDGF-B mRNA表达;其中异钩藤碱能抑制胸主动脉Bcl-2表达。结论钩藤碱、异钩藤碱和钩藤总生物碱可能通过调节原癌基因Bcl-2和Bax蛋白表达,促进自发性高血压大鼠动脉平滑肌细胞凋亡,并能通过抑制c-fos蛋白、c-myc蛋白和PDGF-B mRNA表达途径抑制自发性高血压大鼠胸主动脉细胞增殖,从而改善胸主动脉壁重塑。     

血竭活血化瘀作用的GC-MS代谢组学初步研究北大核心CSCD

目的:利用代谢组学技术,从内源代谢产物的角度探讨传统药材—血竭的活血化瘀作用。方法:将大鼠分组,分别为正常对照组、血瘀证模型组(血瘀证模型大鼠)和血竭给药组(血瘀证大鼠灌胃给予血竭),采集血浆并采用GC-MS方法检测各组大鼠血浆中的内源代谢产物。通过主成分分析和偏最小二乘法等数据分析方法寻找血瘀证大鼠的血浆的差异代谢物,分析大鼠给药后血浆内源代谢产物的变化趋势。结果:建立了基于GC-MS的大鼠血浆内源性代谢产物分析方法,并进行了方法学的确证;采用该方法在大鼠血浆中分析得到约200个数据点,其中约有30个数据点在与NIST库的匹配中得到了初步的鉴定。通过多元数据分析发现了若干血瘀证大鼠差异代谢物,包括乳酸、D-3-羟基丁酸、缬氨酸、异亮氨酸等,这些差异性代谢物与血瘀证相关的代谢通路有密切的联系;血瘀证大鼠经过血竭给药之后,其血浆中的差异代谢物的浓度发生明显的变化,即各差异代谢物指标与血瘀证模型组相比都有一定的恢复作用,代谢组学研究结果与血瘀证大鼠血液流变学实验结果相吻合。结论:建立了血瘀证大鼠的血浆内源代谢产物的研究方法,并将该方法应用于血竭活血化瘀作用的研究中,从代谢组学的角度证实了血竭对血瘀证的治疗作用。     

基于肝脏代谢组学的柴胡-白芍药对抗抑郁作用机制研究

利用LC-MS代谢组学技术,分析柴胡-白芍药对对慢性不可预知温和应激抑郁(CUMS)大鼠肝脏内源性代谢物代谢紊乱的调控作用,明确柴胡-白芍药对"疏肝解郁"的代谢调控途径。将大鼠随机分为正常对照组、CUMS模型组、文拉法辛阳性药组和柴胡-白芍药对高、低剂量组,造模及给药持续28天。通过抑郁症传统药效学指标(大鼠体重、旷场实验、糖水偏爱实验及强迫游泳实验)评价柴胡-白芍药对的药效。动物实验获得山西大学伦理委员会的批准(批准号:SXULL2016036)。采用UHPLC-Q Exactive Orbitrap-MS代谢组学技术分析柴胡-白芍药对对CUMS模型大鼠肝脏代谢轮廓调节作用,探讨柴胡-白芍药对"疏肝解郁"的代谢调控机制。结果显示柴胡-白芍药对能显著改善CUMS模型组大鼠的抑郁样行为;通过LC-MS代谢组学技术共鉴定指认出25种与抑郁相关的生物标志物,柴胡-白芍药对能显著回调其中的16种;代谢通路分析显示D-谷氨酰胺和D-谷氨酸代谢,精氨酸和脯氨酸代谢,丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢,谷胱甘肽代谢为其改善CUMS模型大鼠肝脏代谢紊乱的主要途径。     

异去氢钩藤碱在人和大鼠肠道菌群中代谢产物的鉴定

目的研究异去氢钩藤碱在人和大鼠肠道菌群中代谢产物的异同,阐明肠道菌群对异去氢钩藤碱在体内吸收和代谢的影响。方法采用UHPLC/Q-TOF MS技术,鉴定异去氢钩藤碱在人和大鼠肠道菌群培养液中的代谢产物。采用色谱柱为HSS C18(100 mm×2.1 mm,1.8μm)柱,流动相为乙腈-体积分数0.1%甲酸水溶液梯度洗脱,流速为0.5 m L·min-1,采用ESI离子源,正离子模式检测。结果通过与标准品比对保留时间和质谱信息,鉴定了异去氢钩藤碱在人和大鼠肠道菌群培养液中9个代谢产物。其中异构化和还原为异去氢钩藤碱在肠道菌群中的主要代谢途径,水解、羟基化和氮氧化为微量代谢途径。结论建立采用UHPLC/Q-TOF MS方法鉴定异去氢钩藤碱肠道菌群代谢产物,为四环氧化吲哚类生物碱在体内吸收和代谢机制研究提供科学依据。     

基于核磁共振的益母草碱抗急性心肌缺血的代谢组学研究

目的应用核磁共振(NMR)代谢组学技术研究急性心肌缺血以及益母草碱给药大鼠血浆中代谢物组的变化,探讨益母草碱抗心肌缺血作用的机制。方法应用1H NMR分析假手术组、模型组、益母草碱给药组大鼠血浆代谢物组,应用模式识别多变量统计方法研究模型组与假手术组及给药组之间的代谢物组差异。结果正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)结果显示,模型组与假手术组相比有6个代谢物(丙氨酸、赖氨酸、甘氨酸、肌酸、N-乙酰化及O-乙酰化糖蛋白)水平明显增加,而益母草碱干预治疗能明显降低模型组丙氨酸、赖氨酸、甘氨酸水平,并增加胆碱、磷酸胆碱、鲨肌醇含量。结论益母草碱能通过纠正急性心肌缺血氨基酸代谢紊乱,上调胆碱以及肌醇代谢通路发挥心肌保护作用。该研究为评价益母草碱抗心肌缺血作用提供了有力分析手段,并为研究其作用机制提供新的思路。     

基于代谢组学鉴定枳术连夏汤治疗慢性胃炎大鼠的血清标志物

目的 探讨基于HPLC代谢组学分析枳术连夏汤作用慢性胃炎模型大鼠血清代谢物变化的特征，为中医药治疗慢性胃炎、改善代谢障碍提供参考依据。方法 将40只SD雄性大鼠随机分为4组：正常对照组，模型组、阳性药物对照组和枳术连夏汤治疗组，每组10只。正常对照组大鼠常规饲养，其他3组大鼠建立慢性胃炎模型。模型构建成功后，正常对照组和模型组大鼠每日正常饲养，枳术连夏汤治疗组在正常对照组基础上，每日灌服18 g·kg^-1的枳术连夏汤；阳性药物对照组在正常对照组基础上，每日灌服0.648 g·kg^-1的胃炎康胶囊，连续8周。整个实验过程中，每2周对各组大鼠进行称重1次。给药结束后，测定各组大鼠胃液p H值和胃蛋白酶活力；采用HE法观察各组大鼠胃组织形态；采用免疫组化学法检测各组大鼠血清中胃黏膜保护因子表皮细胞生长因子(EGF)和转化生长因子α(TGF-α)的表达及胃蛋白酶原(PG)的含量；采用HPLC法分析大鼠血清中各代谢物，并通过正交偏最小二乘法判别分析法对各组数据进行分析，最终确定各组大鼠血清标志物。结果 枳术连夏汤可降低慢性胃炎大鼠胃液p H(P <...     

基于代谢组学研究厚朴远志配伍醇提物对尿液代谢物的影响

目的考察厚朴远志配伍对大鼠尿液代谢物的影响,探索其特征生物标志物并分析相关代谢通路,为关联探索厚朴缓解远志胃肠动力障碍的可能机制提供参考。方法 SD♂大鼠40只,随机分为对照组、厚朴3. 50 g·kg~(-1)组、远志1. 75 g·kg~(-1)组、配伍3. 5+1. 75 g·kg~(-1)组,连续灌胃3 d,收集大鼠末次给药24 h内的尿液,采用UPLC-Q-TOF-MS检测各组尿液的代谢物,借助Progenesis QI V2. 0、SIMCA-P14. 0、SPSS 20. 0、Metabo Analyst 3. 0等软件,分析各组尿液代谢标志物及其代谢通路。结果对照组与给药组的代谢物能够明显区分,并筛选出2-氨基苯甲酸、D-葡萄糖醛酸-6,3-内酯、3-甲氧基-4-羟基苯乙醛等16个特征代谢标志物,主要涉及酪氨酸代谢、色氨酸代谢,以及苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸生物合成等通路。结论厚朴可能通过调控酪氨酸代谢、色氨酸代谢、初级胆汁酸生物合成和维生素B_6代谢等代谢通路,缓解远志所致胃肠动力障碍。     

基于代谢组学和网络药理学方法探讨芪参益气滴丸改善心衰大鼠心脏能量代谢的作用机制

组学与生物信息学为中药机制研究带来了新的思路。本研究采用代谢组学和网络药理学联合策略探讨芪参益气滴丸(Qishen Yiqi dropping pill, QDP)改善心力衰竭(heart failure, HF)大鼠心脏能量代谢的药效物质基础及网络调控机制。1H NMR代谢组学分析从HF大鼠心脏组织中发现肉碱、谷氨酰胺、肌酸、脯氨酸、高瓜氨酸、乳酸、牛磺酸和丙氨酸等8个代谢物在QDP治疗后显著回调,表明QDP调控糖、脂、ATP和蛋白质代谢等过程。动物实验操作均遵循中国医学科学院药物研究所实验动物管理与动物福利伦理委员会的规定。利用网络药理学建立“药物-成分-靶点-疾病”网络,并结合代谢组学结果提取与上述代谢过程相关的“成分-靶点”子网络,显示了QDP调节能量代谢潜在的47个作用靶点和79个化学成分,提炼了熊果酸、三七皂苷、人参皂苷等关键化学成分与INS、PPARG、AKT1等核心靶点,同时也从能量代谢的角度展示了QDP与HF之间多靶点、多成分的复杂作用关系。分子对接技术验证了部分靶点与化学成分良好的相互作用,其结合能均小于-5 kcal·mol^-1。本研究结果为...     

代谢组学结合网络药理学技术探讨黄芪-丹参药对预防大鼠脑缺血的药效机制

目的利用代谢组学结合网络药理学技术研究黄芪-丹参药对预防大鼠脑缺血的药效机制。方法通过线栓法复制大鼠脑缺血模型,采用Longa法和TTC染色法评价黄芪-丹参药对模型大鼠的药效影响。采用NMR技术分析实验大鼠血清的代谢轮廓,寻找与药效相关的差异代谢物,并预测相关靶点。另外,采用网络药理学的技术预测黄芪-丹参药对治疗脑缺血的潜在作用靶点。结合2部分获得的靶点,进行蛋白-蛋白相互作用分析,找寻黄芪-丹参药对治疗脑缺血的重要靶点。结果行为学评价和TTC染色结果表明,黄芪-丹参药对可以显著改善脑缺血的损伤。通过代谢组学技术得到12个代谢物与脑缺血损伤密切相关,其中脂质、N-乙酰化糖蛋白、肌酸、α-葡萄糖、β-葡萄糖、丙酮酸、甘氨酸和肌苷8个代谢物在给药后有显著回调,并预测得到71个与回调代谢物相关的靶点。另外,通过网络药理学技术找到了58种潜在活性成分,并预测了84个与脑缺血相关的潜在靶点。最终通过蛋白-蛋白相互作用网络得到了排名前五的重要靶点为MAPK1,AKT1,MAPK8,VEGFA和STAT3。结论黄芪-丹参药对可以预防脑缺血带来的损伤,代谢组学和网络药理学发现其作用的机制可能与MAPK1,AKT1,MAPK8,VEGFA和STAT3靶点有关,为进一步预防和治疗脑缺血提供了依据。     

基于代谢组学木蝴蝶总黄酮抗肝肿瘤作用机制研究

目的初步阐释木蝴蝶总黄酮抗肝肿瘤的作用机制,为木蝴蝶总黄酮作为抗肝癌药物的开发和临床应用提供实验依据。方法采用二乙基亚硝胺(DEN)诱发大鼠肝癌模型,随机分为空白组,模型组,阳性对照组,木蝴蝶总黄酮高、中、低剂量组,从造模第6周开始给药,每日1次,连续10周。第17周眼球取血,分离各组血浆。采用HPLC-QTOF-MS联用技术分析木蝴蝶总黄酮干预后各组大鼠血浆中代谢物的变化,利用Agilent Mass Profiler Professional 12.6软件结合相关数据库进行主成分分析(PCA)、差异代谢物分析及代谢通路分析。结果与模型组比较,木蝴蝶总黄酮干预后共有285种代谢物发生变化,其中上调的有41种,下调的有244种。主要与色氨酸代谢、丝氨酸代谢、胆汁酸合成、花生四烯酸代谢、亚油酸代谢等途径有关。结论木蝴蝶总黄酮发挥抗肝肿瘤作用可能与调节氨基酸代谢、脂肪酸代谢、胆汁酸合成等代谢途径有关。     

基于代谢组学的去芹糖桔梗皂苷D镇咳祛痰机制研究

利用基于UHPLC-LTQ-orbitrap-MS的代谢组学技术,分析去芹糖桔梗皂苷D (deapio-platycodin D, DPD)对浓氨水引咳模型以及酚红排泄模型小鼠肺部组织内源性代谢物代谢紊乱的调控作用,明确DPD发挥镇咳、祛痰活性的代谢调控途径。经江西中医药大学动物伦理委员会批准后(批准号:JZLLSC-20190235),通过浓氨水引咳和酚红排泄实验评估DPD的镇咳、祛痰药效,采用UHPLC-LTQ-orbitrap-MS方法筛选差异性代谢物,利用MetaboAnalyst平台分析与差异性代谢物相关的代谢通路。结果表明, DPD能显著延长(P <0.05)模型小鼠咳嗽潜伏期,减少咳嗽次数,能显著增加(P <0.05)模型小鼠的酚红排泄量。通过UHPLC-LTQ-orbitrap-MS技术共鉴定出25种与咳嗽相关的差异性代谢物、38种与排痰相关的差异性代谢物, DPD能显著回调这些差异性代谢物水平。代谢通路分析结果显示亚油酸代谢,花生四烯酸代谢,甘油磷脂代谢,丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢,戊糖和葡萄糖醛酸相互转化与赖氨酸降解为其改善浓氨水引咳模型小鼠代谢紊乱的...     

基于血清和肝代谢组学研究护肝片的保肝作用

目的:从代谢通路角度阐明护肝片保肝作用的药效及作用机制。方法:将36只雄性SD大鼠随机分成正常组(0.5%羧甲基纤维素钠)、模型组(0.5%羧甲基纤维素钠)和护肝片组(1.7 g/kg),每组12只,每天ig给药1次,连续给药9 d。末次给药后1 h,模型组和护肝片组大鼠ip 50%四氯化碳(CCl_4)花生油溶液1 mL/kg诱导肝损伤。造模24 h后,检测大鼠肝组织中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平;利用核磁共振氢谱(~1H-NMR)代谢组学技术建立大鼠血清和肝代谢物谱,分析护肝片对CCl_4致急性肝损伤大鼠血清和肝代谢轮廓变化和潜在生物标志物的影响。结果:与正常组比较,模型组大鼠肝组织中MDA水平显著升高(P<0.05),SOD、GSH-Px水平显著降低(P<0.05);大鼠机体生理及物质代谢均发生了明显的改变,11种血清代谢潜在生物标志物和14种肝代谢潜在生物标志物水平均显著升高/降低(P<0.05)。与模型组比较,护肝片组大鼠肝组织中MDA水平显著降低(P<0.05),SOD、GSH-Px水平显著升高(P<0.05)。大鼠血清和肝代谢趋于正常,6种血清代谢潜在生物标志物(异亮氨酸、亮氨酸、3-羟基丁酸、丙酮、乙酰乙酸、胆碱)和8种肝代谢潜在生物标志物(3-羟基丁酸、丙氨酸、谷氨酸、丙酮酸、琥珀酸、胆碱、乳酸、葡萄糖)得到显著回调(P<0.05)。结论:护肝片保肝的机制可能与抗氧化应激及调控脂质代谢、糖代谢和氨基酸代谢有关。     

双氢青蒿素对肝癌细胞氨基酸代谢的影响及机制研究

目的:考察双氢青蒿素(DHA)对人肝癌细胞Huh7、BEL-7402中氨基酸类代谢产物的影响,为阐明DHA参与肝癌细胞代谢的调控机制提供理论基础。方法:采用CCK-8法,测定不同浓度DHA(12.5、25、50、100μmol/L)作用24、48、72 h后对两种细胞活性的影响。将两种细胞分别分为对照组和给药组(DHA,25μmol/L),加入不含药或含药培养基后培养24 h,均平行操作3份。对各组细胞样品进行衍生化处理后,采用气相色谱联用质谱(GC-MS)法检测细胞中氨基酸代谢物含量变化,结合SIMCA-P软件分析和化合物谱库的比对,筛选出两种细胞中的差异代谢物;采用Metaboanalyst 4.0软件对差异代谢物进行通路富集分析。结果:与对照组比较,给药组Huh7细胞或BEL-7402细胞中谷氨酰胺、谷胱甘肽、苯丙氨酸、富马酸、牛磺酸等含量均呈下降趋势。上述两种细胞中分别筛选获得28、29个差异代谢物,两者的共同差异代谢物有10个,包括谷氨酰胺、谷胱甘肽、牛磺酸、富马酸、苯丙氨酸等;两者的差异代谢物分别富集到8、6条通路上,其共同富集通路为氨基酸-tRNA生物合成、天冬氨酸-丙氨酸-谷氨酸代谢、氮代谢、苯丙氨酸代谢、戊糖磷酸途径。结论:DHA能明显降低Huh7细胞和BEL-7402细胞的活性,并能显著降低细胞中谷氨酰胺、谷氨酸、谷胱甘肽、苯丙氨酸等的含量;其可能通过影响天冬氨酸-丙氨酸-谷氨酸代谢通路等机制来调控两种细胞的生长。