沙蟾毒精抑制肝癌HepG2细胞黏附、迁移和侵袭的作用

目的研究沙蟾毒精(Arenobufagin)对人肝癌细胞HepG2黏附、迁移和侵袭的抑制作用。方法 MTT法检测沙蟾毒精对HepG2细胞活力和细胞黏附能力的影响,划痕实验观察沙蟾毒精对HepG2细胞运动能力的影响,Transwell小室模型研究沙蟾毒精对HepG2细胞的迁移和侵袭的抑制作用,Western blot检测基质金属蛋白酶MMP 2和MMP 9的表达水平变化。结果与空白组相比,沙蟾毒精可降低HepG2细胞的黏附能力,使Transwell小室膜上的肝癌细胞明显减少,并且呈剂量依赖性。Western blot结果显示沙蟾毒精可以明显抑制基质金属蛋白酶MMP 2和MMP 9的表达。结论沙蟾毒精能抑制人肝癌细胞HepG2的黏附、迁移和侵袭,其机制可能与抑制MMP 2和MMP 9的表达有关。     

厄洛替尼对非小细胞肺癌脑转移细胞PC14/B侵袭转移能力的抑制作用北大核心CSCD

目的研究厄洛替尼对非小细胞肺癌(NSCLC)脑转移细胞PC14/B侵袭转移能力的抑制作用。方法 PC14/B细胞随机分为对照组及3个浓度实验组(厄洛替尼,1,5,25μmol·L^(-1)),噻唑蓝法和迁移小室法分别检测细胞活力及侵袭能力,免疫印迹法检测基质金属蛋白酶2(MMP2)、MMP9、上皮细胞-间充质转化(EMT)相关蛋白E-钙黏附素、波形蛋白的表达及蛋白激酶B(AKT)磷酸化水平。结果与对照组(0.75±0.09)比较,小中大3个浓度实验组均能显著抑制PC14/B细胞活力,比值分别为(0.63±0.06),(0.52±0.04),(0.38±0.03)。与对照组比较,3个浓度实验组均能显著降低侵袭力,上调E-钙黏附素表达,下调MMP2、MMP9及波形蛋白表达,并降低AKT磷酸化水平。结论厄洛替尼能显著的抑制PC14/B细胞侵袭转移能力,与下调MMPs表达、抑制EMT生成及降低AKT磷酸化水平有关。     

酯蟾毒配基抑制人肝癌细胞体外增殖和迁移侵袭研究

本文旨在探讨酯蟾毒配基对人肝癌细胞增殖和迁移侵袭的影响及其相关机制。采用MTT比色法测定酯蟾毒配基对4种肝癌细胞的体外生长抑制作用,划痕实验和Transwell实验用来评估酯蟾毒配基对MHCC-97H细胞的迁移和侵袭能力,采用Western blot实验检测经不同浓度酯蟾毒配基处理后, MHCC-97H细胞内迁移侵袭相关蛋白的表达。结果表明,酯蟾毒配基能明显抑制肝癌细胞的体外增殖能力,其对MHCC-97H、HepG2、SK-Hep-1、Huh-7细胞的半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration, IC₅₀)值分别为0.55±0.06、2.83±0.24、5.25±0.49、14.89±2.28μmol·L^-1;酯蟾毒配基还能显著抑制MHCC-97H细胞的迁移和侵袭能力,且具有显著的浓度依赖性。MHCC-97H细胞中的整合素α2 (integrin α2)、整合素α6 (integrin α6)、整合素β1 (integrin β1)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、基质金属蛋白酶2 (mat...     

蟾毒灵通过下调PKM2抑制黑色素瘤细胞增殖、 迁移与侵袭的实验研究

目的：考察蟾毒灵（Bufalin）对黑色素瘤细胞增殖、迁移与侵袭,以及对有氧糖酵解关键酶M2型丙酮酸激酶（pyruvate kinase M2,PKM2）的调控作用。方法：分别使用MTT、划痕及Transwell实验,考察蟾毒灵对A375黑色素瘤细胞增殖、迁移与侵袭的影响;利用试剂盒检测蟾毒灵对A375细胞有氧糖酵解主要指标乳酸、葡萄糖及丙酮酸激酶的影响;蛋白免疫印迹实验探讨蟾毒灵对PKM2蛋白表达的影响,以及对下游肿瘤迁移与侵袭相关蛋白表达的影响。结果：蟾毒灵能显著抑制A375细胞的增殖、迁移与侵袭;还能抑制A375细胞的有氧糖酵解及PKM2的蛋白表达,进而下调肿瘤转移相关蛋白MMP-2、MMP-9、N-cadherin的表达。结论：蟾毒灵对A375黑色素瘤细胞的增殖、迁移与侵袭具有明显的抑制作用,其抑制机制可能与抑制肿瘤有氧糖酵解途径中关键酶PKM2有关。     

含酰胺结构的大黄酸衍生物4a对卵巢癌细胞的 迁移、侵袭的影响

目的探讨含酰胺结构的大黄酸衍生物4a(简称衍生物4a,derivative 4a)对卵巢癌SKOV3细胞迁移、侵袭能力的影响及可能作用机制。方法采用分子对接和Western blot检测衍生物4a对Rac1蛋白的调控作用,CCK-8、HE染色、Scratch和Transwell实验分别检测衍生物4a对SKOV3细胞增殖、形态学、迁移和侵袭能力的影响;Western blot检测衍生物4a处理细胞后EMT的标志性蛋白Vimentin、β-cantenin、E-caderin、MMP-2、MMP-9的表达情况。结果衍生物4a能有效与Rac1蛋白结合,结合能明显低于大黄酸;且能下调SKOV3细胞Rac1蛋白的表达。衍生物4a能够明显抑制SKOV3细胞的增殖、侵袭和迁移能力,并诱导细胞产生大量空泡化;衍生物4a可下调MMP-2、MMP-9表达,上调EMT上皮性标志蛋白E-caderin表达及下调Vimentin、β-cantenin的表达。结论衍生物4a能抑制卵巢癌SKOV3细胞增殖、迁移及侵袭,其机制可能是靶向调控Rac1,抑制基质金属蛋白酶分泌,上调EMT过程关键分子E-caderin和下调Vimentin、β-cantenin的表达综合作用的结果。     

黄药子配伍甘草对胃癌细胞增殖及侵袭的影响

目的探讨黄药子配伍甘草对人胃癌细胞SGC7901增殖及侵袭的影响。方法体外培养胃癌细胞SGC7901,以黄药子配伍甘草含药血清处理,采用CCK-8法检测细胞增殖,Transwell试验检测细胞侵袭性,实时荧光定量(qRT-PCR)检测上皮间质转化(EMT)相关基因的表达。结果中药含药血清能抑制胃癌细胞SGC 7901增殖,且抑制作用随着药物浓度的增加而加强(P<0.05);中药组Transwell小室穿膜细胞数随着浓度的增加而减少(P<0.05);qRT-PCR结果显示,空白组E钙黏蛋白表达较其他组低,不同浓度中药组E钙黏蛋白表达随着浓度的增加而增加;中药组较空白组N钙黏蛋白和金属基质蛋白酶(MMP)-9的表达均降低,随着中药浓度的增加而显著下降(P<0.05)。结论黄药子配伍甘草能抑制胃癌细胞SGC 7901的增殖,并通过抑制EMT而降低癌细胞的侵袭性。     

非洲爪蟾驱动蛋白样蛋白 2靶蛋白对非小细胞肺癌细胞迁移侵袭的影响及其机制

目的 研究非洲爪蟾驱动蛋白样蛋白2靶蛋白(TPX2)基因对非小细胞肺癌细胞迁移侵袭的影响及其机制.方法 2018年10月至2019年8月,将非小细胞肺癌A549、H1299细胞株分为三组:空白对照组(未经转染的细胞);阴性对照组[转染非特异性的小干扰RNA(siRNA)的细胞];siRNA-TPX2组(转染TPX2特异性的siRNA的细胞).采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)和蛋白质印迹法(Western blotting)方法对转染小干扰RNA(siRNA)前后的非小细胞肺癌A549、H1299细胞株进行鉴定.人胆囊收缩素/缩胆囊素八肽(CCK-8)增殖实验检测细胞增殖能力.Tanswell小室迁移实验检测细胞迁移和侵袭的影响.蛋白质印迹法检测磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)-蛋白激酶B(Akt)信号通路关键分子及基质金属蛋白酶(MMPs)表达的变化.结果 siRNA-TPX2组中TPX2 mRNA和蛋白的相对表达水平显著低于阴性对照组及空白对照组(P<0.05).与阴性对照组相比,下调TPX2可抑制A549细胞的增殖[24 h(0.71±0.02)比(0.62±0.03);48 h(1.62±0.03)比(0.69±0.02);72 h(2.08±0.03)比(0.95±0.02)]、迁移[(91.18±13.97)个比(49.95±12.15)个]、侵袭[(165.46±19.19)个比(93.37±13.54)个](P<0.05).与阴性对照组相比,下调TPX2可抑制H1299细胞的增殖[24 h(0.81±0.03)比(0.65±0.02);48 h(1.73±0.02)比(0.78±0.01);72 h(2.18±0.03)比(1.16±0.02)]、迁移[(74.31±13.86)个比(38.76±9.05)个]、侵袭[(158.46±19.58)个比(88.47±11.23)个](P<0.05).TPX2表达下调能显著降低非小细胞肺癌A549、H1299细胞中PI3K、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、基质金属蛋白酶9(MMP9)和基质金属蛋白酶12(MMP12)蛋白的表达(P<0.05).激动剂胰岛素生长样因子1(IGF-1)能完全削弱TPX2-siRNA抑制A549、H1299细胞中PI3K/Akt信号通路活性及其下游MMP9和MMP12的表达(P<0.05).结论 TPX2通过调控PI3K/Akt信号通路活性及其下游MMP9和MMP12的表达促进非小细胞肺癌细胞侵袭转移.     

裙带菜多糖抑制肝癌细胞增殖和迁移的机制

目的 探讨裙带菜多糖(sulfated polysaccharide from Undaria pinnatifida,SPUP)对肝癌细胞增殖、迁移的影响及潜在机制。方法 MTT和克隆形成实验检测SPUP对肝癌细胞HepG2、SMMC-7721增殖的影响;Hoechst 33258染色和Westernblot法检测SPUP干预后对HepG2、SMMC-7721细胞凋亡的影响;Transwell和划痕法检测HepG2、SMMC-7721细胞的迁移和侵袭;免疫荧光和Westernblot法检测SPUP对肝癌细胞自噬、上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)和基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase2,MMP-2)、MMP-9蛋白的影响。结果 SPUP对HepG2、SMMC-7721细胞有短期和长期的抑制增殖作用,对正常肝细胞L-02无明显抑制作用,SPUP可促进两种肝癌细胞凋亡和自噬水平。同时,SPUP可以抑制肝癌细胞的迁移侵袭能力,降低EMT和MMPs水平。结论 SPUP通过促进凋亡和自噬、抑制EMT和MMP...     

慢病毒介导的性别决定区 Y框蛋白 9表达下调对抑制 Wnt信号通路调控乳腺癌细胞侵袭能力的影响

目的研究慢病毒介导的性别决定区 Y框蛋白 9(SOX9)表达下调对抑制 Wnt信号通路调控乳腺癌细胞侵袭能力的影响。方法以 Wnt信号通路抑制剂 XAV939处理乳腺癌细胞 MDA?MB?436,噻唑蓝( MTT)法测定细胞增殖活性,蛋白质免疫印迹(Western blot)检测细胞中 SOX9蛋白及 Wnt信号通路蛋白 β?连环蛋白( β?catenin)、下游靶基因 c?myc表达水平。 SOX9 siRNA慢病毒感染 MDA?MB?436细胞, Realtime PCR和蛋白质印迹法检测干扰效果。细胞划痕实验测定细胞迁移能力, Transwell小室检测细胞侵袭能力,蛋白质印迹法检测细胞中基质金属蛋白酶 ?2(MMP?2)和上皮间质转化( EMT)相关蛋白上皮性钙黏附素(E?cadherin)、神经性钙黏附素( N?cadherin)表达水平。结果 XAV939能够下调 MDA?MB?436细胞增殖活性,抑制乳腺癌细胞中 SOX9蛋白表达,降低 Wnt信号通路蛋白 β?catenin、c?myc表达水平。 SOX9 siRNA慢病毒感染后的 MDA?MB?436细胞中 SOX9 mRNA和蛋白水平降低。下调 SOX9的 MDA?MB?436细胞侵袭数目从( 85.56±4.35)降低至( 64.15±3.25)迁移率从(74.16±6.25)%降低至( 54.12±3.96)%,细胞中 MMP?2蛋白水平降低, E?cadherin蛋白水平升高, N?cadherin蛋白水,平降低。 XAV939也能够下调 MDA?MB?436细胞侵袭数目从( 85.56±4.35)降低至( 51.23±2.87)迁移率从( 74.16±6.25)%降低至( 45.28± 3.59)%,抑制细胞中 MMP?2蛋白表达,促进 E?cadherin蛋白表达,下调 N?cadherin蛋白表,达水平。 XAV939处理下调 SOX9的 MDA?MB?436细胞,细胞侵袭数目降低至( 34.18±2.59)迁移率降低至( 24.78±1.68)%,细胞中 MMP?2蛋白表达水平下降更多, E?cadherin蛋白水平升高更多, N?cadherin蛋白水平下多。结论抑制 Wnt信号通路下调乳腺癌细胞中 SOX9的表达水平,降更,敲低其表达能够协同 Wnt信号通路抑制剂降低乳腺癌细胞侵袭迁移能力。     

Arresten蛋白通过调控上皮-间质转化抑制宫颈癌细胞的迁移

目的探讨Arresten蛋白对宫颈癌Siha细胞迁移的影响及其可能的作用机制。方法采用四甲基偶氮唑盐(MTT)实验、划痕实验和Boyden小室趋化实验检测Arresten蛋白对宫颈癌Siha细胞增殖及迁移能力的影响;通过免疫细胞化学法检测细胞迁移分子标志基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达水平;利用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)和蛋白质印迹法检测上皮-间质转化(EMT)标志物E-cadherin与N-cadherin的水平变化。结果经3.2μg/ml Arresten蛋白处理的Siha细胞,其增殖能力没有明显改变(P>0.05)。通过对划痕实验中细胞迁移距离和穿越Boyden小室的细胞数目进行分析,发现经3.2μg/ml Arresten蛋白处理的Siha细胞迁移功能受到抑制(P<0.01),细胞内迁移分子标志基质金属蛋白酶(MMP)-9的表达水平也显著降低(P<0.01)。Arresten蛋白可诱导Siha细胞内上皮标志物E-cadherin表达上调(P<0.01),间充质细胞标志物N-cadherin表达下调(P<0.01)。结论 Arresten蛋白对宫颈癌细胞迁移有抑制作用,可能通过抑制EMT途径发挥作用。。     

Molecular mechanism of a Matijin-su derivative for inhibiting proliferation,invasion and migration of prostate cancer cells北大核心CSCD

目的探讨马蹄金素衍生物HXL130对前列腺癌PC3细胞的增殖、侵袭及迁移的影响及其分子机制。方法采用MTT法检测HXL130对PC3细胞增殖的影响,Hoechst 33258染色和流式细胞术检测对癌细胞凋亡以及对其细胞周期的影响,运用Transwell法检测对癌细胞侵袭与迁移的影响;运用蛋白组学测序技术检测化合物处理癌细胞引起的差异表达蛋白(DEPs),分析DEPs的功能及其调控的相关信号通路,并运用Western blot进行验证。结果PC3细胞成活率随着HXL130浓度和时间的增加而降低,且可明显的诱导细胞凋亡和阻滞G 2期,并可明显的抑制PC3细胞的侵袭和迁移能力;蛋白质组学分析表明,HXL130处理癌细胞引起67个蛋白发生差异表达,包括51个上调蛋白和16个下调蛋白,其主要参与PI3K-AKT、MAPK、细胞凋亡及内质网蛋白处理相关信号通路;Western blot结果研究表明HXL130可明显促进细胞中上述信号通路中的关键蛋白PERK、p-elF2α、CHOP、Bax蛋白表达,抑制Bcl-2、MMP1和VEGF的蛋白表达。结论马蹄金素衍生物HXL130可抑制PC3细胞的增殖和转移,其分子机制主要涉及到PI3K-AKT、MAPK、细胞凋亡及内质网蛋白处理相关信号通路的调控。     

小檗碱通过TGF-β/Smad通路抑制TGF-β1诱导的人肝癌HepG2细胞上皮间质转化的研究

目的探讨小檗碱(berberine)对转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)诱导的人肝癌HepG2细胞上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的作用及其机制。方法MTT法检测小檗碱对HepG2细胞增殖活性;采用10 ng·L-1 TGF-β1诱导HepG2细胞EMT模型形成,并加入小檗碱处理;克隆形成实验、细胞划痕和Transwell小室实验分别检测HepG2细胞的克隆形成能力、迁移和侵袭能力;免疫荧光法检测EMT间质标志物Vimentin的表达;Western blot法检测EMT标志物蛋白(E-cadherin、N-cadherin、Snail)、基质金属蛋白酶(MMP-2)、TGF-β/Smad通路蛋白(Smad2、p-Smad2、Smad3、p-Smad3)的表达。结果小檗碱呈浓度时间依赖性抑制HepG2细胞活性;与TGF-β1组比较,小檗碱可以明显抑制HepG2细胞的克隆形成能力、迁移和侵袭能力;并且小檗碱可以抑制TGF-β1上调的E-cadherin蛋白表达,和TGF-β1下调的N-cadherin、Vimentin、Snail、MMP-2、p-Smad2、p-Smad3蛋白表达。结论小檗碱可能通过抑制TGF-β/Smad信号通路,干预TGF-β1诱导HepG2细胞的EMT进程,抑制HepG2细胞的迁移和侵袭能力。     

青藤碱通过COX-2/VEGF通路抑制胃癌MGC803细胞迁移和侵袭的研究

摘要：目的:探讨青藤碱对胃癌MGC803细胞迁移和侵袭的影响及机制。方法:将胃癌MGC803细胞随机分成4组:对照组、青藤碱300,600,1 200 mg·L-1组,采用划痕愈合实验检测细胞迁移率,Transwell实验检测迁移细胞数和侵袭细胞数,qRTPCR检测环氧合酶2（COX-2）、血管内皮生长因子（VEGF）、基质金属蛋白酶9（MMP9）、基质金属蛋白酶2（MMP2） mRNA表达,Western blot检测COX-2、VEGF、MMP9、MMP2蛋白表达。结果:青藤碱300,600,1 200mg·L-1组胃癌MGC803细胞迁移率、迁移细胞数、侵袭细胞数、COX-2、VEGF、MMP9、MMP2 mRNA和蛋白表达显著低于对照组（P<0.05或P<0.01）。结论:青藤碱抑制胃癌MGC803细胞迁移和侵袭,其机制与下调COX-2、VEGF、MMP9、MMP2表达有关。     

白藜芦醇对人结肠癌细胞上皮间质转化的抑制作用

目的观察白藜芦醇(Resveratrol,Res)对人结肠癌细胞HCT-8上皮间-质转化(EMT)的影响,初步探讨其可能存在的机制。方法取对数生长期的人结肠癌HCT-8细胞,采用不同浓度的白藜芦醇(0、40、80、120μmol/L)对细胞分别进行干预24、48、72 h;MTT法检测不同时间Res对HCT-8细胞增殖活性的影响;细胞黏附试验检测Res对HCT-8细胞黏附能力的影响;Transwell小室试验检测Res对HCT-8细胞迁移和侵袭能力的影响;进一步采用蛋白免疫印迹法和qRT-PCR分别检测Res对HCT-8细胞中蛋白激酶B(AKT)、磷酸化蛋白激酶B(P-AKT)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)和mRNA表达的影响。结果 Res(浓度为40、80、120μmol/L)在干预后24、48、72 h均可以明显抑制HCT-8细胞的增殖活性(P<0.05)。与空白对照组相比,细胞的同种黏附能力增强,异种黏附能力降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与空白对照组相比,Res 120μmol/L对细胞迁移和侵袭能力均具有明显的抑制作用(P<0.05),Res 120μmol/L作用HCT-8细胞48 h后,HCT-8细胞中上皮间质标志性蛋白E-钙黏蛋白(E-cadherin)和mRNA的相对表达量增加(P<0.05),而AKT蛋白的表达无明显变化(P>0.05),P-AKT蛋白的表达明显减少(P<0.05);N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)和mRNA的相对表达量显著减少,差异有统计学意义(P<0.05)。结论白藜芦醇通过调控细胞EMT抑制人结肠癌HCT-8细胞的迁移和侵袭能力,其作用机制可能受PI3K/AKT信号通路的调控。     

缺氧对肝癌SMMC7721细胞体外黏附和迁移能力的影响

目的研究低氧对体外培养的人肝癌SMMC7721细胞株黏附、迁移能力的影响,并探讨其可能存在的分子机制。方法通过氯化钴诱导SMMC7721细胞缺氧,通过细胞黏附试验、transwell小室方法观察缺氧对细胞黏附和迁移能力的影响;免疫细胞化学方法检测细胞缺氧前后缺氧诱导因子1a(HIF-1a)和血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶2(MMP2)蛋白表达变化。结果黏附试验显示缺氧后细胞黏附力增强(P<0.01),transwell迁移实验显示,缺氧后细胞迁移能力较常氧时明显增加(P<0.05);细胞免疫组织化学检测显示缺氧24h HIF-1a、VEGF、MMP2蛋白表达均较常氧时增加(P<0.05)。结论氯化钴诱导缺氧后,SMMC7721细胞黏附、迁移能力增强;HIF-1a及其下游靶基因VEGF、MMP2的蛋白表达增加参与了这一生物学行为变化。     

lncRNA LINC00858靶向微小 RNA-363-3p促进肝癌细胞增殖、迁移和侵袭

目的 探讨LINC00858通过靶向miR-363-3p对肝癌HCCLM3细胞生物学行为的影响.方法 选取2017年1月至2019年1月青海省第五人民医院收治的肝癌病人30例,获取其肝癌组织及其癌旁组织.设置si-NC组、si-LINC00858组、si-LINC00858+anti-miR-NC组和si-LINC00858+anti-miR-363-3p组.实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测LINC00858和miR-363-3p表达水平;双荧光素酶报告实验验证LINC00858和miR-363-3p的靶向关系;CCK-8检测细胞增殖活性;Transwell检测细胞迁移和侵袭;蛋白质印迹法(Western blotting)法检测相关蛋白表达.结果 肝癌组织中LINC00858高表达(2.85±0.27),miR-363-3p低表达(0.58±0.05).LINC00858靶向调控miR-363-3p;抑制LINC00858能够上调p21表达,下调细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达,降低细胞活力、迁移数、侵袭数(P<0.05).干扰miR-363-3p表达逆转了抑制LINC00858表达对肝癌HCCLM3细胞增殖、迁移和侵袭的影响.结论 抑制LINC00858通过靶向上调miR-363-3p抑制肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭.     

RNA 干扰抑制人舌鳞癌细胞 MMP-1表达对细胞侵袭、转移能力的影响

目的：探讨基质金属蛋白酶‐1（MMP‐1）短发夹RNA（shRNA）的慢病毒表达载体在人舌鳞癌细胞株CAL27中对MMP‐1表达及细胞侵袭、转移的作用。方法设计合成用于干扰人MMP‐1的shRNA并与载体 PLKO ．1连接,构建重组的慢病毒载体质粒 PLKO ．1／MMP‐1‐shRNA ,稳定感染CAL27细胞。Western blot检测CAL27细胞中MMP‐1蛋白表达,划痕实验和Transwell实验分别检测CAL27细胞的迁移和侵袭能力。结果成功构建慢病毒载体 PLKO ．1／MMP‐1‐shRNA ;其能明显下调CAL27细胞中MMP‐1蛋白表达,抑制CAL27细胞迁移和侵袭能力。结论慢病毒载体PLKO ．1／MMP‐1‐shRNA能有效抑制MMP‐1表达、细胞迁移和侵袭。MMP‐1可能是舌鳞癌细胞转移的重要调节因子。     

去甲斑蝥素对人胆囊癌细胞系侵袭转移及其相关基因的抑制效应

目的 :探讨去甲斑蝥素 (NCTD)对人胆囊癌细胞侵袭转移及其相关基因的抑制效应。方法 :培养人胆囊癌GBC SD细胞 ,应用Matrigel实验、过河实验、SABC方法检测NCTD对GBC SD细胞侵袭、运动和基质溶解相关基因蛋白明胶酶A即金属蛋白酶 2 (MMP2 ) ,金属蛋白酶 2组织抑制剂 (TIM P2 )表达的影响。结果 :NCTD在 5mg·L- 1时即可抑制GBC SD细胞的体外侵袭、运动能力 ,随药物浓度提高过膜细胞减少 ,过膜死亡细胞增多 ,过河时间延长(P <0 .0 1) ;GBC SD细胞MMP2 表达下降 ,TIMP2表达上升 ,MMP2 /TIMP2 比值下降 (P <0 .0 1)。结论 :NCTD在低浓度下即可抑制人胆囊癌细胞的体外侵袭、运动能力 ,其机制可能与抑制GBC SD细胞迁移运动和干扰GBC SD细胞MMP2 ,TIMP2 表达有关。     

CCL5对人肺腺癌细胞增殖、凋亡的影响及机制研究

目的:研究敲低CC基序趋化因子配体5(CCL5)在非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞中的表达及对A549细胞增殖、迁移、凋亡等生物学活性的影响,探讨CCL5促进A549细胞上皮间质软化(EMT)的可能分子机制。方法:体外培养肺腺癌A549细胞,应用shRNA敲低A549细胞中CCL5基因,分为阴性对照组(siRNA-NC)及实验组(siRNA-CCL5)。应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞中CCL5mRNA表达;CCK-8、Transwell实验观察下调CCL5表达后细胞增殖、迁移、侵袭能力的变化;流式细胞术检测细胞凋亡的变化;蛋白印迹法(Western blot)检测E-钙黏附蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)及TGF-β信号通路TGF-β蛋白表达量的变化。结果:与对照组相比,敲低CCL5表达后实验组A549细胞CCL5mRNA表达下调(P<0.05);CCK-8实验结果显示A549细胞的增殖受到抑制(P<0.05);Transwell实验显示A549细胞的迁移、侵袭明显抑制(均P<0.05);A549细胞凋亡增加;West...     

苦参碱对HCCLM3人高转移性肝癌细胞体外转移的 作用及机制研究

目的:探讨苦参碱对HCCLM3人高转移肝癌细胞体外转移的作用及其机制.方法:CCK-8检测不同浓度的苦参碱对HCCLM3癌细胞的增殖作用,选取不具有直接抑制细胞增殖效应的药物浓度进行细胞划痕实验,研究苦参碱对HCCLM3癌细胞迁移的影响;Transwell实验研究苦参碱对HCCLM3癌细胞侵袭的抑制影响;实时定量PCR(RT-PCR)和WesternBlot实验研究苦参碱对HCCLM3癌细胞E-钙粘蛋白(E-cadherin)、N-钙粘蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、基质金属蛋白酶(Matrix Metalloprotinase,MMP)-2和MMP-9因子mRNA和蛋白的表达.结果:苦参碱4、8、16 mg·mL-1剂量对HCCLM3癌细胞不产生直接抑制作用(P>0.05);苦参碱4、8、16 mg·mL-1剂量能够抑制HCCLM3癌细胞的迁移和侵袭,且与苦参碱0 mg·mL-1组相比,差异具有统计学意义(P<0.05);苦参碱4、8、16 mg·mL-1剂量能够减少HCCLM3癌细胞的N-cadherin、Vimentin、MMP-2和MMP-9因子mRNA和蛋白的表达,并增加E-cadherin mRNA和蛋白的表达.结论:苦参碱能够抑制HCCLM3癌细胞的转移和侵袭,其机制可能与抑制细胞上皮间质转化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关蛋白以及MMP-2和MMP-9有关.