紫杉醇对肺腺癌A549细胞株增殖和凋亡的影响

目的:探讨紫杉醇在体外对肺腺癌A549细胞株增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法:采用MTT法测定紫杉醇对A549细胞增殖的影响;Hoechst33258检测紫杉醇作用48h后细胞凋亡情况;流式细胞仪检测药物作用48h后的细胞周期和凋亡率;Western Blot检测的Bax和Bcl-2蛋白的表达。结果:紫杉醇抑制A549细胞增殖呈时效和量效关系;Hoechst33258检测紫杉醇作用48h后可见凋亡细胞;紫杉醇作用48h后药物组G2～M期细胞百分比均高于对照组(均P<0.01),药物组细胞凋亡率高于对照组(均P<0.01),且凋亡率随药物浓度增加而增加;Western Blot显示,不同浓度紫杉醇作用于A549细胞48h,Bax的表达随药物浓度增加而增加,Bcl-2的表达随药物浓度增加而减低。结论:紫杉醇能抑制肺腺癌A549细胞株的增殖,其抑制作用可能通过将细胞周期阻滞于G2～M期和通过上调Bax、下调Bcl-2的表达而诱导细胞凋亡来实现的,并且紫杉醇抑制A549细胞增殖和诱导凋亡作用随药物浓度增加而增加。     

双氢青蒿素对人肺腺癌A549细胞的体外抑制作用研究

目的 观察双氢青蒿素对肺腺癌A549细胞的体外抑瘤效应，并对其抗癌机理作出初步探索。方法 双氢青蒿素对体外培养肺腺癌A549细胞的生长抑制作用采用MTT检测法，细胞凋亡率检测用流式细胞术，并用荧光显微镜及透射电镜观察凋亡细胞的形态学特征。结果 双氢青蒿素半数抑瘤浓度为230nM，双氢青蒿素作用后细胞出现凋亡形态改变，流式细胞术结果出现凋亡峰。结论 双氢青蒿素有较明显抑瘤效应，其抗癌机理可能与诱导细胞凋亡有关。     

丹参酮ⅡA诱导人肺腺癌A549细胞凋亡

目的探讨丹参酮ⅡA(TanshinoneⅡA,TanⅡA)抗人肺腺癌A549作用及其可能作用机制。方法通过细胞形态学和MTT法观察TanⅡA对A549细胞增殖的影响;应用Hoechest33258和PI双染法观察细胞凋亡;采用荧光分光光度计检测细胞内钙及线粒体膜电位;RT-PCR检测Bad和MT-1A mRNA的表达。结果 TanⅡA能抑制A549细胞增殖,且随TanⅡA剂量的增加和作用时间的延长而增强,TanⅡA作用A549细胞24、48和72h的IC50分别为117.85、14.87和6.89μmol·L-1。TanⅡA作用A549细胞24h后,A549细胞出现染色质聚集等典型的凋亡形态学改变,且随TanⅡA剂量的增加,A549细胞凋亡百分率逐渐增大。TanⅡA作用后,A549细胞的细胞内钙升高、线粒体膜电位降低、Bad mRNA表达增加、MT-1A mRNA表达下调。结论 TanⅡA具有抗A549作用,其诱导细胞凋亡可能与钙依赖性通路和MT-1A表达下调有关。     

当归挥发油对肺腺癌A549细胞增殖、迁移及细胞周期的影响

目的 研究当归挥发油对肺腺癌A549细胞增殖抑制、凋亡、迁移及周期的影响.方法 体外培养肺腺癌A549细胞,采用MTT比色法检测细胞活性并计算抑制率;采用细胞划痕试验检测细胞迁移能力;采用流式细胞仪检测A549细胞凋亡及周期分布.结果 相比于阴性对照组,6.25～400 μg·mL-1当归中挥发油对肺腺癌A549细胞增...     

芍药苷对肺腺癌细胞A549凋亡的诱导作用

目的:研究芍药苷对肺腺癌A549细胞凋亡的诱导作用。方法:以0(阴性对照)、5、10、20、40μmol/L芍药苷培养A549细胞48 h后,以MTT法检测A549细胞活力。上述浓度芍药苷培养A549细胞24 h后,酶标法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)活性;Western blot法检测Bcl-xl、Bax、核因子κB p65(NF-κB p65)、磷酸化核因子κB p65(NF-κB pp65)蛋白表达。结果:与阴性对照比较,5~40μmol/L芍药苷培养A549细胞48 h后,细胞活力减弱;5~40μmol/L芍药苷培养细胞24 h后,细胞Caspase-3活性、Bax蛋白表达增强;10~40μmol/L芍药苷培养细胞24 h后,细胞Bcl-xl蛋白表达减弱,NF-κB pp65蛋白表达减弱;以上差异均具有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。结论:芍药苷可诱导A549细胞凋亡,其机制可能与激活NF-κB信号通路、调节相关基因表达有关。     

姜黄素对肺腺癌A549细胞凋亡的影响及其机制

目的观察姜黄素对肺腺癌细胞A549生长的抑制作用,并探索其机制。方法四氮唑蓝法测定姜黄素作用于肺腺癌细胞A549的吸光值,计算细胞抑制率;流式细胞仪测定40μmol.L-1姜黄素或空白对照培养液的肺腺癌细胞凋亡率与凋亡相关蛋白Caspase-9表达;比色法测定凋亡相关蛋白Caspase-3,Caspase-8表达;观察加用Caspase-9抑制剂后Caspase-3的表达。结果姜黄素对肺腺癌A549细胞有抑制作用,存在剂量依赖(r=0.619;P<0.01)与时间依赖(r=0.618;P<0.01);姜黄素对肺腺癌A549的凋亡率(30.25%)明显高于对照组(1.32%)(P<0.001);姜黄素组肺腺癌细胞A549的凋亡相关因子Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9表达明显高于对照组(P<0.001);姜黄素组加用Caspase-9抑制剂后Caspase-3表达明显下降,仍高于对照组(P<0.001)。结论姜黄素诱导肺腺癌A549细胞凋亡可能与激活Caspase-8、Caspase-9、Caspase-3有关。     

柚皮素诱导肺腺癌A549细胞凋亡的研究

目的：研究柚皮素对肺腺癌A549细胞的增殖抑制及诱导凋亡作用。方法应用四甲基偶氮唑盐比色法（MTT法）观察柚皮素对A549细胞增殖的抑制作用;Hoechst 33342染色后于倒置荧光显微镜下观察柚皮素对A549细胞形态的影响;通过Annexin V-FITC/PI双染后流式细胞术检测柚皮素对A549细胞诱导凋亡的作用。结果柚皮素可抑制A549细胞的增殖,且呈现时效、量效依赖关系;Hoechst 33342染色倒置荧光显微镜下发现不同浓度柚皮素作用细胞48h后出现细胞核破裂、浓染,呈现明显的凋亡形态学特征;200μM、400μM 柚皮素作用细胞48h 后 A549细胞凋亡率分别为（12.15±2.14）%和（25.26±3.37）%。结论柚皮素可能通过诱导细胞凋亡从而发挥其抑制A549细胞增殖的作用。     

白藜芦醇诱导肺腺癌A549细胞凋亡的作用机制

目的 探讨白藜芦醇（Res）对肺腺癌A549细胞凋亡的作用及其机制。方法 常规培养肺腺癌A549细胞（购于中国科学院细胞生物学研究所）至对数生长期,加入不同浓度的Res （终浓度分别为3、10、30、60、100、200、300 mg/L）,以Res 0 mg/L为对照组,采用噻唑蓝（MTT）比色法检测不同浓度的Res对A549细胞的吸光度值,计算细胞的生长抑制率;采用Annexin-Ⅴ/PI双染法检测Res对肺腺癌A549细胞凋亡的影响;采用逆转录酶-聚合酶联反应（RT-PCR）检测端粒酶mRNA和β-actin mRNA的相对活性。结果 MTT检测显示Res呈剂量依赖性抑制A549细胞增殖。与对照组比较,不同浓度（10、30、100 mg/L） Res可抑制A549细胞增殖;Annexin-Ⅴ/PI检测结果显示,与对照组比较,随着Res剂量（10、30、100 mg/L）的增加,A549细胞的凋亡数升高,差异有统计学意义（P<0.05）;与对照组比较,不同剂量Res （10、30、100 mg/L）诱导端粒酶mRNA相对含量明显下降,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 Res可诱导肺腺癌A549细胞凋亡,其机制可能与抑制端粒酶活性有关。     

长链非编码RNA BCYRN1对肺腺癌细胞生物学行为的影响

摘要：目的　探究长链非编码RNA（lncRNA）脑胞质RNA1（BCYRN1）在肺腺癌细胞中的表达及对细胞周期、凋亡、侵袭和迁移能力的影响。分析BCYRN1表达与肺腺癌患者临床病理特征及预后的关系。方法　分别培养正常肺上皮细胞BEAS-2B和肺腺癌细胞A549、H1299,采用实时荧光定量聚合酶链反应（qPCR）检测BCYRN1在正常细胞和肺腺癌细胞中的表达水平;分别将BCYRN1敲低及对照质粒转染入H1299肺腺癌细胞,流式细胞仪分析细胞周期和凋亡的变化;通过划痕实验、Transwell实验检测细胞侵袭和迁移能力的变化。结合癌症基因组图谱（TCGA）数据库,分析BCYRN1表达与肺腺癌患者临床病理特征的相关性。利用癌症阵列的lncRNA（lnCAR）数据库中lncRNAs表达数据,采用Cox回归分析BCYRN1表达与患者预后的关系。结果　BCYRN1在肺腺癌细胞中的表达水平显著高于肺正常上皮细胞（P＜0.05）;流式细胞分析提示BCYRN1敲低组的细胞出现S期阻滞,细胞凋亡率增加;划痕实验和Transwell实验显示BCYRN1敲低组H1299细胞侵袭和迁移能力减弱。生物信息学分析显示BCYRN1的表达与患者的N分期和肿瘤分期相关（P＜0.05）,BCYRN1高表达患者总生存期显著缩短。结论　LncRNA BCYRN1在肺腺癌细胞中高表达,下调BCYRN1可抑制肺腺癌细胞的侵袭和迁移能力,并使细胞周期发生阻滞。其高表达与肺腺癌患者N分期和肿瘤分期相关,BCYRN1高表达患者预后较差。     

地塞米松诱导人肺腺癌A549细胞对紫杉醇耐药性及Bcl-xL基因表达的影响

目的观察紫杉醇（PTX）干预不同浓度地塞米松（DEX）预处理人肺腺癌A549细胞后的耐药情况和Bcl-xL基因及蛋白表达变化,探讨DEX诱导A549细胞对PTX产生耐药的分子机制。方法采用四甲基偶氮唑蓝比色法（MTT法）测定不同浓度PTX作用于A549细胞后的细胞存活率,筛选出PTX的半数抑制浓度（IC50）;用不同浓度DEX预处理A549细胞后,再给予不同浓度PTX作用于A549细胞,用MTT法测定细胞存活率,逆转录-聚合酶链反应和蛋白质印迹法检测细胞中Bcl-xL基因和蛋白的表达。结果不同浓度DEX预处理A549细胞后能诱导其对PTX产生耐药,细胞存活率随DEX浓度的增加而增高,Bcl-xL基因和蛋白表达水平随DEX浓度的增加而增高。结论 DEX能诱导A549细胞对PTX产生耐药,其机制可能与DEX诱导A549细胞抗凋亡Bcl-xL基因表达增加有关。     

雷公藤内酯醇对肺腺癌细胞系A549的体外抑制作用的研究

目的观察雷公藤内酯醇对肺腺癌细胞系A549体外生长特性的影响。方法分别采用MTT法、流式细胞仪、琼脂糖凝胶电泳以及荧光染色观察雷公藤内酯醇肺腺癌细胞系A549增殖、细胞周期以及凋亡的影响。结果14nmol.L-1～896nmol.L-1的雷公藤内酯醇均能抑制A549细胞的生长且生长抑制作用呈剂量以及时间依赖性。雷公藤内酯醇在低浓度(14nmol.L-1)条件下,能诱导A549细胞发生细胞周期阻滞,阻滞部位在S期;高浓度(55,112mol.L-1)的雷公藤内酯醇使A549阻滞在G2/M期,并诱导其发生凋亡。结论雷公藤内酯醇能抑制A549细胞的生长,使其阻滞在S期和G2/M期,并诱导其发生凋亡。     

基于RNA干扰技术探讨消岩汤对肺腺癌A549细胞凋亡的影响

目的 分析消岩汤干预下sh-survivin对人肺腺癌A549细胞增殖及凋亡的影响。方法 选择人肺腺癌A549细胞, 采用中药复方进行干预及shRNA进行转染, 将转染后的细胞分组, 通过MTT法观察消岩汤对A549细胞生长的影响, 免疫组化法检测survivin蛋白的表达, 流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果 消岩汤能有效地抑制人肺腺癌A549的细胞增殖, 运用消岩汤作用细胞24 h后, 侵袭的细胞数明显减少, 该方作用48 h后可以诱导肿瘤细胞凋亡;消岩汤中剂量组与转染sh-survivin组抑制率相当, 不同剂量的消岩汤均可协同sh-survivin使肺癌细胞凋亡率增加。结论 消岩汤可以通过干预肿瘤细胞凋亡抑制蛋白的表达而有效抑制肿瘤的发展。     

Impact of siRNA targeting pirh2 on proliferation and cell cycle control of the lung adenocarcinoma cell line A549

The aim of this study was to investigate the role of pirh2 (p53-induced RING-H2) protein in the proliferation, apoptosis and cell cycle control of the lung cancer cell line A549. Pirh2 expression was detected by immunofluorescence, Western blot analysis and real-time polymerase chain reaction (PCR). Cell proliferation was assessed by cell counting kit-8 (CCK-8). Cell cycle control and apoptosis were analyzed by flow cytometry. The results showed that pirh2 was expressed in the cytoplasm of A549 cells. The inhibition of pirh2 expression by siRNA (psiRNA-pirh2) resulted in reduced cell proliferation and increased apoptosis. In addition, the number of G₀/G₁ phase cells was increased but G₂/M cells were not affected significantly. Taken together, the inhibition of pirh2 expression in the lung adenocarcinoma cell line A549 resulted in reduced tumor cell growth via the inhibition of cell proliferation, the activation of apoptosis and the interruption of cell cycle transition.     

Anti-tumor activity of CrTX in human lung adenocarcinoma cell line A549

Aim:

To assess the cytotoxic effect of crotoxin (CrTX), a potent neurotoxin extracted from the venom of the pit viper Crotalus durissus terrificus, in human lung adenocarcinoma A549 cells and investigated the underlying mechanisms.

Methods:

A549 cells were treated with gradient concentrations of CrTX, and the cell cycle and apoptosis were analyzed using a flow cytometric assay. The changes of cellular effectors p53, caspase-3 and cleaved caspase-3, total P38MAPK and pP38MAPK were investigated using Western blot assays. A549 xenograft model was used to examine the inhibition of CrTX on tumor growth in vivo.

Results:

Treatment of A549 cells with CrTX (25–200 μg/mL) for 48 h significantly inhibited the cell growth in a dose-dependent manner (IC₅₀=78 μg/mL). Treatment with CrTX (25 μg/mL) for 24 h caused G1 arrest and induced cell apoptosis. CrTX (25 μg/mL) significantly increased the expression of wt p53, cleaved caspase-3 and phospho-P38MAPK. Pretreatment with the specific P38MAPK inhibitor SB203580 (5 μmol/L) significantly reduced CrTX-induced apoptosis and cleaved caspase-3 level, but G₁ arrest remained unchanged and highly expressed p53 sustained. Intraperitoneal injection of CrTX (10 μg/kg, twice a week for 4 weeks) significantly inhibited A549 tumor xenograft growth, and decreased MVD and VEGF levels.

Conclusion:

CrTX produced significant anti-tumor effects by inducing cell apoptosis probably due to activation of P38MAPK and caspase-3, and by cell cycle arrest mediated by increased wt p53 expression. In addition, CrTX displayed anti-angiogenic effects in vivo.     

白藜芦醇对肺腺癌细胞增殖和CXCR4表达的影响

<正>肺癌是目前世界上最常见的恶性肿瘤之一,临床以早期转移和预后极差为特点。由于CXCR4表达于多种肿瘤细胞中[1],并且与肿瘤细胞远处转移密切相关[2],因此,CXCR4的作用越来越受到人们的重视。白藜芦醇(reveratrol,Res)可以抑制多种癌细胞的生长[3],本实验拟通过研究白藜芦醇     

塞来昔布对人肺癌A549细胞株增殖抑制和凋亡诱导作用观察

目的 体外研究选择性环氧化酶2 (COX-2)抑制剂塞来昔布对人肺癌细胞株A549增殖和凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制.方法 采用噻唑蓝(MTT比色法)观察不同浓度的塞来昔布对人肺癌细胞株A549的增殖抑制作用,TUNEL染色检测细胞凋亡,并用含半胱氨酸的门冬氨酸蛋白水解酶-3(caspase-3)活性检测试剂盒检测其活性变化.结果 塞来昔布能够以浓度依赖性方式有效地抑制K562细胞增殖,药物的Ic50为33.98 μmol·L-1;TUNEL染色分析显示给予不同浓度塞来昔布的细胞与未给予塞来昔布的细胞相比凋亡率有差异(P＜0.05),经塞来昔布处理的A549细胞内caspase-3的A405较正常对照组有显著增加(P＜0.05).结论 塞来昔布能够抑制A549细胞增殖,并呈药物浓度依赖性;塞来昔布能以浓度依赖性方式诱导K562细胞凋亡,其机制涉及caspase-3活化的信号转导途径.