bFGF预处理对Iso致大鼠心肌损伤及Fas/FasL系统的影响

目的：研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对异丙基肾上腺素(Isoprenaline，Iso)致大鼠心肌损伤心肌细胞凋亡及Fas／FasL系统的影响。方法：将Wistar雄性大白鼠随机分成三组：对照组、Iso损伤纽、bFGF预处理组，光镜观察心肌组织的病理变化，TUNEL法检测心肌细胞凋亡，免疫组化和原位杂交方法检测Fas、FasL、Caspase-3蛋白及mRNA的表达水平。结果：Iso损伤组心肌坏死较重，有显著心肌细胞凋亡，且Fas、FasL、Caspase-3基因mRNA及蛋白表达水平明显上调，bFGF预处理组心肌坏死明显减轻，凋亡细胞数减少，Fas、FasL、Caspase-3基因mRNA及蛋白表达水平明显下调。结论：bFGF可通过抑制Fas、FasL、Caspase-3的蛋白及mRNA表达，减少心肌细胞凋亡而减轻保护大鼠的心肌损伤。     

卡托普利预处理对大鼠急性心肌损伤的保护作用及其对心肌细胞凋亡的影响

目的:研究卡托普利预处理对大鼠急性心肌损伤的保护作用及其对心肌细胞凋亡的影响。方法:Wistar雄性大鼠随机分为3组:对照组、异丙基肾上腺素损伤组(Iso损伤组)、卡托普利预处理组(Cap预处理组);用TUNEL方法检测心肌细胞凋亡,用免疫组化方法检测Bcl-2和Bax蛋白表达。结果:Cap预处理组与Iso损伤组比较,心肌坏死面积减小,心肌细胞凋亡指数明显减少(P<0.01)。结论:卡托普利可能通过上调Bcl-2和下调Bax蛋白的表达,从而抑制心肌细胞凋亡,发挥心肌保护作用。     

电针预处理对心肌缺血再灌注大鼠Caspase-3及LC3Ⅱ的影响

目的观察电针预处理"内关"、"足三里"、"关元"穴,对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)大鼠心脏组织损伤的改善作用,以及对细胞自噬标志物微管相关蛋白1轻链3Ⅱ(LC3Ⅱ)和细胞凋亡标志物半胱天冬酶-3(Caspase-3)的影响。方法将雄性SPF级Wistar大鼠40只随机分为正常组、假手术组、模型组和电针组各10只。结扎冠状动脉前降支20min再灌注40min后检测血清肌钙蛋白(cTnI)、血清乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)含量、Caspase-3的mRNA表达水平、LC3Ⅱ的蛋白表达水平及心肌细胞凋亡指数(AI)。结果与正常组相比,假手术组cTnI、LDH、CK、Caspase-3 mRNA、LC3Ⅱ蛋白含量及AI等指标均无显著性变化(均P0.05);与正常组、假手术组相比模型组、电针组血清cTnI、LDH和CK含量均升高(均P0.05),且电针组含量低于模型组(P0.05);与正常组、假手术组相比,模型组、电针组AI均显著升高(均P0.05),且与模型组相比,电针组显著降低(P0.05);与正常组、假手术组相比,模型组、电针组Caspase-3表达均显著升高(均P0.05),且与模型组相比,电针组显著降低(P0.05)与正常组、假手术组相比模型组、电针组LC3Ⅱ表达显著升高(均P0.05)且与模型组相比,电针组明显下降(P0.05)。结论电针预处理能有效抑制细胞自噬、降低细胞凋亡水平进而起到保护心脏的作用。     

GDNF对大鼠脑缺血/再灌注损伤的治疗时间窗与caspase-3表达的关系

目的:探讨胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)对大鼠脑缺血再灌注损伤的治疗时间窗与半胱天冬酶3(caspase-3)蛋白表达的关系.方法:建立大鼠大脑中动脉闭塞2 h模型,再灌注0,1,3 h分别给予GDNF,观察再灌注10 h及22 h缺血半暗带caspase-3蛋白表达.TTC染色测定梗死灶体积.结果:1 h给药组脑梗死灶体积较0 h给药组增大,caspase-3蛋白表达增加(P＜0.05).3 h给药组脑梗死灶体积较1 h给药组增大,caspase-3蛋白表达增加(P＜0.05).0 h及1 h给药组再灌注22 h较10 h caspase-3蛋白表达减少,3 h给药组再灌注22 h较10 hcaspase-3蛋白表达增加(P＜0.05).结论:GDNF对缺血半暗带caspase-3蛋白表达与治疗时间窗有关,GDNF可通过减少caspase-3的表达减少脑缺血/再灌注损伤细胞凋亡的发生.     

高压氧对短暂前脑缺血小鼠海马半胱天冬酶-3表达的影响

旨在通过测定缺血再灌注时半胱天冬酶 3(caspase 3)的表达以及高压氧对表达的影响 ,从细胞凋亡的角度探讨高压氧治疗脑缺血的分子生物学机制。将C5 7BL/ 6N小鼠分为假手术组 (正常对照组 )、缺血再灌注组 (I/R组 )及缺血再灌注加高压氧治疗组 (HBO组 ) ,后 2组夹闭双侧颈总动脉 2 0min后再通血流 ,建立脑缺血再灌注模型 ,分别于再灌注 6h、12h、2 4h和 4 8h取海马。采用半定量反转录 PCR及蛋白免疫印迹 (WesternBlotting)方法分别检测caspase 3在转录水平(mRNA)及翻译水平的表达变化。结果 :各I/R组及HBO组海马中caspase 3mRNA及酶原表达水平与假手术组相比均有明显升高 ,且差异有统计学意义 (P <0 .0 5 ) ;各I/R组与相应时相点HBO组caspase 3mRNA及酶原表达水平相比差异均无统计学意义 (P >0 .0 5 )。提示 :脑缺血再灌注损伤诱发caspase 3转录水平增加 ,而且这是引起其酶原增加的主要原因 ;caspase 3介导的细胞凋亡参与了缺血再灌注损伤 ;本实验中所采用的HBO治疗方案对caspase 3转录及酶原水平无明显作用。     

大鼠脑损伤后caspase-3表达的时间规律性研究

目的:探讨大鼠脑损伤后半胱天冬酶3(caspase-3)在神经元、神经胶质细胞表达的时间规律性.方法:以冲击应力σd为355.09kPa致大鼠脑损伤后不同时间段分别应用原位杂交、免疫组化、免疫组化双染色技术检测caspase-3 mRNA和蛋白的表达强度,用图像分析系统测定阳性反应物平均灰度,进行统计学处理.结果:caspase-3 mRNA及蛋白在对照组为弥散分布,弱表达;分别于伤后15,30 min表达开始呈现增强趋势,至伤后1 d,表达达到峰值,平均灰度值分别为129.76±2.79,128.13±1.97,与对照组、伤后12 h组比较均具有显著性差异(P＜0.05),并维持高水平表达分别至伤后7 d(123.34±1.60)、伤后4 d(120.34±2.96),与对照组比较均具有显著性差异(P＜0.05).免疫组化双染结果显示,伤后阳性细胞包括神经元和星形胶质细胞.结论:脑损伤后caspase-3 mRNA及蛋白的表达具有一定的时间规律性,可运用于法医学推断脑损伤的形成时间.     

牛磺酸对缺血-再灌注大鼠血浆心肌肌钙蛋白T及心肌GRP78、Caspase-12表达的影响

目的探讨牛磺酸(taurine,Tau)对心肌缺血-再灌注损伤时血浆心肌肌钙蛋白T(cardiac troponin T,cT-nT)及心肌葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78,GRP78)、胱天蛋白酶(Caspases)-12表达的影响及其意义。方法将50只大鼠按随机数字表法分为5组:假手术组(对照组,Sham组)、缺血-再灌注组(I/R组)和Tau保护1组(Tau 1组)、Tau保护2组(Tau 2组)、Tau保护3组(Tau 3组),每组10只。采用结扎大鼠冠状动脉左前降支1h,随后再灌注24h以建立心肌缺血-再灌注损伤动物模型;Tau 1组、Tau 2组、Tau 3组分别在结扎冠状动脉前1h腹腔注射Tau 100、200、300mg·kg-1,余操作同I/R组;Sham组大鼠冠状动脉左前降支仅穿线,不结扎。采用酶联免疫法测定血浆cTnT水平,TUNEL法检测心肌细胞凋亡,RT-PCR法和免疫组织化学法分析心肌细胞GRP78、Caspase-12基因表达,荧光分析法测定Caspase-3活性。结果与Sham组比较,I/R组大鼠血浆cTnT、心肌组织中GRP78、Caspase-12mRNA和蛋白表达、细胞凋亡指数及Caspase-3活性均显著升高(均P<0.01);与I/R组比较,Tau 1组、Tau 2组、Tau 3组大鼠血浆cTnT水平、心肌组织中GRP78mRNA、Caspase-12mRNA和蛋白表达、细胞凋亡指数及Caspase-3活性均呈显著降低(均P<0.05)。结论 Tau可显著减轻心肌缺血-再灌注损伤,其作用机制可能是Tau能下调缺血-再灌注心肌中GRP78和Caspase-12过表达。     

白藜芦醇对鼻咽癌相关实验模型的整体与离体药理作用研究

目的:了解白藜芦醇诱导大鼠鼻咽癌细胞CNE-2 Z凋亡过程中半胱天冬酶-6(caspase-6)的活化情况。方法:采用实时PCR检测caspase-6 mRNA表达的改变,比色法测定caspase-6活性的变化。结果:采用不同浓度的白藜芦醇(0μmol/L、30μmol/L、60μmol/L、120μmol/L、240μmol/L)处理小鼠鼻咽癌细胞24h,caspase-6 mRNA的表达呈浓度依赖性的增加(P<0.01);caspase-6活性呈浓度和时间依赖性的升高(P<0.01)。结论:白藜芦醇诱导小鼠鼻咽癌细胞CNE-2Z凋亡过程中存在caspaso-6的活化。     

过氧化氢诱导乳鼠心肌细胞凋亡及半胱天冬酶-3抑制剂的作用

目的　观察外源性羟自由基对心肌细胞凋亡的诱导作用 ,并探讨其可能的信号转导通路 .方法　 1利用培养的第 2代心肌细胞 ,随机分成 4组 ,在终浓度为 10 - 4 mol· L- 1 ,10 - 3 mol· L- 1 的过氧化氢 [一组加半胱天冬酶 - 3(caspase- 3)的抑制剂 (DEVD- FMK) 10 μmol· L- 1 ]无血清条件下培养2 4h.观察各组心肌细胞存活率 ,TU NEL 法检测凋亡 ,透射电镜观察细胞超微结构 ,流式细胞仪检测细胞的凋亡率 .结果　 1外源性羟自由基对心肌细胞生长具有明显抑制作用 .2低浓度过氧化氢 (10 0 μmol· L- 1 )可诱导培养的心肌细胞发生凋亡 ,心肌细胞呈现特征性超微结构变化 ,TU NEL检测呈现黄绿色荧光 ,流式细胞仪 PI染色法呈现典型的亚二倍体峰 .高浓度时则主要致使心肌细胞坏死 .3caspase- 3抑制剂(DEVD- FMK)可阻断外源性 OH-对心肌细胞生长的抑制作用 ,降低心肌细胞的凋亡率 .结论　低浓度羟自由基能诱导心肌细胞凋亡 ,其信号转导通路包括 caspase- 3途径     

γ-射线诱导胰腺癌细胞凋亡中Caspase-3的调控

目的 :探讨γ 射线诱导后胰腺癌SW 1 990细胞凋亡存在形式以及Caspase 3(CPP32 /YAMA/apopain)酶活性、mRNA、蛋白表达及相互之间的关系 ,拟阐明Caspase 3在γ 射线诱导的胰腺癌细胞凋亡中的调控机制 .方法 :用不同剂量γ 射线照射胰腺癌SW1 990细胞于不同时间检测细胞形态、凋亡率及Caspase 3酶活性、蛋白、mRNA表达 .结果 :γ 射线照射后胰腺癌SW1 990细胞呈现典型的凋亡特征 ,早期凋亡率与γ 射线剂量及作用时间成正比 (r =0 .7341 ,P <0 .0 5 ) ;γ 射线诱导的凋亡细胞中Caspase 3酶活性较对照组明显升高 (P <0 .0 5 ) ,且酶的活性变化与细胞凋亡率变化呈正相关 ;凋亡细胞的Caspase 3mRNA含量未见明显升高 ,且凋亡细胞中主要表达Caspase 3裂解后形成的Mr1 70 0 0的活性亚基 ,在正常细胞主要表达Mr32 0 0 0的pro Caspase 3.结论 :γ 射线照射后SW 1 990细胞呈现典型的凋亡特征 ,且细胞凋亡与Caspase 3酶活性明显相关 ;凋亡细胞中Caspase 3酶活性增高主要是由于翻译后酶前体的剪切 ,而并非源于转录的提高 .     

牛磺酸对神经管畸形小鼠Caspase-3、Caspase-8表达的影响

目的探讨维甲酸（RA）致神经管畸形（NTDs）中牛磺酸对神经细胞凋亡的影响。方法建立NTDs模型并给予牛磺酸拮抗,观察神经细胞中Caspase-3、Caspase-8表达的变化。结果各组Caspase-3、Caspase-8蛋白的表达在E11d达高峰,以后逐渐下降。RA组神经上皮细胞Caspase-3、Caspase-8蛋白在E9d～E13d的表达均高于对照组及牛磺酸组,差异有统计学意义（P〈0．05）。各组Caspase-3mRNA、Caspase-8mRNA在E10d达到高峰,以后逐渐下降。RA组Caspase-3mRNA、Caspase-8mRNA在E9d～E13d的表达均高于对照组及牛磺酸组,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论牛磺酸可以拮抗RA引起的神经上皮细胞过度凋亡,其机理可能是通过下调Caspase-3、Caspase-8的表达实现的。     

Caspase-3 mRNA在胃癌中的表达及其与细胞凋亡的关系

目的:通过观察Caspase-3mRNA在胃癌组织、非典型增生组织及正常胃粘膜中的表达,探讨Caspase-3及其所介导的细胞凋亡在胃癌发病中的作用。方法:应用原位杂交法和TUNEL染色法检测75例胃癌组织、68例癌旁非典型增生组织和10例正常胃粘膜组织中Caspase-3mRNA的表达和上述组织的凋亡指数。结果:Caspase-3mRNA在胃癌组织和非典型增生组织中的阳性率(38.67％、20.59％)显著低于正常胃粘膜(60％);TUNEL染色证实,胃癌及非典型增生组织的凋亡指数显著低于正常胃粘膜(P<0.05),Caspase-3mRNA阳性组的凋亡指数显著高于阴性组(P<0.05)。结论:由Caspase-3及其所介导的细胞凋亡与胃癌的发生和演进有关。     

抗癌生物活性肽对实验性胃癌PCNA、caspase-8基因表达的影响

目的:探讨抗癌生物活性肽作用于荷胃癌裸鼠后,对其增殖及凋亡相关基因表达变化的影响.方法:将裸鼠接种胃癌MGC-803细胞后使之致瘤.实验随机分为3组,对照组11只,脾肽实验组12只,肝肽实验组11只;分别尾静脉注射生理盐水0.4mL、脾肽0.4mL(0.15mg/mL)、肝肽0.4mL(0.05mg/mL).连续处理35d,停药4d后处死裸鼠,取肿瘤,以4%多聚甲醛固定,常规石蜡包埋,4μm切片.应用免疫组化SABC法检测PCNA、caspase-8蛋白在实验组与对照组中的表达情况.结果:PCNA蛋白在对照组(NS组)肿瘤中阳性表达较强,在P组、G组裸鼠肿瘤中PCNA蛋白的表达均比对照组的表达弱,且有显著性差异(P<0.01);caspas-8蛋白在对照组(NS组)肿瘤中阳性表达较弱,P、G组裸鼠肿瘤中caspas-8蛋白的表达均比对照组表达强,且有显著性差异(P<0.01).结论:抗癌生物活性肽能降低胃癌移植瘤细胞的增殖活性,并能促进其凋亡.     

养血清脑颗粒对蒙古沙鼠全脑缺血再灌注后Glu和Caspase-3表达的影响

目的探讨养血清脑颗粒对全脑缺血再灌注后的蒙古沙鼠的神经保护作用。方法采用蒙古沙鼠两血管（2-VO）结扎30rain再灌注损伤模型,将模型随机分为假手术组、模型组、治疗组。用Nieel染色法观察蒙古沙鼠海马细胞的变化,用免疫组织化学方法观察假手术组、模型组、治疗组Glu、caspase-3阳性细胞表达变化。并将3组结果进行比较。结果蒙古沙鼠全脑缺血再灌注治疗组海马CAl存活细胞数明显增加,Glu、caspase-3阳性细胞表达量较模型组明显降低,凋亡细胞相应减少。结论养血清脑颗粒能选择性抑制Glu、caspase-3的表达,减少神经细胞的死亡,发挥神经保护作用。     

CD1a、Caspase-3在晕痣皮损表皮内表达的研究

目的 检测CD1a、半胱氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3),探讨晕痣发病机制及细胞凋亡在其中的作用.方法 采用免疫组织化学SP法检测CD1a、Caspase-3在晕痣患者23例和皮内痣患者15例皮损表皮内的表达.结果 晕痣皮损表皮内CD1a、Caspase-3的表达水平显著高于皮内痣(P＜0.05).结论 CD...     

扁平苔藓中细胞凋亡研究以及皮损区 Bcl-2 与 Caspase-3 的表达

目的:探讨扁平苔藓中细胞凋亡相关因子的表达情况,研究其与扁平苔藓发生的关系。 方法:用 Tunel 原位凋亡检测法检测30 例扁平苔藓与10 例正常皮肤组织的细胞凋亡情况,并用免疫组织化学法分别检 测该30 例扁平苔藓与10 例正常皮肤组织中 Bcl-2、Caspase-3 的表达。 结果:在扁平苔藓皮损处,Tunel 原位凋 亡检测结果显示,表皮各层均散在阳性染色,真皮浅层淋巴细胞散在阳性染色,在相同部位 Bcl-2 主要表达于棘 层、颗粒层,同时真皮浅层淋巴细胞亦可见其表达,Caspase-3 主要表达于基底细胞、棘细胞及近基底细胞的淋巴 细胞;在正常皮肤组织中,凋亡细胞数较扁平苔藓明显减少,Caspase-3、Bcl-2 仅少量表达于部分基底细胞。 结 论:Bcl-2、Caspase-3 表达增多可能参与扁平苔藓的发病。     

康莱特对HepG2细胞凋亡及其Caspase-3和Survivin表达影响

目的观察康莱特注射液对HepG2肝癌细胞凋亡及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)和存活素(Survivin)表达的影响,并初步探讨其作用机制。方法分别采用体积分数0.005、0.010、0.015、0.020的康莱特体外培养HepG2细胞。采用MTT法检测HepG2细胞抑制率,流式细胞仪检测HepG2凋亡情况以及Caspase-3和Survivin表达的变化。结果康莱特能明显抑制HepG2肝癌细胞生长,且呈时间和浓度依赖性。康莱特组中Caspase-3、Survivin蛋白的表达与对照组比较,差异有显著性(P<0.01)。结论康莱特可抑制HepG2肝癌细胞增殖,并可通过提高Caspase-3蛋白表达和降低Survivin蛋白表达诱导HepG2肝癌细胞凋亡。     

旋毛虫小鼠小肠和肌肉组织Caspase-3蛋白表达的研究

目的:观察旋毛虫小鼠小肠组织和肌肉组织Caspase-3蛋白表达的变化。方法:建立河南株旋毛虫感染小鼠模型,取3、5、7d成虫期小鼠小肠组织,4、5、6w幼虫期小鼠肌肉组织。采用Western Blot法检测小鼠小肠组织和肌肉组织Caspase-3蛋白的表达情况。结果:旋毛虫成虫发育过程中,小鼠小肠组织Caspase-3蛋白的表达随感染时间的延长升高(P<0.05);旋毛虫幼虫发育过程中,感染5w小鼠肌肉组织Caspase-3蛋白的表达水平最高(P<0.05)。结论:旋毛虫感染可致小鼠小肠组织和肌肉组织Caspase-3蛋白的表达水平升高,且与感染时间有关。     

CLINICOPATHOLOGICAL SIGNIFICANCE OF PTEN AND CASPASE-3 EXPRESSIONS IN BREAST CANCER

Objective To investigate the expressions of PTEN and Caspase-3 proteins in human breast carcinoma, and to evaluate their clinicopathological implications during the tumorigenesis and progression of breast cancer. Methods The expressions of PTEN and Caspase-3 proteins in 95 cases of breast cancer and 15 cases of benign breast diseases were investigated immunohistochemically. Correlations between the expression of PTEN protein, Caspase-3 protein, and clinicopathological features of breast cancers were analyzed. Results The loss expression rate of PTEN protein in tumor tissues was significantly higher than that in benign breast diseases （33.7% vs. 0, P 〈 0.01 ）. Analysis of the clinicopathological features showed that PTEN expression level was negatively correlated with TNM stage, histological grade, axillary lymph node status, recurrence, and metas- tasis （ P 〈 0. 05 ）. The positive expression level of Caspase-3 was negatively correlated with TNM stage （ P 〈 0. 01 ）, but not related with histological grade, axillary lymph node status, recurrence, or metastasis （ P 〉 0.05 ）. In addition, the expression of PTEN protein had significantly positive correlation with the expression of Caspase-3 protein in breast cancer （P 〈 0. 01 ）. Conclusion The combination detection of PTEN and Caspase-3 may serve as an important index to estimate the pathobiological behavior and prognosis of breast cancer.     

稽留流产病人survivin、bax及caspase-3的表达

目的 探讨survivin、bax及caspase-3的表达与稽留流产的关系.方法 以35例稽留流产病人为病例组,30例正常妊娠者为对照组.采用免疫组织化学sP法检测绒毛细胞滋养细胞和合体滋养细胞及蜕膜组织蜕膜细胞中survivin、bax和caspase-3的表达.结果 病例组妊娠组织中survivin的表达明显低于...