化瘢通脉注射液对人脐静脉血管内皮细胞ECV304增殖的影响

【目的】以血清药理学的方法观察血化瘀通脉注射液（HYTM）对于培养人脐静脉内皮细胞ECV304增殖的影响，为治疗性血管新生的靶基因选择提供线索。【方法】取对数生长期的内皮细胞，同步化于CO期，2-（2-甲氧基-4-硝基苯基）-3-（4-硝基苯基）-5-（2，4-二磺酸苯）-2H-四唑单钠盐（CCK-8）检测细胞增殖活性；酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测5溴-2脱氧尿苷（Brdu）的掺入。【结果】与空白血清对照组相比，10％的HYTM含药血清体积添加分数可显著提高细胞增殖活性。【结论】10％的HYTM含药血清体积添加分数通过促进细胞DNA合成，可能具有保护血管内皮的作用。     

夏枯草抑制人脐静脉血管内皮细胞增殖的实验研究

目的探讨夏枯草（Spica Prunellae）对体外培养的人脐静脉血管内皮细胞（HUVEC）增殖的抑制作用，并从增殖细胞核抗原（PCNA）方面研究其抑制HUVEC增殖的作用机制。方法采用HUVEC为材料．取生长良好的HUVEC用于实验，利用100umol／L二氯化钴（CoCl2）诱导HUVEC增殖，同时分别将10mg／ml、20mg／ml、40mg／ml的夏枯草作用于增殖状态下的HUVEC24小时，进行以下的研究：①CCK-8法检测不同浓度夏枯草对HUVEC增殖的抑制程度；②流式细胞仪检测夏枯草对HUVEC核内PCNA蛋白表达的影响。结果①夏枯草明显抑制CoCl2诱导的HUVEC增殖，并且有剂量依赖关系。②夏枯草能够显著降低HUVEC核内PCNA蛋白表达，从而抑制细胞增殖，并具有剂量依赖关系。结论夏枯草能够明显抑制HUVEC的增殖。     

化通脉注射液对人脐静脉血管内皮细胞ECV304增殖的影响

[目的]以血清药理学的方法观察血化瘀通脉注射液(HYTM)对于培养人脐静脉内皮细胞ECV304增殖的影响,为治疗性血管新生的靶基因选择提供线索。[方法]取对数生长期的内皮细胞,同步化于G0期,2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐(CCK-8)检测细胞增殖活性;酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测5溴-2脱氧尿苷(BrdU)的掺入。[结果]与空白血清对照组相比,10%的HYTM含药血清体积添加分数可显著提高细胞增殖活性。[结论]10%的HYTM含药血清体积添加分数通过促进细胞DNA合成,可能具有保护血管内皮的作用。     

四妙勇安汤对人脐静脉血管内皮细胞ECV304的增殖作用

目的:以血清药理学的方法观察血四妙勇安汤对于培养人脐静脉内皮细胞ECV304增殖的影响,为治疗性血管新生的靶基因选择提供线索。方法:取对数生长期的内皮细胞,同步化于G0期,ELISA法检测BrdU的掺入;用流式细胞仪分析细胞周期各时相分布。结果:与空白血清对照组相比,10%的四妙勇安汤含药血清体积添加分数可显著提高BrdU的掺入量,促进DNA合成,提高ECV304细胞周期S期所占比例。结论:10%的四妙勇安汤含药血清能促进内皮细胞ECV304DNA合成,加快细胞周期进程,从而对其增殖具有促进的作用,可能具有血管生成的作用。     

阿魏酸对人脐静脉血管内皮细胞ECV304的增殖作用

目的：观察阿魏酸对于培养人脐静脉内皮细胞ECV304增殖的影响,为治疗性血管新生的靶基因选择提供依据。方法：取对数生长期的内皮细胞,分为阿魏酸低、中、高浓度组,同步化于G0期,ELISA法检测BrdU的掺入;RT-PCR法检测血管内皮细胞生长因子（VEGF）mRNA的表达情况。结果：与对照组相比,不同浓度阿魏酸均可显著提高BrdU的掺入量,上调VEGFmRNA的表达,且在10^2ng/ml～10^4ng/ml之间呈一定的量效关系。结论：阿魏酸能显著促进体外培养的ECV304细胞的增殖,可能具有血管新生的作用。     

参麦注射液对内皮细胞增殖和迁移的影响

目的：探讨参麦注射液对血管生成的影响。方法：采用MTT法检测参麦注射液对牛血清和肿瘤细胞条件培养液促进的牛主动脉内皮细胞增殖的影响，采用琼脂糖刮除法检测参麦对牛血清和肿瘤条件培养液促进的牛内皮细胞迁移的影响。结果：在含10％新生小牛血清培养液中和在肿瘤细胞条件培养液中，参麦都能明显抑制牛主动脉内皮细胞增殖，且呈量效关系，对肿瘤细胞条件培养液诱导的内皮细胞迁移抑制作用显著。方法：参麦能抑制牛内细胞增殖和迁移，具有抑制血管生成的作用。     

黄芪提取物对人脐静脉内皮细胞的促血管新生作用

目的:研究黄芪提取物(RAE)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的促血管新生作用。方法:以体外培养HUVEC为模型,XTT法及细胞计数法检测不同剂量黄芪提取物对细胞增殖的影响;细胞迁移实验检测加药后细胞迁移能力;采用Transwell chamber进行细胞侵入实验检测黄芪提取物对细胞侵入能力的影响;管形形成实验观察加入黄芪提取物后细胞分化情况。结果:XTT法检测HUVEC在黄芪提取物浓度为12.5μg/ml时产生最大增殖效应,增殖率为42.04%。细胞计数法测得在黄芪提取物浓度为25μg/ml时细胞数目比对照组增多124.64%。同时发现在黄芪提取物浓度为25μg/ml时能够最大能力地诱导细胞侵入和管形形成,其侵入率为66.68%,管形分枝点增值率为44.38%;而在浓度为12.5μg/ml时能够最大限度地诱导细胞迁移,迁移率为74.94%。结论:黄芪具有促进血管新生的作用。     

参麦有效部位对血管内皮细胞增殖和迁移的影响

目的：探讨参麦中提取的总皂苷、总多糖对血管内皮细胞增殖和迁移的影响.方法：用MTT法检测不同浓度的总皂苷、总多糖及总皂苷＋总多糖对ECV-304、胃癌SGC-7901细胞增殖及SGC-7901条件培养液诱导ECV-304增殖的影响;用琼脂糖刮除法检测它们对血管内皮细胞迁移的影响.结果：当参麦总多糖浓度为0.18～2.44mg/mL时,对ECV-304、胃癌SGC-7901增殖及SGC-7901诱导ECV-304增殖均无影响;当参麦总皂苷浓度为0.05～0.8mg/mL时,对胃癌SGC-7901增殖无影响,而对ECV-304及SGC-7901条件培养液诱导ECV-304增殖有抑制作用,抑制率为13.16%～62.77%.参麦总多糖对ECV-304迁移没有影响,参麦总皂苷对ECV-304迁移有明显抑制作用,抑制率为42%～80%.总皂苷＋总多糖抑制ECV-304增殖和迁移作用与参麦总皂苷相比差异无显著性.结论：参麦中提取的总皂苷对血管内皮细胞和胃癌细胞条件培养液诱导的血管内皮细胞增殖具有抑制作用,并能抑制血管内皮细胞的迁移,是参麦抗血管生成的有效部位.     

人脐静脉血管内皮细胞的培养与鉴定

目的 探讨人脐静脉血管内皮细胞系的培养和鉴定方法。方法 通过从脐带获取血管内皮细胞并通过原代培养，并采用人第Ⅷ因子免疫荧光抗体检查法鉴定所获得的细胞系。结果 经人第Ⅷ因子免疫荧光抗体检查法鉴定，脐带血管内皮细胞经原代培养后获得人脐静脉血管内皮细胞系。结论 人脐静脉血管内皮细胞可从脐带获得并通过原代培养成为细胞系，而人第Ⅷ因子免疫荧光抗体检查法是鉴定人脐静脉血管内皮细胞的良好方法。     

参麦注射液对血管生成影响的研究

目的：探讨参麦注射液（简称参麦）对血管生成的影响。方法：采用MTT法检测参麦对牛血清促进的牛内皮细胞，人肝癌细胞SMMC-7721增殖的影响；琼脂糖刮除法检测参麦对牛血清促进的牛内皮细胞迁移的影响。利用鸡胚绒毛尿囊膜（CAM）模型。观察参麦对鸡胚绒毛尿囊膜血管生成的影响。结果：参麦能明显抑制牛内皮细胞增殖，与SMMC-7721比较，差异有显著性；参麦能抑制牛内皮细胞迁移；并可抑制鸡胚绒毛尿囊膜的血管生成。结论：参麦能抑制血管生成；抑制内皮细胞增殖和迁移可能是参麦抗血管生成的机理之一。同时也说明参麦是一种特异性血管生成抑制剂。     

丹参注射液对血管内皮细胞低氧损伤的保护作用

目的 探讨丹参注射液对血管内皮细胞低氧损伤的保护作用及可能的机制.方法 将体外培养的人脐静脉内皮细胞株(Human Umbilical Vein Endothelial Cells,HUVEC)分为3组,即常氧培养组、低氧培养组及低氧培养+丹参组,通过倒置相差显微镜观察并比较各组细胞的形态变化;MTT法检测细胞活性;AO/EB染色和Annexin V -FITC/PI流式细胞术检测细胞凋亡;利用DCFH-DA荧光探针检测细胞内活性氧水平;并取各组细胞上清液进行总抗氧化能力检测.结果 丹参能够显著减少低氧引起的细胞凋亡,提高细胞存活率,降低细胞内活性氧水平,并调节细胞总抗氧化能力.结论 低氧条件下,丹参对HUVEC有保护作用,其机制可能与清除自由基有关.     

活血注射液对ox-LDL诱导人脐静脉内皮细胞活化的影响

目的：观察活血注射液对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC) 的细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)的表达及与人单核细胞黏附作用的影响，并探讨核转录因子kappa B(NF-κB) 在其中的调控作用。方法：HUVEC与单核细胞的黏附率用蛋白定量法检测；ICAM-1，VCAM-1 mRNA和蛋白表达分别用RT-PCR技术和流式细胞仪检测；NF-κB p65的阳性细胞百分率和细胞核/浆染色的灰度比值用免疫细胞化学法测定。结果：ox-LDL作用HUVEC后12,24 h时，人单核细胞与HUVEC的黏附率显著升高, HUVEC中ICAM-1和VCAM-1的mRNA和蛋白表达水平也均明显升高, HUVEC的NF-κB p65的阳性细胞百分率和细胞核/浆染色的灰度比值明显增高，明显高于正常组(P<0.05，P<0.01)，而活血注射液可明显降低人单核细胞与HUVEC的黏附率和HUVEC ICAM-1，VCAM-1 mRNA和蛋白表达水平，以及显著降低HUVEC中NF-κB p65的阳性细胞百分率和细胞核/浆染色的灰度比值，与ox-LDL组相比均有显著性差异(P<0.05，P<0.01)，这种作用随着剂量的增加而增强。结论：活血注射液能通过下调内皮细胞表面ICAM-1，VCAM-1 mRNA和蛋白表达抑制单核-血管内皮细胞黏附,其可能机制是其通过抑制内皮细胞NF-κB p65的活性，从而发挥对血管内皮细胞的保护作用。     

参麦有效部位对血管内皮细胞增殖和迁移的影响

目的:探讨参麦中提取的总皂苷、总多糖对血管内皮细胞增殖和迁移的影响。方法:用MTT法检测不同浓度的总皂苷、总多糖及总皂苷 总多糖对ECV-304、胃癌SGC-7901细胞增殖及SGC-7901条件培养液诱导ECV-304增殖的影响;用琼脂糖刮除法检测它们对血管内皮细胞迁移的影响。结果:当参麦总多糖浓度为0.18~2.44mg/mL时,对ECV-304、胃癌SGC-7901增殖及SGC-7901诱导ECV-304增殖均无影响;当参麦总皂苷浓度为0.05~0.8mg/mL时,对胃癌SGC-7901增殖无影响,而对ECV-304及SGC-7901条件培养液诱导ECV-304增殖有抑制作用,抑制率为13.16%~62.77%。参麦总多糖对ECV-304迁移没有影响,参麦总皂苷对ECV-304迁移有明显抑制作用,抑制率为42%~80%。总皂苷 总多糖抑制ECV-304增殖和迁移作用与参麦总皂苷相比差异无显著性。结论:参麦中提取的总皂苷对血管内皮细胞和胃癌细胞条件培养液诱导的血管内皮细胞增殖具有抑制作用,并能抑制血管内皮细胞的迁移,是参麦抗血管生成的有效部位。     

参麦总皂苷对人脐静脉内皮细胞血管细胞黏附分子-1表达影响的研究

目的：研究参麦总皂苷对人脐静脉内皮细胞（HUVEC）血管细胞黏附分子-1（VCMA-1）表达的影响,探讨参麦抗肿瘤作用的可能机理。方法：制备参麦总皂苷,以炎症因子TNF-α为诱导物,用一系列浓度的参麦总皂苷进行干预处理HUVEC细胞,采用荧光定量PCR方法和流式细胞仪检测VCMA-1基因的转录和表达情况。结果：TNF-α可剂量依赖性诱导HUVEC细胞表达VCMA-1,其中20ng/ml为合适诱导浓度;参麦总皂苷可以从mRNA水平和蛋白质水平显著抑制TNF-α诱导的VCMA-1表达,并且与剂量呈正相关,但对正常HUVEC细胞的VCMA-1表达没有明显影响。结论：参麦总皂苷对TNF-α诱导的HUVEC细胞VCMA-1表达有抑制作用,提示其具有抗肿瘤转移作用。     

参麦注射液对淋巴管生成影响的研究

目的：探讨参麦注射液（简称参麦）对淋巴管生成的影响。方法：采用MTT法检测参麦对淋巴管内皮细胞增殖的影响;划线刮除法检测参麦对淋巴管内皮细胞迁移的影响。结果：参麦能抑制淋巴管内皮细胞增殖;参麦能明显抑制淋巴管内皮细胞迁移。结论：参麦能抑制淋巴管生成;抑制内皮细胞增殖和迁移可能是参麦抗淋巴管生成的机理之一。     

参麦注射液对移植性肿瘤血管生成的影响

目的：研究参麦注射液(红参，麦冬)对肿瘤组织内血管生成和细胞增殖核抗原表达的影响，探讨参麦抗肿瘤的机理。方法：通过建立小鼠移植性S180肿瘤模型，从整体水平上观察参麦对肿瘤生长的影响，并采用免疫组织化学方法，检测肿瘤组织中第Ⅶ因子相关抗原(vWF)和细胞增殖核抗原(PCNA)的表达。结果：参麦具有抑制肿瘤生长作用；参麦能降低肿瘤组织中微血管密度，能减少PCNA的表达。结论：抗血管生成是参麦抗肿瘤机理之一。     

参麦注射液对大鼠腹膜微小血管的作用观察

腹膜血流是影响腹透效能的重要因素之一。我们用闭路电视显微镜定量观察大鼠提睾肌和盲肠间皮表面的小动脉和小静脉对商品腹透液及加入具有益气养阴作用的参麦注射液腹透液的反应。结果显示:商品腹透液具有一定的扩血管效应,加入参麦注射液后,盲肠小动脉扩张从20％增加到45％,小静脉从15％增加到32％;对提睾肌小动脉扩张从7％增加到17％,小静脉从5％增加到10％。说明参麦注射液腹透液具有扩张腹膜微小血管、增加血流量、使腹膜交换面积增大的作用。该结果部分解释了参麦注射液提高腹膜清除率的机理。     

冠心病不同阶段患者血清对人脐静脉血管内皮细胞促增殖作用的实验研究

目的观察冠心病不同阶段患者血清对人脐静脉血管内皮细胞（HUVEC）增殖的影响。方法采集正常健康人群（正常组）、冠心病中高危人群（中高危组）、冠心病急性期患者（急性期组）、冠心病稳定期患者（稳定期组）的血清,分别作用于HUVEC,培养至24、48、72、96h检测吸光度值（OD值）。结果4组血清中加或不加5％胎牛血清,其对HUVEC增殖均有促进作用,正常组、中高危组、急性期组、稳定期组对HUVEC的促增殖作用呈逐渐增强趋势,稳定期组血清促增殖作用最强。结论心血管疾病在急性期后,随着病程和生存期的延长,其血清对HUVEC的促增殖作用逐渐增强。     

参麦注射液对冠心病患者血管内皮依赖性舒张功能的影响

目的探讨参麦注射液对冠心病患者血管内皮依赖性舒张功能的影响。方法选取100例冠心病患者,采用随机数字表法分为参麦组及对照组,每组50例。两组患者均进行常规冠心病药物治疗,参麦组患者静脉滴注参麦注射液,50 m L,每天1次,疗程10天。两组患者在用药前及用药10天后采用肱动脉血管超声测定其反应性充血时和含服硝酸甘油后的肱动脉内径变化;采用生化技术检测及放射免疫分析法测定血清一氧化氮(NO)及血浆内皮素(ET)、血栓素B_2(TXB_2)及6-酮-前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)及超氧化物歧化酶(SOD)水平。并以30例经冠脉CT或造影排除冠心病的非冠心病患者作为非冠心病组。结果与非冠心病组比较,冠心病组反应性充血时及含服硝酸甘油后肱动脉内径变化值明显降低(P0.05,P0.01),且NO、6-keto-PGF1α及SOD水平降低,ET、TXB_2水平升高(P0.01)。与对照组比较,参麦组患者用药后肱动脉血管超声反应性充血明显改善,NO、6-ketoPGF1α水平升高,SOD浓度明显升高,血浆ET、TXB_2水平降低(均P0.05)。结论参麦注射液能直接上调冠心病患者NO及6-keto-PGF1水平,提高SOD活力,降低ET及TXB_2水平,提高血管内皮依赖性舒张功能。     

葛根芩连汤干预高糖诱导人脐静脉血管内皮细胞氧化应激实验研究

目的 探讨葛根芩连汤（GQD）对高糖诱导的人脐静脉血管内皮细胞（HUVECs）氧化应激的影响。方法 体外培养HUVECs。配置GQD中药复方含药血清，CCK-8法检测药物毒性、筛选实验最佳浓度及时间后将细胞分为对照组（细胞正常培养）、模型组（细胞利用60 mmol/L高糖处理48 h）、含药血清组（细胞先采用5%浓度含药血清预处理1 h后，再利用60 mmol/L高糖处理48 h）和阳性对照组[细胞先采用3 mmol/L N-乙酰半胱氨酸（NAC）预处理1 h后，再利用60 mmol/L高糖处理48 h]。细胞经以上处理后，采用CCK-8比色法检测细胞活力；流式细胞仪测试细胞凋亡及周期，同时检测细胞内活性氧（ROS）含量；生化试剂盒检测细胞肌酸激酶（CK）、谷胱甘肽（GSH）、乳酸脱氢酶（LDH）、超氧化物歧化酶（SOD）及丙二醛（MDA）水平。结果 与对照组比较，模型组的细胞增殖率显著下降，细胞凋亡率、G0/G1期阻滞、ROS、CK、LDH及MDA的水平均显著增加，而SOD和GSH的水平显著下降（P<0.05）。与模型组比较，含药血清组和阳性对照组细胞的增殖率显著上升、凋亡率明...