田口试验设计法优选积雪草提取工艺

积雪草为伞形科药用植物积雪草Centella asiat-ica(L.)Urban的干燥全草,具有清热解毒、消肿利湿之功效。临床用于治疗炎症、溃疡、皮肤病、促进伤口愈合,静脉功能不全等[1,2]。最近的研究表明其提取物具有抗肿瘤、抗氧化及免疫调节的活性[3-5]。积雪草含有丰富的五环三萜类化合物[6],如积雪草苷、羟基积雪草苷等,其中积雪草苷被认为具有很强的药理活性并作为评价积雪草质量的指标[7-9]。陈瑶等[10]以积雪草总苷为考察指标对积雪....

     

羟基积雪草苷对小鼠急性肝损伤的保护作用

目的研究羟基积雪草苷对小鼠急性肝损伤的保护作用及其初步机制。方法建立四氯化碳(CCl4)诱导的小鼠急性肝损伤模型,检测羟基积雪草苷(3、10、30 mg/kg)对血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)以及肝组织一氧化氮(NO)的影响;Western-blotting检测肝组织中诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)、环氧合酶-2(COX-2)蛋白的表达,并取部分肝组织进行HE染色,观察病理学改变。结果羟基积雪草苷明显降低急性肝损伤小鼠血清中ALT、AST活性及肝组织中NO的量,抑制肝组织中iNOS、COX-2蛋白的表达,病理切片显示羟基积雪草苷组病变程度远较模型组为轻。结论羟基积雪草苷具有一定的肝保护作用,其机制可能与其抗炎作用有关。     

积雪草化学成分研究

目的研究积雪草Centella asiatica的化学成分。方法采用各种色谱技术进行分离纯化,通过理化性质和波谱分析进行结构鉴定。结果从积雪草中共分离得到14个化合物,其结构鉴定为β-谷甾醇(Ⅰ)、二十六醇辛酸酯(Ⅱ)、山柰酚(Ⅲ)、槲皮素(Ⅳ)、胡萝卜苷(Ⅴ)、香草酸(Ⅵ)、丁二酸(Ⅶ)、积雪草酸(Ⅷ)、羟基积雪草酸(Ⅸ)、ter-minolic acid(Ⅹ)、积雪草苷(Ⅺ)、积雪草二糖苷(Ⅻ)、羟基积雪草苷、积雪草苷-B。结论化合物为一新化合物;羟基积雪草酸和terminolic acid、羟基积雪草苷和积雪草苷-B为两对同分异构体。     

羟基积雪草苷与积雪草苷对LPS诱导大鼠发热模型的影响

目的观察积雪草苷和羟基积雪草苷的解热作用,并比较两者在解热作用上的差异。方法将80只SD大鼠随机分为空白组、模型组(LPS 100μg/kg)、溶酶对照组(羧甲基纤维素钠)、积雪草苷5,15,45 mg/kg、羟基积雪草苷10,20,40mg/kg、对乙酰氨基酚50 mg/kg组。腹腔注射LPS(100μg/kg)建立SD大鼠发热模型,绘制各组平均体温变化曲线,比较测量体温与基础体温差值ΔT。结果羟基积雪草苷(10,20,40 mg/kg)与积雪草苷(5,15,45 mg/kg)对LPS诱导的SD大鼠发热模型体温有显著的降温作用(P<0.05)。结论羟基积雪草苷和积雪草苷对LPS诱导的SD大鼠发热模型的体温均有降温作用,积雪草苷在某些时间点(如LPS注射5 h后)降温效应优于羟基积雪草苷。     

积雪草苷对非酒精性脂肪肝大鼠氧化应激的影响

目的:观察积雪草苷对非酒精性脂肪肝(NAFLD)模型大鼠氧化应激的影响。方法:将60只大鼠随机分为正常组、模型组和积雪草苷低、中、高剂量组,每组12只。除正常组外,其余各组大鼠用高脂饮食诱导的方法造模。造模成功后积雪草苷各剂量组给予不同剂量积雪草苷灌胃,正常组与模型组灌胃等量生理盐水,连续灌胃4周。检测各组大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及肝组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)及细胞色素P450 2E1(cytochrome P450,CYP2E1)的表达,并做统计学比较。结果:与模型组比较,积雪草苷中、高剂量组大鼠血清ALT、AST、TNF-α和肝组织CYP2E1的表达明显降低(P0.05);积雪草苷高剂量组大鼠肝组织MDA水平明显降低(P0.05),SOD水平明显升高(P0.05)。结论:积雪草苷对大鼠酒精性脂肪肝有一定疗效,其可能的机制是通过抑制CYP2E1和TNF-α的表达,减轻脂质过氧化反应。     

手性流动相添加剂法测定积雪草中积雪草总苷的量及其总苷特征图谱

目的 以β-环糊精为流动相添加剂,拆分积雪草药材及其总苷中羟基积雪草苷和积雪草苷,建立羟基积雪草苷和积雪草苷的定量测定方法,同时建立积雪草总苷的高效液相色谱特征图谱.方法 采用Dikma Diamonsil(TM)C18(250 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱;流动相为乙腈-2 mmol/L β-环糊精溶液(24:76);柱温30℃;体积流量1.0 mL/min;检测波长205 nm;理论塔板数按积雪草苷峰计算应不低于4 000.结果 β-环糊精的加入很好地分离积雪草药材及其总苷中的羟基积雪草苷和积雪草苷,满足了定量分析的要求,其中有效成分羟基积雪草苷和积雪草苷的线性范围分别为0.181～18.1 μg(r=0.999 98)和0.195～19.5μg(r=0.999 98),积雪草药材的平均加样回收率(n=9)分别为101.2%和101.6%,积雪草总苷的平均加样回收率(n=9)分别为100.3%和99.3%,11批次的积雪草总苷样品的高效液相色谱特征图谱中确定6个共有峰作为定性的指标峰.结论 本法简便快速、结果准确、重现性好,可用于积雪草药材及其总苷的质量控制.     

秦艽中龙胆苦苷的提取方法比较

秦艽为龙胆科植物,中国药典主要收录了四种秦艽,分别为大叶秦艽(Gentiana macrophyllaPall.),麻花秦艽(Genti-ana stram ineaM axim.)、粗茎秦艽(Gentiana crassicaulis DuthieexB irk.)和小秦艽(Gentiana dahuricaF isch)。秦艽主要含龙胆苦苷,一般含量约为7%,最高可达18%[1],药典规定含量2%以上。由于龙胆苦苷在水中不稳定,传统水煎法破坏较多。刘力采用不同浓度乙醇试验,发现70%乙醇超声提取率较高[2]。微波是一种超高频电磁波,具有很强的穿透作用,可以在药材颗粒内外同时均匀迅速加热。一方面,它可使具有永久偶极的分子产生高达4.9…     

积雪草苷对小鼠脓毒症致急性肝损伤的保护作用研究

目的 研究积雪草苷对小鼠脓毒症致急性肝损伤的保护作用,并初步探讨其作用机制.方法 建立盲肠结扎穿孔(CLP)诱导的小鼠脓毒症致急性肝损伤模型,随后用不同剂量的积雪草苷(15,45 mg/kg)干预,24 h后检测血清丙氨酸氨基转移酶 (alanine aminotransferase,ALT)、天冬氨酸氨基转移酶 (aspartate aminotransferase,AST)、肿瘤坏死因子-alpha (tumor necrosis factor alpha,TNF-α)的含量; 免疫印迹法检测肝组织中环氧合酶-2 (cyclooxygenase-2,COX-2)的表达,并取部分肝组织进行组织病理学分析.结果 积雪草苷剂量依赖性地减少脓毒症诱导的血清中ALT、AST及TNF-α的升高,抑制肝组织中COX-2蛋白的表达,病理切片显示积雪草苷组肝组织受损程度较模型组为轻.结论 积雪草苷对CLP诱导的肝损伤具有一定的保护作用,其机制可能与抑制炎症介质COX-2和TNF-α有关.     

积雪草苷修饰脂质体在大鼠体内的药动学及组织分布研究

目的将积雪草苷制成修饰脂质体,考察该制剂在体内的药动学过程及组织分布情况。方法 SD大鼠尾iv积雪草苷溶液及经过D-甘露糖或十八胺修饰和未经修饰的脂质体制剂,不同时间点采集大鼠血浆及组织,样品处理后采用HPLC法检测血浆与组织中的药物浓度,绘制药-时曲线,计算药动学参数,比较积雪草苷剂型间在体内药动学参数和组织分布的差异。结果积雪草苷、积雪草苷脂质体、D-甘露糖-积雪草苷脂质体、十八胺-积雪草苷脂质体4种制剂的药-时曲线均符合权重为1/C2的单室模型。积雪草苷溶液及各脂质体的消除半衰期(t1/2)分别为(14.52±0.56)、(101.35±12.47)、(149.82±20.00)、(159.58±16.46)min,药时曲线下面积(AUC)分别为(1 929.70±159.00)、(57 004.35±8 710.89)、(93 736.52±12 710.76)、(64 737.48±6 365.28)min·μg/m L。同时制成脂质体后,积雪草苷在各器官中的质量分数显著上升,在肺部的质量分数由(4.94±0.94)μg/g升至(39.12±12.04)μg/g。结论将积雪草苷制成修饰脂质体制剂后,缓释明显,并能增强靶向作用。     

积雪草中5个新的三萜苷

伞形科植物积雪草(Centella asiatica)在阿育吠陀医学中用于治疗多种疾病。已知积雪草中含有丰富的五环三萜苷积雪草苷。积雪草苷被认为是药理活性成分并作为评价积雪草质量的标志性成分。 积雪草的地上部分(干重5.1kg)以热甲醇提取,减压浓缩物998g通过DiaionHP-20柱依次以30％甲醇、60％甲醇、80％     

HPLC法测定积雪草中三萜类化合物的含量

目的 :建立一种能同时测定积雪草中四种主要三萜类成分积雪草苷、羟基积雪草苷、积雪草酸、羟基积雪草酸的含量分析方法。方法 :采用 C1 8柱 ,乙腈 -水为流动相 ,梯度洗脱 ,检测波长 2 0 5 nm。结果 :四种三萜组分的平均回收率分别为积雪草苷 97.6 2 % (RSD=1.95 ,n=5 ) ;羟基积雪草苷 98.96 (RSD=2 .0 1 ,n=5 ) ;羟基积雪草酸 10 1.89 (RSD=1.5 4 ,n=5 ) ;积雪草酸 10 1.2 8 (RSD=1.38 ,n=5 )。结论 :此方法简单、准确 ,适用于积雪草原药材及其制剂的质量控制     

一测多评法同时测定积雪草总苷及其2种制剂中3种成分

目的建立一测多评法同时测定积雪草总苷及积雪苷片、积雪苷霜软膏中3种成分的含有量。方法各样品甲醇提取液的分析采用Eclipse XDB-C₁₈色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相乙腈-(2 mmol/L羟丙基-β-环糊精)(24∶76);体积流量1.0 mL/min;柱温30℃;检测波长205 nm。以羟基积雪草苷为内标,计算其他2种成分的相对校正因子,测定含有量。结果积雪草苷B、羟基积雪草苷、积雪草苷在各自范围内线性关系良好(r≥0.999 8),平均加样回收率97.93%～102.05%,RSD 0.61%～2.06%。一测多评法所得结果与外标法接近。结论该方法稳定可靠,可用于积雪草总苷及其2种制剂的质量控制。     

HPLC-CAD法分离测定三金片中同分异构体积雪草苷B和羟基积雪草苷

目的建立一种高效液相色谱-电喷雾检测器(HPLC-CAD)法分离测定三金片中积雪草苷B和羟基积雪草苷2个同分异构体含量的方法。方法采用Thermo AcclaimTM C30色谱柱,甲醇-乙腈-水(35∶8∶57)为流动相,柱温35℃,CAD气化温度为50℃,采集频率为10 Hz,分离测定积雪草苷B和羟基积雪草苷的含量。结果积雪草苷B和羟基积雪草苷线性关系良好,r分别为0.999 8、0.998 4,线性范围分别为0.240 7～2.406 9、0.573 1～5.730 8μg,平均加样回收率分别为100.26%、98.32%,RSD分别为0.69%、1.78%;11批样品中积雪草苷B为1.65～3.18 mg/g,羟基积雪草苷为3.49～7.90mg/g。结论该方法简便、灵敏、准确度高,能有效分离测定积雪草苷B和羟基积雪草苷2个同分异构体,可用于三金片现行药典标准的提高完善。     

白芍中芍药苷的提取工艺研究

白芍(RadixpaeoniaeAlba)系毛茛科植物芍药(PaeonialactifloraPall.)的干燥根。其中,杭白芍为浙江省的著名道地药材“浙八味”之一,是白芍药材中的佳品,具有养血敛阴柔肝止痛、平抑肝阳的功效[1],亳白芍是安徽“四大”名贵道地药材之一,临床广泛用之。目前评价白芍质量的主要化学指标为芍药苷的含量[2],有关白芍中主要有效成分芍药苷的含量测定方法报道很多,芍药苷的含量除与药材的产地、生长年限有关外,提取工艺条件的不同和测定方法的不科学都会影响芍药苷的含量,从而直接影响白芍的质量评价,因此很有必要制定一个芍药苷含量的下限。故…     

积雪草总苷抗DMN诱导大鼠肝纤维化的作用

目的 研究积雪草总苷抗实验性大鼠肝纤维化的作用。方法 采用二甲基亚硝氨(dimethylni-trosamine,DMN)腹腔注射6周,制备大鼠肝纤维化模型。动物随机分为6组(正常组、模型组、秋水仙碱组、积雪草总苷大、中、小剂量组)。于造模开始时同时给予积雪草总苷灌胃,实验结束后分别检测血清总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)含量,并作肝组织病理学观察。结果 积雪草总苷能改善肝功能,与模型组相比可明显降低血清ALT、AST、HA的含量(P<0．05)。肝组织病理学检查显示具有抗肝纤维化作用。结论 积雪草总苷对DMN诱导的大鼠慢性肝纤维化具有良好的治疗作用。     

积雪草苷对兔耳创伤修复不同时期干预及转化生长因子β1和Smad3免疫组织化学表达的影响

目的观察积雪草苷对兔耳创伤修复不同时期及转化生长因子β_1(TGF-β_1)、Smad3免疫组织化学表达的影响。方法将24只新西兰白兔按照随机数字表法分为生理盐水1组、生理盐水2组、积雪草苷1组、积雪草苷2组4组,每组6只。积雪草苷干粉制备成1 000 mg/mL的注射液,现备现用。制作兔耳直径1 cm全层皮肤缺损模型,造模后5 d(创伤修复增殖期),生理盐水1组、积雪草苷1组每日8:00、20:00于兔耳创面处分别注射0.9%氯化钠注射液、积雪草苷液,每次0.2 mL,连用15 d。造模后30 d(创伤修复塑形期),生理盐水2组、积雪草苷2组每日8:00、20:00于兔耳创面处分别注射0.9%氯化钠注射液、积雪草苷液,每次0.2 mL,连用15 d。生理盐水1组、积雪草苷1组于造模后0、5、20 d进行拍照做肉眼观察,生理盐水2组、积雪草苷2组于造模后0、30、45 d进行拍照做肉眼观察;生理盐水1组和积雪草苷1组,生理盐水2组和积雪草苷2组分别于造模后20、45 d后处死动物,切取耳创伤面标本,进行免疫组织化学染色。结果与生理盐水1组比较,积雪草苷1组可以明显促进创伤修复,炎性细胞明显减少,可见大量的成纤维细胞和毛细血管形成。积雪草苷2组瘢痕组织增生层明显比生理盐水2组薄,且未见丰富的血管和成纤维细胞,胶原纤维含量降低,排列稀疏。积雪草苷1组TGF-β_1、Smad3的表达量均高于生理盐水1组(P0.05);积雪草苷2组TGF-β_1、Smad3的表达量均低于生理盐水2组(P0.05)。结论积雪草苷在兔耳创伤修复增殖期干预促进瘢痕形成,但在兔耳创伤修复塑形期干预减少瘢痕形成。     

积雪草总苷抗乙酸致大鼠胃溃疡的研究

目的:研究积雪草总苷抗试验性胃溃疡的作用。方法:将大鼠随机分为空白对照组、模型组、猴头菌组、雷贝拉唑钠组、积雪草总苷高、中、低剂量组(1.62,0.81,0.405 g·kg-1),每组10只。采用乙酸法致大鼠慢性胃溃疡模型,观察积雪草总苷抗胃溃疡的作用。结果:积雪草总苷高剂量组与中剂量组大鼠乙酸致慢性胃溃疡溃疡指数显著低于模型组(P0.05),与西药雷贝拉唑钠组无显著性差异。积雪草总苷还可显著增加IL-2(P0.01)及免疫球蛋白Ig A(P0.01),IgG(P0.05),IgM(P0.05)含量,不同程度提高细胞免疫和体液免疫水平。结论:积雪草总苷具有一定的预防和治疗胃溃疡作用,且成一定的量效关系。     

正交设计优选大豆中总异黄酮的提取工艺

大豆是由豆科植物大豆[Glycine max(L.)Merr.]的成熟种子,在华北地区分布广泛。大豆可以作为油料经济作物,亦可作为常用中药淡豆豉的原料。大豆含有12种异黄酮,分为游离型的苷元(aglycon)和结合型的糖苷(glucoside)两类[1],经发酵后部分苷转变为苷元[2],两种含量较高的苷元成分为:染料木素(genistein)和大豆素(daidzein)[。1]异黄酮具有增强免疫、抗氧化、延缓衰老、改善心功能状态、抗癌等广泛的药理作用[3-7]。对大豆提取工艺的研究应以异黄酮为主。本实验以大豆中染料木素为质量控制指标,采用正交设计,考察了药材粒度、乙醇浓度、提取…     

HPLC-ELSD测定积雪草提取物中积雪草苷的含量

目的：用HPLC-ELSD测定积雪草提取中积雪草苷的含量。方法：色谱柱为HiQ siL KYA-C18分析柱,流动相为乙腈-水,梯度洗脱；漂移管温度105 ℃；载气流速2.9 L·min^-1。结果：积雪草苷在0.35～7.0 μg呈良好线性关系；积雪草提取物中积雪草苷的回收率为94.9％(RSD 1.7%)。结论：该方法简便、准确、分离效果好,无干扰,可用于积雪草提取物中积雪草苷的质量评价。     

从女贞子中提取红景天苷的工艺研究

红景天苷是藏药红景天(Rhadolia raseaL.)的主要活性成分[1],也是其适应高山恶劣环境所必需的成分。研究表明红景天苷具有扩张阻力血管和容量血管,抗心肌缺血[2]、抗肝纤维化[3]等多种药理作用,红景天苷已作为药品和保健食品得到广泛的开发应用。但红景天植物生长于高原地区,资源贫乏、且价格昂贵。中药女贞子为木犀科植物女贞Ligus-trum lucidumA it.的干燥成熟果实,含有多种活性成分[4],包括含量可观的红景天苷[5]。我国女贞子植物分布广泛、资源丰富、且价格低廉,但从女贞子中获得较高纯度的红景天苷提取物至今未见报道,本文对女贞子中…