戊型肝炎病毒与戊型肝炎

病毒性肝炎是我国最重要的传染病之一，国内外对其病原学研究进展甚快，至少已确认有五种肝炎病毒，其中戊肚的散发流行。为使从事传染病防治方面的专业人员病房了解本病毒的特征，进一步完善肝炎的病原学诊断及流行病学调查结果，本刊编辑部特约请第二军医大学微生物教研室戚中田教授撰写了有关戊肚用其戊肝病毒的综述；　　本综述简要报道戊型肝炎病毒的生物学及分子生物学特征，戊型肝炎的临订特征及特异性诊断，并对戊肝免疫预防、基因疫苗的展望作了介绍，对从事病毒学及传染病学的及传染病学的工作人员具有重要的参考价值。     

戊型肝炎患者血清戊型肝炎病毒RNA的动态观察及意义

目前 ,国内外对戊型肝炎 (ＨＥ)患者病毒血症已有研究 ,各家报道有明显不同 ,我们采用逆转录 聚合酶链反应方法检测 32例ＨＥ患者系列血清 ,探明ＨＥ患者病毒血症持续时间和消长规律。检测对象为中国医大二院传染科1995年 1月至 1996年 10月期间住院患者 32例 ,临床诊断为戊型肝炎。分别收集患者病后 0～ 7ｄ、8～ 14ｄ、15～ 12ｄ、2 2～ 2 8ｄ系列血清共 12 5份 ,用异硫氰酸胍一步法抽提ＨＥＶＲＮＡ。引入一对外引物序列为 :外正向引物 (4 45 9 44 78) 5′ ＧＣＡＴＴＡＴＧＧＡＧＧＡＧＴＧＴＧＧ 3′,外反向引物 (4 877 485 8) 5′ Ｃ…     

戊型肝炎患者血清IgG抗—HEV动态变化

应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测80例散发性戊型肝炎病人的系列血清表明,IgG抗-HEV于发病后第3天即可阳转,于发病后3～14天和15～30天,IgG抗-HEV累积阳转率分别为68.75％和93.75％。多数病人IgG抗-HEV持续时间较短,发病后4～6个月和1～2年分别有62.50％和95％的病人阴转。90％的病人IgG抗-HEV水平于30天内达到高峰,多数病人IgG抗-HEV水平在急性期较高,恢复期降至低水平。     

戊型肝炎病人和实验感染戊型肝炎病毒的猕猴血清抗——H…

应用人工合成的戊型肝炎病毒（ＨＥＶ）基因组开放读码框架２（ＯＲＦ２）和３（ＯＲＦ３）两段多肽，分别建立了酶联免疫试验（ＥＩＡ），检测８５份实验感染ＨＥＶ的猕猴和１４３份戊型肝炎（简称戊肝）病人血清，结果两组抗－ＨＥＶ ＯＲＦ２阳性率分别为７０．８９％和６８．５３％，均显著高于抗－ＨＥＶ ＯＲＦ３，且前者阳转时间较早，持续阳性时间也较长。虽然多数（９７．３％）抗－ＨＥＶ ＯＲＦ３阳性血清，抗－ＨＥＶ     

一起甲型肝炎和戊型肝炎的混合暴发

全球少有甲型肝炎和戊型肝炎混合感染的报道。我们经过流行病学调查与实验室检测分析，证实了一起由甲型肝炎和戊型肝炎病毒混合感染引起的暴发。     

戊型肝炎病毒Ⅳ型全基因序列的分析

目的 分析戊型肝炎病毒（HEV）Ⅳ型的全基因序列以比较与其他基因的差异。方法 设计PCR引物对全基因进行分自然扩增,并两个末端采用末端快速扩增方法（RACE）进行扩增,对扩增产物进行克隆及测序。结果 HEV－T1全序与Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅲ型的核苷酸同源性分别为（74．8－75．5）％、74．5％和（75．3－76．3）％。ORF1与已报道的Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅲ型氨基酸同源性分别为（85．0－86．7）％、85．0％和（88．5－88．7）％;ORF2与已报道的Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅲ型的氨基酸同源性分别为（91．6－92．4）％、90．1％和（91．9－93．0）％。ORF3与已报道的Ⅰ型、Ⅱ和Ⅲ型的氨基酸同源性分别为（75．9－77．8）％、75．0％和（79．6－83．3）％。结论 这一研究为今后发展戊型料诊断试剂及戊型肝炎疫苗提供了新的、重要的分子生物学基础。     

一起戊型肝炎暴发的血清抗体比较研究

目的评价戊型肝炎(戊肝)抗体E2-IgM(抗-HEV E2-IgM)酶联免疫试剂(捕获法)在反映戊肝流行特征和对戊肝早期诊断中的作用.方法在首发病例26 d后对某单位戊肝暴发人群和相邻单位对照人群进行血清抗-HEV E2-IgM、IgG检测;部分人群进行美国Genelabs抗-HEV IgM、IgG的平行检测.结果抗-HEV E2-IgM试剂捕获法在对照人群中仅检出1例阳性(0.11%),且阳性和阴性之间可明显区分,其特异度为99.89%;在暴发流行人群中检出145例阳性(8.66%),显著高于对照人群(P＜0.001);暴发人群中戊肝患者的血清学动态变化为抗-HEV E2-IgM在暴露时间为30～60d时保持较高吸光度(A值),随着时间的延长A值呈明显下降趋势;抗-HEV E2-IgM阳性在该组人群中与性别和年龄无关;在暴发人群抗-HEV E2-IgM(+)的115例患者中,Genelabs抗-HEV IgG检测出88份阳性,检出率为76.52%,漏检27例,漏检率为23.48%.对照人群随机抽样179例患者中有20例Genelabs抗-HEVI IgG(+),阳性率为11.17%.在110份抗-HEV E2-IgM(+)的血样中,Genelabs抗-HEVIgM只检测出76份,检出率为69.09%;有16例患者Genelabs抗-HEV IgG、IgM均未能检出;Genelabs抗-HEV IgG和IgM的不一致率为25.45%.结论抗-HEV E2-IgM具有99%左右的特异度,与在正常人群中检出较高阳性率的Genelabs抗-HEV IgG试剂相比,减少了假阳性;抗-HEV E2-IgM与Genelabs抗-HEV IgM、IgG相比,对急性戊肝感染诊断的灵敏度提高了25%～30%,减少了漏诊;抗-HEV E2-IgM试剂盒操作简单、快速,本底较好,不存在酶结合物不足的问题.     

Serological diagnostics of hepatitis E virus infection

Development of accurate diagnostic assays for the detection of serological markers of hepatitis E virus (HEV) infection remains challenging. In the course of nearly 20 years after the discovery of HEV, significant progress has been made in characterizing the antigenic structure of HEV proteins, engineering highly immunoreactive diagnostic antigens, and devising efficient serological assays. However, many outstanding issues related to sensitivity and specificity of these assays in clinical and epidemiological settings remain to be resolved. Complexity of antigenic composition, viral genetic heterogeneity and varying epidemiological patterns of hepatitis E in different parts of the world present challenges to the refinement of HEV serological diagnostic assays. Development of antigens specially designed for the identification of serological markers specific to acute infection and of IgG anti-HEV specific to the convalescent phase of infection would greatly facilitate accurate identification of active, recent and past HEV infections.     

我国汉、回和藏族部分人群HEV感染的血清学调查

目的了解我国不同民族的健康人群戊型肝炎病毒感染情况。方法采用ELISA方法检测人群血清中戊型肝炎病毒（戊肝,HEV）IgG抗体。汉族人群血清分别来自于四川、北京、黑龙江和山东,回族和藏族人群血清来自于甘肃、宁夏和青海,总共10448份血清采集于2006—2008年。结果七省市人群HEV抗体总阳性率为17．97％（1878／10448）。汉、回和藏不同民族人群HEV抗体阳性率分别为24．32％（1794／7376）、3．59％（81／2258）和0．37％（3／814）。不同地区人群HEV抗体阳性率分布,四川、北京、黑龙江和山东汉族人群阳性率分别为27．45％、20．30％、22．89％和22．68％,甘肃汉和回族分别为24．63％（184／747）和6．12％（77／1258）,宁夏回族和青海藏族分别0．40％和0．37％。汉回藏不同民族各年龄组人群HEV感染分布,汉族各年龄组人群HEV抗体阳性率,在≤10岁年龄组为5．19％,11～20岁组为11．64％,21～30岁组为20．08％,31～40岁组为34．17％,41—50岁为41．75％,51～60岁组为48．58％,≥61岁组为57．43％。回族人群各年龄组人群HEV抗体阳性率依次为3．11％,3．96％,2．11％,3．98％,2．52％,4．57％和6．67％。藏族人群3份阳性者分布在21—30岁组、31—40岁组和51～60岁组各1份,阳性率为0．63％、0．58％和1．01％。结论汉族人群戊肝病毒感染明显高于回族和藏族,感染率随年龄增长而升高。回藏族人群HEV抗体阳性率低下,应加强对HEV感染的监测。     

血清学标志阴性的非甲～戊型肝炎的病原学研究

目的对血清学标志阴性的非甲～戊型肝炎进行病原学研究。方法用ＨＢＶＰＣＲ、ＨＣＶＲＴ－ＰＣＲ和ＨＥＶＲＴ－ＰＣＲ分别检测血清学标志阴性的非甲～戊型肝炎患者血清，并对其部分阳性产物进行克隆测序。结果８７例非甲～戊型肝炎血清ＨＢＶＤＮＡ均为阴性，９例（１０．３％）为ＨＣＶＲＮＡ阳性，部分经测序证实为ＨＣＶ１ｂ亚型；余７８例为ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ均阴性。该７８例中，１４例因无血清未作ＨＥＶＲＮＡ检测，余６４例中４９例（７６．６％）为ＨＥＶＲＮＡ阴性，１５例（２３．４％）为ＨＥＶＲＮＡ阳性。经序列分析显示，其中９例为典型的中国ＨＥＶ株基因序列，６例变异较大，与典型的中国株基因序列的同源性仅为８０％左右。４９例ＨＢＶＤＮＡ、ＨＣＶＲＮＡ和ＨＥＶＲＮＡ均阴性的血清中１６例（３２．６％）ＨＧＶＲＮＡ阳性。由此可见，该８７例中至少有９例为ＨＣＶ感染，１５例为ＨＥＶ感染，１６例为ＨＧＶ感染。结论对血清学标志阴性的非甲～戊型肝炎的病人应该用ＰＣＲ法进行病原学分型，以明确其诊断     

从抗-HEV阴性的戊型肝炎病人血清中检测到1株HEV变异株

Objective　To investigate genotypes of hepatitis E viruses isolated from hepatitis E patients with negative anti-HEV. Methods　Acute-phase sera of 22 hepatitis patients with negative anti-HAV IgM, HBsAg, anti-HBc IgM, anti-HCV and anti-HEV were detected for HEV RNA using a RT-nPCR based on a set of degenerate primers derived from open reading frame 2 of HEV. The positive PCR products were directly sequenced. Results　Among 22 acute hepatitis patients, 9(40.9%) were HEV RNA positive. Six PCR products of 9 sera were directly sequenced. Five of them shared the same subtype with HEV Chinese strain (L25595), with the nucleotide identity of 98.0% and the amino acid identity of 99.0%. The remainder, designated HEV LZ-105, was a variant of HEV. The nucleotide and amino acid homology of HEV LZ-105 with HEV(China),HEV(Burma),HEV(Mexico),and the newly identified HEV US-1 and swine HEV was 77.4%,78.1%,74.3%,77.4%,77.1% and 91.0%,91.0%,89.0%,93.0%,93.0%,respectively. Conclusion　A variant of HEV was isolated from a hepatitis E patient with negative anti-HEV.     

人、猪、禽戊型肝炎病毒血清学关系的研究

目的研究人、猪、禽戊型肝炎病毒（HEV）的血清学关系。方法应用ELISA分别以人、猪、禽HEVORF2重组蛋白p166human、p166swine、p268avian检测人、猪、鸡血清及其他标本中抗．HEVIs,G，用SAS软件进行统计学分析，同时进行序列同源性比较。结果p166human和p166swine对HEV实验感染动物血清、HEVORF2重组蛋白免疫血清和单克隆抗体均呈阳性反应，而p268avian均呈阴性反应。以p166human、p166swine、p268avian检测人、猪、鸡血清抗．HEVIgG，戊型肝炎患者血清检出率分别为98．5％、97．7％和1．5％，正常人血清为10．0％、10．0％和4．0％，猪血清为26．9％、25．6％和1．3％，鸡血清为4．3％、2．2％和33．3％。p268avian与p166human或p166swine的检出率差异有统计学意义（P〈0．001）。相关性分析表明，p166human和p166swine对不同样本的检测均呈直线正相关，而p268avitm与p166human或p166swine无直线相关性。人和猪HEVpORt2的序列同源性在88．2％。99．2％，而禽HEV与人、猪HEVpORt2的同源性仅为45．5％～46．1％，其中含有多个插入和缺失突变。结论人和猪HEV血清学关系密切，而禽HEV与人、猪HEV抗原性差异有统计学意义，无血清学相关性。因此禽HEV与人、猪HEV的关系应予进一步考证。     

亚洲戊型肝炎病毒结构蛋白的变异

目的了解戊型肝炎病毒的变异。方法用双脱氧法对亚洲主要戊型肝炎流行国家的戊型肝炎病毒结构基因区段进行了分析，并根据ｃＤＮＡ序列确定了其氨基酸的序列。结果证明亚洲国家包括印度、缅甸、中国、巴基斯坦、吉尔吉斯坦流行的戊型肝炎病毒在基因水平和氨基酸水平上均有变化，核苷酸变化幅度在５％以内。氨基酸在测定的区域内未发现变异，与美洲发现的墨西哥株相比，亚洲株拟来自同一个祖先，基因和氨基酸水平的变化仅属基因漂移的范围。结论以亚洲戊型肝炎病毒基因为基础的疫苗将有广泛的保护作用     

Identifications of polyphyletic variants in acute hepatitis suggest an underdiagnosed circulation of hepatitis E virus in Argentina

Background

In recent years, an increasing number of infections with genotype 3 hepatitis E virus (HEV) have been reported in western countries. Data in South America, however, are still scarce. Swine and human variants previously described in Argentina are closely related to a human Austrian one.

Objective

To identify whether HEV is still circulating in Argentina.

Study design

Sera and stool samples from adults and children with unexplained acute liver disease referred to our center during the last six years were prospectively studied. Dual infection with hepatitis A was retrospectively studied in a group of children with fulminant hepatic failure.

Results

Fifteen new cases (13 adults and 2 children), seven of whom required hospitalization, were diagnosed. Nine had detectable HEV RNA, and one had imported genotype 1. Subgenotype 3i HEV-related variants are still circulating. Five autochthonous sequences, related to European, American and Japanese ones, grouped in subgenotype 3a. One case had a subgenotype 3b variant.

Discussion

The polyphyletic variants widespread in Argentina suggest multiple sources of infection. Whether or not their reservoir is swine merits further investigation. Since hepatitis E is still considered rare, differential laboratory testing in unexplained acute liver disease is not routinely performed in Argentina. Broadening awareness of this disease is important in light of the decrease in hepatitis A incidence since universal vaccination was implemented in 2005. The diagnosis of hepatitis E with a combination of serological and molecular tools is needed to better understand its epidemiology and impact on the clinical management of patients with unexplained increased transaminases.     

一株新型戊型肝炎病毒的部分克隆及分析

目的　对得自北京地区一例急性散发性戊型肝炎病人病毒 (ChinaT)作基因克隆分析。方法　用逆转录套式聚合酶链反应方法从患者粪便中克隆病毒并做核苷酸序列分析。结果　ChinaT株与 4株典型中国株HEV(ChinaA、ChinaB、ChinaC、ChinaD)、缅甸株、墨西哥株、美国株、非洲的乍得株核苷酸 /氨基酸同源性分别为 78% /92 %、78% /92 %、79% /90 %、78% /94%、76 % /92 %。结论　ChinaT株有较高的基因异质性 ,与其它HEV株有很大的不同 ,是一新型HEV。     

乙型肝炎病毒感染者血清中丁型肝炎病毒标志物检测分析

目的 了解丁型肝炎病毒(hepatitis delta virus,HDV)感染标志物在乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染者中的分布状况并分析其临床意义.方法 收集HBV感染者的临床资料和血清样本,通过酶联免疫分析法检测其血清HBV感染五项指标、HDVAg和Anti-HDV,结合临床诊断和生化指标进行分析.结果 收集HBV感染者样本462例,其中无症状携带者210例,慢性肝炎175例,急性乙肝35例,肝纤维化42例,检出HDV感染率为4.8％,男性显著高于女性,肝纤维化组的HDV感染率最高,为9.5％,其次为慢性肝炎的6.9％,45～60岁人群的HDV感染率为7.8％,显著高于其他年龄段.结论 慢性乙肝和肝纤维化病例的HDV感染显著增高,提示HDV感染与肝病的严重程度相关,建议对肝病患者开展血清HDV感染标志物检查,鉴别是否存在HDV重叠感染.