肿瘤浸润淋巴细胞在浆液性卵巢癌的临床病理分析

目的:探讨浆液性卵巢癌中肿瘤浸润性淋巴细胞(TIL)的临床病理和免疫组织化学特征及临床意义。方法:利用免疫组织化学法对68例浆液性卵巢癌中TIL进行组织病理学观察,并分析其与各临床病理因素的关系。结果:68例浆液性卵巢癌中有大量TIL浸润者(≥50 TIL/100肿瘤细胞)43例,占63.24%。有无大量TIL浸润在不同肿瘤细胞分化程度、临床分期、CA125水平中差异有统计学意义(P0.05)。浆液性卵巢癌组织癌巢内CD3~+、CD4~+、CD8~+细胞数显著低于间质内(P0.05);癌巢内CD4~+/CD8~+比值也明显低于间质内(P0.05)。Ⅲ期、低分化组癌巢内及间质内CD4+/CD8~+比值分别低于Ⅰ~Ⅱ期与高-中分化组(P0.05)。癌巢内CD8+/FoxP3~+Treg比值显著低于间质(P0.05);Ⅲ期、低分化组肿瘤癌巢内的CD8+/FoxP3+Treg比值显著降低(P0.05)。Ⅲ期、低分化组患者癌巢中GzmB表达分别低于Ⅰ~Ⅱ期和高-中分化组(P0.05)。结论:有无大量TIL浸润与浆液性卵巢癌肿瘤分化程度、临床分期、CA_(125)水平有关。     

Fas系统在上皮性卵巢癌及其肿瘤淋巴细胞中的表达

目：检测Fas、FasＬ在上皮性卵巢癌及其浸润淋巴细胞（ＴＩＬ）中的表达,探讨Fas系统在卵巢癌免疫逃逸中的作用。方法：用流式细胞术检测了３１份上皮性卵巢癌、２０份卵巢良性、１０份正常卵巢组织以及３１份卵巢癌ＴＩＬ、１２份卵巢份卵巢良性TIL的Fas及FasL的表达。结果：卵巢癌组织的Fas表达明显低于卵巢良性肿瘤及正常卵巢组织（P＜0．01）,其FasL表达则明显高于后者（P＜0．01）;卵巢良性及正常组织的Fas、FasL表达无差异（P＞0．05）。卵巢癌组织中含有丰富的TIL,其Fas及FasL的表达明显高于卵巢良性TIL,差异有显著性（P＞0．05）,卵巢癌组织Fas的表达与临床分期、组织学分级及淋巴结转移无关（P＞0．05）;FasL的表达与临床分期无关但随组织学分级的升高而增加（P＜0．05）;有淋巴结转移者FasL的表达明显高于无淋巴结转移者（P＜0．05）。卵巢癌TIL中Fas及FasL的表达与各临床病理参数无关 （P＞0．05）,结论：上皮性卵巢癌组织中存在Fas表达下调和FasL表达增加,FasL高表达者预后不良。细胞可能通过FasL的过度表达,逃避免疫监视,诱导Fas敏感的TIL凋亡,发生浸润和转移。     

卵巢上皮性癌肿瘤浸润淋巴细胞的增殖、表型及细胞毒活性研究

目的:探讨卵巢上皮性癌肿瘤浸润淋巴细胞TIL的生物学特性。方法:用机械法和酶法消化实体瘤后,经分步低速离心行连续密度梯度法分离卵巢癌TIL,再在IL-2、PHA或OKT_3条件下培养,表型分析采用间接免疫荧光染色法,细胞毒性检测采用MTT法。结果:15份卵巢癌TIL中,得率范围106-107/g,13份TIL活化（另2份污染）,其中7份TIL经培养达治疗量（109细胞）;初分离的卵巢癌TIL处于功能抑制状态,抑制期5-15d,随着活化后体外培养,CD3、CD8、CD25（IL-2R）和 HLA-DR表达显著增多;初分离的卵巢癌TIL对K562和自体瘤细胞杀伤力均低下,随着体外培养,细胞毒性增加,对自体瘤的特异性杀伤力增加尤为显著。结论:卵巢癌TIL体外易分离及活化,特异性杀伤力较强,适于肿瘤的生物学治疗。     

BRMS1和fascin基因在卵巢上皮癌中的表达及其意义

目的 :研究原发卵巢上皮癌 (POEC)中乳腺癌转移抑制基因 (BRMS1)和运动相关蛋白 (fascin)基因表达水平及其意义。方法 :用半定量逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)技术检测 2 5份正常卵巢、15份良性卵巢上皮瘤、2 8份卵巢上皮癌及 15份卵巢癌盆、腹腔种植转移灶中BRMS1和fascin基因mRNA表达情况。结果 :(1)BRMS1基因表达 :在POEC为 0 .4 73± 0 .179,明显低于正常卵巢和良性上皮瘤组 (P <0 .0 5 ) ;在III、IV期 (晚期 )卵巢癌原发灶中的表达显著低于I、II期 (早期 ) (P =0 .0 12 ) ,在腹腔脱落细胞阳性患者卵巢癌组织中的表达明显低于阴性者 (P =0 .0 4 3) ;(2 )fascin基因表达 :在POEC为 0 .94 1±0 .2 87,明显高于良性上皮瘤的 0 .382± 0 .0 4 6(P <0 .0 0 1) ;其表达与分期有关 ,在III、IV期卵巢癌原发灶中的表达显著高于I、II期 (P =0 .0 2 ) ;(3)fascin/BRMS1的相对光密度值(ROD)比值随肿瘤转移增加。结论 :BRMS1和fascin基因表达与卵巢上皮癌转移密切相关 ,其中fascin/BRMS1的ROD比值可成为提示卵巢癌有转移的指标     

卵巢浆液性腺癌肿瘤微环境中CD8~+TILs密度及PD-L1的表达与临床意义

目的:研究卵巢浆液性腺癌肿瘤微环境中CD8~+肿瘤浸润淋巴细胞(TILs)密度及癌细胞程序性死亡配体-1(PD-L1)的表达情况与临床意义。方法:收集2004年7月至2010年12月于上海交通大学医学院附属仁济医院行肿瘤细胞减灭术的116例卵巢浆液性腺癌患者组织标本,免疫组化检测肿瘤组织CD8~+TILs密度及癌细胞PD-L1表达情况;Spearman相关性分析癌细胞PD-L1表达水平与癌巢及间质CD8~+TILs数目的关系;采用乘积极限法进行基于癌巢CD8~+TILs密度及肿瘤细胞PD-L1表达的单因素生存分析。结果:卵巢浆液性腺癌PD-L1高表达的比例为70.69%(82/116)。癌细胞PD-L1表达强度与癌巢内的CD8~+TILs数目呈显著负相关(P=0.024),而与间质内的CD8~+TILs数目无相关性(P=0.117)。癌巢CD8~+TILs高密度组患者的中位生存时间(64月)显著高于低密度组(43月),差异有统计学意义(P0.05);乘积极限法的亚组分析显示肿瘤微环境中癌细胞PD-L1低表达癌巢CD8~+TILs高密度组患者的预后较好。结论:卵巢浆液性腺癌肿瘤微环境中癌巢CD8~+TILs密度及癌细胞PD-L1表达水平与患者预后密切相关,重视肿瘤微环境的免疫分型有助于评估患者预后及筛选合适患者实施抗PD-1/PD-L1免疫治疗。     

卵巢癌组织中STAT3和免疫效应细胞的表达及其相关性分析

目的:研究卵巢上皮癌细胞中STAT3表达与DC、CD4+、CD8+表达之间的关系及临床意义,探讨卵巢癌发生过程中肿瘤免疫逃逸的机制。方法:选择42例卵巢上皮性癌患者为研究对象,25例卵巢良性肿瘤患者及13例正常卵巢组织为对照。用免疫组织化学SABC法检测组织中STAT3与DC、CD4+、CD8+的表达,并进行半定量及相关性分析。结果:(1)STAT3在卵巢上皮性癌中表达增高,与良性和正常对照组的差异有统计学意义(P<0.005);按FIGO分期,Ⅰ~Ⅱ期与Ⅲ~Ⅳ期的差异有统计学意义(P<0.05);(2)DC、CD4+在卵巢上皮性癌中表达降低,与良性和正常对照组的差异有统计学意义(P<0.005);按FIGO分期,Ⅰ~Ⅱ期与Ⅲ~Ⅳ期的差异有统计学意义(P<0.05);(3)CD8+在卵巢上皮性癌中表达降低,与良性和正常对照组的差异有统计学意义(P<0.005);按FIGO分期,Ⅰ~Ⅱ期与Ⅲ~Ⅳ期比较,低表达率增高,但无统计学意义(P>0.05);(4)卵巢上皮癌组织中STAT3表达与DC、CD4+、CD8+表达之间呈负相关,相关系数分别为-0.230、-0.081、-0.102,P均<0.05。结论:STAT3与DC、CD4+、CD8+的表达可作为判断卵巢癌恶性程度的指标;STAT3与DC、CD4+、CD8+在肿瘤组织的表达呈负相关。各因素间相互影响,可能是导致肿瘤逃脱机体免疫监视的机制之一。     

卵巢上皮性癌组织中肿瘤浸润性树突状细胞的状态及其与血管内皮生长因子表达的相关性

目的研究卵巢上皮性癌组织中肿瘤浸润性树突状细胞(TIDC)的状态及其与血管内皮生长因子(VEGF)表达的关系。方法采用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化酶连接法和Picture二步法,检测57例卵巢上皮性癌(恶性组)、30例良性卵巢上皮性肿瘤(良性组)及16例正常卵巢(正常组)组织中S-100蛋白、CD83标记的TIDC状态及其VEGF的表达。结果(1)恶性组TIDC光镜下形态基本可分成两种,其分布有异质性。恶性组S-100^ TIDC中位数为4．3个／400高倍视野(HPF),分别与良性组(中位数为1．8个／HPF)和正常组(中位数为2．0个／HPF)比较,差异有显著性(P值分别为0．000和0．015)。恶性组中,早期(Ⅰ～Ⅱ期)肿瘤组织中S-100^ TIDC数量明显多于晚期(Ⅲ～Ⅳ期,中位数分别为6．0个和3．8个／HPF,P=0．026)。恶性组中,CD83^ TIDC浸润肿瘤间质者极少,中位数为0个／HPF。(2)恶性组细胞中VEGF高表达(5．0分),分别与良性组(3．8分)和正常组(2,4分)比较,差异均有极显著性(P=0.000)。(3)恶性组中,S-100^ TIDC数量与VEGF表达呈明显负相关(P=0．001)。结论(1)卵巢上皮性癌细胞可刺激TIDC的募集,但同时受VEGF的抑制。(2)卵巢上皮性癌中TIDC成熟严重受抑。     

基质金属蛋白酶MMP-9及其组织抑制剂TIMP-1在卵巢肿瘤中的表达及意义

目的　研究基质金属蛋白酶MMP - 9及组织抑制剂TIMP - 1在卵巢肿瘤中的mRNA表达及与卵巢癌临床病理特征和预后的关系。方法　应用RT -PCR方法检测 4 8例卵巢癌、 2 1例良性卵巢肿瘤及 2 2例正常卵巢组织中MMP - 9及TIMP - 1mRNA的表达情况 ,进行阳性率及半定量的比较 ,并将其结果与临床及病理学资料进行统计学分析。结果　MMP - 9在卵巢癌中表达的阳性率及半定量明显高于正常卵巢组织 ,其表达水平与卵巢癌的手术病理分期及预后有关 ,在Ⅲ -Ⅳ期患者中的表达显著高于Ⅰ -Ⅱ期患者 (P <0 0 5 )。MMP - 9阳性患者累积生存率明显低于阴性者。TIMP - 1的表达在卵巢癌中无明显增高 ,且与临床病理无相关性。MMP - 9/TIMP- 1在卵巢癌中的比值明显高于正常卵巢组织。结论　MMP - 9及MMP - 9与TIMP - 1的平衡失调与卵巢癌的浸润转移密切相关 ,MMP - 9可作为监测晚期卵巢癌患者预后的一个指标。     

上皮性卵巢肿瘤患者血清和肿瘤组织中VEGF水平的检测

目的　通过对上皮性卵巢肿瘤患者肿瘤组织中血管内皮生长因子 (VEGF)表达的观察以及对术前血清VEGF水平的检测 ,探讨VEGF与上皮性卵巢肿瘤临床病理因素之间的关系。方法　应用免疫组织化学和ELISA方法 ,对 79例上皮性卵巢肿瘤患者 (包括 2 1例卵巢良性囊腺瘤 ,1 2例交界性卵巢肿瘤和 4 6例上皮性卵巢癌 )术前血清VEGF水平和术后组织标本中VEGF的表达进行了检测。结果　①上皮性卵巢癌组织VEGF阳性表达率 (78 2 6 % )显著高于交界性肿瘤 (4 1 6 7% )和良性囊腺瘤 (33 33% ) (P <0 0 1 ) ;上皮性卵巢癌中 ,晚期癌 (Ⅲ、Ⅳ期 )的VEGF阳性表达率 (92 0 0 % )显著高于早期癌 (Ⅰ、Ⅱ期 ) (6 1 90 % ) (P <0 0 1 ) ,且强阳性表达率 (5 2 0 0 % )也显著高于早期癌 (1 4 2 9% ) (P <0 0 5 ) ;有腹水组VEGF阳性表达率 (87 5 0 % )显著高于无腹水组 (5 7 1 4 % ) (P <0 0 5 ) ;②上皮性卵巢癌患者血清VEGF水平也明显高于良性囊腺瘤患者和交界性肿瘤患者 (P <0 0 1 ) ,卵巢癌中 ,低分化患者血清VEGF水平高于高、中分化患者 (P <0 0 1 ) ,血清VEGF水平在临床Ⅲ、Ⅳ期患者明显高于Ⅰ、Ⅱ期患者 (P <0 0 5 ) ,有明显腹水者比无腹水者高 (P <0 0 1 )。结论　VEGF在上皮性卵巢癌肿瘤组织中表达的增加以及血     

乙酰肝素酶mRNA在卵巢上皮性肿瘤中的表达及其临床病理相关性研究

目的探讨乙酰肝素酶（Hpa）mRNA在卵巢上皮性癌中的表达及与临床病理的相关性。方法应用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测41例卵巢上皮性癌、17例卵巢良性肿瘤和22例正常卵巢组织中Hpa mRNA表达，并分析其与卵巢癌临床病理的相关性。结果①卵巢上皮性癌组织、良性肿瘤组织和正常组织Hpa mRNA阳性表达率分别为58．54％、29．41％和22．73％。癌组织Hpa mRNA阳性表达率显著高于良性组及正常组（P〈0．01），良性组与正常组Hpa mRNA阳性表达率比较，差异无显著性（P〉0．05）。②Ⅲ～Ⅳ期卵巢恶性肿瘤患者中Hpa mRNA的阳性表达率显著高于Ⅰ～Ⅱ期患者（P〈0．05）。低分化肿瘤组织中Hpa mRNA的阳性表达率显著高于中、高分化者（P〈0．05）。③Long-rank分析显示Hpa mRNA表达阳性者的累积生存率明显低于阴性者，差异有显著性（P〈0．05）。结论卵巢上皮性癌中Hpa mRNA阳性表达率明显增高，并与卵巢上皮性癌病情进展有关，可作为卵巢上皮性癌转移和预后的一个重要预测指标。