RESA-间接荧光抗体试验检测恶性疟RESA抗体的研究

由体外培养的恶性疟原虫获得的含环状体为主的感染红细胞制成单层感染红细胞,经戊二醛固定后空气干燥,作为RESA,抗原片,以RESA-IFA检测恶性疟患老血样中的RESA抗体。受检的58份恶性疟血样中,12份呈RESA抗体阳性反应,阳性率为20.7％,其中8份用IFA检测时抗体滴度均>1∶4096。对20份间日疟血样进行了同样试验,结果均为阴性。对RESA及其抗体在疟疾保护性免疫中的作用进行了简要讨论。     

RESA在恶性疟保护性免疫中的作用

由于恶性疟的发病率和死亡率几乎均与恶性疟原虫红内期有关,因而研制红内期疫苗尤为重要。近年来的研究发现,存在于感染环状体或早期滋养体的红细胞表面的抗原RESA,其相应的抗RESA抗体在体外可阻抑裂殖子再侵入红细胞。现场观察亦表明,人群中抗RESA抗体的高滴度与临床免疫具有相应关系。RESA可望成为疟疾的重要候选疫苗。     

西双版纳疟疾患者RESA抗体的初步调查

用RESA—IFA试验对云南省西双版纳州恶性疟患者血样41份,恶性和间日疟原虫混合感染患者血样12份及间日疟患者血样38份进行RESA抗体检测。恶性疟患者阳性者9例,阳性率为22.0％(9/41);混合感染者阳性1例,阳性率为8.3％(1/12);间日疟患者全部阴性。RESA抗体阳性的患者IFA试验的GMRT为1552.1,阴性患者为741.8,差异非常显著。RESA抗体阳性患者平均原虫密度为5042个原虫/μl血,阴性患者为25398个原虫/μl血。表明恶性疟患者血清中的RESA抗体与临床免疫有一定关系。     

用单克隆抗体——酶联免疫吸附试验双抗体夹心法检测人体疟原虫抗原的研究

采用兔抗恶性疟原虫(Fcc株)抗体包被,以现症疟疾病人滤纸血为检测样本,用两种单克隆抗体M_26-32。3F_9混合进行反应的ELISA双抗体夹心法检测红内期疟原虫抗原,取得较满意结果: 64份镜检阳性疟疾样本(海南岛恶性疟31份;江苏恶性疟16份,间日疟17份)和25份非疟疾对照样本测定结果,阳性和对照样本的平均增强率分别为77.5和     

巴布亚-新几内亚高疟区恶性疟原虫环状体感染的红细胞表面抗原的体液免疫反应

环状体感染的红细胞表面抗原(RESA)见于裂殖子微线体表面,裂殖子侵入红细胞形成环状体后,在红细胞膜上可发现RESA。近来的一系列研究提示,该抗原可考虑为多价疟疾疫苗的一个组分。 为了解自然状态下不同年龄组抗RESA抗体阳性率,以及抗体免疫反应与原虫感染度和疟疾发病率间的关系,于1990年7月至     

急性无并发症疟疾病人和脑型疟病人的抗子孢子抗体

作者于1980年7～12月间采自急性无并发症疟疾和脑型疟的病人血清各95份,作间接荧光试验,检测病人血清中抗恶性疟和抗间日疟的子孢子抗体IgG和IgM,抗体滴度>1:8为阳性。其中95份脑型疟病人血清     

自然感染诱发的抗恶性疟环子孢子蛋白的抗体

应用间接荧光抗体试验(IFA)和环子孢子沉淀试验(CSP)曾证明疟区人群和疟疾病人血清中含有抗恶性疟和间日疟子孢子的特异性抗体。鉴于对引起此项免疫反应应答的抗原尚不了解,本文对与疟区人群和疟疾病人血清发生反应的恶性疟子孢子抗原成份进行了研究。     

恶性疟和间日疟原虫感染时的细胞毒抗体

对疟疾时的贫血,过去常以机械性溶血或偶尔因抗-Ⅰ抗体的存在来解释,而血小板减少和淋巴细胞减少的机理则仍不明确。Wells曾在恶性疟和间日疟患者中发现淋巴细胞毒抗体,于15℃时其阳性率在间日疟和恶性疟患者中分别达98%和95%。本文作者用微量淋巴细胞毒技术,对23例各种疟疾患者进行了细胞毒抗体研究。在7例未接受输血的疟疾病人中,发现不同程度的多特异性细胞毒抗体,有的细胞     

居住疟区的儿童环子孢子抗体与恶性疟发病的关系

已证明疟区人群自然感染疟疾后可诱发产生抗子孢子(环子孢子蛋白)抗体。为了解此类抗体在抵抗疟疾感染方面的保护作用,对疟区人群抗子孢子抗体水平与发生恶性疟感染间的关系进行了研究。     

体外培养恶性疟原虫培基中RESA的初步研究

培养恶性疟原虫培基的上清与不同稀释度的环状体感染红细胞表面抗原(RESA)抗体阳性的10份云南恶性疟患者血样共育,取上清进行RESA-IFA。结果显示,所有血样的RESA抗体滴度均有不同程度的下降.培基经加热处理后,并不影响其抑制活性。表明体外培养恶性疟原虫培基中存在可溶性RESA,且对热稳定。用不同程度的裂殖子可溶性抗原和O型红细胞影抗原与RESA抗体阳性的血样共育,再进行RESA-IFA。裂殖子抗原在浓度为3.1μg/ml时产生完全抑制。相反,O型红细胞影抗原在浓度比裂殖子抗原高约30倍时,才产生抑制。表明RESA源于裂殖子。     

恶性疟病人血清抗配子体表面抗原的抗体

30份恶性疟病人血清,其中15份有疟史,1份病史不明,余为初次感染,用间接荧光抗体试验(IFAT)检查配子体抗体,86%初次感染者和93%半免疫者具 IgG 和 IgM 抗体。同48/45kD 传播阻断靶抗原的3个不同决定簇单克隆抗体(单抗)进行 ELISA 竞争测定,约1/3血清50%以上竞争抑制至少2个单抗与抗原的结合。提示疟疾自然感染后可以引起抗体介导抗有性期免疫,这种免疫反应对疟疾在群体中的传播无疑有一定阻断意义。     

疟疾患者对阻断传播候选疫苗的恶性疟有性期抗原的初次抗体反应

在巴布亚新几内亚(PNG)高疟区疟疾病人血清中已发现有抗230和48/45kD的恶性疟配子体/配子表面抗原的抗体。这些抗原的单克隆抗体能够阻断疟原虫从人体传播到媒介蚊。本文报告了用间接荧光抗体试验(IFA)和竞争性酶联免疫吸附试验(cELISA)观     

用ELISA检测疟疾抗体的研究

用体外培养的FCC-2株恶性疟原虫制成抗原涂片,通过ELISA共检测了270名正常人和404例1～4月前感染恶性疟或间日疟患者血清中的疟疾抗体。结果表明,非疫区上海市受检的正常人250例血清无一例抗体滴度≥1:20,故选用该滴度作为本法疟疾阳     

单克隆抗体3A3、2E7用于恶性疟Dipstick检测的初步研究

目的建立一种快速、简便,适用于基层的恶性疟免疫诊断方法.方法将抗恶性疟原虫HRP-Ⅱ的单克隆抗体3A3、2E7纯化后经配对筛选,利用Dipstick-免疫胶体金技术,制成诊断恶性疟的Dipstick层析条.用该层析条对115份疟疾患者血样,20份非疟疾病人血样及10份正常人血样进行检测,评价其敏感性和特异性,并对其稳定性、重复性等进行了初步研究.结果用该法检测145份血样,其对恶性疟的敏感性和特异性分别为83.1%及97.5%,已包被抗原、抗体的Dipstick条在4 C及室温下可保存3个月以上,对30份血样重复检测4次结果完全一致.结论Dipstick-免疫胶体金模式快速、简便,适用于基层应用,为疟疾的快速诊断提供了新的有效的手段.     

马达加斯加恶性疟原虫特异抗体亚类分析及其与保护力的关系

文献报道恶性疟原虫Pf155/RESA抗体或其3＇端重复序列抗体能抑制裂殖子的入侵,在地方性疟区,此类抗体水平随居民年龄而增长,且与抗体保护力平行,而作者对马达加斯加居民的Pf155/RESA中心部重复序列(DDEHVEEPTVA)抗体研究发现与疟疾临床保护力呈负相关。本文进一步分析该抗体各亚类的水平及其与保护力的相关性。     

单克隆抗体3A3、2E7用于恶性疟Dipstick检测的初步研究

目的 建立一种快速、简便，适用于基层的恶性疟免疫诊断方法。方法 将抗恶性疟原虫HRP－Ⅱ的单克隆抗体3A3、2E7纯化后经配对筛选，利用Dipstick-免疫胶体金技术，制成诊断恶性疟的Dipstick层析条。用该层析条对115份疟疾患者血样，20份非疟疾病人血样及10份正常人血样进行检测，评价其敏感性和特异性，并对其稳定性、重复性等进行了初步研究。结果 用该法检测145份血样，其对恶性疟的敏感性和特异性分别为83．1％及97．5％，已包被抗原、抗体的Dipstick条在4℃及室温下可保存3个月以上，对30份血样重复检测4次结果完全一致。结论 Dipstick-免疫胶体金模式快速、简便，适用于基层应用，为疟疾的快速诊断提供了新的有效的手段。     

在宿主防御和急性恶性疟贫血中脾Fc受体的功能

脾脏在防御急性疟疾感染中起着关键性作用,特别是在致死性恶性疟感染中,脾脏具有吞噬寄生和非寄生红细胞的能力。通过其巨噬细胞上的受体可清除免疫球蛋白所包被的颗粒性物质,对IgG包被红细胞的清除作用取决于结合到红细胞上的IgG分子数目、抗体激活补体的能力和脾Fc受体的活性。为了测定急性恶性疟病人中脾Fc受体的功     

食蟹猴和恶性疟原虫抗原用于疟疾间接荧光抗体试验的比较

应用食蟹猴疟原虫与体外培养人恶性疟原虫两种抗原作间接荧光抗体试验以检测疟疾抗体,结果居民146人中检出率分别为52.05％和53.42％,小学生107人检出率分别为18.69％和19.62％,阳性GMRT居民分别为45.60和58.09,小学生分别为42.87和53.84,后者较前者为高。在恶性疟流行区用恶性疟抗原测抗体更能反应当地疟疾流行状况。同时对羊抗人IgG和兔抗人IgG进行了对比,当工作浓度为1:16时,两种IgG均显示较高的灵敏性,将兔抗人IgG浓度稀释至1:32     

在委内瑞拉急性疟疾病人中检出HTLV-Ⅲ/LAV抗体

疟疾可引起类似于获得性免疫缺陷综合征(AIDS)的免疫抑制,如严重的淋巴细胞减少、T_4淋巴细胞亚群消失和 B 细胞激活等。作者对急性疟疾病人进行了检查,以了解有无 HTLV-Ⅲ/LAV(人类嗜淋巴细胞Ⅲ型病毒/淋巴结病相关病毒)感染的迹象。作者以 HTLV-Ⅲ/LAV 感染的细胞或病毒作为抗原,用酶联免疫吸附试验、间接免疫荧光试验、免疫印迹技术(Western blot)和放射免疫沉淀试验等方法,检测了委内瑞拉的12例急性间日疟病人和12例恶性疟病人血清中的 HTLV-Ⅲ/LAV 抗体。受检期间病人不使用抗疟药,病人均非 AIDS 高危人群,也无AIDS 相关的疾病。结果 12例恶性疟疾病人中有3例(25%)     

试纸法检测血液中富组氨酸蛋白Ⅱ快速诊断恶性疟的初步观察

本文报道了应用试纸法检测感染恶性疟后血内富组氨酸蛋白Ⅱ，用以诊断恶性疟。对镜检确诊的恶性疟病人进行了检测，阳性检出率为９５％，检测全过程需５～７ｍｉｎ。应用改良法检测全血或血浆仅需２～３ｍｉｎ；同时对间日疟病人血样和非疟疾病人血样进行了检测，结果全部阴性，特异性为１００％。应用试纸法诊断疟疾无须任何仪器，诊断快速、方便，对临床早期确诊病人并给于及时治疗、减少传播和病死率有重要意义。