参元丹优化方对动脉粥样硬化小鼠胰岛素抵抗及血清血栓素A_2/前列环素比值和DNA甲基化水平的影响

目的观察参元丹优化方对高脂喂养Apo E基因敲除(Apo E-/-)小鼠动脉粥样硬化(AS)胰岛素抵抗及血清血栓素A2(TXA2)/前列环素(PGI2)比值和DNA甲基化(5-m C)水平的影响,探讨其相关作用机制。方法 40只8周龄雄性Apo E-/-小鼠高脂饲料喂养6周,随机分为模型组、立普妥组、参元丹原方组和参元丹优化方组,各给药组给予相应药物干预6周。检测小鼠血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、胰岛素、TXA2、PGI2、DNA甲基化转移酶(DNMT1)和5-m C水平。HE染色,图像分析测量小鼠主动脉AS斑块面积。结果与模型组比较,参元丹原方组和参元丹优化方组小鼠血清TC和TG水平明显降低,HDL-C水平明显升高(P0.01),AS指数明显降低,校正后主动脉AS斑块面积显著降低(P0.05),参元丹优化方组小鼠血清5-m C、DNMT1、胰岛素水平及TXA2/PGI2比值显著降低(P0.05),参元丹优化方组优于参元丹原方组(P0.01)。结论参元丹优化方降低血清胰岛素、5-m C水平和TXA2/PGI2比值均优于原方,改善血脂和AS效果与原方相当。     

益气逐瘀法对AMI/抑郁大鼠神经体液的影响及其机制研究

目的:探讨参元益气活血胶囊(参元丹)对急性心肌梗死(AMI)/抑郁大鼠血清5-羟色胺(5-HT)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平的影响,以研究益气逐瘀法对心梗合并抑郁神经体液的影响机制。方法:将30只Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为正常组、模型组、参元丹高剂量组、参元丹低剂量组、对照组,每组各6只,以冠脉结扎法及慢性轻度不可预知性刺激合并孤养法制作AMI/抑郁模型,分别予参元丹高剂量、参元丹低剂量、氟西汀或蒸馏水灌胃18 d。造模成功3 d后处死,测量各组大鼠血清5-HT、TNF-α水平。结果:血清5-HT浓度比较:与正常组比较,模型组大鼠血清5-HT浓度显著降低(P0.05),与模型组比较,参元丹干预组大鼠血清5-HT浓度均显著升高(P0.05)。参元丹干预组与对照组比较,血清5-HT浓度均无显著性统计学意义(P0.05)。血清TNF-α浓度比较:与正常组比较,模型组大鼠TNF-α浓度无显著性统计学意义(P0.05)。同模型组比较,对照组、参元丹干预组大鼠血清TNF-α浓度差异亦未呈现出统计学意义(P0.05),但L-SYD血清TNF-α较各组明显升高。结论:参元丹能改善AMI/抑郁的血清5-HT水平下降的情况,但对血清TNF-α水平无显著影响。     

益气逐瘀法对中华小型猪PMI模型氧化应激反应的影响

目的:探索氧化应激反应在中华小型猪PCI围手术期心肌损伤(Peri-procedure Myocardial Injury,PMI)过程中的作用,以及益气逐瘀方参元丹(SYD)的心肌保护作用及机制。方法:中华小型猪24只,随机分为假手术组(n=6),模型组(n=6),SYD低剂量组[0.06 g/(kg·d),n=6],SYD高剂量组[0.24 g/(kg·d),n=6]。于小型猪冠脉狭窄处行球囊扩张+拉伤+大支架置入法建立PCI围手术期心肌损伤模型,测定并对比各组手术前1 h,术后4 h,12 h,24 h血清肌酸磷酸激酶同工酶(ck-mb)、肌钙蛋白I(c TNI)及超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、还原性谷胱甘肽(TSH)。结果:各组术前心肌酶水平无统计学意义(P0.05),术后心肌酶升高,但低于正常参考值5倍,提示发生PCI围手术期心肌损伤,造模成功。参元丹低剂量组、高剂量术后各时间点心肌酶水平均低于模型组,差异具有统计学意义(P0.05)。术后12 h、24 h参元丹高剂量组心肌酶水平低于参元丹低剂量组,差异具有统计学意义(P0.05)。模型组术后SOD、GSH水平较假手术组下降,MDA水平较假手术组升高,差异具有统计学意义(P0.05);模型组术后SOD、GSH水平较术前降低,MDA水平较术前升高,差异具有统计学意义(P0.05);参元丹高剂量组与低剂量组均能够升高SOD、GSH,同时降低MDA,差异具有统计学意义(P0.05),但仅在术后4 h,参元丹高剂量组与低剂量组作用存在统计学意义(P0.05),高剂量组优于低价量组。结论:中华小型猪PMI模型造模成功,参元丹具有改善PMI的内源性心肌保护作用。参元丹高剂量组较低剂量组作用更加明显,提示参元丹的心肌保护作用可能呈剂量相关。氧化应激因子在手术前后存在差异,提示氧化应激反应可能参与到了PMI的发生发展过程,参元丹具有加速抗氧化因子生成,维持抗氧化因子有效浓度,降低氧化因子。参元丹的心肌保护作用可能与其抗氧化应激反应相关。     

益气逐瘀方对急性心肌梗死大鼠miR-24表达及心肌细胞凋亡的影响

目的:观察益气逐瘀方参元丹对急性心肌梗死大鼠miR-24表达及心肌细胞凋亡的影响。方法:50只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、参元丹高、中、低剂量组,每组10只,采用左冠状动脉前降支结扎法复制心肌梗死模型,参元丹高、中、低剂量组从术后第2天开始给予参元丹药液灌胃,假手术组和模型组给予等剂量生理盐水灌胃,共给药2周。治疗结束后检测大鼠血清CK、LDH水平及心肌组织miR-24基因表达情况,TUNEL法检测心肌细胞凋亡。结果:实验结束时,与模型组相比,参元丹高、中、低剂量组均能显著降低血清CK、LDH水平(P0.05,P0.01),升高心肌组织miR-24 mRNA表达(P0.05,P0.01),同时降低心肌细胞凋亡指数(P0.05,P0.01)。结论:益气逐瘀方参元丹能够减轻心肌梗死大鼠心肌损伤及细胞凋亡,其作用机制可能与上调心梗大鼠缺血心肌组织miR-24基因表达有关。     

益气逐瘀方改善心肌梗死大鼠心肌损伤及对miR-24/Bim通路相关蛋白表达的影响

目的:探讨益气逐瘀方参元丹对急性心肌梗死大鼠心肌损伤及miR-24/Bim通路相关蛋白表达的影响。方法:50只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、参元丹高、中、低剂量组,每组10只,采用左冠状动脉前降支结扎法复制心肌梗死模型,参元丹高、中、低剂量组从术后第2天开始给予参元丹药液灌胃,假手术组和模型组给予等剂量生理盐水灌胃,共给药2周。治疗结束后检测大鼠血清CK、LDH水平及心肌组织miR-24基因表达,超声心动图检测左室功能,Western-blot检测心肌组织Bim、Bcl-2、Bax、caspase-9蛋白表达。结果:实验结束时,与模型组比较,参元丹高、中、低剂量组均能显著降低血清CK、LDH水平(P0.05,P0.01),升高心肌组织miR-24基因表达(P0.05,P0.01),降低左室舒张和收缩末期内径(P0.05,P0.01),升高左室短轴缩短率及射血分数(P0.05,P0.01),升高心肌组织Bcl-2蛋白表达(P0.05),降低Bim、Bax、caspase-9蛋白表达(P0.05,P0.01)。结论:益气逐瘀方参元丹可能通过调控miR-24/Bim信号通路相关细胞因子蛋白表达改善心肌梗死细胞损伤。     

益气逐瘀方对心肌梗死大鼠心肌损伤标志物及miR-24基因表达的影响

目的观察益气逐瘀方参元丹对心肌梗死大鼠心肌损伤标志物及缺血心肌组织miR-24基因表达的影响。方法 50只SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、模型组(Model组)、参元丹高剂量组(H-SYD组)、参元丹中剂量组(MSYD组)、参元丹低剂量组(L-SYD组),每组10只,采用左冠状动脉前降支结扎法复制心肌梗死模型,H-SYD组、M-SYD组、L-SYD组从术后第2天开始参元丹药液灌胃,Sham组和Model组等剂量生理盐水灌胃,共给药2周。治疗结束时,观察各组大鼠血清肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)水平及缺血心肌组织miR-24基因表达情况。结果与Model组比较,H-SYD组、M-SYD组及L-SYD组均能显著降低血清CK、LDH水平(P0.05,P0.01),H-SYD组、M-SYD组能够显著升高缺血心肌组织miR-24表达水平(P0.05,P0.01)。结论益气逐瘀方参元丹能够减轻心肌梗死大鼠心肌损伤,其作用机制可能与上调缺血心肌组织miR-24基因表达有关。     

丹红注射液对动脉粥样硬化小鼠主动脉斑块的干预作用及基因组DNA甲基化水平和甲基化转移酶的影响

目的:研究丹红注射液对高脂喂养的ApoE基因敲除(ApoE~(-/-))小鼠动脉粥样硬化(As)斑块的干预作用及基因组DNA甲基化水平和DNA甲基化转移酶(DNMTs)的影响。方法:将40只8周龄雄性ApoE~(-/-)小鼠高脂饲料喂养6周后随机分为模型组、阿托伐他汀钙片(商品名:立普妥)(阳性对照组)、丹红注射液低剂量组和高剂量组(n=10),给予药物腹腔注射6周后。检测其血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)水平。行HE染色,图像分析测量小鼠主动脉As斑块面积。采用高效液相色谱(HPLC)法检测小鼠血清基因组甲基化水平,采用ELISA法检测各组小鼠血清DNMTs水平。免疫组化染色,图像分析测量小鼠主动脉As斑块内DNMT1的表达。结果:与模型组相比,丹红注射液高剂量和低剂量组小鼠血清TG水平明显降低(P0.01)、丹红注射液高剂量组LDL-C水平明显降低(P0.01),丹红注射液低剂量组HDL-C水平明显升高(P0.05),丹红注射液高剂量组小鼠动脉粥样硬化指数显著降低(P0.01)。丹红注射液高剂量和低剂量组小鼠血清基因组甲基化和DNMTs水平显著降低(P0.01)。丹红注射液与模型组相比,丹红注射液组As小鼠的校正后主动脉As斑块面积显著降低,以及斑块内DNMT1表达显著降低(P0.01)。结论:丹红注射液可降低As小鼠血脂水平,减少As斑块面积,其机制可能与降低As小鼠血清基因组甲基化水平和整体DNMTs水平和抑制As小鼠主动脉斑块DNMT1表达有关。     

冠心康对microRNA-126和VEC的调控及抗动脉粥样硬化的作用机制研究

目的:观察冠心康对小鼠主动脉及血管内皮细胞miRNA-126及其下游相关信号GRS16、CXCL12、CXCR4、VCAM-1表达的调控,探索中医药抗动脉粥样硬化的作用机制。方法:体外细胞实验中,将小鼠血管内皮细胞随机分为5组,即对照组、模型组、中药高剂量含药血清组、中药低剂量含药血清组。不同组别VEC分别经不同含药血清干预后,观察细胞增殖和凋亡情况,采用qRT-PCR和Western-blot检测VEC中pri-miR-126、RGS16、CXCL12、CXCR4、VCAM-1 mRNA和蛋白表达;体内实验采用HE染色检测各组小鼠主动脉横截面病理损伤程度,采用qRT-PCR和Western-blot检测主动脉pri-miR-126、RGS16、CXCL12、CXCR4、VCAM-1 mRNA和蛋白表达。结果:体外实验结果显示,与对照组相比,中药高低剂量组的VEC凋亡率和增殖率明显优于模型组(P均0.05),中药高剂量组和中药低剂量组VEC增殖率比较差异不明显(P0.05);与对照组相比,中药高低剂量组VEC中miR-126、RGS16、CXCL12、CXCR4和VCAM-1 mRNA表达明显优于模型组(P0.05),中药高剂量组和中药低剂量组间比较差异不明显(P0.05);与对照组相比,中药高低剂量组VEC中RGS16、CXCL12、CXCR4和VCAM-1蛋白表达明显优于模型组(P0.05),中药高剂量组和中药低剂量组间比较差异不明显(P0.05)。体内实验结果显示,小鼠主动脉HE染色结果,对照组小鼠主动脉血管管径厚薄均匀,内膜光滑平整,无动脉粥样硬化病灶,模型组小鼠血管管径厚薄不均匀,斑块形成明显,血管管壁厚度、AS斑块截面积显著大于其他各组。中药高低剂量组小鼠主动脉各层结构正常,炎性细胞浸润较轻,病变轻,AS斑块较小,病变程度明显轻于模型组。与对照组相比,中药高低剂量组主动脉miR-126、RGS16、CXCL12、CXCR4和VCAM-1 mRNA表达明显优于模型组(P0.05),中药高剂量组和中药低剂量组间比较差异不明显(P0.05);与对照组相比,中药高低剂量组主动脉RGS16、CXCL12、CXCR4和VCAM-1蛋白表达明显优于模型组(P0.05),中药高剂量组和中药低剂量组间比较差异不明显(P0.05)。结论:冠心康抑制动脉粥样硬化斑块的形成的作用机制可能与调控miRNA-126及其下游相关信号GRS16、CXCL12、CXCR4、VCAM-1表达有关。     

当归芍药散对动脉粥样硬化小鼠的干预作用及DNA甲基转移酶1和PPAR-γ表达的影响

目的研究当归芍药散对载脂蛋白E基因敲除(ApoE~(-/-))小鼠主动脉粥样硬化(atherosclerosis,As)斑块的干预作用及DNA甲基转移酶1(DNMT1)和PPAR-γ表达的影响。方法将30只8周龄雄性ApoE~(-/-)小鼠西方类型膳食喂养9周,随机分为模型组、立普妥组(阳性对照组)和当归芍药散组(n=10),药物干预9周后,检测血清总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)、低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、血清DNA甲基化水平及DNMTs水平。行苏木素-伊红染色(hematoxylin and eosin staining,HE),采用IPP图像分析软件测量小鼠主动脉As斑块面积。免疫组化法检测各组小鼠主动脉As斑块内DNA甲基化转移酶1(DNMT1)和过氧化物酶体增殖物活化受体γ(PPARγ)的表达。结果与模型组相比,当归芍药散组和立普妥组小鼠血清TC、TG水平明显降低(P0.05),当归芍药散组小鼠血清HDL-C水平明显升高(P0.05)。与模型组相比,当归芍药散组小鼠主动脉As斑块面积显著降低(P0.01),当归芍药散组小鼠主动脉斑块内DNMT1表达显著降低(P0.05),PPARγ表达显著升高(P0.05)。结论当归芍药散可改善As小鼠的血脂水平,减少As斑块面积,具有明确的抗As作用,其机制可能与抑制As小鼠血清甲基化水平和DNMTs水平,促进As小鼠主动脉斑块内PPARγ表达和抑制斑块内DNMT1表达有关。     

黄连素降低ApoE-/-小鼠内脏脂肪素表达

目的:观察黄连素(Ber)对载脂蛋白E基因敲除(Apo E-/-)小鼠主动脉粥样硬化(AS)病变、内脏脂肪素(visfatin)及炎症因子表达的影响。方法:50只SPF级8周龄雄性Apo E-/-小鼠予高脂饲料喂养随机分为5组:Ber低、中、高剂量组分别ip给予Ber 2.5,5,7.5 mg·kg-1·d-1;辛伐他汀组ig辛伐他汀5 mg·kg-1·d-1;模型组ig等量生理盐水。另设10只相同基因背景和周龄的雄性C57BL/6J小鼠为对照组予普通饲料喂养。16周后测小鼠体重、血清脂质及visfatin,血浆白介素(IL-6)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;HE染色观察小鼠主动脉组织AS斑块面积;免疫组化法测AS斑块内visfatin的表达;Western blotting测小鼠主动脉visfatin蛋白的表达。结果:小鼠体重增加值,血清visfatin,总胆固醇(TG),三酰甘油(TC),低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平,血浆IL-6及TNF-α含量,主动脉visfatin蛋白表达方面,模型组均显著高于对照组(P0.05),各给药组均显著低于模型组(P0.05);辛伐他汀组,Ber中、高剂量组小鼠主动脉AS斑块面积比显著低于模型组(P0.05)。结论:Ber可通过降血脂、减小AS斑块面积、降低IL-6及TNF-α含量等发挥抗AS效应,其机制可能与降低visfatin表达有关。     

不同剂量活血、破血药对AS小鼠主动脉病理变化及斑块内CD147表达的影响

目的探究不同剂量活血药(川芎、当归)、破血药(三棱、莪术)对动脉粥样硬化(AS)小鼠主动脉组织病理变化及斑块内CD147基因表达的影响。方法将64只4周龄ApoE基因敲除小鼠制备AS模型,模型制备成功后随机分为6组:模型对照组(模型组)、阿托伐他汀钙组(他汀组)、低剂量活血药组(低活血组)、低剂量破血药组(低破血组)、高剂量活血药组(高活血组)、高剂量破血药组(高破血组)。连续灌胃给药8周后,处理动物。光镜及透射电子显微镜下观察主动脉组织病理变化,利用计算机图像分析系统计算校正斑块面积即斑块面积与血管横截面积的比值(PA/LA);RT-PCR法检测CD147基因mRNA表达水平。结果活血药、破血药均能不同程度改善小鼠主动脉组织病理变化;同时,活血药、破血药均能显著降低斑块内CD147基因表达水平(P0.01),且活血药高、低剂量组间以及破血药高、低剂量组间存在剂量依赖性(P0.01),而在相同剂量条件下,破血药作用显著优于活血药(P0.01)。结论活血药(当归、川芎)、破血药(三棱、莪术)具有抗AS的作用,其作用机制可能与调节斑块内CD147基因表达水平有关。     

景虎通脉方抗ApoE~(-/-)小鼠动脉粥样硬化的作用机制研究

目的探讨景虎通脉方对ApoE~(-/-)小鼠动脉粥样硬化(AS)斑块及炎性因子的作用及机制。方法 SPF级ApoE~(-/-)小鼠高脂饲养8周后建立AS模型,随机分为模型组、阳性药物组及景虎通脉方高、中、低剂量组(18.20、9.10、4.55 g/kg),C57BL/6/J小鼠为正常组。给药8周后HE和Masson染色观察主动脉斑块情况;ELISA检测血清TNF-α、IL-1β、IL-6及检测血脂4项;免疫组化和Western blot检测主动脉Toll样受体4(TLR4)和核受体77(Nur77)表达;基因芯片杂交技术筛选差异基因进行KEGG通路富集分析。结果与模型组比较,景虎通脉方各剂量组能不同程度减低血清TC、TG、LDL-C水平,增加HDL-C水平(P0.05,P0.01);HE和Masson染色观察景虎通脉方各剂量组显著减少斑块面积,增加斑块内胶原纤维表达(P0.01);ELISA检测景虎通脉方各剂量组可减低IL-1β、TNF-α、IL-6水平(P0.01);免疫组化和Western blot显示景虎通脉方各剂量组降低TLR4表达,增加Nur77表达;miRNA芯片结果显示49个miRNA差异显著,经KEGG分析显示其作用与包括Axon guidance及TLR4下游在内的多条通路相关。结论景虎通脉方可明显减少AS小鼠主动脉斑块面积,其机制可能与其调节血脂、减低炎症因子、干预Nur77和TLR4蛋白及包括Axon guidance在内的多条通路相关。     

葛根素降低ApoE-/-小鼠visfatin表达抑制动脉粥样硬化形成的研究

目的观察葛根素对载脂蛋白E基因敲除(Apo E-/-)小鼠主动脉粥样硬化(AS)病变、血脂水平、内脏脂肪素(visfatin)及炎症因子IL-6及TNF-α表达的影响。方法 50只SPF级8周龄雄性Apo E-/-小鼠予高脂饲料喂养随机分为5组:葛根素低、中、高剂量组分别给予葛根素300,600,1200 mg·kg-1·d-1灌胃;辛伐他汀组灌服辛伐他汀5 mg·kg-1·d-1;模型组灌服等剂量生理盐水。另设10只相同基因背景和周龄的雄性C57BL/6J小鼠为对照组予普通饲料喂养。16周后测小鼠体质量、血清脂质及visfatin、血浆IL-6及TNF-α含量;HE染色观察小鼠主动脉组织AS斑块面积;western blotting测小鼠主动脉visfatin蛋白的表达。结果各给药组小鼠体质量增加值、血清visfatin、TG、TC、LDL-C水平、血浆IL-6及TNF-α含量、主动脉visfatin蛋白表达均显著低于模型组(P0.05),血清HDL-C高于模型组(P0.05);辛伐他汀组、葛根素中、高剂量组小鼠主动脉AS斑块面积百分比显著低于模型组(P0.05)。结论葛根素可通过降血脂、减小AS斑块面积、降低IL-6及TNF-α含量等发挥抗AS效应,其机制可能与降低visfatin表达有关。     

丹蒌片抗痰瘀互结型动脉粥样硬化大鼠炎症反应及机制

目的观察丹蒌片对痰瘀互结型动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)大鼠炎症因子以及脂蛋白相关磷脂酶A2(lipoprotein-associated phospholipase A2,LP-PLA2)和分泌型磷脂酶A2(secretory phospholipase A2,s PLA2)表达的影响,分析其可能机制。方法 40只雄性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、西药组、丹蒌低剂量组(低剂量组)、丹蒌高剂量组(高剂量组),每组8只。正常组大鼠喂食基础饲料12周,余4组均采用高糖高脂饮食联合维生素D3腹腔注射复制大鼠痰瘀互结型AS模型。模型组、西药组、低剂量组、高剂量组分别给予生理盐水、阿托伐他汀钙混悬液[1.8 mg/(kg·d)]、丹蒌片低剂量[450 mg/(kg·d)]、高剂量混悬液[900 mg/(kg·d)]灌胃干预8周。观察大鼠一般情况。灌胃结束后,处死大鼠取血清,检测大鼠血清中TC、TG、HDL-C、LDL-C、IL-6、TNF-α、单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein,MCP-1)、氧化低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL)、LP-PLA2、s PLA2,HE染色观察大鼠胸主动脉病理学改变,Western blot和荧光定量PCR法分别检测大鼠胸主动脉内LP-PLA2、s PLA2蛋白及mRNA表达。结果与正常组比较,模型组大鼠精神萎靡,反应迟钝,胸主动脉可见典型的AS斑块,血清TC、TG、LDL-C、IL-6、TNF-α、MCP-1、ox-LDL、LP-PLA2、s PLA2水平升高(P0.05),胸主动脉LP-PLA2、s PLA2蛋白及mRNA表达升高(P0.05)。干预8周后,3个给药组大鼠均变活跃,胸主动脉HE染色见斑块消退。与模型组比较,3个给药组TC、TG、LDL-C、IL-6、TNF-α、MCP-1、ox-LDL、LP-PLA2水平降低(P0.01,P0.05),西药组血清s PLA2水平降低,大鼠胸主动脉LP-PLA2、s PLA2蛋白及mRNA表达降低(P0.01,P0.05);低剂量组胸主动脉LPPLA2蛋白及mRNA表达降低(P0.01,P0.05);高剂量组胸主动脉LP-PLA2、s PLA2蛋白及mRNA表达降低(P0.01,P0.05)。结论丹蒌片可能通过抑制LP-PLA2的表达,减少ox-LDL生成,从而发挥其抗炎、抗AS的作用。     

复方桂术胶囊对小鼠Lewis肺癌的抑制及TNF-α和IFN-γ的影响

目的 研究复方桂术胶囊对肺癌荷瘤小鼠肿瘤的抑制作用及细胞因子的影响.方法 以小鼠Lewis肺癌瘤株建立肺癌荷瘤动物模型,按分组给药10 d后解剖瘤体称瘤质量,采用ELISA双抗体夹心法,观察复方桂术胶囊灌胃肺癌荷瘤小鼠后血清中TNF-α及IFN-γ变化.结果 复方桂术胶囊高、中剂量组均有显著的抑瘤作用(P＜0.05),而低剂量组抑瘤作用则不显著(P＞0.05).中药高、中剂量组小鼠血清TNF-α均显著高于荷瘤模型组(P＜0.05),中药低剂量组血清TNF-α升高不显著(P＞0.05).而中药高、中、低剂量组血清INF-γ均显著低于正常动物组(P＜0.05),中药高剂量组小鼠血清IFN-γ极显著高于荷瘤模型组(P＜0.001),中药中剂量和低剂量组升高不显著(P＞0.05).结论 复方桂术胶囊对荷瘤肺癌小鼠具有抑瘤作用,并能提高其血清TNF-α和IFN-γ细胞因子的水平,从而提高荷瘤小鼠的免疫功能.     

参元丹含药血清对缺氧复氧心肌细胞自噬的影响

目的:观察参元丹含药血清对缺氧复氧心肌细胞自噬的影响,探讨参元丹心肌保护作用机制。方法:建立缺氧复氧心肌细胞损伤模型,采用免疫细胞化学法观察心肌细胞微管相关蛋白1轻链3(LC3)和磷酸肌醇-3-激酶(PI3K)表达,实时荧光定量PCR(Real-time PCR)法测定自噬相关基因(Beclin-1)和半胱天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)mRNA表达量。结果:与正常对照组相比,缺氧复氧组LC3和PI3K荧光表达增强,参元丹含药血清组与相应浓度空白血清组相比,细胞LC3和PI3K荧光表达强度减弱,其中参元丹含药血清10%组PI3K荧光强度明显降低,具有统计学意义(P0.05);缺氧复氧组细胞Beclin-1和Caspase-3 mRNA表达量明显升高,与相应浓度空白血清组相比,参元丹含药血清组Beclin-1 mRNA表达水平明显降低;参元丹含药血清5%组Caspase-3 mRNA表达量降低。结论:参元丹含药血清对缺氧复氧细胞自噬具有抑制作用,可能与抑制PI3K,下调Beclin-1和Caspase-3基因有关。     

瓜蒌薤白半夏汤对ApoE小鼠血脂代谢、氧化应激和主动脉Lox-1表达的影响

观察瓜蒌薤白半夏汤(GXBD)在调节血脂代谢、抗氧化、干预ox-LDL/Lox-1通路的作用,探讨其抗动脉粥样硬化(AS)的作用机制。以高脂饲料饲喂雄性Apo-E-/-小鼠42只,建立AS模型。AS模型小鼠随机分为模型组、辛伐他汀组、GXBD高、低剂量组,以C57BL/6J雄性小鼠作为正常对照组;每组10只,连续灌胃给药8周。末次给药后24 h,检测血清TC,TG,LDL-C,HDL-C及SOD,MDA,GSH-px,ox-LDL水平;HE染色观察主动脉组织结构变化,Western blot和PCR分别检测主动脉Lox-1蛋白表达和mRNA水平。结果显示模型组小鼠血脂指标含量及血清MDA,ox-LDL水平显著高于正常对照组,SOD,GSH-px显著低于正常对照组,主动脉Lox-1蛋白表达水平及其mRNA水平显著高于正常对照组(P0.05),模型组主动脉出现明显粥样硬化斑块;GXBD高、低剂量组和辛伐他汀组小鼠血脂指标含量及MDA,ox-LDL水平显著低于模型组,SOD,GSHpx显著高于模型组,主动脉Lox-1蛋白表达水平及其mRNA水平显著低于模型组(P0.05),主动脉组织粥样硬化病变明显减轻。说明调节血脂代谢,抗氧化、抑制Lox-1的表达、干预ox-LDL/Lox-1通路,可能是其抗AS的机制之一。     

参元丹治疗不稳定心绞痛的临床与实验研究

目的 :对比益气破血法组方的中药参元丹与合心爽治疗不稳定心绞痛 (UA)血瘀证的临床疗效 ;观察参元丹对去氧肾上腺素 (PHE)诱发家兔主动脉环组织痉挛的拮抗作用及其与血管内皮的关系。方法 :临床入选患者均为不稳定心绞痛常规药物治疗未能控制而住院的患者 ,符合WHO标准 ,并有心绞痛发作时心电图动态变化证据 ;维持原来抗心绞痛西药不变 ,随机分组 ;治疗组以参元丹煎剂治疗 ,对照组采用合心爽治疗。实验研究采用家兔离体主动脉环灌流的方法 ,以PHE诱发组织肌条痉挛 ,观察参元丹对PHE的拮抗作用及其是否具有动脉血管内皮依赖。同时观察参元丹拮抗PHE引起家兔主动脉环收缩的剂量反应关系。结果 :参元丹及合心爽对UA血瘀证患者均有较好的临床效果 ,两者在缓解心绞痛方面疗效相近 ,参元丹组在证候积分下降方面优于合心爽组。参元丹对内皮完整及去内皮家兔主动脉环PHE引起收缩均有拮抗作用 ,对内皮完整动脉环作用明显强于去内皮动脉环 ,其作用明显强于香丹注射液及黄芪注射液 ;此作用存在量效关系。结论 :参元丹治疗UA血瘀证方面可能独具优势 ,可以更好地提高UA血瘀证患者的生活质量。参元丹具有拮抗PHE引起的血管平滑肌收缩作用 ,可能是其重要的疗效基础 ,其作用部分需要内皮功能参与。     

白金丸水溶剂治疗高脂血症小鼠的实验研究

目的观察白金丸水溶剂对于高脂血症小鼠的治疗作用。方法将48只昆明种小鼠随机分为空白组、高脂模型组、白金丸高、低剂量组(6.4 g·kg~(-1),1.6 g·kg~(-1))、血脂康组(0.16 g·kg~(-1))、他汀组(0.0 026 g·kg~(-1))共6组,每组8只。空白组喂饲基础饲料,其余各组给予高脂饲料制备高脂模型。4周后,分别予以0.9%Na Cl溶液、白金丸高剂量水溶剂、白金丸低剂量水溶剂、血脂康、辛伐他汀灌胃给药,连续给药15 d,观察各组小鼠体质量、肝脏系数、血清总胆固醇(total cholesterol,TC)、三酣甘油(triglyceride,TG)、低密度脂蛋白(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)、高密度脂蛋白(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的含量变化。结果与空白组比较,模型组小鼠体质量与肝系数均显著提高(P0.05)。与模型组比较,白金丸水溶剂组能使小鼠体质量及肝系数降低(P0.05);白金丸高剂量组、白金丸低剂量组小鼠血清TG降低显著(P0.05),白金丸低剂量组小鼠血清LDL降低显著(P0.05),白金丸高、低剂量组小鼠血清HDL升高显著(P0.05);白金丸低剂量组小鼠肝匀浆中MDA含量降低显著(P0.05),白金丸高剂量组肝匀浆MDA含量降低极显著(P0.01)。与高脂模型组相比较,他汀组、白金丸低剂量组小鼠肝匀浆中SOD活性均升高显著(P0.05)。结论白金丸水溶剂能明显降低高脂血症小鼠体质量及肝系数,通过降低小鼠血清TG、LDL,提高血清HDL-C调节血脂代谢,同时降低肝脏MDA,升高SOD活性。     

三合饮对AS模型小鼠主动脉斑块形成的影响及其作用机制的实验研究

目的:探究三合饮调控巨噬细胞稳定动脉粥样硬化(AS)斑块机制。方法:取ApoE基因敲除小鼠(ApoE-/-),高脂饲料喂养建立AS模型,随机分为AS组,三合饮低、中、高剂量组(7.5、15、30 g/kg)和阿托伐他汀组(3 mg/kg),取C57BL/6J小鼠作正常组;各组连续给药4周。采用油红O染色评估小鼠主动脉斑块面积,双抗夹心ELISA检测小鼠血清白细胞介素18(IL-18)和白细胞介素1β(IL-1β),免疫荧光检测主动脉NOD样受体蛋白3(NLRP3)和巨噬细胞抗体2(MOMA-2)表达和共定位情况。结果:与正常组比较,AS组小鼠主动脉斑块面积占比明显增加,血清IL-18、IL-1β、主动脉NLRP3、MOMA-2及共表达荧光活性明显升高(P<0.05);与AS组比较,三合饮中、高剂量组和阿托伐他汀组斑块面积占比明显减少,IL-18、IL-1β、NLRP3、MOMA-2及共表达荧光活性明显降低(P<0.05),上述指标变化以三合饮高剂量组效果最显著。结论:三合饮可能通过调节NLRP3表达、减少巨噬细胞稳定AS斑块。