P27基因参与子痫前期发生机制的研究进展

子痫前期(pre-eclampsia,PE)是妊娠期特发疾病,其发生与发展是导致母儿患病率、死亡率增加的重要原因,胎盘中滋养细胞正常的增殖、迁移与分化与其关系密切。P27作为细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂(cyclin dependent kinase inhibitors,CKIs),与细胞周期因子结合调控细胞周期。与正常孕妇相比,PE患者胎盘滋养细胞中P27基因的表达明显增加,这可能与滋养细胞的增殖及侵入障碍有关。P27蛋白与不同蛋白质结合发挥不同作用,其调节主要依靠翻译后修饰及亚细胞定位。Nodal作为转化生长因子β(transforming growth factor β,TGF-β)的成员,在滋养细胞中通过多种机制上调P27 mRNA和蛋白水平,提高了P27蛋白的稳定性并在S10处诱导了P27蛋白的磷酸化,促使P27蛋白和CDK2向细胞质的转移,且加强P27/CDK2/CDK5/Stathmin的结合,从而抑制了细胞增殖、迁移及侵袭。P27蛋白在许多位点被磷酸化,氧化应激、蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)、蛋白O-岩藻糖基转移酶1(protein O-fucosyltransferase 1,poFUT1)、磷酸果糖-2-激酶/果糖-2,6-二磷酸酶(PFKFB1-4)等通过使P27蛋白磷酸化,影响其泛素-蛋白酶体降解途径调节细胞周期进程。     

MAPK1/ERK2通过SRF调控中性粒细胞弹性蛋白酶分泌在子痫前期发病中的研究进展

子痫前期是一种累及全身多脏器的妊娠期特发性疾病,是导致孕产妇及围生儿死亡的主要原因。发病机制包括过度氧化应激、炎症免疫过度激活、内皮细胞功能障碍等,其中中性粒细胞过度活化释放弹性蛋白酶,导致血管内皮细胞损伤是关键环节。研究发现子痫前期患者中性粒细胞中丝裂原活化蛋白激酶1(MAPK1)及中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)水平显著升高。血清反应因子(SRF)是MAPK1途径下游靶蛋白,使活化的中性粒细胞黏附和迁移,导致内皮细胞损伤。MAPK1可能通过调控SRF从而导致中性粒细胞过度活化释放NE从而参与子痫前期的发病。本文将对MAPK1通过SRF调控NE分泌的相关作用机制进行综述。     

血管内皮祖细胞在子痫前期中的作用

子痫前期是妊娠期的严重并发症,除了提前终止妊娠外尚无有效的治疗方法,其病因及发病机制尚不清楚,但血管内皮细胞损伤是子痫前期发病的关键因素之一。血管内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)是血管内皮细胞的储备形式,当血管内皮细胞受损时,机体发生一系列变化以诱导募集EPCs至损伤部位,修补受损的血管内皮。但在子痫前期患者体内,损伤的血管内皮不能及时得到修复,推测子痫前期患者体内的EPCs在功能或数量上存在异常;与此同时EPCs移植可能成为治疗子痫前期的一种新方法。综述EPCs与子痫前期的关系,概括EPCs的调节因素,论述EPCs移植治疗子痫前期的可能性,以寻找预防和治疗子痫前期的新方法。     

跨膜型血管内皮生长因子受体1在子痫前期患者胎盘组织中的表达及其意义

目的研究跨膜型血管内皮生长因子受体1(Flt-1)在子痫前期患者胎盘组织中的表达变化及其意义。方法采用RT-PCR方法检测20例子痫前期患者(观察组)胎盘组织中Flt-1mRNA的相对表达量[以Flt-1与β肌动蛋白(β-actin)电泳条带吸光度(A)值的比值表示],并以20例正常孕妇(对照组)为对照;采用蛋白印迹(westernblot)法检测和比较两组各18例胎盘组织中Flt-1的蛋白相对表达量[其余4例标本因蛋白提取不理想而废弃,以Flt-1与磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)电泳条带A值的比值表示]。结果两组孕妇胎盘组织中均有Flt-1的表达,观察组孕妇胎盘组织Flt-1mRNA相对表达量为2·25±0·19,对照组为1·23±0·29,两组比较,差异有统计学意义(P<0·05);观察组孕妇胎盘组织Flt-1蛋白相对表达量为2·67±1·19,对照组为0·94±0·51,两组比较,差异也有统计学意义(P<0·05)。结论Flt-1可能参与了子痫前期的病理生理过程。     

可溶性血管内皮生长因子受体1在子痫前期患者胎盘组织中的表达及意义

目的探讨可溶性血管内皮生长因子受体1(sFlt-1)在子痫前期患者胎盘组织中的mRNA及蛋白表达水平变化及其意义。方法(1)采用免疫组化方法及RT-PCR技术分别检测30例子痫前期患者(子痫前期组,其中轻度子痫前期11例,重度子痫前期19例)及45例健康孕妇(对照组,其中早期妊娠18例、中期妊娠12例、晚期妊娠15例)胎盘组织中sFlt-1的蛋白及mRNA表达水平。(2)采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定各组孕妇血清中血管内皮生长因子(VEGF)及sFlt-1水平。结果(1)子痫前期组胎盘组织中sFlt-1 mRNA表达水平为0．90±0．11,对照组晚期妊娠妇女为0．80±0．06,两者比较,差异有统计学意义(P<0．01)。子痫前期组重度患者为0．93±0．12,子痫前期组轻度患者为0．85±0．05,两者比较,差异也有统计学意义(P<0．05)。(2)sFlt-1蛋白在子痫前期组患者胎盘组织中的表达水平为0．156±0．008,对照组中晚期妊娠妇女为0．143±0．009,两者比较,差异有统计学意义(P<0．01);子痫前期组重度患者sFlt-1蛋白表达水平为0．159±0．008,子痫前期组轻度患者为0．151±0．005,两者比较,差异也有统计学意义(P<0．05)。(3)子痫前期组孕妇血清VEGF、sFlt-1水平分别为(19．3±2．9)ng／L、(30．2±13．7)μg／L,对照组晚期妊娠妇女为(30．2±3．1)ng／L、(7．4±3．1)μg／L,两者比较,差异有统计学意义(P<0．01)。(4)对照组孕妇血清sFlt-1水平与胎盘sFlt-1蛋白及mRNA表达水平呈正相关关系(r=0．439,P<0．01;r=0．314,P< 0．05);子痫前期组孕妇血清sFlt-1水平与胎盘sFlt-1蛋白及mRNA表达水平也呈正相关关系(r= 0．383,r=0．372;P均<0．05)。结论子痫前期患者胎盘组织中sFlt-1 mRNA表达水平上调及sFlt-1蛋白过度表达,可引起循环中sFlt-1水平升高,从而参与子痫前期的病理生理过程。     

生物活性因子在妊娠期高血压疾病发病机制中的作用

妊娠期高血压疾病(hypertensive disorder complicating pregnancy,HDCP)是妊娠和高血压并存的一组疾病,是严重的妊娠期并发症,病因和发病机制目前尚未完全阐明.目前研究认为内在遗传因素与外在环境因素相互作用导致胎盘缺氧缺血是HDCP发病的主要机制.胎盘缺血缺氧促进生物活性因子释...     

早发型子痫前期胎盘细胞侵袭相关信号通路表达及其交互作用的研究

目的：探讨细胞侵袭相关Notch1及Wnt1信号通路在早发型子痫前期患者胎盘组织中的表达以及两者的交互作用。方法：收集2016年6月—2017年12月郑州人民医院收治的176例早发型子痫前期患者（轻度组102例、重度组74例），同期60例健康孕妇为对照组。收集所有研究对象分娩后的胎盘组织样本，通过免疫组织化学法检测组织Notch1及Wnt1蛋白的表达，Western blotting检测Notch1、Jagged1、Wnt1及β-catenin蛋白表达水平，并对各蛋白表达水平进行相关性分析。结果：3组Notch1及Wnt1表达强度和阳性表达率差异均有统计学意义（P＜0.05）；轻度组和重度组Notch1及Wnt1阳性表达率低于对照组，重度组阳性表达率低于轻度组（P＜0.05）。3组Notch1、Jagged1、Wnt1及β-catenin蛋白表达水平差异有统计学意义（P＜0.05）；轻度组及重度组Notch1、Jagged1及Wnt1蛋白表达水平均低于对照组，重度组β-catenin表达水平低于对照组，且重度组Notch1、Jagged1及Wnt1及β-catenin均低于轻度组（均P＜0.05）。Notch1与Jagged1（r=0.826，P=0.000）、Wnt1与β-catenin（r=0.531，P=0.000）表达水平呈正相关，Wnt1与Notch1（r=－0.167，P=0.010）、Wnt1与Jagged1（r=－0.136，P=0.037）表达水平呈负相关。结论：Notch1及Wnt1低表达与早发型子痫前期的发生、发展相关，且在该过程中Notch及Wnt信号通路之间可能存在一定的交互作用。     

sFlt-1及PLGF与子痫前期发病的关系

可溶性血管内皮生长因子受体1 (sFlt-1)与Flt-1均属于血管内皮生长因子受体(VEGFR),其与Flt-1竞争结合VEGF,完全阻断VEGF的生物学活性,引起血管生成障碍并影响血管壁的完整性和通透性.胎盘生长因子(PLGF)是VEGF家族成员之一,PLGF与Flt-1受体结合时,发挥促血管生成和促绒毛滋养细胞增殖、浸润的效应,而这些生物学功能均可被sFlt-1阻断,且sFlt-1对PLGF具有强效的拮抗作用,调节PLGF的功能.在子痫前期妊娠妇女血清中sFlt-1的水平升高,早于疾病的发生.子痫前期患者血浆中PLGF的水平降低.sFlt-1在子痫前期发生发展过程中的作用可能与磷酯酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(P13K/Akt)信号转导通路有关.联合测定妊娠妇女血PLGF、sFlt-1预测子痫前期的发生,有较高的敏感度及特异度.     

胎盘蛋白13对子痫前期早期预测及治疗的价值

子痫前期是指妊娠20周后,以高血压和蛋白尿为主要临床表现的妊娠相关疾病,目前仍是威胁全球母婴结局的主要原因。若该疾病不加以控制可导致母体HELLP综合征、子痫、胎盘早剥等并发症,部分可致胎儿生长受限,甚至引起胎死宫内等严重不良妊娠结局,但当前尚无有效的生物标志物对子痫前期进行早期预测。多数学者认为,子痫前期是以胎盘受损为主要原因的多因素综合作用的结果,考虑胎盘蛋白13（placental protein 13,PP13）作为胎盘特异性蛋白之一,在胎盘滋养细胞中高度表达,故结合国内外最新文献,通过对PP13及其在母体妊娠生理和子痫前期发生发展过程中的作用,探讨PP13作为子痫前期早期预测的潜在标志物及其在靶向治疗方面的应用前景。     

p38丝裂原活化蛋白激酶信号分子在子痫前期患者血管内皮细胞损伤中的作用

目的 探讨p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号分子在子痫前期患者血管内皮细胞损伤中的作用.方法选择2009年9月至2010年3月在重庆医科大学附属第一医院住院分娩的足月产妇54例为研究对象,其中36例为子痫前期患者,按病情分为子痫前期轻度组(20例)、子痫前期重度组(16例);同期足月择期剖宫产孕妇为对照组(18例).采用CD34标记血管内皮细胞,计数各组胎盘微血管密度(MVD);SP法检测磷酸化的p38 MAPK(p-p38 MAPK)在胎盘组织中的定位;蛋白印迹法检测各组胎盘p38 MAPK及p-p38 MAPK的蛋白表达差异;双抗体夹心ELISA法检测各组血清中可溶性血管内皮生长因子受体1(sFlt-1)及可溶性内皮糖蛋白(soluble endoglin,sEng)的水平.结果 (1)MVD:对照组、子痫前期轻度组及子痫前期重度组患者胎盘MVD分别为103±3、81±5、63±4,各组间两两比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).(2)p38 MAPK和p-p38 MAPK蛋白表达水平:对照组、子痫前期轻度组及子痫前期重度组患者胎盘组织p38 MAPK蛋白表达水平分别为0.84±0.05、0.90±0.14、0.86±0.18,各组间两两比较,差异均无统计学意义(P＞0.05);p-p38 MAPK蛋白的表达水平分别为0.13±0.05、0.59±0.12和1.16±0.18,各组间两两比较差异均有统计学意义(P＜0.05).(3)p-p38 MAPK蛋白的表达部位:p-p38 MAPK蛋白主要表达于胎盘滋养层细胞的胞质及胞核、血管内皮细胞及少量间质细胞的胞核.(4)sFlt-1及sEng的水平:①对照组孕妇血清sFlt-1、sEng水平分别为(5.2±0.3)、(10.9-±0.4)μg/L;子痫前期轻度组分别为(12.5±1.2)、(20.4±5.3)μg/L;子痫前期重度组分别为(19.3±3.0)、(29.5±3.7)μg/L;各组sFlt-1、sEng水平两两比较,差异均有统计学意义(P＜0.05);②p-p38 MAPK蛋白表达水平与血清sFlt-1、sEng水平的相关性:子痫前期重度组和子痫前期轻度组p-p38 MAPK蛋白表达水平与血清sFlt-1、sEng水平均呈明显正相关(r=0.68,P＜0.05;r=0.87,P＜0.05).结论 子痫前期患者胎盘组织中p38 MAPK信号分子的显著活化,使血清中sFlt-l、sEng水平升高,损伤胎盘血管内皮细胞,导致胎盘MVD降低;p38 MAPK信号分子可能是子痫前期患者血管内皮细胞损伤的关键信号传导通路之一.

Abstract：

Objective To study expression and activation of p38 mitogen activated protein kinase (MAPK) in vascular endothelial cells dysfunction in preeclampsia. Methods From Sept. 2009 to Mar.2010, 54 pregnant women underwent deliveries in the First Affiliated Hospital of Chongqing Medical University were enrolled in this study, including 20 patients in mild preeclampsia group, 16 patients in severe preeclampsia group and 18 women with term cesarean section without perinatal complications as control group. Placental endothelial cells were labeled by CD34 to assay microvessel density (MVD) of each group. Immunohistochemical SP and western blot were used to detect localization and expression of p-p38 MAPK protein, respectively. The levels of sera soluble fms-like tyrosine kinase-1 (sFlt-1)and soluble endoglin(sEng) were measured by ELISA. Results ①The MVD of placenta were 103 ± 3 in control group, 81 ±5 in mild preeclampsia group and 63±4 in severe group, respectively, which showed statistical difference among each group (P＜0.05).②The expression of p38 MAPK protein were 0.84±0.05 in control group,0.90±0.14 in mild group and 0. 86 ±0.18 in severe group, which did not reach remarkable difference among each group (P＞0.05). The expression of p-p38 MAPK protein were 0.13±0.05 in control group,0.59±0.12 in mild group and 1.16±0.18 in severe group, which show statistical difference among each group(P＜0.05).(3) The localization of p-p38 was in trophoblast, endothelial cells and a few (5.2±0.3)and(10.9±0.4)μg/L in control group,(12.5±1.2) and (20.4±5.3)μg/L in mild group and (19.3±3.0) and (29. 5 ±3.7) μg/L in severe group. When drawing paired comparison in those p-p38 MAPK protein levels and the concentrations of serum sFlt-1, sEng in preeclampsia groups (r=0.68,P＜0.05;r=0.87,P＜0.05). Conclusions The remarkable activation of the p38 MAPK in the placenta of patients with preeclampsia induced the increased levels of sFlt-1 and sEng in maternal serum, which confer the injury of vascular endothelial cells that caused the significant decline of MVD in placentas. p38 MAPK signaling might be one of the key pathways in vascular endothelial cell dysfunction in preeclampsia.     

血管损伤因子与子痫前期发病机制的研究

子痫前期是妊娠妇女和围生儿死亡的主要原因之一,迄今病因仍未明了。目前研究认为,内皮细胞损伤、血管生成抑制和血管间炎症在其发病中起重要作用。一些胎盘及血管源性循环因子的释放,包括血管内皮生长因子、可溶性血管内皮生长因子-1、血管紧张素Ⅱ受体1的自身抗体及肿瘤坏死因子-α、白细胞介素1(IL-1)和IL-6、正五聚蛋白3等通过不同途径引起母体血管内皮广泛损伤及全身性炎症反应;血管舒缩因子失衡,例如一氧化氮(NO)、前列环素及肾上腺髓质素等血管舒张因子表达减少,而内皮素、血管紧张素Ⅱ等血管收缩因子表达增加也可导致血管功能紊乱。其中某些标记物还可作为子痫前期发病的预测指标。     

子痫前期患者胎盘组织中松弛素受体的表达

目的 探讨子痫前期患者胎盘组织中松弛素受体LGR7表达与子痫前期发病的关系.方法 应用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连接法和RT-PCR技术检测20例正常孕妇(正常组)及26例重度子痫前期孕妇(子痫前期组)胎盘组织中松弛素受体LGR7蛋白及mRNA的表达.结果 (1)两组孕妇的胎盘组织中均有松弛素受体LGR7表达,主要定位于胎盘绒毛滋养细胞的细胞膜上,在细胞滋养细胞、合体滋养细胞中都有较高的表达水平.(2)正常组胎盘组织中松弛素受体LGR7蛋白的表达水平为0.912±0.003,子痫前期组为0.625±0.037,两组比较,差异有统计学意义(P＜0.01).(3)正常组胎盘组织中松弛素受体LGR7 mRNA表达水平为0.776±0.021,子痫前期组为0.393±0.075,两组比较,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 子痫前期患者胎盘组织中松弛素受体表达水平下降,可能与子痫前期的发病有关.     

滋养细胞凋亡的二阶段与子痫前期二阶段发病机制关系的探讨

子痫前期是产科的严重并发症,不仅影响孕产妇健康,而且影响后代远期预后,发病原因至今不清。该病是胎盘源性疾病,其发生发展可分为两个阶段：第1阶段为病理生理变化形成过程,以滋养细胞浸润异常,螺旋动脉重铸不良,胎盘血流灌注减少为特点;第2阶段为器官受损阶段,导致各种临床征象发生。滋养细胞凋亡在子痫前期发病中起重要作用,细胞凋亡失衡可导致其侵袭能力异常。在子痫前期发病的不同阶段,滋养细胞凋亡的机制也不同。总结相关文献发现,第1阶段为蜕膜自然杀伤细胞及诱导绒毛外滋养细胞凋亡引起螺旋动脉重铸不足的阶段,第2阶段为螺旋动脉重铸不足引起胎盘缺血缺氧导致合体滋养细胞凋亡的阶段。其相关的机制有待进一步研究。     

血管内皮生长因子与EMs发病机制及治疗

子宫内膜异位症（endometriosis,EMs）是一种病因未明,处理棘手,严重危害妇女健康的疾病。异位内膜的种植和增殖必需有新生血管的形成。在血管形成中血管内皮生长因子（VEGF）起关键作用,因此VEGF与EMs的关系受到重视。目前VEGF基因启动子区多态性与EMs发病关系及采用抗VEGF治疗EMs是研究的热点。5′未翻译区和3′未翻译区均有多个多态性位点,其中以-2578～C,＋405G/C,-460T/C和＋936C／T最具代表性,其对VEGF基因启动子的活性有很大影响,并可能改变VEGF的量。很多实验证明,针对VEGF及其受体的药物,如抗VEGF抗体等能有效抑制EMs发展。为EMs诊断和治疗提供新的思路。