HPLC同时测定冬虫夏草中腺苷、虫草素和麦角甾醇

目的:建立同时测定冬虫夏草药材中腺苷、虫草素和麦角甾醇的方法。方法:Diamosil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相甲醇-水梯度洗脱,体积流量1.0 mL.min-1,柱温30℃,进样量10μL,检测波长260 nm。结果:腺苷、虫草素和麦角甾醇分别在0.032 2～0.805,0.015 4～0.385,0.084 3～2.107 5μg线性关系良好,回归方程分别为Y=2 573X+0.737 8;Y=2 631X+0.624 4;Y=2 315X+0.482 9,平均加样回收率分别为98.94%(RSD 1.16%),99.73%(RSD 2.19%),99.55%(RSD 2.02%)。结论:该方法准确性高,重复性好,可作为冬虫夏草药材的质量控制方法。     

RP-HPLC法测定不同北虫草子实体和培养基中腺苷和虫草素含量的比较

目的:比较九种北虫草子实体以及3种培养基中腺苷和虫草素的含量。方法:超声水提法提取样品中腺苷和虫草素,用RP-HPLC法测定其含量。结果:九种北虫草子实体腺苷和虫草素含量都存在差异,腺苷含量为(1.054±0.259)-(2.931±0.356)mg·g-1;虫草素含量差异较大,为(0.435±0.016)-(4.981±0.212)mg·g-1。3种不同培养基中虫草素和腺苷也存在差异,其中3号培养基虫草素含量最高,达1.046 mg·g-1,1号培养基腺苷最高,为0.612 mg·g-1。结论:九种北虫草子实体腺苷和虫草素含量差异较大;三种培养基中腺苷和虫草素含量也存在差异。     

RP-HPLC法测定北虫草中腺苷、虫草素含量

目的:采用RP-HPLC法测定不同基地、不同批次的北虫草子实体中腺苷、虫草素含量。方法:Agela-C18色谱柱,流动相为Na2HPO4-NaH2PO4缓冲液(pH=6.5)-甲醇(17∶3),流速1.0 ml/min,检测波长260 nm,柱温20℃。结果:小麦基质培养的北虫草中腺苷平均含量最高,虫草素含量二者相差甚微。结论:以小麦为基质培养的北虫草质量较好。     

HPLC法测定蛹虫草中腺苷和虫草素的含量

目的建立HPLC法测定蛹虫草中腺苷和虫草素的含量。方法采用SinochromODS Cl8柱,以磷酸盐缓冲液-甲醇(85:15)为流动相;流速为1.0 mL·min-1;检测波长为260 nm。结果腺苷在8.92~44.6μg·mL-1范围内线性关系良好,r=0.999 9;虫草素在6.23~31.15μg?mL-1范围内线性关系良好,r=0.999 9;腺苷平均加样回收率为97.80%,RSD为1.1%(n=5)。虫草素平均加样回收率为97.46%,RSD为1.5%(n=5)。结论本法专属性强,准确度高,重现性好,可作为蛹虫草质量控制的方法。     

HPLC-ESI-MS测定冬虫夏草和蚕蛹虫草中腺苷和虫草素含量

目的 :建立测定冬虫夏草及蚕蛹虫草中腺苷和虫草素的方法。方法 :HPLC-ESI-MS法 ,用甲醇为提取溶剂 ,采用选择性离子检测 (SIM)和电喷雾离子化 (ESI) ;色谱条件 :ShimadzuVP-ODS色谱柱 ;流动相水 甲醇 甲酸(94∶5∶1) ,以 2 氯腺苷为内标。结果 :腺苷回归方程Y=0 .1346X +0.0129,r=0.9984 ,线性范围 0.5～124.5mg·L^-1;虫草素回归方程Y=0.2164X +0.0215 ,r=0.9991,线性范围 0.5～ 136 .5mg·L^-1;腺苷和虫草素加样回收率分别为 95 .8%及 98.1%。结论 :方法灵敏、快速和选择性好 ,可用于冬虫夏草及其代用品中腺苷和虫草素的分析及质量控制。     

RP-HPLC测定人工虫草和天然虫草中麦角甾醇含量

目的建立反相高效液相色谱法测定人工虫草和天然虫草中麦角甾醇的含量。方法采用Diamonsil C18(2)色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-水(98∶2),检测波长280 nm,柱温25℃,流速1.0 mL/min。结果麦角甾醇进样量在0.197 7~3.954 9μg范围内与峰面积呈良好线性关系(r=1.000),平均加样回收率为99.51%,RSD=0.56%(n=9)。结论本方法操作简便、灵敏、准确,具有良好的重复性和稳定性,适用于人工虫草和天然虫草中麦角甾醇的含量测定。     

新疆虫草与冬虫夏草中腺苷和虫草素的HPLC法测定比较

目的：建立测定虫草类药材腺苷和虫草素含量的HPLC方法,比较新疆虫草和不同地区冬虫夏草中腺苷和虫草素的含量差异。方法：采用反相高效液相色谱法,色谱柱：DikmaTM C18（4.6mm×250mm,5μm）;流动相：甲醇-水（15：85）;柱温为30℃,流速：1.0ml/min;检测波长：260nm。结果：新疆虫草和冬虫夏草中均含有腺苷和虫草素,其中新疆虫草中腺苷含量为237.7μg/g,介于3个冬虫夏草样品（145.2～307.4μg/g）之间;虫草素含量为38.9μg/g,明显高于冬虫夏草（4.2～11.3μg/g）的3～10倍左右。结论：本方法具有简便、快捷、准确等特点,适用于虫草类药材中腺苷和虫草素含量的测定,本研究提示新疆虫草可作为冬虫夏草新资源。     

高效液相色谱法测定人工虫草菌丝中腺苷和虫草素的含量

为定量测定蛹虫草菌丝体中腺苷和虫草素的含量，用ＹＷＧＣ_１８不锈钢柱，磷酸二氢钠氢氧化钠缓冲液（ｐＨ６.８，加１％四氢呋喃）为流动相，高效液相色谱法同时分离和测定了人工蛹虫草菌丝中腺苷和虫草素，并考察了提取方法。二组分的线性关系良好，回收率满意。     

高效液相色谱法测定蝉花中腺苷的含量

蝉花(Cordyceps Cicadae)是我国珍贵药材之一,具有镇静、镇痛、解热等功效[1],蝉花中的腺苷具有降低血压、减慢心率等作用[2].现报告蝉花中腺苷含量的测定方法如下. 1 仪器、样品与试药 1.1 仪器 Waters 510 高效液相色谱仪,484 型紫外检测器,岛津 C-R4A 数据处理器.CQ 250 型超声波清洗器. 1.2 实验材料蝉花(经浙江省药品检验所鉴定);腺苷对照品(英国 BDH 公司);其他试剂皆为分析纯.     

HPLC测定不同产地山药中腺苷含量

目的:分析不同产地的山药中腺苷的含量,为山药质量标准的建立提供参考。方法:采用高效液相色谱法,SunFire C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);磷酸盐缓冲液(pH 6.5)-甲醇(85∶15)为流动相,流速1.0 mL.m in-1;检测波长260 nm。结果:10批不同产地山药中腺苷含量介于0.035 9～0.104 0 mg.g-1。结论:该方法操作简便,结果稳定可靠,可用于山药的质量评价。     

不同产地芜花药材中芜花酯甲含量比较

芫花药材来源于瑞香科植物芫花Daphne genkwa sieb．et Zucc的干燥花蕾，为传统的峻下逐水药，具有泻水逐饮、解毒杀虫的功效。本品有毒，始载于《神农本草经》，列为下品，传统认为有“毒鱼”作用，炮制时要求“不可近眼”。其所含刺激性油状物为毒性部位，主要含二萜原酸酯类成分（芫花酯甲等）。     

储存时间对腺苷和虫草素在柞蚕蛹虫草中分布和含量的影响

目的:研究储存时间对腺苷和虫草素在柞蚕蛹虫草中分布和含量的影响。方法:采用RP-HPLC法分别测定柞蚕蛹虫草子实体、菌核及整草中腺苷和虫草素含量,并与相同储存时间的米饭虫草进行比较。结果:储存1年的柞蚕蛹虫草腺苷和虫草素的含量顺序为子实体菌核;总量顺序为菌核子实体。储存2年的柞蚕蛹虫草腺苷和虫草素含量有所降低,其分布规律以及总量顺序没有明显变化。储存1年的柞蚕蛹虫草中腺苷总含量高于2年的,差异有统计学意义(P0.05),但其虫草素的含量差异无统计学意义(P0.05)。米饭虫草中腺苷含量是柞蚕蛹虫草的1.6倍,虫草素的含量是柞蚕蛹虫草5倍。结论:储存时间对腺苷和虫草素分布规律以及总量顺序无明显影响,但对其腺苷总含量有明显影响。     

不同产地冬虫夏草腺苷含量的测定

目的 :评价不同产地冬虫夏草的药材内在质量。方法 :以腺苷含量作为评价冬虫夏草内在质量的主要指标 ,以高效液相法测定来源于 13个产地的优质冬虫夏草的腺苷含量。结果 :13个产地冬虫夏草的腺苷含量为0.1425～0.396 6mg·g^-1,其中藏草腺苷含量高于川草 ;在川草中 ,炉草腺苷含量高于滇草 ,灌草最低。结论 :产地不同 ,冬虫夏草的腺苷含量不同。在商品虫草两大类型 (道地品牌 )中 ,藏草优于川草 ,川草中又以炉草为胜。     

PCR-DGGE法分析不同产地蝉花真菌多样性

目的:采用PCR-DGGE的方法对安徽、江苏、四川、广西等10个产地蝉花的真菌多样性进行分析,以期获得蝉花优势寄生真菌。方法:通过提取样品总DNA,采用真菌通用引物NS1、Fung扩增18S rDNA,将PCR产物DGGE电泳后,对16个差异性条带进行了切胶回收、克隆测序以及BLAST数据库比对验证;对不同产地蝉花的电泳图谱进行了相似度以及多样性指数分析。结果:广西玉林产地蝉花的条带数最多为16条,H=2.679;四川北川、四川绵阳、广东河源3个产地的蝉花真菌多样性相似度较高。结论:克隆测序结果表明共有条带3和9代表的真菌为不同产地蝉花的优势寄生真菌蛹虫草Cordyceps militaris;除了3种未获得纯培养的节担菌纲和真核细胞外,其余的为Eurotium athecium、Magicicada cassini、Myrothecium roridum、Aspergillus penicillioides等菌。     

不同采收时期雪峰虫草中腺苷含量的动态变化

目的:通过研究不同采收期雪峰虫草腺苷含量的动态变化,为确定雪峰虫草的最佳采收期提供科学依据。方法:采用高效液相色谱法,以C18柱,磷酸盐缓冲液(PH6.5)-甲醇(85∶15)为流动相;在260 nm波长处测定不同采收期雪峰虫草中腺苷的含量。结果:不同时期采收的雪峰虫草中腺苷含量存在差异,以8~12月份较高。结论:确定8~12月为雪峰虫草的最佳采收期。     

不同产地和商品等级延胡索中尿苷、鸟苷、腺苷的含量分析

目的:建立高效液相色谱法同时测定延胡索药材中尿苷、鸟苷和腺苷3种核苷成分含量的方法,并比较不同产地、不同商品等级中3种核苷类成分含量的差异和各成分间的结构比。方法:采用Venusil MP C18(2)色谱柱(4.6 mm×250mm,5μm),以甲醇(A)-水(B)为流动相梯度洗脱(0~10 min,1%~5%A;10~15 min,5%~15%A;15~22 min,15%~17%A;22~26 min,17%~20%A;26~32 min,20%~24%A),流速1.0 m L·min-1,柱温35℃,检测波长260 nm。运用上述方法对38批延胡索药材进行测定,并对测定结果进行聚类分析。结果:测定了延胡索药材中3种核苷类成分的含量,在线性范围内线性关系良好(r0.999 8),平均回收率为99.63%~104.24%,RSD为0.7%~2.3%。38批延胡索样品中尿苷、鸟苷和腺苷均可检测到,不同产地延胡索药材中尿苷、鸟苷、腺苷量及组成结构比差异显著;同一产地不同种植户的延胡索药材其3种成分量及组成结构比也存在明显差异。采用聚类分析能将不同产地的38批延胡索药材分为3类。结论:总体上来说,不同产地延胡索药材成分的组成存在显著性差异,不同商品等级延胡索中核苷类含量无明显差异,延胡索药材的质量受自然环境、栽培技术因素的影响。该方法适用于延胡索中尿苷、鸟苷和腺苷的含量测定,为其质量控制提供保证。     

不同产地、不同采收期猪苓中麦角甾醇及多糖动态变化研究

目的测定不同产地、采收期猪苓麦角甾醇及多糖的含量,根据含量的差异及动态变化得到最佳猪苓产地及最佳猪苓采收期。方法以葡萄糖为对照品,采用紫外-分光光度计法测定不同采收期猪苓中多糖的含量,并采用HPLC法测定其中麦角甾醇含量。结果不同产地猪苓中麦角甾醇和多糖含量差异较大,其中吉林长白山栽培猪苓的含量高于其他产地,为0.45%和2.19%;9个不同采收期吉林长白山猪苓的含量测定结果显示,麦角甾醇和多糖含量在5月末达到峰值0.26%和2.1%。结论吉林长白山猪苓质量较好,吉林长白山猪苓5月末药材质量较佳,与传统采收期相符。此方法简便、灵敏、准确,为寻找最佳猪苓产地及猪苓最佳采收期提供了科学依据。     

蝉花与有关虫草活性成分检测比较

目的:测定蝉花的虫草活性成分,并与冬虫夏草和蛹虫草作比较。方法:分别采用高效液相色谱法、3,5-二硝基水杨酸比色法和高碘酸钠比色法测定3种虫草样品的腺苷和虫草素、虫草多糖以及虫草酸含量。结果:经测定,蝉花中含虫草素0.02mg·g-1,腺苷1.90mg·g-1,虫草多糖94.88mg·g-1,虫草酸78.57mg·g-1,其中虫草酸和腺苷含量高于冬虫夏草,多糖和虫草酸含量高于蛹虫草。结论:蝉花中的虫草活性成分不亚于冬虫夏草和蛹虫草,属于优质虫草,值得进一步研究和推广。     

民族药石花中松萝酸在不同产地的含量比较

目的：采用高效液相色谱法,建立民族药石花中松萝酸的含量测定方法,明确不同产地石花中松萝酸的含量,对其进行质量评价。方法：采用Venusil MP C₁₈柱(4.60 mm×300 mm,5μm),流动相为乙腈-0.5%乙酸水溶液(78∶22),流速为1.0 mL/min,柱温30℃,紫外检测波长254 nm,进样量10μL。结果：松萝酸浓度在0.21～4.2 mg/mL范围内与峰面积有良好的线性关系,平均回收率为99.16%,RSD=1.3%(n=6)。不同产地石花药材中松萝酸含量差异较大。结论：该方法准确、简便,对石花药材中有效成分松萝酸进行含量测定对于保证其质量和临床疗效具有重要意义。     

HPLC法测定虫草中腺苷的含量

目的:建立高效液相色谱(HPLC)法测定虫草中腺苷的含量。方法:采用ZORBAX SB-C_(18)(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,流动相:乙腈-水(10:90,V/V),检测波长:260nm,柱温:30℃,流速:1.0mL/min。结果:腺苷的线性范围2.0~100μg/mL,r=0.99996,腺苷的加标平均回收率为98.2%,最低检出限为0.45μg/mL(S/N=3)。结论:本方法简单,灵敏,重现性好,结果准确,适合虫草中腺苷的含量检测。