替考拉宁的分离纯化

目的 优化替考拉宁纯化工艺,制备纯度高、满足欧洲药典标准的替考拉宁。方法 采用大孔树脂吸附、结晶等技术分离替考拉宁,结合二元液相色谱系统,以聚合物微球为载体,对填料的型号和洗脱条件进行优化,最终得到高质量替考拉宁样品。结果 PS30-300微球为最佳纯化介质,洗脱剂为65%甲醇-水,上样量为10mg/mL填料,洗脱流速为1.5~2.0BV/h柱体积时洗脱效果最佳。在此实验条件下产品纯度≥99%,纯化收率≥75%。结论 该分离纯化方法简单,快速,易于操作,适于工业化生产。     

闰年霉素分离纯化工艺研究

目的 开发闰年霉素的分离纯化工艺。方法 采用二元液相分离系统，以反相填料为载体，对填料的类型和洗脱条件进行优化，得到适宜的操作条件。结果 反相硅胶C18为最佳层析介质，洗脱剂为50%乙腈-酸水，上样量为10mg/mL填料。在此实验条件下所得产品纯度≥98.5%，纯化收率≥70%。结论 此种闰年霉素的纯化方法简单易行，收率稳定，适于产业化应用。     

非达霉素的分离纯化

开发了高纯度非达霉素的分离纯化工艺。采用中压色谱系统,以聚合物微球为载体,优化了微球类型和洗脱条件。结果显示,选用聚合物微球Uni PS 30-300为色谱介质,洗脱剂为75%甲醇(含0.05%乙酸),上样量1.0 g/100 ml填料,纯化所得产品纯度≥95%,纯化收率≥60%。     

A-40926混合物中B0组分的分离纯化

目的 开发一种高纯度A-40926混合物中B0组分(以下简称A-40926 B0)的分离纯化工艺。方法 采用中压色谱系统,以聚合物微球为载体,A-40926 B0的收率为指标,筛选聚合物微球的类型,优化洗脱条件。结果 型号为UniPS30-300的微球为最佳层析介质,上样量为10mg(每毫升填料),洗脱剂依次为体积分数30%,45%的乙醇溶液,流速为1.5BV/h(BV：层析柱体积);所得产品纯度大于95%,层析总收率大于75%。结论 此种高纯度A-40926 B0的分离纯化方法简单易行,收率稳定,适于工业化生产。     

聚合物纳米微球分离纯化达托霉素方法研究

目的 开发高纯度达托霉素的分离纯化工艺.方法 以聚合物纳米微球为载体,对洗脱条件进行优化,再进一步采用结晶的方法进行纯化.结果 选择PS RPC-300型聚合物纳米微球为层析填料,上样量为0.5g/100g填料,流速控制为5mL/min,以体积分数为30％和40％的乙醇进行洗脱,收集40％乙醇洗脱液,浓缩后加入丙酮进行结晶,过滤,干燥得到纯度大于98.5％的达托霉素.结论 建立了高纯度达托霉素的的分离纯化工艺,流程简单、可行,为该产品产业化开发提供基础.     

替考拉宁分离条件的响应面法优化

利用大孔吸附树脂分离纯化替考拉宁,并对其分离条件进行优化。以替考拉宁发酵液提取粗品为原料,研究上样浓度、解吸剂、解吸剂pH、解吸剂浓度等因素对替考拉宁含量的影响。在单因素试验基础上对上样浓度、解吸剂pH、解吸剂浓度三个因素进行Box-Behnken试验设计,以替考拉宁含量为响应值,利用响应面分析法对分离条件进行优化。在上样浓度为2500μg/mL、解吸剂pH2.0、解吸剂浓度40%的分离条件下,替考拉宁含量达90.8%。响应面法优化替考拉宁含量比优化前的单因素试验结果有较大提高。     

重组人红细胞生成素大规模制备中反相色谱的条件优化

目的优化重组人红细胞生成素(rhEPO)大规模制备纯化中主要影响回收率的反相色谱的条件,提高回收率。方法采用反相纯化作为三步法纯化的第一步,利用R1型反相填料采用不同分步洗脱条件进行洗脱。结果优化后经第一步反相色谱所得rhEPO蛋白纯度达70%,再通过阴离子交换和凝胶过滤色谱纯化,rhEPO终产物的纯度可达100%,体内比活达1.91×105IU/mg,rhEPO蛋白的回收率提高了1.2倍。结论优化的反相纯化条件(30%乙醇-1.5 mol/L尿素,60%乙醇-3.0 mol/L尿素)能更有效的从培养上清中大量纯化出rhEPO,回收率高。获得的产品纯度高,体内外活性好。适合大规模纯化。     

采用响应面法优化替考拉宁的层析工艺

目的对替考拉宁的层析提取工艺进行优化。方法通过对层析用树脂的筛选和单因素试验,分别考察了上样pH值、洗脱液pH、洗脱液乙醇浓度等对替考拉宁提取比的影响,确定各因素的适宜水平。在此基础上,使用Box—Behnken法通过Design—Expert软件设计响应面试验,寻找最优条件。结果替考拉宁的最佳提取工艺条件为：上样pH6．45、洗脱液pH8．00、洗脱液乙醇浓度59％。在此条件下,替考拉宁的提取比为0．9487。结论经优化,替考拉宁分离纯化的提取比提高了10．23％,产品色素符合《中国药典》的要求。     

重症感染患者替考拉宁血药浓度影响因素探讨

摘要：目的 监测重症感染患者替考拉宁起始负荷剂量治疗第2天的血药谷浓度(Cmin)及目标浓度(Cmin≥10mg/L)达标情 况,探讨早期血药谷浓度的影响因素。方法 对2018年3月—2019年3月重症医学科38例使用替考拉宁治疗的重症感染患者进行 回顾性分析,根据起始负荷剂量分为高剂量组(≥10mg/kg)和低剂量组(＜10mg/kg),均间隔12h静脉注射3剂,于第3剂前30min 采集血样,应用高效液相色谱法(HPLC)测量Cmin。分析替考拉宁Cmin分布情况、目标浓度达标率及影响因素。结果 38例血样 Cmin为(11.06±3.88)mg/L,其中63.2%(24/38)达标,36.8%(14/38)未达标;高剂量组较低剂量组可明显提高目标Cmin达标率(82.4% vs 47.6%,P＜0.05),肾小球滤过率(GFR)≥60mL/min/1.73m2的患者达标率显著低于GFR＜60mL/min/1.73m2的患者(51.9% vs 90.9%,P＜0.05);Cmin未达标组的GFR明显高于Cmin达标组[(135.03±62.22)mL/min/1.73m2 vs (81.8±54.62)mL/min/1.73m2,P ＜0.05]。结论 重症感染患者使用≥10mg/kg的替考拉宁起始负荷剂量可较快达到有效血药谷浓度,高GFR是影响Cmin达标的重 要因素,有必要结合重症患者的药代动力学优化替考拉宁治疗剂量。     

聚合物纳米微球分离纯化米卡芬净母核的方法研究

目的 研究聚合物纳米微球分离纯化米卡芬净母核的方法.方法采用中压层析系统,以聚合物纳米微球为层析介质,以高纯度的米卡芬净母核收率为指标,筛选聚合物纳米微球的类型,优化洗脱条件.结果UniPS(R)30型聚合物纳米微球为最佳层析介质,洗脱剂为5％的乙醇溶液,流速为10mL/min、上样量1.0g/(100g介质)时,得到纯度＞98％的米卡芬净母核精粉,总收率＞85％.结论此分离纯化米卡芬净母核的方法简便、可靠,适用于工业化生产.     

葛根总黄酮和葛根素的纯化工艺研究

目的研究葛根总黄酮和葛根素的纯化工艺。方法以葛根总黄酮和葛根素为指标,对萃取法、盐析法、活性炭吸附法以及大孔树脂吸附法四种纯化方法进行综合评价,并对大孔树脂吸附法进行了工艺优化。结果四种纯化方法中,大孔树脂吸附法效果最佳。非极性大孔树脂更加有利于葛根总黄酮及葛根素的纯化,且以HPD 300最佳。结论HPD 300树脂吸附纯化时,以上样液浓度1g.mL-1(相当于原生药),20%乙醇洗脱效果最佳,其中葛根总黄酮可达90%以上,葛根素纯度可达50%以上,能满足大工业生产的要求。     

树脂法纯化茶多酚工艺的研究

目的:筛选适合制备高纯度茶多酚的树脂及其条件,以期得到纯度为98％茶多酚产品。方法:以茶多酚含量为指标．考察不同树脂对茶多酚吸附解吸特性,筛选出适合制备高纯度茶多酚的最佳工艺条件。结果:纯度为 35％,浓度为5mg/ml的茶多酚经H1020树脂吸附,吸附率达80．33％,依次经蒸馏水和10％的乙醇溶液洗脱除杂后, 80％乙醇洗脱,洗脱率达83．5％,洗脱液过滤后,经喷雾干燥得到纯度为98％以上的茶多酚产品。结论:为高纯度茶多酚的生产提供一种操作简单、产品质量高、生产成本低的绿色工艺。     

Encapsulation of BSA using a modified W/O/O emulsion solvent removal method

A systematic investigation of protein encapsulation in polylactic-co-glycolic-acid (PLGA) was carried out using the formation of a w/o/o emulsion followed by solvent removal. Various factors were studied, including composition of the suspension medium and the relative amounts of aqueous phase containing protein to polymer solution. High yields of microsphere fabrication were achieved by using silicon oil containing methylene chloride as a suspension medium instead of pure silicon oil, with minimal loss of polymer and protein drug (<2%). The amount of aqueous phase influenced the process and successful encapsulation was obtained if the volume ratios of aqueous phase to polymer solution were less than 5% (v/v) at a wide range of polymer concentration (2-15% g ml-1). Protein encapsulation by this w/o/o emulsion and solvent removal method has a high yield of microsphere fabrication and protein encapsulation (98%). In addition, it provides an easy way to control the release rate of protein encapsulated in microspheres by modulating their porosity in fabrication process.     

高效液相色谱法测定人血清中替考拉宁浓度的不确定度评定

目的：评定高效液相色谱（HPLC）法测定人血清中替考拉宁浓度的不确定度。方法：HPLC法测定人血清中替考拉宁浓度，分析评定测定精密性、天平称量、工作液制备、血清样品制备、液相色谱仪、提取回收率、标准曲线拟合、对照品纯度、样品均匀性以及温度等因素对结果的影响，计算各因素的相对标准不确定度，最终计算合成标准不确定度和扩展不确定度。结果：当置信概率为95%时，人血清中低（6 μg·mL^-1）、中（20 μg·mL^-1）、高（50 μg·mL^-1）浓度替考拉宁的扩展不确定度分别为U（L）=0.63 μg·mL^-1，U（M）=1.87 μg·mL^-1，U（H）=5.08 μg·mL^-1，其测量结果可分别表示为（6.18±0.63）、（20.74±1.87）、（50.09±5.08）μg·mL^-1。结论：HPLC法测定人血清中替考拉宁浓度的不确定度主要由标准曲线拟合、样品提取过程（特别是低、高浓度）引入。     

乌拉立肽的纯化工艺优化

本研究采用制备高效液相色谱法,对含有较多结构相似的多肽混合物的乌拉立肽粗品进行二步纯化。通过单因素试验与响应面法优化一步纯化工艺,结果表明,使用Daiso-SP-ODS(30 nm,10μm)填料,在70 mmol/L磷酸二氢铵水溶液,pH 4.0和柱温30℃条件下,一步纯化后样品纯度98.65%,收率70%。再经过转盐二步纯化后,产品纯度由文献中的98%提高至99.91%,总收率由29%提高至56%。该二步纯化工艺可为多肽分离纯化方法的建立提供参考。     

离子交换树脂混用技术分离纯化妥布霉素

目的 开发利用离子交换树脂混用技术分离纯化妥布霉素的工艺。方法 建立2,4-二硝基氟苯(DNFB)HPLC柱前衍生化检测妥布霉素及相关物质,以树脂吸附量和解吸量以及妥布霉素纯度为指标,通过静态吸附和动态吸附实验,对妥布霉素在树脂上吸附和解吸条件进行优化。结果 从10种不同类型的树脂筛选出HZ-3C和JK110分离纯化妥布霉素,确定最优工艺条件如下：确定两种树脂最佳比例为3:1,上样pH值为9,上样流速为3BV/h,使用浓度0.20%和0.35%氨水溶液进行梯度洗脱。采用优化后的条件,妥布霉素纯度从32.85%提高到94.82%,回收率为88.26%。结论 建立了一种新的妥布霉素分离纯化方法,优化后的工艺妥布霉素得率高、工艺简单易行,适合工业化生产。