萘酚酯酶染色法的改良

氯醋酸AS-D萘酚(Naphthal AS-D Chloroacetate)酯酶(AS-D-CE)对粒系细胞有特异性反应,故又称特异性酯酶。AS-D-CE染色的方法很多,作者基于Higgy等的染色方法,在本室建立起此染色方法,并将Higgy法加以改良,报告如下。1 试剂1.1 孵育液的配制:称取氯醋酸AS-D 萘酚0.25mg,加纯丙酮5滴,待底物溶解后.加 0.067mol/L pH6.4磷酸盐缓冲液 10ml,混匀,加坚牢蓝 BB(Fast Blue BBSalt)15mg,混匀。不过滤。新鲜配制,一次用完。     

中性粒细胞碱性磷酸酶钙钴染色法的实验条件探讨

本文对钙钴法染色的实验条件进行了全面观察。结果表明:(1)用95％乙醇和10％甲醇乙醇作固定液是最佳选择。(2)血片经37℃、45℃、50℃孵育不同时间的染色结果有差异。(3)PH9.60的基质液染色明显高于其他PH值时的染色结果。(4)用0.2MT_(ris)代替巴比妥缓冲液(Ca~(++))=0.06M的基质液的染色效果最佳。(5)改进后的钙钴法孵育时间缩短为30分钟。     

国产电极配合DL-67测定青霉素含量

1995年版《中国药典》中青霉素含量测定修订为硝酸汞电位滴定法，国内通常采用手工滴定，如用进口自动电位滴定仪，则无与之配套的进口电极。我们采用国产电极配合进口仪器，结果精密度高，重现性好。一、材料和方法1．仪器：DL－67自动滴定仪（Swttwrlandmettler公司）；213型铂电极和汞一硫酸亚汞电极（上海电光学仪器厂）；PHSJ－4PH计（上海雷磁仪器厂）。2．试药：1mol／L氢氧化钠溶液1mol／L硝酸溶液；pH4．6醋酸盐缓冲液；pH9．0硼酸缓冲液；醋酸酐；0.02mol／L硝酸汞滴定液。试液按中国药典配制，所用原试剂均为分析纯。注射…     

酚氯伪缓释片的释放度试验研究

目的：研究酚氯伪缓释片释放度的试验条件。方法：采用“桨法加沉降篮”的溶出度测定方法,用0．1mol／L盐酸溶液和不同pH值的缓冲液作介质。结果与结论：用0．1mol／L盐酸液作介质,转速100r／min时,本品与国外的Clariflu^*缓释片的释放曲线比较接近。     

固定剂对新鲜组织恒冷切片酶活性的影响

新鲜组织恒冷切片固定后再进行孵育,是防止酶扩散的重要方法之一。但固定剂对酶活性有抑制作用,而有关固定切片对酶活性的影响报道甚少。为孵育前切片固定时选择固定剂提供科学依据,我们进行了本实验。 实验用大鼠肝、肾组织恒冷切片(8μm),在4℃下分别用4％戊二醛、4％缓冲甲醛和4％多聚甲醛(均用pH7.4,0.2M磷酸缓冲液配制)固定液及纯丙酮,固定不同时间(3、10、20、30分钟),然后作酶反应。选用一般认     

褪黑素对豚鼠回肠体外吗啡依赖性的影响

目的 观察褪黑素(MT)对豚鼠体外回肠吗啡依赖性的影响。方法 以豚鼠体外回肠为实验对象，37℃孵育3h，测定纳洛酮催发引起的戒断性收缩强度，作为产生依赖性的指标。结果 豚鼠回肠标本用含吗啡(终浓度4μmol/L)的Krebs液孵育3h，纳洛酮(终浓度为4μmol／L)可催发戒断症状(特异性收缩)；MT(终浓度800μmol／L)单独孵育3h．纳洛酮不会催发戒断性收缩；急性给MT(终浓度分别为100，200，400μmol／L)或预防性给MT(终浓度分别为25，100，400μmol／L)均可剂量依赖性地减弱回肠戒断后的特异性收缩。结论 MT可抑制回肠吗啡依赖性的产生且减弱回肠的吗啡依赖戒断性反应。     

急性白血病骨髓基质细胞对HL-60细胞增殖、分化的影响

目的 为探讨急性白血病骨髓基质对HL-60细胞的影响。方法 骨髓基质与白血病细胞共培养，采用MTT检测基质对白血病细胞的粘附，流式细胞仪检测粘附的HL-60细胞周期，非特异性酯酶及过氧化物酶染色观察白血病细胞分化及绘制白血病细胞生长曲线。结果 白血病骨髓基质对HL-60细胞的粘附率及粘附的白血病细胞处于G0／G1期比例均明显高于正常骨髓基质；正常骨髓基质对HL-60细胞的生长抑制作用及诱导分化作用均明显强于白血病基质。结论 急性白血病骨髓基质对HL-60细胞的增殖、分化作用均存在异常。     

流通人民币HBsAg污染情况调查

为了了解流通人民币HBsAg的污染增况，我们对医院挂号、收费处的人民币随机采样，采样时用含1％小牛血清0．01mol／L磷酸盐缓冲液沾湿的无菌棉拭子涂抹人民币10cm×10cm，然后以固相放射免疫法检测HBsAg。结果：176个标本中，55个标本HBsAg为阳性，阳性率为31．2％。其中，1，2     

对中国药典诺氟沙星对照品在不同溶媒中的稳定性研究

目的：考察不同溶媒配制的诺氟沙星对照品溶液能否保存。方法：用紫外分光光度法分别对5℃放置的使用不同溶媒的对照品溶液在0d、10d、20d、30d、40d测定最大吸收波长、吸收值。结果；以0．4％NaOH溶液为溶媒的诺氟沙星对照液于5℃放置40d，最大吸收波长、吸收值均未发生变化（无显著性差异P＞0．05）。而以pH4.0醛酸缓冲液、pH7．4磷酸盐缓冲液为溶媒的两种对照液5℃放置40d，最大吸收波长未发生变化，但吸收值明显降低（有显著性差异P＜0．05）。结论：用0．4％NaOH溶液配制的诺氟沙星对照品溶液在适宜的条件下（5℃，避光密闭）保存，40d内是稳定的，可继续使用。而用pH4．0醋酸缓冲注和pH7．4磷酸盐缓冲液配制的诺氟沙星对照品溶液则不能保存使用，必须临用新配。     

叔丁醇干燥的扫描电镜样品制备方法

扫描电镜样品的干燥，采用临界点干燥需用专用仪器，且操作复杂。我们用超声波清洗样品[1]，叔丁醉进行干燥[2,3]，结果满意，介绍如下。1材料与方法：取大鼠气管、小肠和胃，生理盐水冲洗几次。2.5％戊二醛固定。放入盛有0．1mol／L的二甲砷酸钠缓冲液中用超声波（25～28kH2）清洗，依组织不同分别清洗3～4次，每次5min，1％饿酸后固定，0．1mol／L二甲砷酸钠缓冲浪洗2次，每次10min。用不同浓度的酒精配制成30％、50％、70％、SO％、90％叔丁醇溶液，样品经此逐级脱水置换，入纯叔丁醇3次，每次10min，于最后一次叔丁醇时置4C冰箱内约1…     

不同固定液对延迟处理标本的HE制片的影响

目的：观察比较10%甲醛、10%甲醛冰醋酸1：1的混合液及丙酮三种固定液对延迟固定标本的固定效果,为临床病理做出更好的延迟固定标本切片提供实验基础。方法：取术中送检标本80例,分别延迟24、48、72h后,相同延迟固定时间标本分别用三种固定液固定,然后做HE染色,观察各自的组织结构及染色情况。结果：同一延迟固定时间,甲醛固定的组织结构自溶现象最显著,染色黯淡;混合固定液自溶现象相对较轻,染色效果优于甲醛;丙酮固定的组织结构自溶现象最轻,染色效果最好。且延迟固定时间越久,变化越显著。结论：三种固定液都可用于固定延迟固定标本,但丙酮效果最好。     

降低解剖教学标本甲醛气味的实验研究

目的：研究比较降低局解教学标本中甲醛气味的3种防腐固定液配方。方法：实验家兔分为3组，分别用固定液1(30％乙醇、10％甘油、2％苯甲酸、3％甲醛)、固定液2(前3项同1、2％甲醛)、固定液3(前3项同1、1％甲醛)灌注固定家兔，10％甲醛浸泡6个月。再分别用处理液1(1％食用香料、10％氨水)、处理液2(1％食用香料、6％氨水)、处理液3(1％食用香料、3％氨水)再次灌注动物，并在相应处理液中浸泡6个月，大体解剖观察色泽、韧性并结合HE染色，观察腓肠肌、肝脏形态。结果：在3组标本中第3组香味最浓，甲醛气味最淡，而且肌组织柔软，色泽暗红，有利于解剖操作。HE染色显示肌细胞、肝细胞形态完整。结论：采用第3种固定液和处理液处理的标本色泽韧性较好并且明显减少了甲醛气味的刺激。     

一种新的染色液用于红细胞花环试验

绵羊红细胞用抗人淋巴细胞单克隆抗体致敏后 ,可以直接用于检测外周血 T细胞及其亚群。为了更好地观察实验结果 ,作者在实验中摸索出一种新的染色液。现报告如下。1　材料、方法与结果1 .1　材料 :( 1 )淋巴细胞分离液 :上海试剂二厂生产。 ( 2 ) Hank's液 (1) 。 ( 3)致敏绵羊红细胞 :卫生部武汉生物制品研究所生产。 ( 4 ) Giemsa液 1 :磷酸盐缓冲液 1 0 ml,姬姆萨原液 6滴 ,瑞氏原液 1滴。( 5) Giemsa液 2 :磷酸盐缓冲液 1 0滴 ,姬姆萨原液1滴。 ( 6)新染色液 :本室配制。 ( 7)光学显微镜。1 .2　方法 :( 1 )取肝素抗凝血 2 ml,与 Hank…     

血小板染色后计数方法

在普通光镜了计数血小板，由于对比度较差，容易造成视力疲劳。我们采用血小板预染色后计数。用3种不同染色液显示血小板呈不同青绿色，结果皆不影响血小板计数，报道于下。1材料与方法1．1配制方法：取草酸铵1g，Na2EDTA0．1g，甲醛0．1ml，加水100ml，加亚甲蓝1g，煌焦油蓝1g     

6种市售阿司匹林肠溶片释放度的测定

目的：观察市售阿司匹林肠溶片的体外溶出,以评价其内在质量。方法：采用转蓝法进行体外溶出试验,用紫外分光光度法测定溶出液中药物浓度。结果：各厂家阿司匹林肠溶片在0.1mol／L盐酸溶液和pH6.8磷酸盐缓冲液中的溶出均符合规定。结论：各厂家阿司匹林肠溶片的释放度均符合规定,但不同厂家间存在显著差异。     

阿托伐他汀对骨髓基质细胞增殖及向成骨细胞分化的影响

目的比较不同浓度的阿托伐他汀对小鼠骨髓基质细胞向成骨细胞分化、矿化成骨的影响。方法分别将10^-8、10^-7、10^-6mol／L的阿托伐他汀和空白药物加入传代培养的小鼠骨髓基质细胞，通过细胞形态学观察、细胞增殖率检测、碱性磷酸酶（ALP）检测和钙结节染色，比较药物在成骨细胞分化过程中对细胞增殖和分化的影响。结果阿托伐他汀可以剂量依赖性方式抑制骨髓基质细胞的增殖，10^-7mol／L组和10^-6mol／L组较明显（均P〈0．05）。阿托伐他汀可以提高骨髓基质细胞ALP活性，培养10～22d，10^-7mol／L组和10^-6mol／L组ALP活性高于对照组和10^-8mol／L组（均P〈0．05）。矿化成骨染色显示在培养26d后，10^-6mol／L组染色明显深于其它各组。结论阿托伐他汀可促进骨髓基质细胞来源的成骨细胞的分化，抑制了细胞增殖，促进骨结节钙化。     

人体末稍血ANAE染色的初步临床调查

目前,α酯酸荼酯酶(ANAE)染色法作为非特异性区别T和B淋巴细胞已广泛用于实际并建立了统一试行流程。本文应用此法调查以恶性肿瘤为主的病人情况,并进行对照,作一初步报导。检测技术与方法本文基本按叶德立所介绍的技术。染色液是3％碱性品红溶液。4％亚硝酸钠溶液。M/15 pH7.6磷酸缓冲液和2％α醋酸萘酯溶液。染色步骤是新鲜耳血涂片自然干燥后放入新配制的pH6.0孵育液中37℃温箱浸染3小时,取出后浸漂冲洗放入1％孔雀绿溶液中复染5分种,再取出冲洗自然干燥后在油镜下用血球分类计数器计数100个淋巴细胞。按下例标准判定:凡淋巴细胞胞浆中有     

Fas在正常成年恒河猴中枢神经系统的分布(摘要)

目的：为探讨Fas在成年灵长类动物恒河猴中枢神经系统的分布及功能提供有用的形态学依据。方法：成年雄性恒河猴（体重5kg）1只，经氯胺酮复合地西泮肌肉注射麻醉后，经左心室插管升主动脉，Zamboni液灌注固定，组织块于含30％蔗糖0．1mol／L的PBS内（4℃）沉底后，作20μm连续恒温冷冻切片，免疫组织化学SP法染色，光镜下观察结果。     

铁超负荷对胰岛β细胞分泌胰岛素功能的影响

目的 建立胰岛细胞表面灌注系统,并检测次氮基三醋酸铁（FeNTA）溶液对正常大鼠离体胰岛细胞一相分泌的影响。方法 分离正常大鼠的胰岛细胞,将其分为3组：A组、B组和C组,每组合50个胰岛,分别用不同的刺激液进行灌注,检测40min内胰岛素的分泌量。其中,A组为对照组,灌注液为16．7mmol／L葡萄糖液;B组为舍铁的高糖液灌注,包括B1组（高糖液舍有0．05mmol／LFeNTA）和B2组（高糖液舍有O．1mmol／LFeNTA）;C组为经过FeNTA孵育5h后用高糖液灌注,包括C1组（孵育液中含FeNTA0．05mmol／L）和C2组（孵育液中舍FeNTA0．1mmol／L）;实验过程重复3次。结果 ①正常大鼠的胰岛细胞在16．7mmol／L葡萄糖刺激下胰岛素分泌具有典型的早相分泌;②无论是在含一定浓度的（0．05mmol／L或0．1mmol／L）FeNTA的葡萄糖的刺激液灌注,还是经过合FeNTA（0．05mmol／L或0．1mmol／L）孵育液孵育5h后再用高糖刺激液灌注,大鼠胰岛细胞的胰岛素分泌均完全缺乏一相分泌,仅有不断出现的微小波动,分泌峰值仅仅较基础状态略有增加。结论 铁含量增加会损害胰岛细胞分泌胰岛素,这对阐明铁与糖尿病的关系具有一定的意义。     

HPLC法测定盐酸二甲双胍片的含量

目的：用HPLC法测定盐酸二甲双胍片的含量。方法：采用Diamond C18色谱柱（250mm×4．6mm，5μm）；流动相：0．01mol／L磷酸二氢钾缓冲液含0．015mol／L高氯酸（pH3．0）；流速：1．0ml／min；柱温：室温；检测波长：218nm，以峰面积计算。结果：在0．1—0．3mg／ml范围内盐酸二甲双胍片的峰面积和浓度呈良好的线性关系，r=0．9994。结论：本法简便、快捷、灵敏，可作为盐酸二甲双胍片质量控制的有效方法。