肝细胞癌凋亡病变的原位末端标记显示

原位末端标记（ＩＳＥＬ）是显示凋亡的新技术。按Ｇａｖｒｉｅｌｉ法对４６例未接受过化疗与放疗的人肝细胞癌（ＨＣＣ）作回顾性（ＩＳＥＬ）研究，结果显示在对照系列中阴性与阳性均与理论相符，４６例ＨＣＣＩＳＥＬ（＋）可分为：①单个细胞（＋）；②点状（＋）；③小片状（＋）；④大片（＋）．Ⅰ级ＨＣＣ以单细胞（＋）较多；Ⅱ、Ⅲ级以小片状（＋）较多（Ｐ＜０．０５）．单个细胞（＋）为凋亡经典概念，而片状（＋）报道还不多。本文小片状（＋）很普遍，常位于癌巢中央，其ＨＥ形态以核浓缩为主，此结果表明，通常ＨＣＣ所见小片状＂变性坏死样改变＂可能为凋亡而非坏死。     

凋亡细胞DNA片段原位末端检测技术在检测人肝细胞性…

作者采用ＢＯＥＨＲＩＮＧＥＲＭＡＮＮＨＥＩＭ公司新近推出的细胞死亡原位检测碱性磷酸酶试剂盒，对３１例人肝细胞癌石蜡切片进行了凋亡细胞检测。结果表明，该试剂盒具有灵敏度高，实验流程简便和重复性好等优点。另外，就实验流程中ｐＨ值及蛋白酶Ｋ浓度校正和ＮＢＴ／ＢＣＩＰ显色过程中应注意的问题作了介绍。作者认为良好的标记切片应具备下列条件：①检出的阳性信号应有良好的组织内定位和细胞内定位；②正常组织、有病变的     

肝细胞癌中DcR3表达与癌细胞凋亡的关系研究

目的探讨诱捕受体3（decoy receptor 3,DcR3）蛋白在原发性肝细胞癌（HCC）中的表达及其与癌细胞凋亡和HCC预后的关系。方法应用免疫组织化学（EnVision法）及和脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记（TUNEL）技术检测43例HCC,16例非癌肝组织（单纯性肝硬化及肝血管瘤周围正常肝组织）中DcR3蛋白的表达及凋亡情况,并分析其与临床病理参数的关系。结果DcR3明确定位于肝细胞胞质内;HCC组织中的DcR3蛋白的阳性率为74．42％（32／43）,明显高于非癌肝组织43．75％（7／16,P〈0．05）;HCC中有转移癌组DcR3阳性率为100％（22／22）,明显高于无转移组52．94％（9／17,P〈0．01）;DcR3蛋白的表达与AFP水平（r=0．444,P〈0．01）、门静脉癌栓（r=0．414,P〈0．01）有关,与年龄、性别、有无肝硬化、包膜浸润、肿瘤结节数及分化程度无关（P〉0．05）。HCC中细胞凋亡指数[AI（0．78±0．64）％]明显低于非癌肝组织[（3．32±1,81）％,P〈0．01];HCC临床TNM分期Ⅰ、Ⅱ期AI（1．03±0．69）％高于Ⅲ、Ⅳ期[（0．52±0．48）％,P〈0．01];HCC无转移组AI（1．10±0．72）％高于转移组[（0．44±0．27）％,P〈0．01];AI与AFP水平（r=-0．468,P〈0．01）、门静脉癌栓（r=-0．434,P〈0．01）、包膜浸润（r=-0,331,P〈0．05）有关,与年龄、性别、有无肝硬化、肿瘤结节数及分化程度无关（P〉0．05）。在HCC和非癌肝组织中,DcR3阳性者的AI均分别低于阴性者的AI（均P〈0．01）。结论DcR3表达可影响凋亡并在HCC的发生发展中起重要作用;检测DcR3蛋白与AI有助于判断HCC患者预后。     

Caspase—3与肝细胞癌的细胞凋亡

Caspase 3是哺乳动物细胞凋亡的关键蛋白酶 ,亦参与了肝细胞癌的细胞凋亡的病理过程。免疫组化分析肝细胞癌中Caspase 3表达强度明显减弱 ,认为在肝细胞癌的发生过程中 ,Caspase 3的活性通过多种途径受到抑制。研究Caspase 3与影响肝细胞癌细胞凋亡各因素之间的关系 ,有助于寻找和开辟肿瘤治疗的新途径。     

人肝细胞癌细胞凋亡

原发性肝癌的发生发展是恶性细胞异常增殖和细胞凋亡异常的结果，虽存在着自发性凋亡，但肿瘤细胞的凋亡远不及其恶性增殖。肝癌瘤细胞的凋亡机制极为复杂。近年的研究提示，诱导肝癌肿瘤细胞凋亡是临床治疗的发展方向之一。     

人肝细胞癌细胞凋亡

原发性肝癌的发生发展是恶性细胞异常增殖和细胞凋亡异常的结果,虽存在着自发性凋亡,但肿瘤细胞的凋亡远不及其恶性增殖.肝癌瘤细胞的凋亡机制极为复杂.近年的研究提示,诱导肝癌肿瘤细胞凋亡是临床治疗的发展方向之一.     

原位末端转移酶地高辛标记法检测凋亡细胞

采用地高辛原位末端标记法（ＩＳＥＬ），建立了Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ细胞的原位检测体系。结果显示：小鼠胸腺细胞在体外培养８ｈ时，台盼兰拒染率为９４％￣９５％，地塞米松刺激的胸腺细胞ＤＮＡ电泳呈典型的“梯形条带”，ＩＳＥＬ标记的细胞阳性率为７４．４％，未经地塞米松刺激和未经培养直接标记的胸腺细胞阳性率分别为２８．６％和１０．２％。     

肝细胞癌组织中HBx基因蛋白表达与凋亡关系

乙型肝炎病毒(hepatitis B virus，HBV)感染是肝细胞癌(hepatocellular carcinoma，HCC)发生的主要病因之一，HHx基因具有癌基因的特性，其表达产物HBx蛋白具有转录激活子功能，在HCC的发生发展中起着重要的作用。研究HBx蛋白的表达及其对细胞凋亡的调节有助于阐述HCC的发生发展机制。笔者利用S-P免疫组化方法和原位脱氧     

细胞凋亡的原位显示技术及应用

原位末端标记法是利用末端转移酶作为催化酶，在适当条件下将底物接合于ＤＮＡ双链钝端，再用免疫组化放大标记信号，然后ＤＡＢ显色，苏木素衬染，能结构完好地原位显示凋亡细胞     

亡细胞DNA片段原位末端检测技术在检测人肝细胞性肝癌石蜡切片中的应用(ISEL法检测技术的探讨)

作者采用ＢＯＥＨＲＩＮＧＥＲＭＡＮＮＨＥＩＭ公司新近推出的细胞死亡原位检测碱性磷酸酶试剂盒，对３１例人肝细胞癌石蜡切片进行了凋亡细胞检测。结果表明，该试剂盒具有灵敏度高，实验流程简便和重复性好等优点。另外，就实验流程中ｐＨ值及蛋白酶Ｋ浓度校正和ＮＢＴ／ＢＣＩＰ显色过程中应注意的问题作了介绍。作者认为良好的标记切片应具备下列条件：①检出的阳性信号应有良好的组织内定位和细胞内定位；②正常组织、有病变的组织和肿瘤组织间，同一病例组织切片内的阳性信号率和阳性强度应有一定差异；③清晰的标记切片背景和适度的复染效果。     

前列腺癌雄激素受体表达与细胞凋亡的关系

目的：探讨前列腺癌雄激素受体与细胞凋亡的关系及其生物学特性,方法：56例前列腺癌和20例良性前列腺增生症,应用免疫组化方法检测石蜡蜡包埋的组织切片中雄激素受体（AR）表达和应用原位末端标记技术（TUNEL）检测细胞凋亡指数（AI）。结果：AR在良恶性前列腺组织中的表达差异无显著性（P＞0．05）。AR和AI与前列腺癌Gleason分级无关。AI在前列腺癌组织中的表达明显高于良性前列腺增生症（P＜0．05）,AR阳性的前列腺癌AI亦明显高于AR阴性的前列腺癌。结论：前列腺癌组织中AR的表达可诱导其细胞凋亡,并对前列腺癌的功能性分类和内分泌治疗的疗效判断具有实用的临床意义。     

肝细胞癌和肝硬变中bcl—2蛋白表达与细胞凋亡的关

研究肝细胞癌和肝硬变中ｂｃｌ－２蛋白表达与细胞凋亡的关系。方法，应用原位脱氧核糖酸末端转移酶标记法和Ｓ－Ｐ免疫组化技术检测２８例肝硬变和３５例肝细胞癌组织中凋亡细胞的分布、密度及ｂｃｌ－２蛋白的表达。     

双标记方法检测骨肉瘤细胞增生和细胞凋亡

本研究应用ＡＰＡＡＰ和原位末端标记（ｉｎｓｉｔｕｅｎｄｌａｂｅｌｉｎｇ，ＩＳＥＬ）双标记方法，检测了８０例骨肉瘤细胞的增生和细胞凋亡，旨在建立一种同时显示细胞增生和细胞凋亡的方法，便于病理医生更好地观察肿瘤细胞增生和细胞凋亡的关系。     

双标忆方法检测骨肉瘤细胞增生和细胞凋亡

本研究应用ＡＰＡＡＰ和原位末端标记（ＩＳＥＬ）双标记方法，检测了８０例骨肉瘤细胞的增生和细胞凋亡，旨在建立一种同时显示细胞增生和细胞凋亡的方法，便于病理医生更好地观察肿瘤细胞增生和细胞凋亡的关系。     

细胞凋亡原位检测方法的改进

细胞凋亡不仅在生物体发育过程中与细胞增殖、分化保持动态平衡以维持机体结构和功能的正常 ,而且细胞凋亡的异常可能是艾滋病、老年性痴呆等神经退变性疾病、缺血性损伤、肿瘤和自身免疫性疾病的重要发病机制。因此 ,细胞凋亡检测技术可广泛应用于实验研究和临床检验 ,目前正倍受关注。现将我们在实验研究中使用宝灵曼公司原位细胞死亡检测药盒 (ＰＯＤ)的具体做法和一些改进与体会报道如下 :1　工作原理本方法是应用脱氧核苷酸末端转移酶 (ＴｄＴ)介导缺口末端标记法 (ＴｄＴｍｅｄｉａｔｅｄｄＵＴＰｎｉｃｋｅｎｄｉｎｇｌａｂｅｌｌｉ…     

肝细胞癌及癌旁肝组织端粒酶活性的原位检查

端粒酶的激活与肝细胞癌（ＨＣＣ）的发生已受到人们的重视。既往检测ＨＣＣ端粒酶活性均采用端粒重复扩增分析法（ＴＲＡＰ）［１６］，但该法不能把端粒酶活性与组织细胞的形态结构结合起来观察。１９９７年Ｏｈｙａｓｈｉｋｉ等［７］在ＴＲＡＰ法的基础上利用原位ＰＣＲ检测了单层培养细胞和游离细胞的端粒酶活性。但该法存在许多问题，在冷冻切片上未获成功。我们对Ｏｈｙａｓｈｉｋｉ［７］的方法进行了改进，发展了端粒酶原位标记法（ＩＳＬＴ）并成功地在冷冻切片上原位检测了ＨＣＣ及其癌旁肝组织中端粒酶的活性。一、材料与方法…     

细胞间隙连接与肝细胞癌

细胞间隙连接（ｇａｐｊｕｎｃｔｉｏｎ）是普遍存在于动物组织中的一种细胞连接形式，细胞通过它所介导的细胞间隙连接通讯（ｇａｐｊｕｎｃｔｉｏｎｉｎｔｅｒｃｅｌｕｌａｒｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎ，ＧＪＩＧ）进行着细胞间信号的传递，调控着细胞的新陈代谢、增殖...     

肝细胞的凋亡

肝细胞的凋亡丁濂细胞凋亡（ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）是生物体内无用的，老化的或一些损伤的细胞死亡的一种形式，不引起局部组织损伤或炎症反应。可见于：（１）胚胎器官发育的过程，如胚胎肢端发育成指、趾时有部分细胞凋亡。（２）成熟老化细胞的新老交替。（３）淋巴细胞...     

放线菌酮诱导大鼠肠系膜淋巴结淋巴细胞凋亡

本实验利用放线菌酮建造细胞凋亡动物模型 ,用原位末端标记和电镜方法观察了大鼠肠系膜淋巴结淋巴细胞凋亡的形态学变化。结果显示放线菌酮处理 4h后 ,肠系膜淋巴结部分淋巴细胞处于凋亡状态 ,主要表现为细胞核凝聚 ,染色质边集 ,可见线粒体、内质网增殖 ,自噬体和凋亡小体形成。结果表明放线菌酮主要诱发肠系膜淋巴结生发中心的 B淋巴细胞凋亡 ,线粒体、内质网的增殖是细胞凋亡的一种主动行为。