银杏叶提取物对TNF—α,IL—6诱导的牛脑微血管细胞粘附单核细 …

目的：观察银杏叶提取物（Ｇｉｎｋｇｏ ｂｉｌｏｂａ ｅｘｔｒａｃｔ,ＧｂＥ）对培养新生牛脑微血管内皮及平滑肌细胞粘附单核细胞及中性粒细胞的影响。方法：用ＴＮＦ－α,ＩＬ－６诱导传代的新生牛脑微血管内皮及平滑肌细胞,粘附大鼠血单核细胞及中性粒细胞,计算粘附率。     

银杏叶提取物对肺纤维化模型大鼠血清中TNF-α、IL-6表达的影响

随着对肺纤维化发生机制的深入研究,人们发现细胞因子在其发生、发展中起着重要的作用.有研究报道[1,2],TNF -α、IL-6为肺纤维化中重要的前炎症因子和致纤维化因子,它们通过不同环节,使肺泡纤维母细胞增生,并分泌大量胶原,导致肺纤维化的形成.本实验观察TNF -α、IL -6在大鼠肺纤维化过程中的动态变化及银杏叶提取物对其的影响,旨在探讨二者在肺纤维化过程中的作用及银杏叶提取物对肺组织保护作用的可能机制.     

黄芪多糖诱导脐血单核细胞分化为树突状细胞的鉴定分析

目的:观察黄芪多糖对脐血单核细胞分化为树突状细胞的诱导作用并对其进行分析鉴定.方法:无菌条件下采集脐血,密度梯度离心法获得脐血单核细胞,分为3组,即实验组、阴性对照组、阳性对照组;培养过程中用倒置光学显微镜和透射电镜观察细胞形态;收集部分培养第12天的细胞利用流式细胞仪检测各组细胞表面CD1a、CD80、CD83和CD86的表达.结果:在培养72小时后实验组和阳性对照组细胞形态开始变化,随着培养时间的延长,树突状结构更加明显,第12天细胞呈典型的树突状细胞形态;阴性对照组细胞生长缓慢,培养至第12天细胞呈梭形巨噬细胞形态.培养至10天的实验组细胞透射电镜下呈典型的树突状细胞形态.培养12天实验组、阳性对照组细胞分别高表达DCs特异性抗原CD1a、CD80、CD83和CD86,与阴性对照组对应比较差异均有显著性(P＜0.01);实验组与阳性对照组之间比较无统计学意义(P＞0.05).结论:黄芪多糖体外可诱导脐血单核细胞(DCs前体细胞)定向分化为树突状细胞(DCs).     

银杏叶提取物对白介素-1β损伤关节软骨细胞增殖的影响

目的:观察银杏叶提取物(EGb)对白介素-1β损伤的膝关节软骨细胞增殖的作用.方法:在无菌环境下消化得到3月龄雌性新西兰白兔膝关节软骨细胞,实验用细胞为第2代软骨细胞.软骨细胞与rratIL-1β(5μg/L)、rratlL-1β(5μg/L)+不同浓度地塞米松(10-7、10-6、10-5mmol/L)、rratIL-1β(5μg/L)+银杏叶提取物(40mg、80mg、160mg/L)共同孵育,72小时后,MTT法检测软骨细胞的增殖.结果:rratIL-1β对软骨细胞的增殖有明显的抑制作用;地塞米松同银杏叶提取物均可对抗rratIL-1β效应.银杏叶提取物的作用呈剂量依赖性.结论:银杏叶提取物对rratlL-1β损伤的膝关节软骨细胞具有的保护效应.     

大叶蛇葡萄乙醇提取物对2215细胞HBsAg、HBeAg表达抑制作用的实验研究

目的：研究大叶蛇葡萄乙醇提取物的抗乙肝病毒（HBV）作用。方法：将大叶蛇葡萄乙醇提取物作用于乙肝病毒DNA转染人肝癌细胞系2215细胞,以细胞病变（CPE）观察药物对2215细胞的毒性,用酶联免疫测定法（ELISA）检测药物对培养8天的2215细胞分泌的表面抗原（HBsAg）和e抗原（HBeAg）表达的抑制作用。结果：大叶蛇葡萄乙醇提取物的半数毒性浓度（TC50）为250μg/ml,最大无毒浓度（TC0）为125μg/ml;乙醇提取物对培养8天的2215细胞HBsAg、HBeAg表达抑制作用的半数有效浓度（IC50）分别为43.1μg/ml、54.8μg/ml,治疗指数（TI）值分别为5.8、4.7。结论：大叶蛇葡萄乙醇提取物具一定的体外抗乙肝病毒的作用,为有效物质部位。     

小大黄对ox-LDL诱导血管平滑肌细胞增殖的影响

目的:观察小大黄对氧化修饰型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导血管平滑肌细胞(SMC)增殖的影响。方法:采用体外培养的牛主动脉平滑肌细胞为模型,ox-LDL诱导SMC增殖。实验分为对照组、ox-LDL组和用药组(ox-LDL 不同剂量小大黄),应用MTT法、流式细胞仪分别测定细胞数量和细胞周期,用硫代巴比妥酸比色法测定细胞培养液中丙二醛(MDA)的水平。结果:小大黄能明显降低细胞培养液中MDA的水平,MTT检测显示用药组比ox-LDL组OD值降低,并呈浓度依赖性。流式细胞仪检测表明,用药组(S G2M)期细胞百分率降低。结论:小大黄能抑制ox-LDL诱导的SMC增殖,并具有抗脂质过氧化作用。     

鱼腥草、田基黄和板蓝根对机体中性粒细胞、单核细胞化学趋化和超氧化物的调整作用

目的:为探讨鱼腥草、田基黄和板蓝根对机体中性粒细胞和单核细胞化学趋化和超氧化物的调整作用。方法:应用化学趋化试验和超氧化物产物测定方法。结果:鱼腥草、田基黄和板蓝根能显著增加两种细胞的超氧化物产物,预先与以上三种药物培养的中性粒细胞的化学趋化被明显抑制(化学趋化剂为甲酰肽和酵母多糖),但单核细胞的化学趋化无明显变化。结论:鱼腥草等中草药参与中性粒细胞的氧化反应(呼吸爆发),参与调节中性粒细胞的趋化作用、抗炎效应和杀菌功能。     

银杏叶提取物对肝纤维化大鼠肝脏低氧诱导因子1α及血管内皮生长因子表达的影响

目的:观察银杏叶提取物(GbE)对肝纤维大鼠肝组织低氧诱导因子1α(HIF-1α)及血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响,探讨GbE抗肝纤维的作用机制。方法:采用40%的CCl4皮下注射(3mL.kg-1.d-1,2次/周,首剂加倍),连续6周诱导大鼠肝纤维化模型,同时分别以高、中、低剂量(200、100、50mg.kg-1.d-1)GbE灌胃干预6周,常规HE和Masson染色观察大鼠肝组织炎症和纤维化程度,RT-PCR及免疫组化法检测肝组织HIF-1α和VEGF基因的mRNA及蛋白表达。结果:模型组大鼠肝组织炎症和纤维化程度计分较正常组明显增高(P0.01),肝组织HIF-1α和VEGF基因的mRNA及蛋白的表达较正常组明显增强(P0.05,P0.01),HIF-1α蛋白表达水平与肝纤维化程度、VEGF mRNA表达水平呈明显的正相关;应用高、中、低剂量GbE干预后,大鼠肝组织炎症和纤维化程度显著减轻(P0.05,P0.01),肝组织HIF-1α和VEGF基因的mRNA及蛋白表达明显下降(P0.05)。结论:GbE下调肝纤维化大鼠肝组织HIF-1α及其下游分子VEGF的转录和表达可能是其抗肝纤维化作用的机制之一。     

益肝化毒胶囊对S180荷瘤小鼠IL-2、TNF-α的影响

目的:以移植性S180荷瘤小鼠为实验对象,观察具有健脾益气、解毒化瘀、软坚散结功效的中药复方益肝化毒胶囊对S180荷瘤小鼠IL-Ⅱ、TNF-α的影响.方法:用S180腹水型肉瘤小鼠的腹水肿瘤细胞悬液接种小鼠左腋皮下复制肿瘤模型.造模后按体重随机分为模型空白组、肝复乐片组、益肝化毒胶囊小、中、大剂量组、正常对照组.模空组和正常对照组以生理盐水灌胃,每日1次,0.2 mL·10 g-1·d-1;肝复乐片组以肝复乐混悬液灌胃,每日1次,0.2 mL·10 g-1·d-1;益肝化毒胶囊小、中、大剂量组分别以混悬液灌胃,每日1次,0.2 mL·10g-1·d-1.连续用药10 d,第11天取材测定血清IL-2、TNF-α含量.结果:本方能提高IL-2水平,并能有效降低异常升高的TNF-α.结论:益肝化毒胶囊大、中、小剂量均有抗肿瘤作用.     

溶栓颗粒含药血清对TNF-α损伤血管内皮细胞VEGF表达影响的研究

目的：探讨溶栓颗粒含药血清对TNF-α损伤血管内皮细胞VEGF表达的影响。方法：用TNF-α损伤大鼠脑皮质微血管内皮细胞（BMECs）造模,用含大、中、小剂量溶栓颗粒和中等剂量阿托伐他汀的大鼠血清干预受损的BMECs,应用HE染色观察细胞形态变化,免疫组化法观察血管内皮细胞生长因子（VEGF）的表达。结果：TNF-α可以造成BMECs损伤,表现细胞数量下降、皱缩;受损细胞的VEGF表达明显增多。含大、中剂量溶栓颗粒和阿托伐他汀的大鼠血清能减少VEGF表达,阿托伐他汀的这一作用与大剂量溶栓颗粒相当。结论：溶栓颗粒可以减少因炎性介质TNF-α增加而受损的血管内皮细胞的VEGF表达,可能是其减缓动脉粥样硬化形成的作用机制之一。     

槲皮素对血管紧张素Ⅱ诱导大鼠胸主动脉平滑肌细胞IL-6的影响

目的:观察槲皮素对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导大鼠胸主动脉平滑肌细胞产生IL-6的影响。方法:以不同浓度AngⅡ刺激培养的大鼠胸主动脉平滑肌细胞,并以不同剂量的槲皮素干预24 h,用ELISA法检测不同时间点上清液中IL-6含量,用半定量RT-PCR法检测槲皮素对IL-6 mRNA表达的影响。结果:AngⅡ刺激血管平滑肌细胞产生IL-6具有剂量和时间依赖性。槲皮素对不同浓度AngⅡ刺激血管平滑肌细胞产生IL-6有明显剂量依赖性抑制作用,1000μmol/L时作用最为明显;不同浓度槲皮素均可下调AngⅡ(10-7M)所诱导的血管平滑肌细胞IL-6mRNA的表达,浓度为1000μM时作用最明显。结论:槲皮素可在蛋白和转录水平下调AngⅡ诱导血管平滑肌细胞IL-6的产生,提示槲皮素的抗动脉粥样硬化作用可能与其抗炎作用有关。     

姜黄素对TNF-α诱导人脐静脉内皮细胞FKN表达的干预作用

目的:观察姜黄素对TNF-α刺激人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的不规则趋化因子(Fractalkine,CX3CL1,FKN)表达的影响。方法:MTT法筛选HUVEC的姜黄素最佳药物浓度,检测不同浓度TNF-α对HUVEC FKNmRNA表达的上调作用,比较不同时间段TNF-α0.5ng/ml对HUVEC FKNmRNA表达的影响,比较0~5μmol/L姜黄素联合TNF-α0.5ng/ml对HUVEC FKNmRNA表达的影响,荧光定量PCR和Western-blot检测FKNmRNA及蛋白质水平变化。结果:MTT法筛选出HUVEC的姜黄素最佳药物浓度为5μmol/L,0.5ng/ml TNF-α能明显提高HUVEC FKNmRNA表达,刺激16小时0.5ng/ml TNF-α能显著增加HUVEC FKNmRNA表达量,荧光定量PCR及Western-blot检测表明姜黄素2~5μmol/L联合TNF-α0.5ng/ml能明显抑制HUVEC FKNmRNA的表达量及蛋白质表达水平。结论:Cur可抑制TNF-α刺激HUVEC的FKNmRNA及蛋白表达。     

丹参单体对TNF-α诱导大鼠动脉平滑肌细胞MCP-1和IL-1β的影响

目的观察丹酚酸B和丹参酮ⅡA对肿瘤坏死因子（TNF—α）诱导的血管平滑肌细胞（SMC）白细胞介素-1β（IL—1β）和单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）的影响，探讨丹参单体抗动脉粥样硬化（AS）的作用机制。方法体外培养大鼠主动脉SMC；RT—PCR法检测SMCMCP-1mRNA的表达；放免法检测SMC培养上清IL-1β的水平。结果TNF—α促进SMCMCP—1mRNA的表达，提高IL-1β水平（P值均＜0．01）。两种丹参单体均抑制上述因子的表达，其中，对于抑制MCP—1mRNA的表达以丹参酮ⅡA效果更佳。结论丹参单体抗AS作用的机制之一是抑制炎症相关因子的表达，丹参酮ⅡA抗炎效果优于丹酚酸B。     

黄芪注射液对病毒性心肌炎TNF-α、IL-1和IL-6的影响

目的：探讨病毒性心肌炎（VMC）患者血清肿瘤坏死因（TNF—α）、白细胞介素1（IL—1）、白细胞介素6（IL—6）的变化及黄芪注射液防治作用。方法：治疗组24例用黄芪注射液治疗，对照组24例用辅酶A、ATP甲等治疗。结果：治疗后治疗组血清TNF—α、IL—1和IL—6水平显著下降（P〈0．01），与健康组无显著差异；对照组治疗前后TNF—α、IL—1和IL—6水平无差异，并显著高于健康组（P〈0．01）。结论：黄芪注射液可降低TNF—α、IL—1和IL—6，对病毒性心肌炎有良好的防治作用。     

复智胶囊对血管性痴呆大鼠血清TNF-α、IL-6影响的研究

目的:探讨复智胶囊对血管性痴呆大鼠血清TNF-α、IL-6炎性细胞因子的影响,研究其组方对血管性痴呆的作用机制。方法:复制拟血管性痴呆大鼠模型,造摸30 d后检测大鼠血清TNF-αI、L-6含量。结果:复智胶囊对造模痴呆大鼠血浆TNF-αI、L-6的指标产生明显影响,高、中、低剂量组均能降低大鼠血清中IL-6、TNF-α含量(P<0.05)。结论:复智胶囊全方可影响患病大鼠血浆TNF-αI、L-6的含量,对改善痴呆大鼠神经变性起着重要的作用。     

白术挥发油对癌性恶病质小鼠血清细胞因子TNF-α、IL-2的影响

目的:白术挥发油对癌性恶病质小鼠血清细胞因子TNF-α、IL-2的影响。方法:(1)C57BL6小鼠接种Lewis(小鼠肺腺癌)建立癌性恶病质动物模型,(2)采用白术挥发油对癌性恶病质鼠进行治疗,(3)观察癌性恶病质鼠治疗后生理状况(体重、摄食量等)的改善,(4)用RIA检测癌性恶病质发生、发展相关的血清细胞因子如TNF-α、IL-2的水平变化。结果:与生理盐水治疗荷瘤小鼠相比,白术挥发油能明显阻止癌性恶病质鼠体重下降,增加其摄食量,延缓肿瘤生长。血清IL-2水平升高,TNF-α水平同时明显下降。结论:白术挥发油具有明显的抗癌性恶病质作用。     

山楂黄酮甙对牛内皮细胞作用的观察

本文以不同剂量的山楂黄酮M-199培养液培养牛内皮细胞,分别测定其细胞内、外液中羟脯胺酸和糖胺多糖的含量。结果表明:随着山楂黄酮甙剂量的增加,细胞内液和细胞外液中的羟脯氨酸含量均下降,与对照组比较,差异有非常显著意义(p<0.01);中剂量组的山楂黄酮甙促进糖胺多糖的代谢,而小剂量和大剂量组则抑制糖胺多糖的代谢,与对照组比较,差异均有非常显著性意义(p<0.01)。作者认为通过本试验,说明山楂黄酮甙在预防血栓形成和动脉粥样硬化的功能上有其药理学基础。     

川黄合剂对TNF-α诱导的人腹膜间皮细胞IL-6和IL-8表达的影响

目的探讨川黄合剂对TNF-α诱导的体外培养的人腹膜间皮细胞(HPMCs)增殖及白细胞介素-6(IL-6)和IL-8表达的影响。方法体外培养HPMCs,用含1%胎牛血清的RPMI-1640培养液同步24 h后,分为空白对照组、TNF-α诱导组(1μg/L)和低、中、高剂量川黄合剂干预组(n=3)。采用MTT法和流式细胞术检测各组细胞的增殖情况;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞上清液中IL-6和IL-8蛋白含量,细胞沉淀用BCA蛋白检测方法测定细胞蛋白质含量,用以校正ELISA结果。结果干预48 h后,3种浓度川黄合剂干预组的OD值、PI值均显著高于TNF-α诱导组(P均0.05),且IL-6和IL-8蛋白表达水平均明显低于TNF-α诱导组(P均0.05)。结论川黄合剂能增强炎症状态下HPMCs活性,并降低炎症因子IL-6和IL-8的表达。     

慢性胃炎1号对T淋巴细胞IL-2、CSFs表达的影响

目的:探讨慢性胃炎1号对脾(阳)气虚模型T淋巴细胞分泌白细胞介素-2(IL-2)、集落刺激因子(CSFs)的影响.方法:以ConA活化的小鼠淋巴细胞作为反应细胞,测定大鼠脾条件培养液(SCM)和混合SCM中IL-2水平;以骨髓细胞作为反应细胞,测定大鼠SCM和混合SCM以及小鼠肺条件培养液(LCM)中CSFs活性.结果:该方药能显著促进脾(阳)气虚证大鼠脾淋巴细胞和混合脾淋巴细胞分泌IL-2(P均＜0.01),显著或明显促进大鼠脾淋巴细胞和混合脾淋巴细胞分泌CSFs(P＜0.01),显著促进小鼠肺组织自发性分泌CSFs(P＜0.01).结论:慢性胃炎1号有显著增强脾(阳)气虚证模型细胞免疫和骨髓造血功能的作用.     

子宫内膜异位症患者血清和腹腔液中VEGF、IL-6、TNF-α、CA125表达及临床意义

目的探讨子宫内膜异位症患者血清和腹腔液中血管内皮生长因子(VEGF)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子(TNF-α)和糖类抗原125(CA125)表达情况及临床意义。方法选取经腹腔镜手术及术后病理证实为子宫内膜异位症患者116例作为患者组,体检健康者80例作为对照组,分别采用放射免疫法和ELISA法检测患者组手术前后血清及腹腔液中VEGF、IL-6、TNF-α、CA125水平和对照组血清VEGF、IL-6、TNF-α、CA125水平,Spearman相关分析及绘制受试工作特征曲线(ROC)评价血清VEGF、IL-6、TNF-α和CA125在子宫内膜异位症诊断中的价值。结果患者组治疗前血清和腹腔液中VEGF、IL-6、TNF-α、CA125水平均明显高于治疗后(P均<0.05),且治疗前血清VEGF、IL-6、TNF-α、CA125水平均明显高于对照组(P均<0.05)。随着子宫内膜异位症分期的增加,血清和腹腔液中VEGF、IL-6、TNF-α、CA125水平呈上升趋势,且Ⅲ~Ⅳ期患者血清和腹腔液中VEGF、IL-6、TNF-α、CA125水平均明显高于Ⅰ~Ⅱ期(P均<0.05)。Spearman相关分析显示,血清和腹腔液中VEGF、IL-6、TNF-α、CA125水平与子宫内膜异位症分期均呈明显正相关性(P均<0.05),其中血清和腹腔液中VEGF水平与子宫内膜异位症Ⅲ~Ⅳ期相关性较好(r=0.862,P=0.000和r=0.884,P=0.000)。ROC曲线显示,血清VEGF、IL-6、TNF-α、CA125的AUC及95%CI分别为0.908(0.832,0.984)、0.796(0.731,0.872)、0.863(0.796,0.925)、0.852(0.784,0.921),VEGF对子宫内膜异位症的诊断效能优于IL-6、TNF-α和CA125。结论血清和腹腔液中VEGF、IL-6、TNF-α、CA125水平升高与子宫内膜异位症的发生及病情进展密切相关,联合检测有助于子宫内膜异位症的诊断及病情评估。