Fas/FasL抗原在Behcet病患者外周血T淋巴细胞的表达

目的研究Fas/FasL抗原在Behcet病患者外周血T淋巴细胞的表达及其可能的意义。方法采用流式细胞仪(flowcytometry)及三色荧光双标记细胞免疫荧光技术对26例Behcet病患者和43例正常人外周血T淋巴细胞表面Fas和FasL抗原的表达进行检测。结果Behcet病CD4+T细胞Fas表达阳性率为25.70%±7.32%,对照组为14.02%±6.30%,二者有显著性差异(P＜0.01);但CD4+T细胞的FasL表达在2组间无显著性差异。CD8+T细胞Fas表达阳性率为9.47%±6.97%,对照组为3.47%±2.75%,二者有显著性差异(P＜0.01),但FasL表达阳性率二者无显著性差异。结论Behcet病患者外周血CD4+和CD8+T细胞Fas的表达阳性率高于正常对照组,FasL的表达阳性率相对不足,提示这些活化的Fas+T淋巴细胞不能有效地通过Fas/FasL系统介导的凋亡途径被清除,此可能是Behcet病患者体内大量活化的淋巴细胞长期存在和炎症持续存在及复发的重要原因之一。     

Fas／FasL抗原在葡萄膜炎患者外周血T淋巴细胞上的表达

目的评价和探讨Fas/FasL抗原在葡萄膜炎患者外周血T淋巴细胞上的表达及其可能存在的意义.方法采用流式细胞术(flow cytometry,FCM)及三色荧光双标记细胞免疫荧光染色技术对26例Behcet病、17例Vogt-小柳原田综合征患者、25例特发性前葡萄膜炎患者及43例正常人外周血CD4+T细胞和CD8+T细胞表面Fas和FasL的表达进行检测.结果Behcet病、Vogt-小柳原田综合征和特发性前葡萄膜炎患者CD4+T细胞Fas的表达阳性率分别为(25.70±7.32)%、(19.60±11.02)%、(20.81±7.40)%,均显著高于正常对照组[(14.02±6.30)%],而FasL的表达阳性率与正常对照组比较,差异无显著性意义.Behcet病和Vogt-小柳原田综合征患者CD8+T细胞Fas的表达阳性率分别为(9.47±6.97)%,(6.84±5.53)%,均显著高于正常对照组[(3.47±2.75)%];特发性前葡萄膜炎患者CD8+T细胞Fas的表达阳性率[(5.34±3.08)%]与正常对照组[(3.47±2.75)%]比较,差异无显著性意义.Behcet病和Vogt-小柳原田综合征患者CD8+T细胞FasL的表达阳性率分别为(3.66±2.16)%、(4.05±1.38)%,与正常对照组[(3.09±2.04)%]比较,差异无显著性意义;特发性前葡萄膜炎患者CD8+T细胞FasL的表达阳性率[(1.58±0.93)%]低于正常对照组[(3.09±2.04)%].结论葡萄膜炎患者CD4+T细胞和CD8+T细胞Fas的表达阳性率高于正常对照组,而FasL的表达阳性率相对不足,提示这些活化的Fas+T淋巴细胞不能通过Fas/FasL系统介导的凋亡途径被清除,此可能是葡萄膜炎患者体内大量活化的淋巴细胞长期存在和炎症持续存在及复发的重要原因.     

Behcet病患者外周血淋巴细胞共刺激分子的表达

目的观察Behcet病患者外周血淋巴细胞CD80(B7-1)、CD86(B7-2)、CD28、CTLA-4分子的表达。方法采用流式细胞三色直接免疫荧光标记法，对24例Behcet病患者(Behcet病组)和20个正常人(对照组)外周血T、B淋巴细胞亚群的共刺激分子CD80、CD86、CD28和CTLA-4的表达进行检测。结果Behcet病患者外周血CD ⁴⁺ T细胞表面 CTLA-4 分子的表达[(3.18±1.18)%]高于对照组[(1.73±0.66) %]，两者差异有显著性的意义(t=-3.722,P<0.01)；CD19⁺ B细胞表面CD86分子的表达[(4.49±1.73)%]高于对照组[(2.40±1.49) %]，两组比较差异有显著性的意义(t=－2.071,P<0.05)。比较两组间其它分子的表达，差异均无显著性的意义。结论Behcet病患者 B7、 CD28的相互作用促进了葡萄膜炎的发生，阻断其相互作用可能为今后葡萄膜炎的治疗提供一种新思路。(中华眼底病杂志,2003,19:357-359)     

Behcet病患者外周血淋巴细胞Fas、FasL mRNA的表达及意义

目的 :探讨Fas、FasLmRNA在Behcet病患者外周血淋巴细胞的表达及可能的意义。方法 :抽取 19例Behcet病患者和 19个正常人的外周血 ,提取淋巴细胞的总RNA ,然后用荧光定量聚合酶链反应 (fluorescentquantitativepolymerasechainreaction ,FQ -PCR)的方法实时检测Fas、FasLPCR扩增的全过程 ,计算样本中Fas、FasLmRNA的表达量。结果 :Behcet病患者外周血淋巴细胞的FasmRNA的表达量 ( 1 5 0× 10 6± 0 77× 10 6)显著高于正常对照组 ( 0 5 7× 10 6± 0 2 0×10 6) (P <0 0 5 ) ,FasLmRNA的表达量 ( 2 0 0× 10 6± 2 2 5× 10 6)也显著高于正常对照组 ( 0 48× 10 6± 0 35× 10 6) (P <0 0 1)。结论 :Behcet病患者外周血中存在大量Fas、FasLmRNA高表达的活化的自身免疫性淋巴细胞 ,这些细胞的长期存在可能是患者炎症反复发作、病情迁延不愈的重要原因之一。     

Fas和FasL在视神经炎患者表达的研究

目的探讨视神经炎患者外周血淋巴细胞Fas和FasL的表达及意义。方法用流式细胞术检测26例视神经炎患者外周血淋巴细胞Fas和FasL的表达情况,并以26例同期住院的非免疫相关性疾病患者作为对照。结果视神经炎患者淋巴细胞Fas和FasL表达水平高于对照组(t值分别为2932、4647,P<0001)。Fas和FasL表达之间呈正相关(r=0516;P=0003)。结论Fas和FasL可能参与视神经炎的发病过程,Fas系统介导的自身免疫机制和细胞凋亡可能是髓鞘损害的主要原因。     

Beh(c)et病患者结节红斑组织中CD40/CD40L共刺激分子的表达

目的：探讨Behcet病患者结节红斑中CD40/CD40L分子的表达及意义。 方法：采用免疫组化方法对5例Behcet病活动期患者腿或臂部结节红斑中CD4,CD8,CD19,CD68,HLA-DR,CD40和CD40L分子表达的情况进行了检测,并用双重染色方法探讨了细胞来源。 结果：Behcet病结节红斑中表皮约90%的细胞表达CD40,但无CD40L表达。真皮和皮下表达CD4,CD8,CD19,CD68,HLA-DR,CD1a,CD40L和CD40的细胞均显著增多。双染结果显示,45%的CD4^＋T细胞表达CD40L分子。100?68^＋细胞表达CD40分子。59.2%的HLA-DR^＋细胞表达CD40分子。 结论：CD40L分子主要表达于CD4^＋T细胞,CD40分子主要表达于单核巨噬细胞、抗原提呈细胞和角朊细胞。CD40/CD40L通路可诱导巨噬细胞和T淋巴细胞的功能和活性,对Behcet病患者结节红斑的发生、炎症的持续和扩大起重要作用。     

伏格特-小柳-原田综合征患者外周血淋巴细胞Fas和FasL mRNA的表达

目的 探讨Fas、FasL mRNA在伏格特-烛柳-原田(Vogt-Koyanagi-Harada,VKH)综合征患者外周血淋巴细胞的表达。方法 于2000年1～6月抽取16例VKH综合征患者和19例正常人的外周血,提取淋巴细胞的总RNA,将RNA逆转录为cDNA,然后用荧光定量聚合酶链反应(fluorescent quantitative polymerase chain reaction,FQ-PCR)的方法实时检测Fas、FasL PCR扩增的全过程,计算样本中Fas、FasL mRNA的表达量。结果 VKH综合征患者外周血淋巴细胞的Fas mRNA的表达量[(1.6±2.0)×106]显著高于正常对照组[(5.7±2.0)×105](t=4.50,P<0.05),FasLmRNA的表达量[(1.8±1.5)×106]也显著高于正常对照组[(4.8±3.5)×105](t=9.57,P<0.05)。结论 VKH综合征患者外周血中长期存在的大量Fas、FasL mRNA高表达的活化自身免疫性淋巴细胞,可能是其炎性反应反复发作、病情迁延不愈的重要原因之一。(中华眼科杂志,2004,40:507-509)     

大鼠高危角膜移植免疫排斥反应中Fas/FasL表达

目的：研究大鼠高危角膜移植免疫排斥反应的病理变化和Fas／FasL的表达及IL-lra对Fas／FasL表达的影响。方法：用40只Wistar大鼠作为受体，20只SD大鼠作为供体，用缝线法诱导受体大鼠角膜新生血管，建立高危角膜移植动物模型。将实验大鼠随机分为实验组和对照组，每组10只。实验组从术后第一天起用IL-lra 5mg／ml点眼治疗，4次／天，共30天。对照组用相同的方法生理盐水点眼治疗。应用免疫组织化学染色方法检测IL—1ra治疗组和生理盐水对照组术后不同时期角膜植片中Fas和FasL的表达。结果：角膜移植术后Fas／FasL的表达明显升高，IL-1ra可对此产生明显的抑制作用。结论：Fas／FasL与角膜移植免疫排斥反应密切相关，IL—1ra可以抑制角膜移植免疫排斥反应中Fas／FasL的表达。     

辅酶Q10对大鼠紫外线光损伤角膜上皮细胞凋亡相关基因表达的影响

目的 研究辅酶Q10对紫外线所致角膜上皮细胞光损伤防护作用.方法 36只wistar雄性大鼠随机分为正常对照组、阳性对照组与辅酶Q10治疗组.紫外线连续照射24 h建立角膜上皮紫外线光损伤模型.治疗组于光照前3周每天辅酶Q10灌胃.观察角膜组织病理学改变并用免疫组化染色观察凋亡相关基因蛋白Bcl-2、Bax、Fas和FasL的表达,进行细胞计数与统计学检验.结果 正常对照组角膜上皮可以见到Bcl-2、Fas和FasL的阳性表达,很少见到Bax的阳性表达.阳性对照组和辅酶Q10治疗组均可以见到Bcl-2、Bax、Fas和FasL的表达.与正常组比较,阳性组Bcl-2表达阳性的角膜上皮细胞数显著减少,Bax表达阳性的角膜上皮细胞数显著增多(P＜0.01);治疗组Bcl-2、Bax表达阳性的细胞数与正常组相比无明显变化(P＞0.05);而阳性组Fas和FasL表达阳性的角膜上皮细胞数明显增多(P＜0.01),治疗组Fas和FasL表达阳性细胞数明显少于阳性组(P＜0.05).结论 辅酶Q10通过上调Bcl-2的表达,下调Bax、Fas和FasL的表达,能够阻抑凋亡过程和细胞的死亡.     

人眼组织中共刺激分子、Fas/FasL及主要组织相溶性复合体II类分子的免疫组织化学研究

目的 探讨正常人眼组织(虹膜睫状体、脉络膜、视网膜)中共刺激分子B7-1和B7-2、与凋亡相关的分子Fas/FasL、人类白细胞抗原(human leukocyte antigen, HLA)DR及CD68(抗巨噬细胞抗体)分子的表达及意义。 方法 12只正常供体人眼(死后16～24 h)均来自中山眼科中心眼库，将6只供体眼组织(虹膜睫状体、脉络膜、视网膜)行常规冰冻切片，另6只做视网膜平片，分别于各部分眼组织切片及视网膜平片进行免疫组织化学研究，探讨正常人眼组织中B7-1、B7-2、HLA-DR、CD68、Fas/FasL分子的表达。 结果 人虹膜睫状体中有B7-2、FasL、CD68、HLA-DR分子的表达；脉络膜中有B7-1、FasL、CD68、HLA-DR分子的表达；视网膜中可见HLA-DR、CD68、FasL分子的表达，而无B7-1、B7-2、Fas分子的表达。 结论 共刺激分子B7-1和B7-2、Fas/FasL及主要组织相溶性复合体(major histocompatibility complex, MHC-II)类分子在不同人眼组织中的表达不同，这些分子的表达可能对维持人眼组织免疫环境的稳定性起着重要作用。 （中华眼底病杂志，2003，19：109-112）     

Disturbed expression of Fas/FasL on CD4+ and CD8+T cells in Behcet's disease,Vogt-Koyanagi-Harada syndrome,and idiopathic anterior uveitis

Aims: To evaluate the expression of Fas/FasL antigen on peripheral blood T lymphocytes in patients with Behcet's disease, Vogt-Koyanagi-Harada (VKH) syndrome, and idiopathic anterior uveitis. Methods: The expression of Fas and FasL on peripheral blood T lymphocytes was determined using flow cytometry in 26 patients with Behcet's disease (BD), 17 patients with VKH syndrome, 25 patients with idiopathic anterior uveitis, and 43 healthy individuals (controls). Results: A higher proportion of CD4 + T cells expressing Fas was noted in patients with Behcet's disease (25.70 ± 7.32%), VKH syndrome (19.60 ± 11.02%), and idiopathic anterior uveitis (20.81 ± 7.40%) compared with controls (14.02 ± 6.30%). The expression of Fas on CD8 + cells from patients with Behcet's disease (9.47 ± 6.97%) and VKH syndrome (6.84 ± 5.5%) was also higher than that seen in controls (3.47 ± 2.75%). There was no difference in FasL expression on T cells between patients and controls except that a lower expression of FasL on CD8+ T cells was noted in patients with idiopathic anterior uveitis. Conclusion: A disturbed expression of Fas and FasL on T cells is present in patients with Behcet's disease, VKH syndrome, and idiopathic anterior uveitis, which may be involved in the perpetuation and recurrence of uveitis.     

Vogt-小柳原田综合征发病机制研究进展

Vogt-小柳原田综合征发病机制尚不完全清楚,目前的研究多倾向于认为该病为自身免疫性疾病,且与遗传因素有关。Fas/FasL表达异常、自身应答性T细胞的免疫调节异常,参与了Vogt-小柳原田综合征的发病过程。本文就近年来有关Vogt-小柳原田综合征发病机制的研究作一综述。     

Fas系统在视网膜母细胞瘤的表达

目的 观察视网膜母细胞瘤（ＲＢ）中Ｆａｓ和Ｆａｓ配体（ＦａｓＬ）的表达特征。方法 应用免疫组化法检测３２例ＲＢ标本中Ｆａｓ和ＦａｓＬ的表达。结果 Ｆａｓ和ＦａｓＬ在ＲＢ中的阳性表达率分别为７０．６％和６５．８％,二者呈正相关（Ｐ〈０．００１）。分化程度低的和经过放疗的表达率明显增高（Ｐ〈０．０５或０．０１）。其表达率与视神经受浸润与否、眼内期或青光眼期无关（Ｐ〉０．０５）。结论 ＲＢ中Ｆａｓ及ＦａｓＬ高表达,分化程度越低表达越强。Ｆａｓ和ＦａｓＬ的表达可作为临床判断ＲＢ恶性程度的指标之一。     

压力对大鼠纯化视网膜神经节细胞中Fas/FasL mRNA表达的影响

目的：通过检测不同压力及时间纯化培养的大鼠视网膜神经节细胞（retinal gangal ,Cells,RGCs)中Fas/FasL mRNA的表达，探讨Fas/FasL在RGCs凋亡中的作用，方法：用SD系大鼠脑源性星型胶质细胞同化培养液双界面法培养羊抗鼠Thy1.1单克隆抗体纯化的SD系大鼠RGCs，分别在0mmHg(对照组）和20，40，60and 80mmHg(1kPa=7.5mmHg)的压力下培养24h及48h后,用免疫组化和原位杂交对RGCs中Fas/FasL及其mRNA的变化进行定性及半定量观察，TUNEL法检测各组织细胞的凋亡，结果：纯化的RGCs培养24h用羊抗鼠FITC－Thy-1.1单克隆抗体进行鉴定阳性，纯度为97％，免疫组化和原位杂交检测Fas/FasL及其mRNA，结果培养24h对照组无表达，20mmHg组有较弱的表达信号，40，60及80mmHg组表达逐渐增强，与对照组比较差异均有显著性（P＜0．05），培养48h对照组弱表达，压力≥20mmHg各组较相同压力培养24h各组表达增强，差异有显著性（P＜0．05），TUNEL法检测细胞凋亡，培养24h对照组未见细胞凋亡。20mmHg见少量细胞凋亡，随着压力的增高细胞凋亡数增多，凋亡指数增高，与对照组相比均有显著性差异，培养48h组压力≥20mmHg各组较相同压力培养24h组凋亡指数增高，差异有显著性（P＜0．05），结论：压力可激活视网膜神经节细胞Fas/FasL mRNA表达，Fas/FasL系统活化参与了青光眼高眼压下视网膜神经节细胞的凋亡。     

大鼠角膜碱烧伤后视网膜细胞凋亡的研究

目的研究严重眼前段碱烧伤后视网膜组织内的细胞凋亡情况,以及Fas抗原(Fas)和Fas配体(Fas ligand,FasL)表达与细胞凋亡的关系。方法制作大鼠角膜严重碱烧伤模型。在烧伤的不同阶段,应用TUNEL法检测凋亡细胞、免疫组织化学法检测Fas、FasL在视网膜组织中的表达和变化,并与正常大鼠相对照。结果正常视网膜中基本未见TUNEL阳性细胞,碱烧伤3d后在视网膜神经节细胞、内核层细胞和内层血管内皮细胞中均可见不同程度的TUNEL阳性细胞。正常视网膜未见Fas表达,实验各组中均可见不同程度的Fas表达;正常视网膜FasL弱表达,实验各组FasL表达显著增强,与正常对照组比较差异有显著性(P<0.01)。Fas和FasL表达与凋亡之间具有较好的相关性,相关系数分别为0.899(P<0.01)和0.504(P<0.01)。结论严重眼前段碱烧伤后视网膜组织细胞存在异常凋亡,凋亡可能与Fas/FasL系统有关。     

内毒素诱导的大鼠葡萄膜炎细胞凋亡的研究

目的探讨大鼠内毒素诱导的葡萄膜炎（EIU）中葡萄膜和视网膜组织浸润细胞的凋亡,及Fas-FasL的表达与细胞凋亡的相关性。方法注射霍乱弧菌内毒素诱发大鼠EIU模型,内毒素注射后6、12、18、24、48h进行临床观察评分并行组织病理学检查。应用TUNEL法检测葡萄膜和视网膜中的凋亡细胞,免疫组织化学法检测Fas和FasL在葡萄膜和视网膜中的表达和变化。结果实验组大鼠均发生了EIU;葡萄膜和视网膜组织浸润细胞中可见TUNEL染色阳性凋亡细胞,18h达高峰,以虹膜和睫状体最为明显,凋亡阳性细胞数与正常对照组相比,差异有统计学意义（P〈0.01）;实验各组中均可见Fas表达,实验各组中FasL表达显著增强,与正常对照组相比差异有统计学意义（P〈0.01）。Fas和FasL的表达与凋亡之间呈正相关（r=0.923,0.807,P〈0.01）。结论EIU中葡萄膜和视网膜的浸润细胞存在凋亡现象,凋亡参与了炎症的迅速消退,Fas和FasL的高表达可能与内毒素诱导的葡萄膜炎眼组织的细胞凋亡有关。     

增生性玻璃体视网膜病变增殖膜的免疫组织化学及细胞凋亡研究

目的　检测增生性玻璃体视网膜病变 (PVR)增殖膜标本中细胞Fas、Fas配体 (Fasligand ,FasL)的表达和凋亡 ,并探讨Fas/FasL与凋亡的关系。方法　通过免疫组织化学的方法检测 12例增殖膜标本Fas和FasL的表达 ,TUNEL技术检测凋亡细胞。结果　PVR增殖膜标本中Fas和FasL阳性细胞百分率分别为 60 6%和 43 75 % ,偶见两者同时表达的细胞。 5例前膜和 2例下膜标本可见TUNEL染色阳性细胞核。凋亡与Fas、FasL相关系数均为 0 77(t =3 82 ,P <0 0 5 ) ,PVR病程与凋亡的r值为 0 74(t =3 11,P <0 0 1)。结论　Fas、FasL高表达与凋亡的正相关性提示 ,通过Fas/FasL系统诱导增殖细胞及炎症细胞凋亡 ,可能成为临床防治PVR的新策略