验方祛斑汤对A375人黑素瘤细胞黑素合成的影响

目的 研究验方祛斑汤对A375人黑素瘤细胞株细胞增殖、酪氨酸酶活性和黑素合成的影响,探讨验方治疗黄褐斑的作用机制.方法四甲基偶氮唑蓝法(MTT)测定验方对细胞增殖的影响,用酶学方法测定对酪氨酸酶活性的影响,475nm比色法测定验方对黑素含量的影响.结果验方祛斑汤对体外培养的A375人黑素瘤细胞具有抑制细胞增殖,降低酪氨酸酶活性和黑素含量作用.结论该方能抑制黑素细胞黑素合成,这可能是其治疗黄褐斑的作用机制之一.     

小柴胡汤对B16黑素瘤细胞黑素合成相关基因表达的影响

目的:研究不同浓度小柴胡汤对B16黑素瘤细胞黑素合成相关酶酪氨酸酶(tyrosinase,TYR),酪氨酸酶相关蛋白-1(tyrosinase related protein-1,TRP-1),酪氨酸酶相关蛋白-2(tyrosinase related protein-2,TRP-2)mRNA表达的影响。方法:采用CCK8检测细胞活力,选取小柴胡汤低、中、高质量浓度分别为0.1,1,2.5 g·L-1用于实验,逆转录-聚合酶链式反应(RTPCR)法检测B16细胞中TYR,TRP-1,TRP-2 mRNA的表达。结果:与正常组比较,随着浓度的增加,小柴胡汤水煎液能够显著下调细胞TYR,TRP-1,TRP-2 mRNA的表达(P0.05,P0.01)。结论:小柴胡汤对黑素合成的抑制作用除了通过直接抑制TYR活性外,还可通过下调酪氨酸酶家族其他成员TRP-1,TRP-2的基因表达、蛋白合成3方面实现其抑制黑素生成的作用,提示小柴胡汤对黑素生成的抑制可通过对酶蛋白转录后调节途径来实现。     

柿叶提取物对黑素细胞增殖和酪氨酸酶活性的影响

目的：筛选柿叶中对黑素细胞增殖及酪氨酸酶活性有明显抑制作用的部位。方法：柿叶70％乙醇提取后萃取得到不同的提取物;MTT法观察各提取物对小鼠B-16黑素瘤细胞增殖的影响,采用多巴氧化法研究柿叶提取物对黑素细胞酪氨酸酶活性的影响。结果：MTT法结果表明柿叶水提物和醇提物对黑素细胞的增殖均有抑制作用,且呈量效关系;70％醇提物的半数抑制浓度最低,与阳性对照相当;三氯甲烷和醋酸乙酯部分合并后对酪氨酸酶活性抑制作用明显。结论：本研究为柿叶的临床应用和进一步开发提供了一定的科学依据。     

养颜青娥丸对小鼠B-16黑素瘤细胞株黑素合成和酪氨酸酶的影响

 目的：研究养颜青娥丸对小鼠B-16黑素瘤细胞株细胞增殖、黑素合成的影响及对细胞内酪氨酸酶的影响。 方法：四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法测定养颜青娥丸对细胞增殖的影响；酶学方法研究养颜青娥丸对酪氨酸酶活性的作用；470 nm比色法测定合成黑素含量A值。结果：研究发现养颜青娥丸对黑素细胞增殖及酪氨酸酶活性有抑制作用，对合成黑素含量有降低作用；组方单味药中杜仲、沙苑子、制首乌对黑素细胞增殖及酪氨酸酶活性有抑制作用，对合成黑素含量有降低作用；补骨脂、核桃肉对黑素细胞增殖及酪氨酸酶活性有促进作用，对合成黑素含量有增加作用。结论：养颜青娥丸对黄褐斑可能有一定的治疗作用，但治疗机制不能单纯用生化学、酶学改变来解释。     

小柴胡汤对荷瘤小鼠肠粘膜T细胞及NK细胞的诱导

目的:探讨小柴胡汤抑制S180生长的机理是否与其诱导肠管粘膜免疫系统T细胞及NK细胞有关.方法:小柴胡汤提取物对荷瘤小鼠S180灌胃10d,观察其对肠管粘膜免疫系统T细胞及NK细胞的影响.结果:小柴胡汤对S180荷瘤鼠三批实验均有显著抑制作用,高剂量抑瘤率42.51%～45.29%.小柴胡汤诱导荷瘤小鼠肠粘膜T细胞及NK细胞在小肠显著性增加,在大肠T细胞显著性增加,NK细胞有增加趋势.结论:小柴胡汤提取物抑制S180瘤细胞生长的机理与其诱导肠管粘膜免疫系统T细胞及NK细胞有关.     

小柴胡汤对细胞因子的影响

以丙型肝炎患者外周血单核细胞，分析ＩＬ－２，ＩＬ－３，ＩＬ－４，ＩＬ－５，ＩＬ－１０及ＩＦＮ－γ等细胞因子的产生能及小柴胡汤对其影响。结果发现，肝炎患者细胞因子产生过量，可引起变态反应及体液免疫反应的异常，小柴胡汤可纠正其异常。     

当归提取物对黑素瘤细胞与角质形成细胞共培养模型黑素合成的影响

目的:考察当归水提取物对体外构建的人黑素瘤细胞( A375)与角质形成细胞(HaCaT)共培养模型黑素合成的影响.方法:分别培养A375细胞与HaCaT细胞,A375细胞与HaCaT细胞以1∶2的比例接种于培养板后加入MEM培养基培养24 h.用MEM将当归提取物制备成0.1 ～2g·L-15个质量浓度,细胞给药作用48 h,采用MTT法、NaOH裂解法、多巴氧化法分别测定给各组A375细胞与HaCaT细胞共培养模型的细胞活力、黑素含量和酪氨酸酶活性.结果:与阴性对照组相比,2,1,0.5 g·L-1当归提取物对共培养细胞的增殖有显著促进作用(P＜0.01);2,1,0.5,0.25 g·L-1当归提取物对黑素合成有显著的抑制作用(P ＜0.05或P＜0.01),呈现浓度依赖性的抑制作用趋势;当归提取物各浓度组对酪氨酸酶活性均有显著抑制作用,2,1 g·L-1组的抑制作用弱于熊果苷组(P＜0.01),0.5,0.25,0.125 g·L-1组与熊果苷组作用相当.结论:当归水提取物能够通过抑制酪氨酸酶活性来抑制A375细胞和HaCaT细胞共培养体系的黑素合成,为临床使用当归治疗黄褐斑提供了实验依据.     

小柴胡汤对Caco-2细胞MDR1 mRNA转录量及药物转运活性的影响

曾报道，小柴胡汤可增加细胞因子和细胞色素P450 mRNA转录量。为了明确小柴胡汤对与药物吸收密切相关的MDR1（P-gp）的影响，以Caco-2细胞探讨了MDR1 mRNA转录量及MDR1转运活性。     

山茱萸水提取物对黑素瘤细胞与角质形成细胞共培养模型黑素合成的影响

目的:考察山茱萸水提取物对体外构建的人黑素瘤细胞(A375)与角质形成细胞(Hacat)单层混合共培养模型黑素合成的影响。方法:将山茱萸水提取物制备成含生药0.75～12 g.L-15个质量浓度,细胞给药,通过MTT法、NaOH裂解法、多巴氧化法分别测定给药前后A375细胞与Hacat细胞共培养模型的细胞活力、黑素含量和酪氨酸酶活性。结果:与空白对照组相比,6,3,1.5,0.75 g.L-1山茱萸水提取物对共培养体系的细胞增殖率影响不大,对共培养体系黑素生成均有显著差异(P<0.01),对共培养体系酪氨酸酶活性有差异(P<0.05或P<0.01);与阳性对照药物熊果苷相比,6,3 g.L-1山茱萸水提取物对共培养体系黑素生成有显著差异(P<0.01),作用强于熊果苷,1.5,0.75 g.L-1山茱萸水提取物对共培养体系黑素生成无差异;与阳性对照药物熊果苷相比,6,3,1.5,0.75 g.L-1山茱萸水提取物对共培养体系酪氨酸酶活性无差异。结论:山茱萸水提取物能够通过抑制酪氨酸酶活性来抑制A375细胞和Hacat细胞共培养体系的黑素合成,为临床使用山茱萸治疗黄褐斑提供了实验依据。     

复方中药黄酮类成分提取工艺优化及抑制黑素合成活性研究

目的:以总黄酮为指标,对由当归、丹参、黄芪、黄芩、甘草、白薇六味中草药形成的组方进行提取工艺优化,并通过体外检测对经过UVB刺激后B16黑素瘤细胞黑素合成抑制活性,探究组方提取物美白功能。方法:采用CCK8法检测样品对B16细胞的增殖抑制活性,用Na OH裂解法测定黑素含量,用硝酸铝-亚硝酸钠比色法测定总黄酮含量,以总黄酮为指标,考察提取时间、提取温度、料液比、溶剂4个主要因素,通过单因素和正交试验,研究组方最佳提取工艺。结果:组方最佳提取工艺为提取时间3 h,提取温度85℃,提取料液比1∶20,提取溶剂75%乙醇。通过最佳提取工艺提取所得的组方提取物,对经过UVB刺激后的B16黑素瘤细胞黑素合成均具有显著抑制活性(P0.01),且呈剂量依赖型。结论:采用最佳提取工艺提取的组方提取率高,具有较佳的美白活性,能为复方美白功能添加剂的开发提供参考。     

48味中药对体外培养鼠黑素瘤细胞黑素形成的影响

研究了４８味常用于色素障碍性皮肤病的中药水煎剂对鼠黑素瘤细胞Ｂ１６Ｆ１０细胞黑素形成的作用。结果菟丝,透骨草等１０种中药能促进黑素的形成,白芷,猪苓、白蔹等１０种中药能抑制黑素形成,白芨,白芍,黄芪,白鲜皮等２８种中药对黑素形成无明显作用。     

48味中药对体外培养鼠黑素瘤细胞黑素形成的影响

研究了４８味常用于色素障碍性皮肤病的中药水煎剂对鼠黑素瘤细胞Ｂ１６Ｆ１０细胞黑素形成的作用。结果：菟丝子、透骨草等１０种中药能促进黑素的形成,白芷、猪苓、白蔹等１０种中药能抑制黑素形成,白芨、白芍、黄芪、白鲜皮等２８种中药对黑素形成无明显作用。     

小柴胡汤对慢乙肝HBVM及ALT的影响

本文采用小柴胡汤治疗慢性乙型肝炎(慢乙肝)36例,观察其血清谷丙转氨酶(ALT)和HBVM的变化,现报告如下。 1 一般资料 1.1 病例 按全国病毒性肝炎北京会议标准选择77例临床诊断为慢乙肝者,其中男性56例,女性21例;年龄18～56岁,均为HBsAg、HBeAg、HBVDNA阳性,随机分为治疗组和对照组。 1.2 治疗方法 治疗组:小柴胡汤水煎服,每日1剂,疗程3～4个月。对照组:肌苷片口服,0.2每日3次及维生素C口服,0.2每日3次。两组病例治疗期间均口服施尔康,必要时加     

消白合剂对人A375黑素瘤细胞株黑素合成的影响

目的观察消白合剂对人A375黑素瘤细胞生长、酪氨酸酶活性及黑素含量的影响。方法设消白合剂水提液体0．01、0．1、1、10g／L浓度实验组和空白对照组,体外观察对人A375黑素瘤细胞的增殖、酪氨酸酶的活性以及黑素含量的调节作用。四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法测定消白合剂对细胞增殖的影响,酶学方法测定对酪氨酸酶活性的影响,比色法（490nm）测定对黑素含量的影响。结果消白合剂在0．01～0．1g／L浓度范围内对细胞增殖、酪氨酸酶活性及黑素的合成有促进作用,而随着浓度的继续增高反而起抑制作用。结论消白合剂对人A375黑素瘤细胞株黑素的合成具有双向调节作用,临床运用时应该考虑到药物的量的优化。     

色象中药对人A375黑素瘤细胞酪氨酸酶活性的影响

目的:研究黑白两类中药水提取物对人A 375黑素瘤细胞酪氨酸酶活性调节的影响。方法:采用多巴速率氧化法研究中药对酪氨酸酶活性调节的影响。结果:研究发现,与对照组相比,黑色组中药大部分对酪氨酸酶活性有明显促进作用(P<0.05或P<0.01),而白色组大部分则有明显抑制作用(P<0.05或P<0.01)。另外,研究发现白蒺藜、白芷、白茯苓、白芍、当归具有双向调节作用,而桃仁虽为白色,但却起着促进作用。结论:黑色或深色类药物促进酪氨酸酶活性的作用更明显,而白色或浅色类药物的抑制作用更明显。说明药材颜色与色素代谢调节存在一定的相关性,在色素代谢障碍性皮肤病的临床治疗中值得借鉴应用。     

小柴胡汤对免疫抑制小鼠细胞因子影响的研究

目的：观察小柴胡汤对免疫抑制小鼠免疫相关因子的影响。方法：取健康昆明鼠90只,按照随机分组的原则分为5组：设正常对照组和治疗组,治疗组分为模型对照组和小柴胡汤低、中、高剂量组,每组18只。正常对照组腹腔注射生理盐水1mL/d,同时用生理盐水经食道灌胃0.3mL/d;治疗组用环磷酰胺腹腔注射（100mg/kg/d[1]）,模型对照组同时用生理盐水经食道灌胃0.3mL/d;低、中、高剂量组同时分别用小柴胡汤0.3mL/d（剂量为10g/kg、20g/kg、40g/kg）经食道灌胃,连续7d。末次给药后测量体重,摘眼球取血,分离血清,用ELISA法测定血清TNF-α、IL-2、IL-6含量;分离胸腺并测定重量,计算胸腺指数。结果：与模型对照组比较,小柴胡汤高、中、低剂量组胸腺指数均有显著升高（P〈0.01）;小柴胡汤高剂量组TNF-α有显著升高（P〈0.05）;小柴胡汤高、中、低剂量组IL-2均有显著升高（P〈0.01）;小柴胡汤高、中剂量组IL-6均有显著升高（P〈0.01）。结论：小柴胡汤能够拮抗环磷酰胺的免疫抑制作用,对环磷酰胺所致免疫抑制小鼠的胸腺指数有明显的提高作用;能够升高免疫抑制小鼠血清IL-2、IL-6及TNF-α的水平,其中小柴胡汤中、高剂量组效果更显著。     

驱虫斑鸠菊对人黑素瘤细胞酪氨酸酶活性及其基因表达水平的调节作用研究

目的:探讨驱虫斑鸠菊对人 A375黑素瘤细胞株分泌酪氨酸酶活性、黑素合成以及细胞内酪氨酸酶基因表达水平的影响。方法:采用酶学方法研究驱虫斑鸠菊对酪氨酸酶活性的影响;采用475 nm 比色法测定黑素含量;采用 TRIzol 试剂盒提取总 RNA,再用半定量逆转录聚合酶链反应扩增 cDNA,检测酪氨酸酶基因表达水平。结果:驱虫斑鸠菊可以增强 A375人黑素瘤细胞酪氨酸酶活性和黑色素合成能力,还可增强酪氨酸酶基因表达。结论:驱虫斑鸠菊可能从基因水平增强酪氨酸酶活性,促进黑素合成。     

小柴胡汤对鼠实验性肝纤维化的影响

目的:探讨小柴胡汤对鼠肝纤维化的抑制作用及该抑制作用与活性伊东细胞间的相互关系。方法:分别腹腔注射二甲基亚硝基胺和猪血清复制两种肝纤维化动物模型并投予小柴胡汤观察其预防与治疗作用。结果:小柴胡汤可促进肝维生素 A 含量恢复;降低肝胶原含量和明显抑制肝前α-Ⅰ型胶原的基因表达;显著减少Ⅰ、Ⅲ型胶原在肝脏沉积,明显减少。α-平滑肌原纤维阳性的伊东细胞的数目。结论:小柴胡汤可防治鼠肝纤维化的发生与发展。     

复色1号方对小鼠B16黑素瘤细胞增殖及酪氨酸酶活性的影响

目的 探讨复色1 号方对小鼠B16 黑素瘤细胞增殖及酪氨酸酶活性的影响.方法 采用MTT 法测定不同浓度的复色1 号方对小鼠B16 黑素瘤细胞增殖的影响,多巴速率氧化法测定对酪氨酸酶活性的影响,对其结果进行统计分析.结果 复色1 号方浓度在0.001～0.01g/l,范围内对小鼠B16 黑素瘤细胞的增殖与对照组相比无统计学意义(P＞0.05),0.05～0.1g/l 浓度范围内对小鼠B16 黑素瘤细胞的增殖与对照组相比有显著意义(P＜0.05),呈现一定的抑制作用;复色1 号方在0.001～0.1g/l 浓度范围内对小鼠B16 黑素瘤细胞中酪氨酸酶活性的影响与对照组相比,各浓度含药培养基组的A 值均有显著性差异(P＜0.05),呈剂量依赖性激活作用.在0.001～ 0.01g/l 浓度范围内,复色1 号方的最佳激活浓度为0.01g/l.结论 复色1 号方没有促进小鼠B16 黑素瘤细胞增殖的作用;在一定浓度范围内(0.001～0.1g/l),对小鼠B16 黑素瘤细胞酪氨酸酶的活性呈剂量依赖型激活作用.     

小柴胡汤对小鼠腹腔巨噬细胞释放 NO 的影响

为了了解小柴胡汤抗肝损害机理，采用Ｇｒｉｅｓｓ度剂检测小柴胡汤醇提物及灌服小柴胡汤醇提物小鼠血清对小鼠巨噬细胞释放ＮＯ的影响。结果显示：小柴胡汤醇提物直接加入小鼠腹腔巨噬细胞培养液中不影响ＮＯ的产生；而加入１２０ｍｉｎ，１８０ｍｉｎ，２４０ｍｉｎ采集的含小柴胡汤醇提物小鼠血清能促进ＮＯ的产生，结果显示：促进巨噬细胞释放ＮＯ可能是小柴胡汤抗肝损害的机理之一。