太原地区妇女儿童淋球菌感染调查及基因快速诊断

改进并建立快速检测淋球菌基因的聚合酶链反应，同时用涂片染色筛查和培养法作鉴定比较，对太原地区１９８６￣１９９５年妇女儿童淋球菌感染状况作调查分析，对９２０４例妇女儿童生殖道感染者作直接涂片染色检菌，阳性率为２６．５％，其中１２２０例同时用培养与ＰＣＲ法检测，阳性率为１２．４％和２１．０％，用ＰＣＲ直接检测临床标本ＮＧ－ＤＮＡ，具有简便，快速、敏感特异之优点。     

淋球菌快速免疫层析法的临床应用

目的评估采用免疫层析法(immunochromatography test,ICT)的淋病奈瑟菌抗原检测试剂盒,检测男性尿道分泌物、女性宫颈分泌物中淋球菌(Neisseria gonorrhoeae,NG)的临床应用。方法选取近2年本院门诊收集总计159例怀疑为淋病感染者的生殖道分泌物标本,进行淋球菌快速免疫层析检测,同时进行PCR检测,结果不符的以培养法为金标准。结果159例生殖道分泌物分析,ICT法的阳性率为94.12%,灵敏度为88.24%,特异度为99.11%。结论淋球菌ICT具有较高的灵敏度和特异性,且具有快速检测的特点,可为临床医生诊断淋病提供一个快速、准确、更具参考和诊断价值的检测结果。     

不孕不育者SAT法和尿液快速检测法检测淋球菌比较

目的比较实时荧光核酸恒温扩增技术(SAT)和尿液快速检测法在淋球菌(NG)检测中的诊断价值,以选择更为准确、快速、实用的临床检测方法。方法采集本院就诊的不孕不育对象200例,每例分别进行SAT法和尿液快速检测法检测,每例另取1份分泌物拭子标本做分离培养金标准对照用。结果 SAT法阳性率为22.00%,快速法阳性率为26.00%,其中疑似标本SAT法与快速法阳性率分别为39.00%、44.00%,无症状标本SAT法与快速法阳性率分别为5.00%、8.00%。SAT法的敏感性和特异性分别为100.00%、97.50%,尿液快速法的敏感性和特异性分别为100.00%、92.50%,SAT法与尿液快速法的敏感性均较好,SAT法的特异性高于尿液快速法。结论 NG在不孕不育人群中隐性感染不容忽视,加强就诊对象NG的筛查、诊治和预防,确保优生优育。SAT技术精准、特异,具有较高的临床实用性,是适合实验室诊断的检测方法。     

实时荧光PCR检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的研究

目的建立一种快速、准确检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的实时荧光聚合酶链反应（PCR）方法。方法收集临床诊断或疑似为败血症患者的血标本，直接提取细菌基因组DNA，确定其敏感性；以金黄色葡萄球菌nuc基因和MRSA的mecA基因为靶序列，合成引物，采用实时荧光PCR技术对上述基因进行检测，并将其结果与细菌常规培养结果对比，分析该方法检测MRSA的特异性、灵敏度、阳性预测值和阴性预测值。结果直接从血标本中提取细菌基因组DNA的灵敏度为10’CFU／mL。MRSA阳性血标本实时荧光PCR灵敏度为46．15％，特异性为100．00％，阳性预测值为100．00％，阴性预测值为56．25％。结论使用该方法快速检测临床血标本中MRSA的灵敏度不高，欲应用于临床快速诊断尚有若干问题需解决。     

三种检测淋病奈瑟氏菌方法结果比较

目的比较PCR检测法、细菌培养法、直接涂片法快速检测法检测淋病奈瑟氏菌的实验室应用效果评价。方法对临床288例诊断为淋病的分泌物分别采用PCR检测法、细菌培养法、直接涂片法快速检测法检测，对三种方法的阳性检测结果进行比较分析。结果PCR检测法的阳性率最高为79．86％。尿液淋球菌快速检测法的阳性率为45．83％，细菌培养法的阳性率为62．84％，直接涂片法的阳性率最低为43．40％。PCR检测法阳性检出率显著高于其它两种检测方法，相比较均有显著性差异（P〈0．05）。结论PCR检测法特异性强，灵敏度高，可作为慢性淋病检测的首选方法。     

聚合酶链反应检测慢性淋球菌感染

６８例拟诊慢性淋病患者的尿道和宫颈分泌物标本作淋球菌ＰＣＲ聚合栈链反应检测与淋球菌培养和直接涂片法比较,结果ＰＣＲ阳性率为７２．１％,培养阳性率３３．８％,标本直接涂片阳性率为２７．９％,而培养阳性者,ＰＣＲ检测全部阳性,但在涂片１９例阳性中,有２例培养和ＰＣＲ检测均阴性。由此可见ＰＣＲ对诊断慢性淋病具有灵敏度高、特异性强、简便、快速的新方法,帮笔者认为ＰＣＲ检测既可作为急慢性感染的诊断依据,又可     

金标法在餐饮从业人员体检中应用的可行性

本文从灵敏度、特异性、准确性及稳定性等四个方面对金标法检测乙肝表面抗原（HBsAg）进行了探讨,并分别用金标法及酶免疫法（ELIA法）对800例体检标本进行对比检测,发现金标法检测血清中乙肝表明抗原特异性强,灵敏度高,与ELISA法符合率为99．0％,且无需特殊仪器设备,快速简便,应用前景广泛,具有良好的推广价值。     

非淋菌性尿道炎支原体感染率调查及耐药性分析

目的非淋菌性尿道炎生殖道支原体感染率调查及耐药趋势调查。方法应用支原体定量鉴定和药敏综合试剂盒,对７１例ＮＧＵ患者泌尿生殖道标本作解脲支原体、人型支原体定量培养和鉴定,并对阳性标本作６种药敏的敏感性试验。结果ＮＧＵ患者中Ｕｕ和Ｍｈ感染总阳性率为４９．３％,女性为５６．８％,男性为４１．２％,二者有显著差异Ｐ＜０．０５。药敏试验结果表明支原体对强力霉素、交沙霉素及四环素的敏感率分别为８０％、８８．６％和７１．４％。结论支原体是ＮＧＵ患者主要的病原     

实时荧光定量PCR技术在群体感染性腹泻病原体快速筛查中的应用

目的:建立快速筛查感染性腹泻标本的实时荧光定量PCR法,考察其在群体感染性腹泻病原体快速筛查中的应用.方法:采用国家标准的细菌培养法(或传统ELISA法)对2006年丽水地区发生的总计14起共487例群体感染性腹泻标本进行病原体筛查,同时采用实时荧光定量PCR方法对该487例标本进行检测,比较两者的实验结果,并考察实时荧光定量PCR方法的特异性和灵敏度.结果:实时荧光定量PCR检测结果与传统检测方法的符合率为97.54%,除完全符合的278例标本之外,另有7例采用传统方法检测为阴性的标本用实时荧光定量PCR检测显示为阳性.表明实时荧光定量PCR方法具有更高的灵敏度;特异性和灵敏度实验表明实时荧光定量PCR方法的特异性达100%,灵敏度为102拷贝/ml.结论:实时荧光定量PCR法具有准确性好、灵敏度高、检测快速等优点.是一种理想的群体感染性腹泻病原体快速筛查的方法.     

荧光PCR探针熔解曲线法检测结核分枝杆菌耐利福平突变研究

目的对荧光PCR熔解曲线法检测结核分枝杆菌耐利福平突变方法进行临床研究,评价检测能力及在国境口岸的应用价值。方法应用荧光PCR熔解曲线法检测结核病人临床分离结核分枝杆菌,以传统药物敏感性试验为标准,获得该方法的灵敏性、特异性。结果对347例结核病人临床分离培养样本,传统药物敏感性试验检出271例利福平敏感标本,76例利福平耐药标本。荧光PCR熔解曲线法检出269例利福平敏感标本,78例利福平耐药标本,灵敏性为93.42%,特异性为97.42%,符合率为96.54%。结论荧光PCR熔解曲线法检测速度快速、灵敏度高、特异性强,可用于结核分枝杆菌利福平耐药突变的快速检测,适于国境口岸对耐多药结核病的快速筛查。     

实时荧光PCR检测志贺菌特异基因ipaH

目的：建立一种灵敏、快速检测志贺菌的实时荧光PCR方法,研究志贺菌在腹泻病人中的感染情况。方法：针对志贺菌特异性基因ipaH设计引物、探针,应用培养分离的志贺菌进行验证,同时检测360例临床标本并与培养法进行对照。结果：应用实时荧光PCR方法,10株志贺菌检测结果均为阳性,10株非志贺菌结果均为阴性;检测灵敏度达到4 cfu/test。360例临床标本中实时荧光PCR方法检测出29例阳性,培养法检测出12例阳性。结论：实时荧光PCR法检测志贺菌具有灵敏度高、快速方便的特点,可用于检测腹泻病人志贺菌感染。     

应用LAMP同时快速检测沙门菌和志贺菌的效果评价

目的探讨环介导等温扩增（LAMP）方法同时快速检测沙门菌和志贺菌的应用价值。方法通过通用增菌培养,应用LAMP方法和分离培养法分别对76份食堂从业人员粪便标本进行沙门菌和志贺菌检测。结果LAMP方法检出1份标本沙门菌阳性,阳性率为1．32％;分离培养法检出1份都柏林沙门菌,阳性率为1．32％;2种方法的检测结果一致。LAMP方法可在3h内检出沙门菌、志贺菌,而分离培养法需要3-5d,鼠伤寒沙门菌LAMP方法的灵敏度为170CFU／ml,福氏志贺菌LAMP方法的灵敏度为190CFU／ml,与常见的食源性致病菌均无交叉反应。结论与分离培养法相比,LAMP方法特异性高,灵敏度高,不需要特殊仪器,能够在简易的实验条件下,快速、简便地同时检测沙门菌和志贺菌,LAMP方法适用于基层疾病控制实验室开展沙门菌和志贺菌的快速筛查检测。     

血液唾液和尿液HIV抗体快速检测及免疫印迹试剂评估

目的对Calypte公司血液、唾液和尿液3种HIV-1／2抗体快速检测试剂与尿液和血液两种HIV-1抗体免疫印迹试剂进行评估,为引进检测性能良好的试剂提供参考。方法平行采集84位HIV阳性感染者指尖血、唾液、尿液和静脉血标本,分别用Calypte公司的3种快速试剂进行HIV-1／2抗体检测,并与梅里埃血液ELISA参比试剂检测结果比较;尿液和静脉血标本分别用Calypte公司的两种免疫印迹试剂进行检测,并与GerieLabs公司的血液免疫印迹参比试剂检测结果进行比较。结果血液、唾液和尿液快速检测试剂的敏感性分别为100％、100％和96．42％,3种快速试剂检测结果与梅里埃血液ELISA检测结果一致性分别为100％、100％和96．42％;血液和尿液HIV-1WB试剂检测结果与GeneLabs参比试剂的一致性为100％。结论Calypte公司3种HIV-1／2抗体快速检测试剂和两种HIV-1抗体免疫印迹试剂与相应的参比试剂有很好的一致性。     

对应征入伍青年实施尿液吗啡检测的应用研究

目的 为了防止吸毒人员进入部队,应用吗啡胶体金法对应征入伍健康青年进行尿液吗啡检测,为健康体检提供依据.方法 采用高度特异性单克隆抗体技术及免疫竞争法特异性定性检测尿液中的吗啡,其灵敏度参照美国国家药物滥用研究所推荐标准,阈值为300 ng/ml,计算阳性率.结果 对531名年应征入伍健康的男性青年尿液进行吗啡检测,共检测出10例吗啡阳性,阳性率为1.9%(10/531例).结论 用胶体金法检测尿液吗啡具有高度特异性,在健康青年体检中具有应用价值,可作为健康青年体检的一项筛选试验.     

肾结核患者分枝杆菌培养诊断价值的分析

目的分析BacT／ALERT3D全自动微生物快速培养检测系统和罗氏培养法在肾结核患者尿液分枝杆菌培养中的诊断价值。方法收集昆明结核病防治院2007年9月～2010年8月期间256例门诊和住院的肾结核患者尿液标本,用BacT／ALERT3D和罗氏培养这两种方法进行结核分枝杆菌培养,分析两种培养方法对肾结核的诊断价值。结果BacT／ALERT3D全自动微生物快速培养检测系统阳性率为43％,罗氏培养法阳性率为25．4％。BacT／ALERT3D全自动微生物快速培养检测系统的阳性率明显高于罗氏培养法,结果所需时间短于罗氏培养法,但是培养费用高于罗氏培养法。结论通过结核分枝杆菌培养两种方法的比较,对选择肾结核的检查方法有一定意义。     

锰的神经毒性机制与基因调控

为探讨聚合酶链反应（PCR）法诊断酿酒工人浅部真菌病的意义,采用蛋白酶消化法和煮沸法处理临床标本,提取真菌DNA后进行PCR扩增检测,并与培养法对比。收集的191例标本经PCR法检出阳性者173例（占90．58％）,培养法检出阳性者162例（占84．82％）。研究表明,PCR法具有快速、简便、敏感性和特异性高等特点,可用于职业性浅部真菌病的检测和诊断。     

对应征入伍青年实施尿液吗啡检测的应用研究

目的为了防止吸毒人员进入部队,应用吗啡胶体金法对应征入伍健康青年进行尿液吗啡检测,为健康体检提供依据。方法采用高度特异性单克隆抗体技术及免疫竞争法特异性定性检测尿液中的吗啡,其灵敏度参照美国国家药物滥用研究所推荐标准,阈值为300 ng/ml,计算阳性率。结果对531名年应征入伍健康的男性青年尿液进行吗啡检测,共检测出10例吗啡阳性,阳性率为1.9%(10/531例)。结论用胶体金法检测尿液吗啡具有高度特异性,在健康青年体检中具有应用价值,可作为健康青年体检的一项筛选试验。     

基于流感嗜血杆菌外膜蛋白ompP6基因的PCR的建立和临床应用

目的建立基于流感嗜血杆菌外膜蛋白omp P6基因的PCR检测方法,并确定其检测限、灵敏度和特异性。方法根据Gen Bank公布的omp P6基因核苷酸序列设计引物,用流感嗜血杆菌标准菌株验证其检测限,通过检测1 225例呼吸道感染标本并与细菌培养法比较确定所建立的PCR检测方法的灵敏度与特异性。结果 1 225例呼吸道感染标本,细菌培养流感嗜血杆菌的阳性率为10.94%(134/1 225),PCR检测流感嗜血杆菌的阳性率为19.18%(235/1 225),培养法检测阳性标本PCR法检测均阳性。建立的PCR方法检测临床标本流感嗜血杆菌检出率明显高于细菌培养(χ2=32.5,P0.01)。检测时模板的下限为3 pg,方法的灵敏度为100%,特异性为90.7%。结论建立的PCR方法具有快速和灵敏度高的特点,对于流感嗜血杆菌引起的呼吸道感染早期诊断有重要意义。     

荧光定量PCR技术在痰结核菌检测中的应用

目的 比较荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)技术与痰涂片抗酸染色、改良罗氏培养法在检测结核分枝杆菌的灵敏度和特异性,探讨FQ-PCR检测痰标本中结核分枝杆菌的应用价值.方法 对240例临床确诊的肺结核病患者和107例非结核呼吸系统疾病患者的痰标本分别应用FQ-PCR法、痰涂片抗酸染色法、改良罗氏培养法检测结核分枝杆菌;另用FQ-PCR法检测14例非结核分枝杆菌DNA以评价该方法对非结核分枝杆菌检测的特异性.结果 FQ-PCR检测结核分枝杆菌的敏感性分别为52.1％ (125/240),明显高于抗酸染色法的24.2％ (58/240)和改良罗氏培养法的35.4％ (85/240),x2=39.36,P＜0.01;FQ-PCR法对14例非结核分枝杆菌检测结果全部为阴性,特异性为100％.结论 FQ-PCR是一种快速、敏感性高、特异性强的结核分枝杆菌辅助诊断方法,并且可以有效地鉴别非结核分枝杆菌感染,在肺结核的临床实验室诊断上有重要的应用价值.     

不同核酸检测方法检测非淋球菌性尿道炎病原体

目的探讨不同核酸检测方法在非淋球菌性尿道炎病原体检测中的应用价值。方法对162例疑似非淋球菌性尿道炎患者样本同时运用实时荧光定量PCR法(FQ-PCR)和实时核酸恒温扩增检测技术(SAT)进行沙眼衣原体(Ct)和解脲支原体(Uu)检测,并对结果比较分析。结果分别对162例患者尿液标本和拭子标本作Ct病原核酸检测,SAT法阳性率均为18.52%。FQ-PCR法阳性率分别为17.28%和20.37%。尿液标本和拭子标本Uu病原核酸检测,SAT法阳性率均为53.70%;FQ-PCR法阳性率分别为41.98%和50.00%。以FQ-PCR法为参考方法,SAT法在Ct检测中拭子标本的检测灵敏度为87.88%,特异度为99.22%。尿液标本的检测灵敏度为92.86%,特异度为97.01%。在Uu检测中,SAT法拭子标本的检测灵敏度为90.12,特异度为82.72%。尿液标本的检测灵敏度为100.00%,特异度为79.79%。结论 SAT和FQ-PCR均能为临床诊断Ct,Uu感染提供依据,SAT可以以尿液标本代替拭子标本,且可以用于判愈,防止过度治疗。