益气活血复方对兔颈总动脉球囊损伤后VCAM-1表达的影响

目的观察益气活血复方（YQHXFF）对兔颈动脉内皮损伤后血管内膜增生及血管细胞黏附分子-1（VCAM-1）表达的影响。方法将雄性新西兰白兔28只,随机分为3组,空白组给予普通饲料8周;模型组和益气活血复方组给予高脂喂养6周后,用球囊拉伤法建立兔颈总动脉内皮损伤模型,第8周末处死动物,免疫组化法检测损伤处颈总动脉组织中VCAM-1表达,HE染色观察颈动脉组织病理形态学改变。结果与模型组对比,益气活血复方可明显抑制损伤后的动脉内膜增殖反应,下调损伤局部VCAM-1的表达水平（P〈0．05）。结论益气活血复方可抑制球囊损伤后动脉内膜增殖反应,其机制可能与下调VCAM-1表达有关。     

11,12-环氧二十碳三烯酸对缺氧/复氧诱导的内皮细胞损伤及细胞间黏附因子-1表达的影响

目的观察11,12-环氧二十碳三烯酸(11,12-epoxyeicosatrienoic acids,11,12-EET)对缺氧/复氧诱导的内皮细胞损伤以及黏附分子表达的影响,了解环氧二十碳三烯酸发挥血管保护作用的可能途径,初步探讨其作用机制。方法采用原代培养人脐静脉内皮细胞,用数字表法将其随机分为对照组、11,12-EET对照组、缺氧/复氧组和11,12-EET缺氧/复氧组。通过向培养瓶内通入混合气体(2%O2,5%CO2,93%N2)3h,复氧1h,复制缺氧/复氧损伤模型。采用MTT法检测细胞活力,用比色法检测培养液中超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)的变化,用RT-PCR法检测细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)mRNA表达,用酶联免疫吸附实验测定细胞间黏附分子-1蛋白表达,用Western blotting方法检测蛋白激酶B(Akt)。结果11,12-EET在常氧条件下可对细胞造成轻度损伤,在缺氧/复氧条件下能显著提高内皮细胞的存活率,提高SOD的活性,降低MDA的含量,抑制细胞间黏附分子-1 mRNA和蛋白的表达,提高Akt的表达。结论11,12-EET具有减轻内皮细胞缺氧/复氧损伤作用,这可能与其能提高缺氧/复氧条件下内皮细胞SOD活性、清除氧自由基、抑制细胞间黏附分子-1 mRNA和蛋白的表达和促进Akt的表达有关。     

脓疱型银屑病患者外周血中性粒细胞及皮损部位黏附分子的表达

目的探讨黏附分子CD15、CD11b、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)在脓疱型银屑病(PP)发病中的作用,为该病的治疗探索新途径。方法应用流式细胞仪检测13例患者(银屑病组)和13例正常人(对照组)外周血中性粒细胞(PMN)表面CD15、CD11b的荧光强度。应用免疫组化方法检测13例患者皮损处脓疱壁、血管内皮细胞、角质形成细胞ICAM-1的表达水平,并与正常皮肤标本的测定结果进行比较。结果PP患者与正常对照者PMN表面CD15、CD11b的荧光强度间差别均有显著性意义(P<0.05)。PP患者皮损组织的脓疱壁、真皮浅层和乳头内血管及表皮角质形成细胞ICAM-1染色呈阳性;表皮内ICAM-1的表达呈局灶性分布;正常皮肤组织ICAM-1染色呈阴性。结论黏附分子CD15、CD11b、ICAM-1参与了PP的发病,并促进炎症发展,提示抗人黏附分子抗体可能成为治疗PP的新药。     

高浓度葡萄糖对培养血管内皮细胞活力和黏附分子表达的影响

目的探讨高浓度葡萄糖作用于脐静脉内皮细胞后,对脐静脉血管内皮细胞系的活力和白细胞黏附分子〔血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)〕表达的影响,为阐明高血糖在糖尿病血管病变的早期发病中作用与机制提供依据。方法采用胎盘蓝染色法及流式细胞仪检测细胞活力和黏附分子表达。结果高浓度葡萄糖可使内皮细胞的死亡率增加,ICAM-1表达显著上调,但VCAM-1表达无明显变化。结论减少高糖诱导的ICAM-1、VCAM-1表达增加,对减少糖尿病患者慢性并发症的发生概率是一条有益的途径。     

腺病毒载体介导hRAMP1调节兔颈动脉球囊损伤后炎症细胞因子表达对增生内膜的影响

目的探讨腺病毒载体介导人受体活性修饰蛋白-1(receptor activity modifying protein-1,hRAMP1)基因对兔颈动脉粥样硬化并球囊成形术后炎性细胞因子表达的影响。方法建立兔动脉粥样硬化狭窄模型并行球囊损伤血管(简称血管成形术),随机抽样分为RAMP1组(n=18)和对照组(n=18),经球囊局部注射携带hRAMP1基因腺病毒载体(pAd2-GFP-RAMP1)或PBS,于注射后7、14 d和28 d,应用ELISA法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和C-反应蛋白(CRP)表达水平;Western blot检测局部hRAMP1目的基因表达;免疫组织化学染色测定血管局部TNF-α表达,HE染色检测血管形态学。结果血管成形术后不同时间点TNF-α表达增加[7 d:(74.13±4.99),14 d:(93.40±6.69),28 d:(67.46±6.57)],外源hRAMP1注射后TNF-α表达下降[7 d:(64.95±6.77),14 d:(75.29±4.73),28 d:(45.08±5.00),P<0.05],病毒注射后7 d和14 d RAMP1组CRP水平[7 d:(29.27±1.57),14 d:(9.68±1.60)]与对照组比较[7 d:(43.96±7.88),14 d:(13.51±1.68)]显著下降(P<0.05),28 d 2组间无差异性;腺病毒注射后28 d损伤血管局部仍检测到hRAMP1蛋白表达,同时RAMP1组局部TNF-α表达与对照组比较明显下降,HE染色显示:RAMP1组新生内膜面积[7 d:(0.07±0.18),14 d:(0.15±0.05),28 d:(0.35±0.05)]与对照组[7 d:(0.14±0.02),14 d:(0.39±0.09),28 d:(0.56±0.05]比较明显降低(P<0.05)。结论外源hRAMP1基因调节兔动脉粥样硬化并血管成形术后CRP和TNF-α的表达,抑制血管成形术后再狭窄。     

川芎嗪抑制大鼠颈动脉球囊损伤后再狭窄的在体研究

研究川芎嗪对大鼠颈动脉球囊损伤后再狭窄的影响及机制。方法建立SD大鼠颈动脉球囊损伤模型,分为假手术组、模型组和川芎嗪组。川芎嗪组为川芎嗪[10mg（kg·d）]尾静脉预给药1周,球囊成形术后继续同剂量川芎嗪尾静脉注射6周。于第6周末收集损伤段颈动脉,病理切片HE染色测量内中膜厚度比及Western blot检测相关蛋白表达水平。结果大鼠颈动脉球囊损伤后6周,损伤段血管内膜明显增厚,模型组和川芎嗪组与假手术组比较,内膜/中膜面积比显著增加（P＜0.05）;与模型组比较,川芎嗪组内膜/中膜面积比下降（P＜0.05）。模型组损伤段血管Wnt 4、Dvl-1、β- catenin、Cyclin- D1表达表达水平较假手术组显著增高,而川芎嗪组的表达明显减少（均P＜0.05）。结论川芎嗪可以抑制大鼠颈动脉球囊损伤后再狭窄,其机制与下调Wnt信号通路有关。     

miR-503-5p对IL-1β诱导的血管内皮细胞增殖、迁移、凋亡和黏附的影响

目的探讨miR-503-5p对白细胞介素1β（IL-1β）诱导的血管内皮细胞增殖、迁移、凋亡和黏附的影响和分子机制。方法将人脐静脉血管内皮细胞（HUVECs）分为NC组、IL-1β组、IL-1β+anti-miR-con组及IL-1β+anti-miR-503-5p组。分别采用噻唑蓝（MTT）法、黏附实验、流式细胞术、Transwell实验检测HUVECs增殖、黏附、凋亡和迁移能力。Western blotting检测细胞间黏附分子1（ICAM-1）、血管细胞黏附分子1（VCAM-1）表达水平。结果与NC组比较,IL-1β组HUVECs细胞活力、迁移细胞数显著降低,细胞黏附数、凋亡率、ICAM-1和VCAM-1蛋白表达显著升高（P < 0.01）。与IL-1β+anti-miR-con组比较,IL-1β+anti-miR-503-5p组HUVECs细胞活力、迁移细胞数显著升高,细胞黏附数、凋亡率、ICAM-1和VCAM-1蛋白表达显著降低（P < 0.01）。结论抑制miR-503-5p表达可促进血管内皮细胞增殖和迁移,抑制细胞黏附和凋亡,其机制可能与抑制ICAM-1和VCAM-1表达有关。     

Effect of inflammatory cytokine expression in adenovirus vector-mediated human receptor activity modifying protein-1 after carotid artery saccule injury on proliferative intima

[目的]探讨腺病毒载体介导人受体活性修饰蛋白-1(receptor activity modifying protein-1,hRAMPI)基因对兔颈动脉粥样硬化并球囊成形术后炎性细胞因子表达的影响.[方法]建立兔动脉粥样硬化狭窄模型并行球囊损伤血管(简称血管成形术),随机抽样分为RAMP1组(n=18)和对照组(n=18),经球囊局部注射携带hRAMP1基因腺病毒载体(pAd2-GFP-RAMP1)或PBS,于注射后7、14d和28d,应用ELISA法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和C-反应蛋白(CRP)表达水平；Western blot检测局部hRAMP1目的基因表达；免疫组织化学染色测定血管局部TNF-α表达,HE染色检测血管形态学.[结果]血管成形术后不同时间点TNF-α表达增加[7d:(74.13±4.99),14d:(93.40±6.69),28d:(67.46±6.57)],外源hRAMP1注射后TNF-α表达下降[7d:(64.95±6.77),14d:(75.29±4.73),28d:(45.08±5.00),P＜O.05],病毒注射后7d和14d RAMP1组CRP水平[7d:(29.27±1.57),14d:(9.68±1.60)]与对照组比较[7d:(43.96±7.88),14d:(13.51±1.68)]显著下降(P＜0.05),28d2组间无差异性；腺病毒注射后28d损伤血管局部仍检测到hRAMP1蛋白表达,同时RAMP1组局部TNF-α表达与对照组比较明显下降,HE染色显示:RAMP1组新生内膜面积[7d:(0.07±0.18),14d:(0.15±0.05),28d:(0.35±0.05)]与对照组[7d:(0.14±0.02),14d:(0.39±0.09),28d:(0.56±0.05]比较明显降低(P＜0.05).[结论]外源hRAMPI基因调节兔动脉粥样硬化并血管成形术后CRP和TNF-α的表达,抑制血管成形术后再狭窄.     

褪黑素减轻大鼠颈动脉球囊损伤后炎性细胞浸润

目的 探讨褪黑素对大鼠的颈动脉球囊损伤后炎性细胞浸润的影响。方法 随机将20只雄性SD大鼠分为正常对照组、正常并注射褪黑素组、球囊损伤组、球囊损伤并注射褪黑素组。将各组大鼠的颈动脉行球囊损伤,14天后取出实验大鼠的颈动脉。免疫组织化学染色检测实验大鼠颈动脉内的CD45表达情况。Western blot法检测实验大鼠颈动脉内的NF-κB、MCP-1、VCAM-1、ICAM-1的表达情况。结果 球囊损伤能明显诱导实验大鼠颈动脉壁内的炎性细胞浸润。球囊损伤并注射褪黑素组大鼠的炎性细胞浸润程度显著低于球囊损伤组大鼠(P<0.01)。球囊损伤组大鼠的NF-κB、MCP-1、VCAM-1、ICAM-1的表达显著高于正常对照组大鼠(P<0.01)。球囊损伤并注射褪黑素组大鼠的NF-κB、MCP-1、VCAM-1、ICAM-1的表达显著低于球囊损伤组大鼠(P<0.05)。结论 球囊损伤能明显诱导实验大鼠颈动脉的炎性细胞浸润和炎性因子的表达,褪黑素能够减轻此炎性细胞浸润。     

水溶性壳聚糖对腹主动脉球囊损伤大鼠血管狭窄的抑制作用

[摘 要］ 目的:探讨水溶性壳聚糖（WSC）在血管狭窄方面的作用,阐明WSC对大鼠腹主动脉球囊损伤的影响,为开发防治血管狭窄的高效低不良反应药物提供实验依据。方法：75 只雄性 SD大鼠随机分 5 组：50、100和 200 mg/kg 的WSC 组、模型组和对照组（假手术组）,每组15只。采用球囊损伤大鼠腹主动脉内膜方法制备血管狭窄模型,对照组仅分离结扎右髂总动脉。造模后WSC各组经大鼠尾静脉分别注射50、100 和 200 mg/kg浓度的 WSC;模型组和对照组注射生理盐水,每次0.4 mL,每天1次。每组按 7、14 和 21 d 3个时点随机选取 5 只大鼠处死,常规HE染色制作病理切片,观察各组大鼠血管损伤形态,计算相对管腔面积,比较 WSC 对血管狭窄的抑制作用。结果：普通光学显微镜观察,对照组大鼠腹主动脉结构完整,中膜血管平滑肌细胞排列整齐。模型组大鼠在第7天时腹主动脉血管内膜增生明显;第14天时可见内膜、中膜明显增厚,管壁局限性隆起;第21天内膜增厚,以平滑肌细胞为主,中膜细胞排列紊乱,有假腔形成。与模型组比较,实验组第7天时内膜增生明显减轻,以100 和 200 mg/kg WSC组为最好;第14天时可见内膜、中膜增厚均不明显,但200 mg/kgWSC组仍可见大量排列紊乱的血管平滑肌细胞;第21天时各浓度的WSC组均表现正常,其中以200 mg/kg WSC组更为明显。管腔相对面积比较,对照组大鼠管腔面积随术后时间变化不明显（P>0.05）;模型组大鼠管腔面积在第7、14 和 21天时均减小,与对照组比较差异有统计学意义（P<0.01）。50 mg/kgWSC 组大鼠在第 14 天和第21天时,管腔面积有一定的增加,但与对照组比较差异有统计学意义（P<0.01）;100 mg/kg WSC组大鼠的管腔面积明显大于 50 mg/kg WSC 组,其中在第14 天和第21天时的管腔面积与对照组比较差异有统计学意义（P<0.05）;200 mg/kg WSC 组的管腔面积在多于 14 d时为最大,与对照组相比较差异无统计学意义（P>0.05）。各实验组不同天数之间比较差异均无统计学意义（P>0.05）。结论：WSC对大鼠腹主动脉球囊损伤后的血管狭窄有明显抑制作用,其中以200mg/kg浓度的 WSC作用14 d以上为抑制作用最强。     

球囊损伤术建立血管再狭窄鼠模型

目的 建立大鼠颈动脉球囊损伤血管再狭窄模型,观察损伤血管的组织形态学变化.方法 雄性Wistar大鼠36只,随机分为假手术组（对照组）、损伤后1d组、损伤后3d组、损伤后7d组、损伤后14 d组、损伤后28 d组,每组6只.除假手术组其余各组均利用PTCA球囊导管损伤颈动脉建立血管再狭窄模型,用光学显微镜观察损伤后不同时间血管的形态学变化.结果 球囊导管损伤术使颈动脉内皮剥脱、VSMC增殖、迁移、新生内膜增生,导致管腔狭窄.损伤后7d,内膜开始增生,14 d内膜增生最显著,28 d达到最大.结论 利用PTCA球囊导管成功建立血管再狭窄鼠模型,方法科学,能满足研究血管损伤后再狭窄的需要.     

CaN-NFATc3途径在大鼠腹主动脉球囊扩张术后再狭窄中的作用

目的研究钙调神经磷酸酶（CaN）及其下游活化T细胞核因子（NFATc3）在球囊扩张术后再狭窄中的作用,为防治血管再 狭窄提供新的理论依据。方法雄性SD大鼠随机分为假手术组（n=12）、球囊组（n=12）、环孢菌素(CsA) 组（n=12）。球囊组大鼠 用球囊扩张术损伤腹主动脉;CsA组大鼠从手术前3d至实验结束,每天灌喂CsA12.5 mg/（kg.d）-1。球囊损伤术后30 d取材,血 管组织作苏木素—伊红（HE）染色、免疫组化检测CaN在血管壁中的水平,光学显微镜观察病理学改变;Rea1 time PCR技术检 测血管壁组织中CaN、NFATc3的mRNA表达;Elisa法测定血清MCP-1水平。结果球囊损伤后血管壁出现新生内膜,且厚度不 均;CsA组与球囊损伤组相比较内膜增生、内膜/中膜厚度明显减轻（P<0.05）。与假手术组相比,球囊损伤组血管壁组织CaN蛋 白及mRNA表达均明显升高、NFATc3的mRNA表达显著增加,血浆炎症因子MCP-1水平也升高（P<0.05）。CsA组上述各项指 标均显著低于球囊损伤组（P<0.05）。结论CaN-NFATc3途径参与大鼠球囊损伤术后再狭窄的发生;CsA通过抑制该通路减轻 再狭窄的形成。     

葛根素对球囊损伤后再狭窄过程中组织蛋白酶S及胱蛋白C表达的影响

目的研究葛根素对动脉球囊损伤后再狭窄成过程中组织蛋白酶S（cathepsin S,CatS）及其抑制剂胱蛋白C（cystatin C,CysC）表达的影响。方法 建立兔髂－腹主动脉球囊损伤后再狭窄模型,观察应用葛根素治疗前后再狭窄形成的范围、再狭窄局部CatS及其抑制剂CysC的表达变化以及内皮下胶原的变化。结果葛根素组［100mg/(kg·d)］与球囊损伤组比较,再狭窄范围明显减小,差异具有统计学意义（P<0.05）;CatS的表达水平减低,差异具有统计学意义（P<0.05）;CysC表达水平差异无统计学意义（P>0.05）;内皮下胶原含量减少,差异具有统计学意义（P<0.01）。结论葛根素可降低球囊损伤部位再狭窄形成过程中CatS表达、减少斑块内胶原的聚集而发挥一定的抑制再狭窄形成作用,但对CysC调节作用不显著。     

糖尿病大鼠血管损伤后纤连蛋白的表达

目的 :观察糖尿病大鼠血管损伤后纤连蛋白 (FN)mRNA和蛋白的表达。方法 :Wistar大鼠 32只 ,随机分为正常对照组 (n =8) ,手术对照组及糖尿病组 (均n =12 ) ,糖尿病组单次腹腔注射链脲佐菌素 (STZ)制成糖尿病模型。后 2组大鼠均行胸主动脉至左髂总动脉球囊损伤后 ,每组选 8只用于试验。术后 14d用Northern印迹杂交测定血管平滑肌细胞FNmRNA的表达 ,用免疫组化检测FN在血管壁的表达。结果 :与手术对照组相比 ,糖尿病组FNmRNA和蛋白表达均明显增高 (P <0 .0 1) ,而此 2组又均高于对照组 (P <0 .0 1)。结论 :糖尿病患者PTCA后再狭窄的发生与FNmRNA及蛋白水平高表达有关     

卡维地洛对大鼠颈动脉损伤后MMP-9和TIMP-1表达的影响

目的：观察卡维地洛（CAR）对大鼠颈动脉损伤血管组织MMP-9、TIMP-1表达的影响,探讨卡维地洛防治再狭窄的机制。方法：雄性Wistar大鼠90只,随机分为假手术组、损伤组和CAR组,后两组行颈动脉球囊损伤术。三组均于术后1 d、3 d、7 d、14 d、28 d处死大鼠。光镜下观察血管损伤后内膜增生情况,用免疫组化和RT-PCR法检测MMP-9、TIMP-1在各组术后不同时间点的表达情况。结果：与损伤组比较,术后14 d CAR组内膜面积、内膜与中膜面积比值显著减少,管腔面积显著扩大（P〈0.05）;与损伤组比较,CAR组术后3-14d MMP-9表达显著减少（P〈0.05）,而TIMP-1表达无显著变化。结论：卡维地洛有效抑制大鼠颈动脉损伤后MMP-9表达,抑制了VSMCs迁移、增殖,改善了细胞外基质的合成与降解平衡,从而减轻再狭窄。     

白芍总苷对大鼠球囊损伤再狭窄的 作用及机制研究

目的 分别应用白芍总苷灌胃及白芍总苷浸泡球囊法观察大鼠球囊损伤前后及白芍总苷干预对 Th17、Treg 细胞的影响。方法 将SD 大鼠随机分为对照组、球囊损伤组、白芍总苷灌胃组及白芍总苷浸泡 球囊组。对照组采用生理盐水灌胃4 d 后行假手术，术后生理盐水灌胃13 d ；球囊损伤组采用生理盐水灌胃 4 d 后在左侧颈总动脉行球囊损伤，术后生理盐水灌胃13 d ；白芍总苷灌胃组采用白芍总苷灌胃4 d 后行球囊 损伤，术后白芍总苷灌胃13 d ；白芍总苷浸泡球囊组采用生理盐水灌胃4 d 后行球囊损伤，术前将球囊浸泡于 白芍总苷稀释液中4 h，术后生理盐水灌胃13 d。各组术后14 d 取左侧颈总动脉，采用流式细胞术分别检测各 组脾脏中Th17、Treg 细胞占CD4+T 细胞的百分比，计算Th17/Treg 细胞比例，损伤血管行苏木精- 伊红染色， 观察内膜变化。结果 球囊损伤组管腔面积较对照组小，内膜面积及内膜面积/ 中膜面积比值较对照组大 （P <0.05）；白芍总苷灌胃组管腔面积较球囊损伤组高，内膜面积及内膜面积/ 中膜面积比值较球囊损伤组 减小，但高于对照组（P <0.05）；白芍总苷浸泡球囊组管腔面积较白芍总苷灌胃组大，内膜面积及内膜面积/ 中膜面积比值较白芍总苷灌胃组小，但高于对照组（P <0.05）。球囊损伤组Th17 细胞占CD4+T 细胞的百分比、 Th17/Treg 高于白芍总苷灌胃组、白芍总苷浸泡球囊组及对照组（P <0.05）；白芍总苷浸泡球囊组低于白芍 总苷灌胃组，而高于对照组（P <0.05）。白芍总苷灌胃组Treg 细胞占CD4+T 细胞的百分比高于球囊损伤组 及对照组（P <0.05），白芍总苷浸泡球囊组Treg 细胞占CD4+T 细胞的百分比高于白芍总苷灌胃组（P <0.05）。 结论 白芍总苷通过调节Th17、Treg 细胞数量调节细胞免疫失衡，减轻球囊损伤后血管狭窄，且白芍总苷浸 泡球囊法较白芍总苷灌胃法效果更佳。     

转录因子NF-kB对粘附分子及血管新生内膜形成的影响

目的以调节多种增殖因子的核转录因子NF -kB的反义和诱骗性寡核苷酸为干预药物 ,探讨它们单独或联合作用对大鼠颈动脉球囊损伤后血管增殖反应及粘附分子表达的影响。　方法SD大鼠随机分为七组 ,制作血管球囊损伤模型 ;相应时间点处死动物进行检测。　结果模型组、正义组、Scramble组的血管内膜面积、中膜面积、内膜 /中膜在第 5d增加 ,14d达到高峰 ;反义组、诱骗组、反义组 +诱骗组干预后 ,血管上述病理指标明显改善 (P<0 .0 5 )。血管细胞间粘附分子 (VCAM - 1)mRNA表达在血管损伤后 6h即可检测到 ,3、5、7d后持续表达增加 ,14d后表达降低 ;免疫组化显示VCAM - 1蛋白质表达在 14d达到高峰。反义组、诱骗组、反义组 +诱骗组治疗后 ,与模型组、正义组、scramble组相比 ,VCAM - 1mRNA表达和蛋白合成在各时相点均降低 (P <0 .0 5 )。Westernblot检测核蛋白抽提物 ,显示核因子NF -kBp6 5在血管损伤后 6h有一定蛋白表达 ,1d后蛋白表达明显增加 ,至 7d达高峰 ,14d后蛋白表达略降低。反义组、诱骗组、反义组 +诱骗组干预后 ,各时相点蛋白质表达均减弱 (P <0 .0 5 )。　结论转录因子NF -kB调控VCAM - 1基因表达和蛋白质合成 ;球囊损伤后血管壁细胞增殖在不同时相点有动态变化 ;脂质体介导局部转染反义、诱骗性寡     

适度铜缺乏对大鼠颈动脉内皮剥脱术后MMP-9表达和活性的影响

目的:探讨四硫钼酸盐(TM)引起的适度铜缺乏对大鼠颈动脉球囊损伤后内膜增生和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)活性和表达的影响. 方法:SD雄性大鼠随机分为铜缺乏组(TM组)和对照组,TM组术前2 wk及术后给予TM强饲,使血清铜蓝蛋白降至基础值的(20±2)%;对照组给予蒸馏水强饲. 每组分为5个时相点(1,3,7,14 d),建立颈总动脉球囊损伤模型,于术后相应时间点处死动物. 利用含1 g/L明胶的SDS-PAGE 非变性凝胶电泳检测各点损伤的颈总动脉组织MMP-9活性,Western blot法检测MMP-9蛋白表达水平. 结果:TM组血管内膜增生程度较对照组显著降低,管腔无明显狭窄. 术后1～7 d,TM组MMP-9活性显著低于对照组,TM组MMP-9蛋白表达水平也较对照组明显降低(P＜0.01). 结论:TM诱导的适度铜缺乏能够显著抑制MMP-9的表达和活性,这可能是起抑制血管球囊损伤术后再狭窄的机制之一.     

脉冲电场介导AT2R基因在血管局部表达及其对血管新生内膜的影响

目的研究脉冲电场对血管紧张素2型受体(AT2R)基因在血管局部表达的作用,探讨AT2R基因在体转染对大鼠颈动脉球囊损伤后新生内膜增生的作用。方法大鼠颈动脉球囊损伤后,用脉冲电穿孔法介导AT2R cDNA真核表达质粒或空质粒载体在动脉局部表达,于术后3、7 d和21 d用免疫组织化学、HE染色等方法,进行AT2R在颈动脉壁中表达的变化及定量组织形态学分析。结果免疫组织化学染色结果显示:脉冲电场介导AT2R cDNA真核表达质粒表达后,3 d时可见内膜、中膜、外膜大量AT2R的棕色阳性着色,7 d时可见少量棕色阳性着色,21 d棕色阳性着色几乎消失,未转染组及空质粒转染组未见AT2R的棕色阳性着色,表明脉冲电穿孔能有效导入AT2R基因,并在动脉壁获得稳定表达。在21 d时,AT2R cDNA真核表达质粒组的内膜面积与中膜面积比显著低于未转染组和空质粒载体组[分别为(0.76±0.08)、(1.39±0.08)、(1.32±0.10),P<0.01],空质粒转染组和未转染组间无统计学差异(P>0.01)。结论脉冲电穿孔可介导AT2R基因在血管局部有效表达,AT2R在体转染可抑制球囊损伤后大鼠颈动脉平滑肌细胞增殖和新生内膜增生。