胶体金免疫层析法和ELISA在HBsAg检测中的方法学评价

目的：对胶体金免疫层析法（GICA）和ELISA两种检测HBsAg方法进行方法学比较。方法：用国产HBsAg胶体金纸条和ELISA试剂同时检测血清标本，结果：与ELISA相比，胶体金免疫层析法检测HBsAg的灵敏度为96%，特异性为100%，符合率为97%，以上结果可以看出，胶体金免疫层析法与ELISA相比特异性基本一致，但胶体金免疫层析法灵敏度稍差，结论：国产HBsAg胶体金纸条与ELISA试剂相比有较高的符合率，但灵敏度有待于进一步提高。     

显色时不同的温育温度及时间对ELISA法检测HBsAg结果的影响

我们观察了ELISA法测定HBsAg显色时的不同温育温度及时间变化,对测定结果有较大影响,随着温度的升高和时间的延长,P值及P/N值逐渐升高。因而在实际工作中,应选择一最适的显色温度和时间,以稳定室内质控的结果。     

胶体金免疫层析定性检测试剂的质量控制与评价

目的：探讨胶体金免疫层析定性检测试剂质量控制技术关键要求，为生产企业、检验机构质量控制及评价提供参考，有效地促进该类体外诊断试剂质量水平的提高。方法：结合胶体金免疫层析定性检测试剂质量标准要求及分类管理，对该类试剂质量的关键性能要素进行剖析，提出相应建议，提高试剂质量。结果与结论：质量控制与评价是贯穿产品全流程的核心要素，膜条宽度、液体移行速度、阴性符合率、阳性符合率、检出限、重复性是胶体金免疫层析定性检测试剂质量控制及评价的关键性能指标，对于试剂的质量至关重要。相关生产研发企业要合理设计性能要求，完善质量管理体系；检验机构要根据产品性能要点做好质量评价；监管部门要根据行业需要和监管需要，加快标准制修订工作，加强上市后监管；从生产、检验及监管各环节对这些关键性能指标进行控制，提高试剂的质量标准，从而满足临床和监管的需求。     

金标法和ELISA法在无偿献血者中检测HBsAg的比较

目的：为搜索出无偿献血者中HBsAg阳性样品。方法：使用胶体金免疫层析法与EUSA法对无偿献血者血标本进行筛查。结果：检测17582份，金标法结果与EUSA法比较，本法的特异性为93％，敏感性为100％，总符合率为99．6％，整个过程时间仅需15～30分钟。结论：金标法其特异性和敏感性不亚于EUSA法，并且操作简单，不需要任何仪器和实验工具，完全可以有效用于无偿献血工作的现场筛选和临床急症手术前的检测。     

某县1～7岁儿童HBsAg检测结果分析

目的:探讨胶体金法和ELISA法在儿童HBsAg检测中的作用,了解某县1～7岁儿童HBsAg感染趋势.方法:对2004～2008年某县幼儿园69 303名儿童采用胶体金法筛查乙肝表面抗原,初筛阳性者再用ELISA法复查两对半.结果:经胶体金法筛查乙肝表面抗原阳性者947 例,ELISA法复查两对半确诊为乙肝者878例;2004～2008年阳性率分别为1.77%,1.34%,1.31%,1.23%,0.87%,各年度HBsAg阳性率比较差异有显著性(P＜0.05).结论:某县儿童乙肝表面抗原阳性率呈逐年下降趋势;胶体金法作为儿童HBsAg初筛仍是一种理想的方法.     

ELISA技术检测中草药抗HBsAg的实验研究

本文为作者使用ELISA技术对250种中草药水提物进行抗HBsAg的实验研究,共筛出有效药物10种(占总数的4.0%)。若按不同剂量(0.3、0.6、1.2、2.5、5.0mg/100μl)的药物、2种不同浓度(10.92、14.26P/N比值)的HBsAg与3种不同接触时间(立即、1h、2h)的10项P/N比值的均数来综合评价药效指数时,10种有效药物的次序为山渣叶(1.34)、辣蓼(1.37)、贯众(1.64)、橄榄(2.20)、苧麻根(2.49)、马齿苋(2.50)、苦荞头(2.69)、石吊兰(2.73)、赶山鞭(3.45)与木通(3.51)。     

Novel HBsAg markers tightly correlate with occult HBV infection and strongly affect HBsAg detection

Occult HBV infection (OBI) is a threat for the safety of blood-supply, and has been associated with the onset of HBV-related hepatocellular carcinoma and lymphomagenesis. Nevertheless, genetic markers in HBsAg (particularly in D-genotype, the most common in Europe) significantly associated with OBI in vivo are missing. Thus, the goal of this study is to define: (i) prevalence and clinical profile of OBI among blood-donors; (ii) HBsAg-mutations associated with OBI; (iii) their impact on HBsAg-detection. OBI was searched among 422,278 blood-donors screened by Nucleic-Acid-Testing. Following Taormina-OBI-definition, 26 (0.006%) OBI-patients were identified. Despite viremia <50 IU/ml, HBsAg-sequences were obtained for 25/26 patients (24/25 genotype-D). OBI-associated mutations were identified by comparing OBI-HBsAg with that of 82 chronically-infected (genotype-D) patients as control. Twenty HBsAg-mutations significantly correlated for the first time with OBI. By structural analysis, they localized in the major HBV B-cell-epitope, and in HBsAg-capsid interaction region. 14/24 OBI-patients (58.8%) carried in median 3 such mutations (IQR:2.0-6.0) against 0 in chronically-infected patients. By co-variation analysis, correlations were observed for R122P + S167L (phi = 0.68, P = 0.01), T116N + S143L (phi = 0.53, P = 0.03), and Y100S + S143L (phi = 0.67, p < 0.001).Mutants (obtained by site-directed mutagenesis) carrying T116N, T116N + S143L, R122P, R122P + Q101R, or R122P + S167L strongly decreased HBsAg-reactivity (54.9 ± 22.6S/CO, 31.2 ± 12.0S/CO, 6.1 ± 2.4S/CO, 3.0 ± 1.0S/CO and 3.9 ± 1.3S/CO, respectively) compared to wild-type (306.8 ± 64.1S/CO). Even more, Y100S and Y100S + S143L supernatants show no detectable-HBsAg (experiments in quadruplicate).In conclusions, unique HBsAg-mutations in genotype-D, different than those described in genotypes B/C (rarely found in western countries), tightly correlate with OBI, and strongly affect HBsAg-detection. By altering HBV-antigenicity and/or viral-particle maturation, they may affect full-reliability of universal diagnostic-assays for HBsAg-detection.     

乳糜血样对酶联免疫吸附试验检测结果的影响

目的分析乳糜血样对酶联免疫吸附试验(ELISA)检测结果的影响。方法在不同程度的乳糜血浆中加入不同浓度的HBsAg质控血清,对不精密度及灵敏度进行比较。结果乳糜血液不精密度:批内平均CV6.3%,批间平均CV25.4%,轻度乳糜血液CV15.4%,中度CV27.1%,重度CV44.5%。不同程度的乳糜血液随放置时间的延长,OD值下降,轻度乳糜血液下降4.6%,中度下降14.7%(P<0.05),重度乳糜血液下降62.8%(P<0.05),并出现灵敏度降低及不同程度的漏检,HBsAg含量1.5ng/mL的乳糜血液阳性漏检率7.0%,HBsAg含量1.0ng/mL的乳糜血液阳性漏检率13.0%,HBsAg含量0.5ng/mL的乳糜血液阳性漏检率34.7%。结论不同程度的乳糜血液随放置时间的延长,OD值下降,灵敏度降低,并出现不同程度的漏检,检测乳糜血液时,轻度乳糜血液放置时间不超过3d,中度放置时间不超过1d,重度的必须立即检测。     

2004年湖北省内使用的HIV抗体ELISA诊断试剂的评估分析

目的 通过对艾滋病病毒（HIV）抗体检测诊断试剂的质量评估,筛选检测性能好的试剂,为艾滋病临床检测提供选择依据。方法 用湖北省艾滋病性病防治中心确认实验室提供的199份样品。用明胶凝集法和蛋白印迹法来评价四个厂家的HIV抗体ELISA诊断试剂的敏感性、特异性。结果 被评价的各种检测诊断试剂敏感性在96．67～100．00％之间．特异性在91．72～95．86％之间,功效率92．46～95．98％之间。结论 HIV抗体检测诊断试剂有较好的检测性能．国产试剂敏感性和特异性与进口试剂相差不大,适合在中国市场作为临床诊断中使用。     

人尿制品乙肝表面抗原(HBsAg)的检测

目的建立尿激酶、乌司他丁及尤瑞克林等3种人尿制品乙肝表面抗原(HBsAg)的检测方法。方法采用ELISA法对尿激酶、乌司他丁、尤瑞克林进行了HBsAg的检测。结果尿激酶原料药及注射用尿激酶、乌司他丁原料药及注射用乌司他丁、注射用尤瑞克林HBsAg均为阴性。结论该法简单、安全,可作为尿激酶、乌司他丁及尤瑞克林的常规HBsAg检测方法。     

贯众的药理研究进展

贯众在传统药理研究基础上有新进展,主要有抗乙肝病毒、流感病毒、柯萨奇Ｂ病毒及埃柯病毒、疱疹病毒的研究;抗菌作用的研究;对子宫平滑肌作用的研究;抗白血病及抗艾滋病毒作用的研究。