诱骗受体DcR3对佐剂型关节炎大鼠模型的作用分析

目的 研究诱骗受体DcR3 对佐剂型关节炎(AA)大鼠模型的作用及其机理.方法 注射弗式完全佐剂建立大鼠佐剂型关节炎(AA)模型,尾静脉注射DcR3蛋白,观察大鼠关节肿胀度、间接 ELISA 检测血清和滑膜液中细胞因子IL-1 β、TNF-α、IFN-γ的变化.RT-PCR检测滑膜和淋巴细胞中DcR3、Fas、FasL mRNA的表达以及脾脏中TGF-β、IFN-γ、TNF-α、IL-4、IL-10 mRNA的表达.Western blot分析滑膜细胞中Caspase-8、Caspase-3、Caspase-9、Bcl-2蛋白的表达.结果 DcR3 治疗AA大鼠后,足肿胀度降低;血液和滑膜液的IL-1β、TNF-α、IFN-γ水平下降;脾脏中TGF-β、IFN-γ、TNF-α mRNA 表达下调,IL-4、IL-10 mRNA表达上调;滑膜细胞中Caspase-8、Caspase-3蛋白表达上调,Bcl-2蛋白表达下调. 结论 DcR3 可以用于实验性大鼠AA的治疗,其治疗机制与调节滑膜细胞FasL、Fas mRNA的表达和血液淋巴细胞中 Fas mRNA的表达,促进滑膜细胞和自身反应性淋巴细胞的凋亡;调节脾脏细胞Th1/Th2细胞因子平衡相关.本研究为进一步阐明RA的发病机理奠定了重要基础,为有效治疗RA提供了新思路.     

心衰大鼠心肌核因子-κB活化及其与心肌细胞凋亡的关系

目的:探讨核因子-κB(NF-κB)活化与充血性心力衰竭(CHF)大鼠心肌细胞凋亡发生、发展的关系及其对Fas和Fas配体(FasL)表达的调控作用。方法:以假手术组为对照,观察雄性Wistar大鼠心肌梗死(MI)后2周、4周及8周的血流动力学指标、心肌细胞凋亡指数、Fas、FasL、Bcl-2和κB抑制蛋白的表达及NF-κB核结合活性的改变。结果:MI后心肌细胞凋亡指数、Fas及FasL表达水平进行性升高,Bcl-2的mRNA表达下调;κB抑制蛋白水平逐渐降低,而NF-κB活性逐渐增高。结论:心肌细胞凋亡在MI后CHF发生、发展过程中起着重要作用,NF-κB活化启动Fas和FasL基因转录,Fas和FasL表达上调、Bcl-2表达下降介导大鼠MI后心肌细胞凋亡的发生。     

Caspase抑制剂对大鼠心肌缺血／再灌注损伤Fas／FasL表达的影响

目的探讨大鼠心肌缺血／再灌注时caspase抑制剂对心肌细胞凋亡及Fas／FasL基因mRNA表达的影响及其机制。方法以穿线结扎或松扎左冠状动脉制备大鼠心肌缺血／再灌注模型。42只大鼠随机分为假手术组、Z-VAD-fmk治疗组和缺血／再灌注对照组,并分设缺血4-5min后再灌注3,6,12h3个时相点。以缺口末端标记法检测心肌细胞凋亡的变化,逆转录聚合酶链反应法检测Fas／FasL基因mRNA的表达改变,并分析心肌组织病理学损伤程度。结果心肌缺血／再灌注后心肌细胞凋亡指数及Fas/FasL基因mRNA表达均增高,caspase抑制剂预处理下调Fas／FasL表达水平,减少心肌细胞凋亡。结论心肌细胞凋亡与Fas／FasL系统参与了心肌缺血／再灌注损伤过程,caspase抑制剂Z-VAD-fmk通过抑制凋亡和下调Fas／FasL表达,减低再灌注损伤。     

心肌缺血损伤大鼠心肌细胞凋亡与Fas、FasL基因表达的变化

目的探讨异丙肾上腺素(isoprenaline,ISO)诱导的心肌缺血损伤大鼠心肌细胞凋亡与Fas和FasL基因表达变化。方法健康成年SD大鼠随机分为对照组及心肌缺血损伤组(损伤组),腹腔大剂量注射异丙肾上腺素,造成心肌缺血损伤模型。采用原位末端缺口标记(TUNEL)法观察心肌细胞凋亡的改变;应用Western blotting和免疫组化方法检测Fas和FasL蛋白表达的变化,并使用HPIAS10009图像分析仪进行定量分析。结果与对照组比较,缺血损伤组大鼠心肌细胞凋亡率明显增加(P<0.01)、心肌组织Fas、FasL蛋白表达水平显著升高(P<0.01)。结论心肌细胞凋亡及Fas、FasL基因过表达可能参与了心肌缺血损伤的发生和发展。     

去窦弓神经大鼠心肌细胞凋亡及其相关基因表达的研究

目的:研究去窦弓神经(SAD)大鼠心肌组织重构中的细胞凋亡及其相关基因的表达。方法:10周龄SD大鼠行SAD术或假手术(Sham),术后16周对SAD及Sham组大鼠的心肌连续切片,采用末端标记TUNEL法检测细胞凋亡;采用ABC法检测Bcl-2、Bax、Fas和Fas-L蛋白的表达,并用计算机图像分析技术进行观察和比较;采用RT-PCR技术检测bcl-2、bax、fas和fas-L的mRNA的表达。结果:SAD大鼠心肌细胞凋亡率高于Sham组;Bcl-2蛋白表达少于Sham组,Bax、Fas、Fas-L蛋白表达高于Sham组,Bcl-2/Bax比率低于Sham组;RT-PCR结果显示,SAD大鼠心肌组织bcl-2mRNA表达明显少于Sham组,而bax、fas、fas-LmRNA表达多于Sham组。结论:心肌细胞凋亡及其相关基因表达失调参与SAD大鼠的心肌重构。     

DcR3 对肝纤维化动物模型的影响

目的:研究DcR3 基因对肝纤维化大鼠的预防性治疗的作用。方法:SPF 级健康雄性Wistar 大鼠30 只,体重范围180 ~220 g,随机分为3 组,每组10 只,分别为正常对照组、DcR3 基因预防性治疗组(1% DMN+DcR3 组)、造模组(1%DMN 组)。采用1%DMN 诱导大鼠肝纤维化模型,腹腔注射DcR3 质粒进行预防性干预。分别采用HE 染色和Masson 染色观察肝组织病理情况;qRT-PCR 和Western blot 法检测DcR3、Fas、FasL、-SMA 和TGF-1 的mRNA 和蛋白表达水平。结果:与模型组相比,DcR3 预防治疗组大鼠肝组织炎性细胞浸润及胶原类物质沉积有所改善;DcR3 基因可显著降低肝纤维化大鼠Fas、FasL、 SMA 和TGF-1 mRNA 和蛋白表达水平,DcR3 基因预防性治疗组与对照组和造模组有显著性差异(P<0.05);同时DcR3 基因预防性治疗组DcR3 mRNA 和蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。结论:DcR3 基因可有效防治大鼠肝纤维化,其作用机制可能是DcR3 通过降低肝脏炎症反应,减少胶原类物质沉积,抑制 SMA 和TGF-1 表达,从而抑制HSC 活化;下调Fas和FasL 表达,抑制Fas/ FasL 途径诱导的肝细胞凋亡。     

Fas/FasL介导的caspase-3活化与急性胰腺炎腺泡细胞凋亡的关系

目的： 研究凋亡调控基因及蛋白Fas、FasL和caspase-3在大鼠急性胰腺炎（AP）组织中的表达及其相互关系。方法：经胰胆管逆行注射不同浓度的牛磺胆酸钠建立不同炎症程度的AP模型,采用RT-PCR、Western blotting技术检测大鼠胰腺炎组织Fas、FasL和caspase-3蛋白及mRNA的表达, TUNEL法检测胰腺炎组织腺泡细胞凋亡。结果：在正常胰腺组织内即可见Fas、FasL、caspase-3蛋白和mRNA的表达;建立AP模型后,随胰腺炎症程度的加重,Fas、FasL、caspase-3蛋白和mRNA的表达逐渐下降,腺泡细胞凋亡率亦逐渐下降,且caspase-3 表达水平在各个组间的变化趋势与Fas/FasL系统的变化趋势相一致。结论：Fas/FasL系统介导的凋亡途径参与了急性胰腺炎腺泡细胞凋亡的调节。     

慢性缺氧致大鼠右心室心肌细胞凋亡及其机制研究

目的：通过建立大鼠慢性缺氧心肌肥大模型,探讨慢性缺氧致大鼠心肌细胞凋亡的发生规律及其机制。方法: 将大鼠随机分为慢性缺氧组和正常对照组,每组30只,慢性缺氧组置于氧浓度为(10.0±0.5)％的大型玻璃舱中,分别持续缺氧14、21、28 d,分别于第14、21、28 d处死大鼠,取心脏称重,留右心室,进行形态学观察,分析心肌细胞凋亡形态及计量,检测肌球蛋白β重链(β-MHC)、原癌基因B淋巴细胞瘤-2（bcl-2）、Bad 等mRNA及Bcl-2、Bad蛋白的表达水平。结果: (1)慢性缺氧14、21、28 d组大鼠右心室/（左心室+室间隔）［RV/(LV+S)］、右心室/体重（RV/BW）比值及右心室β-MHC mRNA和蛋白表达均明显高于正常对照组(均Ｐ<0.01),并且随时间延长而增高(均Ｐ<0.01)。(2) 慢性缺氧心肌细胞凋亡指数14、21、28 d组大鼠均明显高于正常对照组(均Ｐ<0.01),且随着时间的延长而增加(均Ｐ<0.01)。（3）慢性缺氧14、21、28 d组大鼠右心室bcl-2 mRNA表达和Bcl-2蛋白表达均明显低于正常对照组(均Ｐ<0.05),缺氧28 d组bcl-2 mRNA表达和Bcl-2蛋白表达较缺氧14 d组显著降低 (均Ｐ<0.05)。慢性缺氧14、21、28 d组大鼠右心室bad mRNA表达和Bad蛋白表达与正常对照组比较无明显改变 (均Ｐ>0.05)。（4）慢性缺氧14、21、28 d组大鼠右心室bcl-2/bad比值均明显低于正常对照组(均Ｐ<0.05),缺氧28 d组bcl-2/bad比值较缺氧14 d组显著降低 (Ｐ<0.05)。结论: 慢性缺氧可以诱导大鼠右心室心肌细胞凋亡和心肌肥大,且大鼠右心室心肌细胞凋亡和心肌肥大程度随着缺氧时间的延长而增加。慢性缺氧通过抑制大鼠右心室心肌细胞抗凋亡基因bcl-2表达,使bcl-2/bad比值下调,打破原有的平衡,导致心肌细胞凋亡。     

葛根素预处理对大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡的影响

目的观察葛根素(Pur)预处理对缺血再灌注(I／R)心肌细胞凋亡的干预作用，并探讨其作用的可能机理。方法将原代培养的新生大鼠心肌细胞随机分为(1)正常对照组及正常 Pur组；(2)模拟缺血组及缺血 Pur组；(3)模拟再灌注组及再灌注 Pur组。末端标记法(TUNEL法)检测心肌细胞凋亡，流式细胞仪检测细胞凋亡百分率，透射电镜观察心肌细胞凋亡的形态学特征、免疫组织化学法检测Bcl-2／Bax蛋白表达，并检测胞内Ca^2 浓度。结果(1)心肌细胞I／R后电镜观察到典型的凋亡超微结构特征；TUNEL染色可见心肌细胞凋亡阳性反应；免疫组化检测发现Bcl-2蛋白表达下调，Bax蛋白表达上调；胞内明显Ca^2 超载。(2)葛根素可显著降低I／R心肌细胞内Ca^2 浓度、降低凋亡指数和凋亡百分率、上调Bcl-2蛋白表达、下调Bax蛋白表达。结论葛根素具有抗心肌细胞凋亡的作用，其机理可能与抑制胞内Ca^2 超载，干预Bcl-2／Bax蛋白表达有关。     

慢性缺氧致大鼠右心室心肌细胞调亡及其机制研究

目的:通过建立大鼠慢性缺氧心肌肥大模型,探讨慢性缺氧致大鼠心肌细胞凋亡的发生规律及其机制.方法:将大鼠随机分为慢性缺氧组和正常对照组,每组30只,慢性缺氧组置于氧浓度为(10.0±0.5)%的大型玻璃舱中,分别持续缺氧14、21、28 d,分别于第14、21、28 d处死大鼠,取心脏称重,留右心室,进行形态学观察,分析心肌细胞凋亡形态及计量,检测肌球蛋白β重链(B-MHC)、原癌基因B淋巴细胞瘤-2(bcl-2)、Bad等mRNA及Bcl-2、Bad蛋白的表达水平.结果:(1)慢性缺氧14、21、28 d组大鼠右心室/(左心室+室间隔)[RV/(LV+s)]、右心室/体重(RV/BW)比值及右心室β-MHC mRNA和蛋白表达均明显高于正常对照组(均P<0.01),并且随时间延长而增高(均P<0.01).(2)慢性缺氧心肌细胞凋亡指数14、21、28 d组大鼠均明显高于正常对照组(均P<0.01),且随着时间的延长而增加(均P<0.01).(3)慢性缺氧14、21、28 d组大鼠右心室bcl-2 mRNA表达和Bcl-2蛋白表达均明显低于正常对照组(均P<0.05),缺氧28 d组bcl-2 mRNA表达和Bcl-2蛋白表达较缺氧14 d组显著降低(均P<0.05).慢性缺氧14、21、28 d组大鼠右心室bad mRNA表达和Bad蛋白表达与正常对照组比较无明显改变(均P>0.05).(4)慢性缺氧14、21、28 d组大鼠右心室bcl-2/bad比值均明显低于正常对照组(均P<0.05),缺氧28 d组bcl-2/bad比值较缺氧14 d组显著降低(P<0.05).结论:慢性缺氧可以诱导大鼠右心室心肌细胞凋亡和心肌肥大,且大鼠右心室心肌细胞凋亡和心肌肥大程度随着缺氧时间的延长而增加.慢性缺氧通过抑制大鼠右心室心肌细胞抗凋亡基因bcl-2表达,使bcl-2/bad比值下调,打破原有的平衡,导致心肌细胞凋亡.     

抗Fas的抗体在实验性病毒性心肌炎中作用机制的研究

目的探讨中和型抗Fas的抗体对小鼠柯萨奇病毒性心肌炎的治疗作用及作用机制。方法60只BAIB/c小鼠随机分为4组：1组空白对照组，2组病毒对照组、3组IgG对照组、4组抗Fas抗体治疗组。于接种后第10天每组随机处死小鼠8只，心肌组织切片HE染色了解心肌损伤情况，电镜技术及原位末端标记法（TUNEL）检测心肌细胞凋亡情况，免疫组化方法检测casimse-3的表达，逆转录．聚合酶链反应（RT-PCR）检测心肌组织中easpase-3的mRNA表达。实时定量PCR（RQ-PCR）定量心肌柯萨奇病毒B3（CVB3）mRNA拷贝数。结果（1）病毒对照组可见caspase-3表达和心肌细胞凋亡，且均与心肌病变积分成正相关（r=0．81，P〈0．01；r=0．73，P〈0．05）。（2）抗Fas抗体治疗组小鼠心肌组织病变积分、心肌细胞凋亡率、caspase-3蛋白和mRNA表达及心肌内CVB3 mRNA拷贝数均明显低于病毒对照组（P〈0．05）和IgG对照组（P〈0．05）。结论Fas/FasL途径介导的心肌细胞凋亡参与了病毒性心肌炎的发病过程，凋亡是导致病毒性心肌炎心肌损伤的重要机制之一，抗Fas抗体可降低caspase-3活化和mRNA表达，减少心肌细胞凋亡，降低心肌细胞内病毒复制，使心肌损伤明显减轻。     

血必净对活化诱导T细胞凋亡的调节

目的 观察活化诱导对脾脏T淋巴细胞凋亡、凋亡相关基因mRNA表达及caspase3活性的影响,以及活血化瘀中药的调节作用.方法 提取BALB/c小鼠脾脏T淋巴细胞并培养,以Con A+IL-2诱导T细胞活化凋亡,MTT法检测细胞增殖活性,流式细胞仪检测细胞凋亡率,RT-PCR检测Fas、FasL、Bcl-2、Bax、IL-2 mRNA表达水平,分光光度法测定caspase3酶活性,并观察活血化瘀中药对上述各项指标的影响.结果 活化T淋巴细胞于诱导18h后凋亡率明显增加,于诱导6h时未见FasL、Bax mRNA表达,Fas、Bcl-2 mRNA表达无明显变化;于诱导18 h后Fas、FasL、Bax mRNA表达升高,Bel-2 mRNA表达下降,caspase3活性增高.活血化瘀中药可降低T细胞凋亡,并可分别降低Fas、FasL、Bax mRNA表达,提高Bcl-2 mRNA表达,减轻easpase3酶活性.在活化诱导早期(6 h)促进T淋巴细胞内IL-2 mRNA表达,在晚期(18 h)减少IL-2 mRNA表达.结论 过度活化是脾脏T淋巴细胞异常凋亡的诱发因素,而凋亡的发生与Fas、FasL、Bax、Bcl-2 mRNA表达的改变有关.活血化瘀中药可通过调节IL-2及凋亡相关基因mRNA表达而减轻脾脏T淋巴细胞凋亡,同时可以促进T淋巴细胞的增殖活性.     

大鼠实验性心肌缺血后Fas、bcl-2的表达与心肌细胞凋亡的关系

目的 探索心肌缺血后Fas、bcl-2的表达与心肌细胞凋亡的关系。方法 结扎大鼠左侧冠状动脉造成心肌缺血,10min—7d后取心脏标本做末端脱氧核酸转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)原位细胞凋亡染色、Fas、bcl-2蛋白的免疫组织化学抗生物素蛋白-生物素复合物法(ABC法)染色。结果 在时间上,心肌细胞凋亡从缺血后3h开始,36h仍较显著,7d时TUNEL法检测不到凋亡细胞;而bcl-2、Fas分别于缺血后10min和3h开始检出,持续到缺血后7d;在组织学关系上,凋亡的心肌细胞和Fas、bcl-2阳性细胞不在心肌同一区域,凋亡的心肌细胞在心肌缺血区,Fas、bcl-2表达在无明显缺血的心肌区域。结论 Fas、bcl-2的表达可能并不直接参与缺血心肌细胞凋亡的调控。     

枸杞多糖调控老年大鼠T细胞凋亡及相关基因表达的研究

目的 :探讨枸杞多糖对老年大鼠T细胞过度凋亡及相关基因表达的调节作用。方法 :利用TUNEL标记的流式细胞术和荧光实时定量PCR技术 ,研究了老年大鼠和年轻大鼠T细胞凋亡百分率及抗凋亡和促凋亡基因 (Fas,FasL ,TNFR1,Bax ,Bcl 2 ,TNFR2 )mRNA表达情况 ,并研究了枸杞多糖对老年大鼠T细胞凋亡百分率及促凋亡和抗凋亡基因mRNA表达的影响。结果 :枸杞多糖能够有效地降低老年大鼠T细胞的过度凋亡 ,而且可以下调促凋亡的TNFR1基因mRNA表达并上调抗凋亡的Bcl 2基因mRNA表达。结论 :枸杞多糖下调促凋亡基因表达的同时上调抗凋亡基因的表达 ,从而改善老年大鼠T细胞过度凋亡的状态     

p38MAPK介导的Fas/FasL凋亡信号通路在大鼠抗GBM肾炎中的作用

目的:探讨p38MAPK介导的Fas/FasL凋亡信号通路在大鼠抗肾小球基底膜(GBM)肾炎中的作用。方法:1:复制大鼠抗GBM肾炎模型,于实验第2、7、14、21、28天取肾组织行免疫印迹法检测p-p38MAPK、p38MAPK、FasL、Fas、Caspase-3的表达。2:应用p38MAPK阻断剂SB203580处理大鼠抗GBM肾炎模型,于实验第2、7、14天检测24小时尿蛋白、血肌酐及血尿素氮含量;第14天取肾组织,经光镜观察肾组织病理变化;TUNEL法检测肾组织细胞凋亡情况;免疫印迹和免疫组织化学法检测肾组织p-p38MAPK、p38MAPK、FasL、Fas、Caspase-3表达情况。结果:在成功复制大鼠抗GBM肾炎模型基础上,免疫印迹结果显示肾炎模型组大鼠p-p38MAPK、FasL、Fas、Caspase-3蛋白表达各时间点均明显高于正常对照组,而p38MAPK表达与正常对照组相比无明显差异。在成功复制大鼠抗GBM肾炎模型基础上,阻断剂SB203580降低了大鼠抗GBM肾炎生化指标,减轻了肾炎病理反应,抑制了p-p38MAPK、FasL、Fas、Caspase-3的表达,降低了肾组织细胞凋亡数。结论:p38MAPK介导的Fas/FasL凋亡信号通路在大鼠抗GBM肾炎发病机制中发挥重要作用,其阻断剂SB203580减轻了大鼠抗GBM肾炎的病理改变,为临床防治人类新月体性肾炎提供实验理论依据。     

精胺抑制模拟缺血-再灌注心肌细胞Fas/FasL的表达

目的:观察外源性精胺对缺血-再灌注损伤诱导的乳鼠心肌细胞凋亡的影响并探讨其可能机制。方法:原代培养的乳鼠心肌细胞缺氧、无血清孵育2h,再复氧和复血清培养24h以模拟心肌缺血-再灌注损伤,并于再灌注期给予10μmol/L的外源性精胺。利用流式细胞仪检测心肌细胞的凋亡率;电镜观察细胞超微结构变化;应用RT-PCR、Western blotting方法和免疫荧光的方法观察Fas、FasL mRNA的转录和蛋白的表达。结果:模拟缺血-再灌注后心肌细胞凋亡率为27.4%±1.8%,明显高于对照组(5.7%±0.3%),细胞超微结构出现凋亡、坏死等改变,Fas、FasL的转录和蛋白表达均明显上调,与对照组比,Fas mRNA和FasL mRNA转录分别增加了2.2倍和2.4倍(P0.01);Fas和FasL的蛋白表达分别增加了1.7倍和1.9倍(P0.01);10μmol/L的外源性精胺干预后心肌细胞凋亡率降低为21.7%±1.3%,Fas、FasL的转录和蛋白表达也明显被抑制(与单纯模拟缺血-再灌注组比,P0.05或P0.01)。结论:外源性精胺可通过抑制Fas死亡受体途径而减轻模拟缺血-再灌注诱导的心肌细胞凋亡。     

心肌再灌注对抑郁大鼠心肌细胞凋亡以及bcl-2、bax和caspase-3表达的影响

目的: 探讨心肌缺血再灌注(I/R)对抑郁大鼠心肌细胞凋亡及凋亡基因bcl-2、bax和 caspase-3 的影响。方法: Wistar大鼠32只,随机分为4组,每组各8只。A组:非抑郁大鼠假手术组;B组:抑郁大鼠假手术组;C组:非抑郁大鼠心肌I/R组;D组:抑郁大鼠心肌I/R组。采用慢性轻度不可预知性应激结合孤养制备抑郁模型,用敞箱实验和液体消耗实验观察大鼠行为改变;运用结扎左冠状动脉前降支的方法复制心肌I/R模型。运用 TUNEL法检测心肌凋亡细胞;运用免疫组化法和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测bcl-2、bax和 caspase-3 的表达。结果: (1)与A、B组比较,C、D组心肌细胞凋亡数量显著增加(P<0.01),A、B两组间比较无显著差异;与C组比较,D组心肌细胞凋亡数量显著增加(P<0.05)。(2)与A、B组比较,C、D组Bcl-2、Bax和caspase-3蛋白和mRNA表达显著增加(P<0.01),A、B两组间比较无显著差异; 与C组比较,D组Bcl-2蛋白和mRNA表达显著减少(P<0.05),而Bax和caspase-3蛋白和mRNA表达显著增加(P<0.05)。结论: 心肌缺血再灌注可加重抑郁大鼠缺血心肌细胞凋亡,其机制可能与上调bax和 caspase-3 基因表达、下调 bcl-2 基因表达有关。     

pSS患者唇腺组织中Fas介导的凋亡信号蛋白的表达

目的:研究原发性干燥综合症( primary Sjgren’s syndrome，pSS)唇腺组织细胞中Fas 介导的细胞凋亡信号蛋白的表达，探讨导致干燥综合征的细胞信号转导的可能途径。 方法:采用Western blotting法检测唇腺组织中Fas、FasL、FADD蛋白的表达;免疫组织化学法检测caspase-3蛋白表达;RT-PCR半定量检测CAD mRNA表达。 结果:pSS患者唇腺组织细胞中Fas 介导的细胞凋亡信号转导相关蛋白Fas、FasL、FADD、caspase-3及CAD mRNA表达都有不同程度高于对照组(P＜0.05)。 结论:导致干燥综合征患者唇腺组织凋亡的信号转导途径可能是：FasL与其受体Fas结合后，通过FADD激活caspase-8，级联激活ICE家族成员，最后通过caspase-3裂解ICAD释放CAD催化DNA降解导致细胞凋亡。     

凋亡相关因子参与自身免疫性甲状腺疾病发病的研究

目的:了解细胞凋亡相关蛋白Fas,FasL和Bcl-2表达在自身免疫性甲状腺疾病发病机制及病理变化中的作用及意义。方法:采用免疫组织化学方法,检测20例桥本甲状腺炎,20例Graves病以及20例甲状腺腺瘤(作为对照组)患者甲状腺标本中Fas、FasL和Bcl-2表达及分布。结果:Fas在所有的标本中表达,主要分布于甲状腺滤泡细胞表面和细胞质上。除3例甲状腺瘤标本外,其余均表达FasL。Bcl-2表达于15例桥本甲状腺炎、19例Graves病以及17例甲状腺瘤滤泡细胞上。在甲状腺瘤滤泡细胞上表达中等强度Fas,很少或是没有表达FasL。在桥本甲状腺炎中Fas和FasL免疫染色强阳性甲状腺滤泡细胞多分布于浸润淋巴滤泡附近,浸润淋巴细胞中Fas、FasL免疫染色相对较弱。在Graves病中,Fas表达强度与桥本甲状腺炎类似,但FasL表达却更弱。在Graves病和甲状腺瘤组织中,Bcl-2表达两者类似。但在桥本甲状腺炎组织中,分布于浸润淋巴细胞附近的甲状腺滤泡细胞以及生发中心的淋巴细胞上,Bcl-2表达很弱。结论:Fas、FasL和Bcl-2表达在桥本甲状腺炎和Graves病中相似。FasL高表达和Bcl-2低表达可能引起桥本甲状腺炎滤泡细胞凋亡。进一步证明3种凋亡相关因子在自身免疫性甲状腺疾病发病机制中的作用。在桥本甲状腺炎中,滤泡细胞凋亡并非由浸润淋巴细胞其FasL发挥作用直接杀伤,但是它们能分泌细胞因子促进滤泡细胞自身Fas、FasL表达,从而导致滤泡细胞凋亡。     

ALA-PDT对尖锐湿疣凋亡及细胞因子的影响

目的：检测5-氨基酮戊酸-光动力疗法(ALA-PDT)治疗前后尖锐湿疣皮损凋亡相关因子(Fas、caspase3、Bcl-2)及促炎症细胞因子(CCL-20、TNF-α、IL-1)的表达,探讨ALA-PDT治疗尖锐湿疣的可能机理。方法：收集10例尖锐湿疣患者ALA-PDT治疗前后皮损(同时以正常健康者皮肤组织对照),采用荧光定量PCR检测其Fas、caspase3、Bcl-2、CCL-20、TNF-α、IL-1 mRNA表达;Western blot检测其Fas、caspase3、Bcl-2、CCL-20、TNF-α、IL-1蛋白表达。结果：尖锐湿疣皮损组织内Fas、caspase3、Bcl-2、CCL-20、TNF-α、IL-1 mRNA和蛋白表达均高于正常皮肤组织(P<0.05);与治疗前比较,治疗后Bcl-2、CCL-20、TNF-α、IL-1 mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.01),Fas、caspase3 mRNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.01)。结论：ALA-PDT是一种能有效治疗尖锐湿疣的方法,它可诱导细胞表面凋亡蛋白Fas、caspase3的表达、减少凋亡抑制因子Bcl-2的表达,从而可能依靠内源性途径(线粒体介导的凋亡)和外源性途径(死亡受体介导的凋亡)促进尖锐湿疣角质形成细胞凋亡;并可能通过抑制促炎细胞因子CCL-20、TNF-α、IL-1而发挥局部免疫调节作用。