下呼吸道感染产超广谱β-内酰胺酶革兰阴性杆菌的耐药监测

由于第三代头孢菌素对需氧革兰阴性菌的抗菌作用强、抗菌谱广，且毒性低，被广泛用于治疗革兰阴性杆菌感染。近年来国内外的病原学研究表明，革兰阴性杆菌对此类抗菌药物的耐药率逐年上升。主要是由于第三代头孢菌素能诱导细菌产生基因位点突变，使细菌产生质粒介导的超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)，它能水解青霉素、头孢菌素及单环类抗生素。我国三级医院中已广泛开展ESBLs的基础研究，加强二级医院使用抗生素的监测及管理也是必要的。ESBLs主要由革兰阴性杆菌中的肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌和阴沟肠杆菌产生，本研究即对我院下呼吸道感染上述3种细菌的分离株进行分析，现报道如下。     

革兰阴性杆菌产AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶的检测及耐药相关性

目的了解革兰阴性杆菌产AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的情况及其耐药性，指导临床合理用药。方法K—B法检测184株革兰阴性杆菌对11种抗生素的耐药性；采用头孢西丁（FOX）药敏纸片进行AmpC酶的初筛，通过酶提取物三维试验方法确证产AmpC酶细菌；采用NCCLS推荐的纸片扩散确证试验检测184株革兰阴性杆菌中大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBLs的情况。结果184株革兰阴性杆菌中，AmpC酶阳性率为23．3％主要产生菌为鲍曼不动杆菌57．7％，铜绿假单胞菌37．5％，AmpC酶阳性菌对头孢噻肟（CTX）、头孢曲松（CRO）、复方新诺明（SXT）、左旋氧氟沙星（LEV）、哌拉西林（PRL）、氨曲南（ATM）、头孢他啶（CAZ）、阿米卡星（AK）、头孢吡肟（FEP）、美洛培南（MEM）的耐药率分男11为94．7％、86．8％、84．2％、81．6％、71．0％、68．4％、68．4％、55．3％、50．O％、5．3％；38株大肠埃希菌和26株肺炎克雷伯菌中ESBLs阳性率分别为42．1％、23．1％，ESBLs阳性菌对头孢噻肟（CTX）、头孢曲松（CRO）、哌拉西林（PRL）、氨曲南（ATM）、复方新诺明（SXT）、头孢他啶（CAZ）的耐药率较高。对头孢吡肟（FEP）、阿米卡星（AK）、头孢西丁（FOX）、美洛培南（MEM）的耐药率较低，对左旋氧氟沙星（LEV）的耐药率大肠埃希菌则远高于肺炎克雷伯菌。结论在革兰阴性杆菌中，AmpC酶和ESBLs产生情况已相当严重，应重视对其的检测；产酶菌与非产酶菌对抗生素的耐药性有明显区别；临床用药以碳青霉烯类如美洛培南（MEM）为首选。     

临床分离株中革兰阴性杆菌产超广谱β-内酰胺酶菌的分布

目的 了解临床分离的革兰阴性杆菌中产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的分布及耐药性. 方法 对临床分离的革兰阴性杆菌,采用CLSI标准检测产ESBLs菌株. 结果 120株革兰阴性杆菌分离出38株产ESBLs菌,阳性率32%,包括大肠埃希菌、克雷伯菌属、阴沟肠杆菌、弗劳地枸椽酸杆菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌.其中,第一位是大肠埃希菌 (53.8%, 21 /38),其次产酸克雷伯菌(35.3,6/17)、肺炎克雷伯菌(33.3%,7/20);药敏结果显示除对碳青酶烯类抗生素敏感外,ESBLs阳性株对多种抗生素的耐药率均较高,且明显高于ESBLs阴性株. 结论 本院产ESBLs菌分离率较高,主要以大肠埃希菌、产酸克雷伯菌、肺炎克雷伯菌为主.     

革兰阴性杆菌超广谱β-内酰胺酶检测的探讨

临床发现，越来越多的革兰阴性杆菌对三代头孢类抗生素耐药，其主要原因是细菌质粒介导产生的超广谱β－内酰胺酶（Extended Spectrum β－Ｌ；ESBLs）所致。研究发现。产ESBL细菌主要集中在肠杆菌科细菌，以肺炎在雷伯杆菌和大肠埃希氏菌为主，另外有阴沟肠杆菌、沙雷氏菌、产碱杆菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌等其它革兰阴性杆菌也有报道。由于产ESBL的菌株往往携带多重耐药基因，表现在不仅β－内酰类抗生素耐药。而且对氨基甙类、喹诺酮类抗生素也耐药，给临床治疗带来极大困难。目前产ESBL菌株有增多趋势并可引起医院感染的暴发流行。所以，ESBL的检测在临床上具有重要意义。目前，尽管检测ESBL的方法众多，但仍无令人满意的统一方法。本文对目前实验室较常采用的单纸片琼脂扩散试验（SD）法、双纸片协同试验（CD法）和Etest三种方法检测ESBL作一初步探讨。     

174株革兰阴性杆菌超广谱β-内酰胺酶检测分析

目的了解革兰氏阴性杆茵产超广谱β-内酰胺酶(ESBL).方法采用法国生物梅里埃VITEK32细菌分析系统对174株临床标本分离出的革兰氏阴性杆菌进行生化鉴定及药敏分析.结果检出产ESBL菌21株,为12.1%;其中大肠埃希氏菌13株;肺炎克雷伯菌5株;铜绿假单胞菌2株;阴沟肠杆菌1株;ESBL菌对β-内酰胺类、青霉素类、氨基糖甙类、喹诺酮类、磺胺类几乎全部耐药.但亚胺培南对ESBL菌有很强的抑菌作用.结论ESBL菌株产生来源于抗生素的滥用,从而导致交叉耐药菌及多重耐药茵的产生,所以合理选择抗生素,控制ESBL传播和流行具有深刻意义.     

革兰阴性杆菌超广谱β-内酰胺酶的检测及药敏分析

目的　了解本院常见的革兰阴性杆菌中超广谱 β -内酰胺酶 (ESBLs)细菌的发生率和药敏情况 ,为防止产ESBLs细菌的传播和抗生素的合理应用提供依据。方法　细菌鉴定用Vitek - 32细菌鉴定仪 ,药敏试验用K -B法 ,ESBLs初筛用双纸片法 ,ESBLs确证用NCCLS 1 999年推荐的确证方法。结果　产ESBLs耐药菌占全部分离菌的 2 8 9% ,其中各细菌ESBLs发生率大肠埃希菌为 2 8 6 % ,肺炎克雷伯菌为 34 1 % ,阴沟肠杆菌为 4 0 5 %。另外有 1例铜绿假单胞菌、2例弗劳地枸橼酸杆菌、2例嗜麦芽窄食单胞菌产ESBLs。对试验所做抗生素 ,ESBLs阳性株比阴性株具有更高的耐药率和更严重的交叉耐药现象。结论　本院产ESBLs细菌以大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌多见 ,ESBLs的发生率和菌种分布有上升趋势 ,ESBLs菌感染的治疗仍以亚胺培南为首选     

革兰阴性杆菌中超广谱β-内酰胺酶和AmpC酶的检测与分析

目的：了解革兰阴性杆菌中超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)、AmpC酶的产生情况，为临床用药提供参考依据。方法：用纸片扩散确证试验检测345株革兰阴性杆菌的ESBLs产生情况，同时用酶提取物三维试验检测其中194株菌的AmpC酶产生情况。结果：革兰阴性杆菌中，ESBLs阳性率为30．4％，主要产生菌为阴沟肠杆菌68．2％，大肠埃希菌45．9％，肺炎克雷伯菌31．0％；AmpC酶阳性率为11．9％，主要产生菌为阴沟肠杆菌29．5％，鲍曼不动杆菌18．2％。结论：在革兰阴性杆菌中ESBLs、AmpC酶产生情况已相当严重和普遍，应重视对这两类酶的检测。     

136株革兰阴性杆菌ESBLs和AmpC酶的检测

随着抗生素的广泛使用,细菌的耐药性已成为人们关心的热点问题.已发现越来越多的革兰阴性杆菌对β-内酰胺类抗生素产生耐药性.细菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和1-型β-内酰胺酶(AmpC酶)是革兰阴性杆菌对β-内酰胺类抗生素产生耐药性的机制之一.     

革兰阴性杆菌β-内酰胺酶表型和基因型研究

目的了解铜陵地区临床分离的革兰阴性杆菌产生超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)、头孢菌素酶(AmpC酶)和金属β-内酰胺酶(MBL)的分布情况,并检测产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的ESBLs基因型鉴定。方法采用三维试验检测革兰阴性杆菌产ESBLs和AmpC酶,纸片协同法检测MBL,用聚合酶链反应(PCR)对ESBLs表型阳性的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌进行TEM型、SHV型、CTX-M型三种耐药基因检测并克隆测序。结果356株革兰阴性杆菌检出产酶株90株,检出率25.3%。单产ESBLs革兰阴性杆菌57株,检出率16.0%,以肺炎克雷伯(31.6%)、大肠埃希菌(31.0%)检出率高;单产AmpC酶4株,检出率1.1%,其中阴沟肠杆菌3株;同时产ESBLs和AmpC酶16株,检出率4.5%,以鲍曼不动杆菌(12.5%)检出率最高;产MBL细菌13株,均为非发酵菌,以嗜麦芽窄食单胞菌检出率最高,为71.4%。17株ESBLs表型阳性的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌有16株检出ESBLs耐药基因,其中CTX-M型15株(88.2%),TME型13株(76.1%),SHV型2株(11.8%),有11株细菌同时带有两种ESBLs基因,1株带有3种ESBLs基因。结论革兰阴性杆菌产生ESBLs、AmpC酶和MBL多种β内酰胺酶,铜陵地区大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌ESBLs基因型以CTX-M型为主。     

转座子tnpU基因在多重耐药革兰阴性杆菌中的分布情况

目的 研究转座子tnpU基因和β-内酰胺酶在多重耐药革兰阴性杆菌中的分布情况.方法 用纸片扩散初筛试验、扩散确证试验进行超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)表型检查,头孢西丁三维试验进行AmpC β-内酰胺酶的表型检查,纸片协同试验筛选产金属β-内酰胺酶(MBL)菌株;用多重聚合酶链反应(PCR)技术扩增转座子tnpU基因,并进行DNA测序;用MIC药敏法分析多重耐药革兰阴性杆菌的药物敏感性.结果 转座子tnpU的总检出率为25.5％,在各菌种的检出率分别为大肠埃希菌占6.3％(3株)、肺炎克雷伯菌占8.3％(1株)、鲍曼不动杆菌占33.3％(20株)、铜绿假单胞菌占43.2％(16株);β-内酰胺酶表型检测中,ESBLs的检出率最高,转座子tnpU基因阳性的菌株大多数β-内酰胺酶表型为阳性;转座子tnpU基因阳性菌株对抗生素的耐药率显著高于转座子阴性菌株(P＜0.05).结论 转座子tnpU基因在非发酵菌中的分布较广泛,可能在多重耐药机制中起重要作用.     

重视细菌耐药基因检测提高抗感染治疗水平

近年来细菌耐药性已成为全球医疗领域中的重要问题,各类耐药菌感染已给人类健康及生命构成重大威胁,早期给予恰当的抗感染药物对挽救患者生命具有重要意义.     

革兰阴性菌中的毒力岛及其致病性

近年来 ,对细菌的致病性与致病机制主要是确定其致病性的相关基因。而毒力岛的发现及研究为了解细菌的致病性和毒力因子提供了有效途径。本文就革兰阴性菌中的毒力岛及其致病性综述如下。1　毒力岛的基本特征1.1　毒力岛的基本概念及特征　毒力岛 [1 ] (virulence island)又称致病性岛 (pathogenicity island) ,是近年来在细菌分子学研究领域出现的新概念。 1997年 Hacker等对毒力岛下了较为精确的定义 :即毒力岛是编码细菌毒力基因簇的一分子量相对较大的染色体 DNA片段。毒力岛具有下列基本特征 :1毒力岛是存在于细菌染色体上的 DNA段 …     

多药耐药革兰阴性菌肺炎的抗感染治疗

铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌和肺炎克雷伯菌是最容易产生对多种抗生素耐药的院内致病菌。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）和耐万古霉素肠球菌（YRE）的定义相对简单，只要对一种有代表性的抗生素产生耐药就可以了。但是，给多药耐药或者泛耐药的革兰阴性杆菌下定义则较为困难。     

2011年中国地区SMART结果：腹腔感染的革兰阴性菌菌种分布和药敏分析

本研究展示了2011年中国地区腹腔感染的革兰阴性菌的菌种分布和药敏分析。2011年共收集来自中国21家大型三甲教学医院腹腔感染的革兰阴性菌1929株,采用肉汤稀释法测定这些菌株对12种常见抗菌药物的敏感性。在1929株革兰阴性菌中,分离率最高的菌株依次为大肠埃希菌（47.3%),雷伯菌（17.2%),绿假单胞菌（10.1%)鲍曼不动杆菌(8.3%)。肠杆菌科细菌在所有革兰阴性菌中占了78.8%。在12种测试药物中,厄他培南和亚胺培南是对肠杆菌科细菌最为敏感的抗菌药物,敏感率分别为95.1%和94.4%,其次为阿米卡星（93.9%)和哌拉西林/他唑巴坦(87.7%)。头孢曲松,头孢噻肟,头孢他啶和头孢吡肟对肠杆菌科细菌的敏感率分别为38.3%,38.3%,61.1%和50.8%。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBLs的比率为68.8%和38.1%。总之,肠杆菌科细菌是造成腹腔感染最主要的病原菌,对肠杆菌科细菌最为敏感的抗菌药物为厄他培南和亚胺培南。     

广州地区3500株革兰阴性细菌的分布特征及耐药性特点

目的 了解广州地区医院感染常见革兰阴性细菌分布特征和耐药特点。方法 2001年7月~2003年8月,用Kirby-Bauer法检测了从广州地区13家医院分离获得的3500株革兰阴性细菌对临床常用15~21种抗生素的药敏结果,并按美国临床实验标准委员会2000年判断标准进行判断,用WHONET-5软件分析数据。结果 分离出的3500株革兰阴性菌中前3位细菌依次是大肠埃希菌(Escherichia coli,ECO)1244株(占35.5%)、肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae,Kpn)900株(占25.7%)和铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,Pae)547株(占15.6%)。广州地区临床分离革兰阴性菌中产超广谱β内酰胺酶(extended-spectrumbeta-lactamases,ESBLs)菌株的总检出率为31.0%(1084/3500),在各种常见菌属中的检出率分别为:大肠埃希菌为38.7%(482/1244)、肺炎克雷伯菌为37.9%(341/900)、铜绿假单胞菌为5.3%(29/547)、阴沟肠杆菌为55.2%(117/212)、不动杆菌属为8.2%(17/208)、其他肠杆菌属为27.7%(53/191)、嗜麦芽窄食单胞菌为33.3%(37/117)、变形杆菌属为9.2%(8/87)。从呼吸道标本中分离获得革兰阴性细菌最多,为1463株(占41.8%);其次为泌尿道标本,为943株(占26.9%)。耐药性分析显示:革兰阴性杆菌对临床常用抗生素的总体耐药率最低为亚胺培南(8.7%),其次为头孢哌酮/舒巴坦对广州地区临床分离的铜绿假单胞菌和嗜麦芽窄食单胞菌的耐药率最低,分别为10.8%和15.9%,大部分细菌呈多重耐药.产ESBLs菌株对15～21种临床常用抗菌药物的耐药率均显著高于不产ESBLs菌株(P<0.05)。结论 细菌耐药性仍是目前广州地区临床用药最为严重的问题,尤其是产ESBLs菌株有上升趋势.亚胺培南和头孢哌酮/舒巴坦分别对临床分离革兰阴性菌株有较好的抗菌活性,可以作为广州地区临床经验用药的候选药物。     

ICU呼吸机相关肺炎病原菌及多重耐药菌的危险因素分析

目的分析ICU(intensive care unit)住院患者呼吸机相关性肺炎(ventilator-associated pneumonia,VAP)细菌种群变化及相关危险因素,指导多重耐药菌的临床治疗。方法回顾性分析2009年1月~2017年1月ICU住院患者419例VAP细菌感染资料,采用法国生物梅里埃ATB Expression微生物分析仪对细菌做鉴定及药敏试验,应用WHONET5软件及SPSS19.0进行数据统计分析。结果 2009~2017年的8年间共检测出革兰阴性菌323例,占77.1%,其中主要为鲍曼不动杆菌143例,占34.1%,铜绿假单胞菌68例(16.2%),肺炎克雷伯杆菌57株(13.6%),大肠埃希菌49例(11.7%),其他阴性菌6例(1.43%);革兰阳性菌96例,占23%,其中金黄色葡萄球菌31例(7.4%)。其多重耐药感染高危因素有住院时间延长(入住ICU≥3 d),APACHEⅡ急性生理与慢性健康评分(acute physiology and chronic health evaluation)15、插管包括经鼻胃管、中心静脉插管,机械通气≥2 d,接受抗菌药物广泛使用等。结论重症医学科VAP感染多重耐药性细菌以革兰阴性菌为主,导致多重耐药影响因素较多,机械通气时间、抗菌药物联合使用、APACHEⅡ15都是高危因素,ICU重症患者应控制相关因素,减少多重耐药菌的产生。     

我院2007～2010年革兰阴性菌分布及耐药性分析

目的：了解我院2007～2010年革兰阴性杆菌的分布和耐药情况,为临床治疗提供帮助。方法：对2007－2010年我院微生物实验室从各种药敏送检标本中培养分离出的革兰阴性杆菌2840株进行回顾性分析。结果：2007－2010年医院共分离出病原菌：4915株。革兰阴性杆菌2840株,占57．78％,其中,大肠埃希菌分离率最高（28．5％）。连续4年革兰阴性杆菌对亚胺培南敏感性均较好,而大肠埃希菌和铜绿假单胞菌对氨曲南的耐药率均呈逐年上升趋势。结论：应加强革兰阴性杆菌耐药性的动态监测,为临床医师合理使用抗菌药物提供科学依据,     

长春地区部分医院革兰阴性杆菌氨基糖苷类修饰酶基因的检测

目的：分析长春地区部分医院革兰阴性杆菌氨基糖苷类修饰酶基因的分布和类型,为抗生
素的合理应用提供依据。方法：通过琼脂稀释法筛选出阿米卡星与庆大霉素的耐药菌株,采用聚合
酶链式反应及序列分析的方法检测耐药菌株所携带的氨基糖苷类修饰酶基因类型。结果：69株革兰阴性杆菌对阿米卡星与庆大霉素的耐药率分别为44.9%和87.0%,其中63株 (91.3%) 检出氨基糖苷类修饰酶基因,基因类型包括aac(3)-Ⅰ、aac(3)-Ⅱ、aac(6′)-Ⅰb、ant(3")-Ⅰ和
ant(2")-Ⅰ,阳性率分别为4.3%、81.2%、43.5%、33.3%和13.0%;而aac (6′)-Ⅱ基因为阴性。结论：本地区革兰阴性杆菌氨基糖苷类修饰酶基因主要以aac(3)-Ⅰ、aac(3)-Ⅱ、aac(6′)-Ⅰb、ant(3")-Ⅰ和ant(2")-Ⅰ  5种类型存在,其中以aac(3)-Ⅱ型氨基糖苷类修饰酶基因最为常见。合理应用氨基糖苷类抗生素对于降低细菌的耐药性具有重要意义。
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