6种第3代抗-HIV试剂盒应用评价

目的　评价第 3代双抗原夹心法抗 HIV试剂盒的质量。方法　应用抗 HIV参考品血清盘和临界值质控血清对所购进的第 3代双抗原夹心法抗 HIV试剂盒进行应用评价。结果　 6家试剂的灵敏度、阴性符合率、阳性符合率、总符合率存有差别 ,个别厂家试剂存在阳性样本漏检或有假阴性样本出现 ,6个厂家的试剂均有最低检出限量样本未检出。结论　试剂使用前进行质量抽检 ,综合评价质量抽检结果 ,可作为选用试剂盒时的参考依据     

国产人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂质量评价

目的 对不同原理的人类免疫缺陷病毒(HIV)抗体诊断试剂盒的质量评价。方法 3745份特殊人群血样，各种试剂盒同时测定，对检测结果不一致的样品经HIV抗体免疫印迹法试剂盒确证，比较各试剂盒的检测敏感性；用亲和层折纯化的HIV gp4l抗体，测定各不同试剂盒的最低检出量；用10份系列稀释的阳性血清测定试剂盒的综合检测能力。结果 国产间接法抗HIV诊断试剂检测敏感性较第一代同类试剂提高约2—8倍；双抗原夹心法诊断试剂较间接法其敏感性有显著提高，最低检出量提高了4—32倍。结论 国产抗HIV诊断试剂的质量已有了显著提高，尤其是双抗原夹心法诊断试剂，其质量已达到国际先进试剂的水平。     

两种方法检测抗-HIV在献血者中的应用

国产 ELISA抗 - HIV体外免疫诊断试剂盒有间接法和双抗原夹心法两种。为了加强对献血者抗 - HIV检测的质量控制 ,笔者对 1 997年～ 2 0 0 1年 5月间本站用 EL ISA抗 - HIV间接法筛选的结果进行了分析 ,同时又对 2 0 0 1年 1～ 5月间用两种不同厂家的 ELISA抗 - HIV间接法检测呈现阳性反应的 1 8份血标本 ,再次用多家 ELISA抗 - HIV的间接法试剂和多家双抗原夹心法试剂进行对比检测分析 ,现将结果报告如下。材料与方法1　抗 - HIV诊断试剂盒　 EL ISA抗 - HIV间接法所采用的试剂盒分别来自北京吉比爱生物技术有限公司 ,批…     

某国产与进口HIV诊断试剂检测结果分析

目的对国产第3代HIV抗体双抗原夹心法诊断试剂盒和进口第4代HIV试剂盒的应用效果进行评价。方法采用两种HIV检测试剂盒对献血者血液标本、室间质评标本、卫生部临检中心质控品进行检测,献血者标本经两种试剂检测,结果均为反应性或任一种试剂为反应性即判为初筛反应性,并将标本送HIV确认实验室确认。结果共检测17806份血液标本,国产试剂检出8例反应性,进口试剂检出36例反应性,其中两种试剂均为反应性3例,其中1例为确认阳性,其余为阴性;室间质评标本中2例低值质控品进口试剂出现假阴性。结论该国产第3代HIV抗体双抗原夹心法诊断试剂盒实际应用效果优于进口第4代HIV检测试剂盒。     

抗-HIV(1/2)ELISA一步法检测时应注意钩状效应

目的　认识抗 HIV(1/ 2 )双抗原夹心ELISA一步法试剂盒在检测某些高滴度HIV抗体强阳性标本时可能存在的钩状效应。方法　用 5种不同厂家的抗 HIV(1/ 2 )双抗原夹心ELISA试剂盒 (包括一步法和二步法 )检测 4 32 5 6份血标本 ,将检测出来 4份高滴度HIV抗体强阳性标本用蛋白印迹法确认结果 ,同时将 4份强阳性标本稀释 10 0倍后用 5种不同厂家的抗 HIV(1/ 2 )双抗原夹心ELISA试剂盒重复检测。结果　某些厂家抗 HIV(1/ 2 )双抗原夹心ELISA一步法试剂盒在测定原倍和稀释后高滴度HIV抗体强阳性标本时其结果OD值存在着显著性差异。结论　在使用抗 HIV(1/ 2 )双抗原夹心ELISA一步法试剂盒进行检测时应注意因严重钩状效应而影响结果正确的可能性。提示应选择高灵敏和高特异性试剂 ,确保血液质量安全     

4种ELISA试剂筛查献血人群抗-HTLV结果评价

目的　对HTLV抗体ELISA诊断试剂盒进行初步评价。方法　 797份献血者标本用 1种国产双抗原夹心法试剂 ,1种国产间接法试剂和 2种进口间接法试剂同时进行检测 ,对ELISA阳性血清均用Westernblot(WB)进行确证。结果　 797名献血者四种试剂盒均能检出 4份抗 HTLV 1阳性标本 ,但三种间接法试剂均分别出现了 4～ 11份不等的假阳性 ,而国产双抗原夹心法试剂则未出现假阳性。结论　国产HTLV抗体ELISA诊断试剂盒已具备用于规模筛检能力。     

丙型肝炎病毒抗体检测试剂在高危人群中的应用评价

目的 对研制的丙型肝炎病毒（HCV）抗体检测试剂（双抗原夹心法）在高危人群中的应用进行评价,并与间接法进行比较。方法 收集河北省固安县丙型肝炎高发地区A村38份、B村47份,共85份样品,采用研制的抗-HCV检测试剂（双抗原夹心法）及间接法同时测定样品抗-HCV,对检测结果不符的样品用HCV-RIBA补充试剂进行确认。结果 85份样品中,间接法检测阳性76份（89．41％）,阴性9份;双抗原夹心法检出阳性73份（85．88％）,阴性12份。有3份间接法检测弱阳性,而双抗原夹心法检测为阴性,经HCV-RIBA补充试剂确认2份为阴性,1份仅1条带阳性,再经病毒核酸定量检测为（1．2～4．8）×10^2copies／ml,HCVRNA测定为阴性。结论 研制的双抗原夹心法抗-HCV检测试剂的灵敏度与间接法相同,特异性优于间接法。     

双抗原夹心法检测丙型肝炎病毒抗体的应用分析

目的分析探讨应用双抗原夹心酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)的应用效果,为无偿献血样本的抗-HCV筛查提供参考依据。方法收集2017年4月至2018年1月某院经间接法ELISA检测的抗-HCV单试剂或双试剂反应性的献血者标本72份以及1 850份无偿献血者样本作为研究对象,采用双抗原夹心ELISA法和间接ELISA法进行检测,对于有一种以上试剂反应性(包括单试剂反应性、双试剂反应性及三种试剂均呈反应性)的标本采用重组免疫印迹实验(RIBA)进行进一步确认。以RIBA检测阴性或三种试剂均为阴性作为真阴性的标准,分析两种检测方法三种试剂的检测结果的假阳性率、特异性及符合性。结果总共1 922份检测样本中,一种以上反应性样本合计51例,三种试剂均为阴性反应性1 871份。51例反应性样本经RIBA验证,阳性29例,阴性22例。万泰双抗原夹心试剂诊断的假阳性率明显低于雅培间接试剂和万泰间接试剂,诊断与RIBA的符合率则高于两种间接法试剂,差异有统计学意义(P0.05)。1 871份阴性检测样本中,万泰间接试剂、雅培间接试剂和万泰双抗原夹心试剂诊断的特异度分别为96.69%、94.28%、99.79%,万泰双抗原夹心试剂诊断的特异度明显高于两种间接法试剂,差异有统计学意义(P0.05)。结论应用双抗原夹心法诊断试剂者检测血液样本抗-HCV具有较高的特异性和准确性,能降低生物学假阳性,值得在临床血液样本的抗-HCV筛查中进行广泛推广应用。     

HIV1＋2型抗体化学发光免疫分析试剂盒的研制

[目的]建立：险测HIV1＋2型抗体化学发光免疫分析方法并研制其试剂盒。[方法]应用HIV-1的gp41和gp120．HIV-2的gp36蛋白混合包被化学发光微孔板作为固相抗原；用辣根过氧化物酶（HRP）标记以上抗原，应用含Luminol及其增强剂的化学发光底物作示踪剂，通过条件优化建立检测血清中HIV-1＋2型抗体的双抗原夹心化学发光免疫分析法。应用该方法制备HIV1＋2抗体化学发光免疫分析试剂盒三批，分别检测中国药品生物制品检定所（中检所）HIV抗体国家参考品，并与国内市场主要产品进行对比。[结果]建立了HIV1＋2型抗体化学发光免疫分析试剂盒（双抗原夹心法）。用中检所HIV抗体国家参考品检测，该方法研制的三批试剂盒均符合质量标准。与国内知名厂家的HIV-ELISA试剂盒比较，该方法所研制的试剂盒在灵敏度和精密性上较好。检测196份HIV1／2感染血清，226份其他疾病患者血清和正常人血清，阳性和阴性符合率均100％，与HIV-ELISA试剂相关性达0．994。三批变异系数均小于10％。试剂盒于37℃放置6d后，检测结果的阴阳性判断不受影响。[结论]该法特异性强，灵敏度高，精密性及稳定性好，适用于献血员的筛查和临床HIV感染的检测。     

双抗原夹心与间接ELISA法检测抗HCV对比研究

[目的]用研制的双抗原夹心ELISA法试剂与间接ELISA法试剂对比检测抗HCV。[方法]利用基因重组技术表达的HCV多表位抗原分别包被和标记，收集献血员样本，二种国产（试剂A，B）及雅培间接抗HCV试剂同时检测，对一种试剂单独阳性和3种试剂检测均为阳性的样本，再用研制的双抗原夹心法进行检测。[结果]试剂A检测单独阳性的样本12份，试剂B单独检测阳性20份样本中，双抗原夹心检测为阴性 ；而三家试剂检测均为阳性9份样本，双抗原夹心检测均为阳性。[结论]双抗原夹心检测抗HCV特异性较间接法好，灵敏度二者相当。     

双抗原夹心法检测抗-HIV(1+2)

抗-HIV（1+2）初筛试验大多采用间接ELISA方法,但存在部分假阳性反应。笔者以确证试验蛋白印迹法（WB）结果作对照,采用双抗原夹心法检测抗-HIV（1+2）确证阳性和初筛试验结果灰区标本,结果显示,双抗原夹心法检测抗-HIV（1+2）比间接ELISA法具有更好的准确性,更适用于抗-HIV（1+2）的初筛检测,缩短了窗口期,提高了对感染后的检出率,对于HIV感染者的早期发现,鉴别诊断具有重要的意义。现报告如下。 1 材料与方法 1.1 标本取自1995年以来本站初筛阳性的标本,其中结果不确定标本60份,确证阳性结果14份;总后卫生部及卫生部临床检验中心抗-HIV（1+2）室间质评血清40份（预期结果阳性22份,阴性18份）;抗-HIV（1+2）4Ncu/ml定值血清,由卫生部临床检验中心提供。 1.2 检测试剂间接ELISA初筛采用K、X、J 3个厂家的试剂;双抗原夹心ELISA初筛采用W及A厂家试剂。确证试验由江苏省AIDS确认中心实验室采用蛋白印迹方法（WB）检测。 1.3 实验方法各项实验均严格按照操作说明书进行。对于初筛阳性的样本,再次进行重复检测,复检时除原检测试剂外,尚需同时选择另一种初筛试剂予以复检,如均呈阳性或有一份阳性,该标本送确证实验室进一步做确证实验。 1.4 仪器设备 Perkin Elmer960型PCR分析仪（U.S.A）,GBS 全自动洗板机（U.S.A）,CliniBio 128型全自动绘图酶标仪（Australia）。     

丙型肝炎病毒核心抗原检测试剂的临床评价

[目的]对研制的丙型肝炎病毒核心抗原（HCV—cAg）ELISA检测试剂进行临床特异性及敏感性评价。[方法]制备抗HCV-核心区（Core）抗原四株单克隆抗体，研制出双抗体夹心检测HCV～core抗原酶联免疫检测（ELISA）试剂。三家临床单位收集抗HCV阴性样品3040份，HBsAg阳性100份，抗HIV阳性40份，从10万份抗-HCV筛查出临界样品28人份。[结果]3040份阴性样品检测有3份HCV—cAg阳性，3份经HCVPCR检测有1份阳性，100份HBsAg阳性，40份抗HIV阳性样本检测均为阴性，在10万份抗HCV抗体筛查样品中，选择28份抗-HCV检测临界样品进行HCV—cAg检测，有4份阳性，4份HCV—cAg阳性样品中有3份HCV—RNA检测阳性。[结论]研制的双抗体夹心HCV-核心抗原ELISA试剂具有很好的特异性和灵敏度。     

3种酶联免疫吸附试验试剂检测丙型肝炎抗体结果分析

目的：通过对国产3种丙型肝炎病毒（HCV）抗体检测试剂盒间接法和夹心法检测的结果比较,分析评价双抗原夹心法试剂的性能。方法设计不同的试验方法,用3种试剂对收集的阳性和阴性标本进行丙型肝炎病毒抗体检测,对单试剂和双试剂呈阳性反应的标本同时进行第三组重组免疫印迹试验（RIBA）和核酸检测;另外,用已知浓度的质控物倍比稀释后,用3种试剂平行检测。对得到的所有检测结果进行比对,综合分析。结果与确证试剂相比,2种间接法试剂和1种夹心法试剂的假阳率分别为42.2％、57.8％和1.6％,阳性检出率均为100％,但夹心法的分析灵敏度比间接法高1～4倍。结论夹心法 ELISA 检测试剂在灵敏度、特异性方面优于间接法 ELISA 检测试剂。     

双抗原夹心ELISA检测抗HCV总抗体

目的建立检测抗HCV抗体的双抗原夹心ELISA法,评价其可行性。方法将与His或GST融合表达的HCV基因工程抗原,分别用作ELISA的包被和酶标记抗原,建立用于抗HCV总抗体检测的双抗原夹心ELISA。用此方法检测1 968份临床血清标本,并以间接ELISA(北京万泰试剂)与之对照;此外,用套式RT-PCR检测部分血清的HCV RNA。结果有1 761份血清2种ELISA检测均为阴性,有190份血清均为阳性,两种方法符合率为99.1%;有17份血清的检测结果不相符,间接法阳性而本法阴性的14份,其中HCV RT-PCR阳性1份;本法阳性而间接ELISA阴性的3份,其中RT-PCR阳性2份。双抗原夹心ELISA与间接ELISA的敏感性分别为99.48%、98.96%,特异性分别为99.94%、99.27%。结论新研制的检测抗HCV总抗体的双抗原夹心ELISA具有较高的敏感性和特异性,值得作进一步的深入研究。     

22例抗-HIV国产ELISA试剂检测假阳性报告

笔者在用国产ELISA双抗原夹心法试剂对无偿献血者的血液进行抗 -HIV检测时 ,曾检出 2 2份“阳性”样品 ,再用进口ELISA双抗原夹心法试剂复检为阴性 ,最后经送滨州市卫生防疫站用蛋白印迹技试剂检测 ,证实为假阳性 ,现将结果报告如下。1　材料与方法1.1　样品　 2 0 0 4年 8月份至 11月份无偿献血者血液标本 5 5 0 0人份 ,每份标本均采用北京金豪有限公司及北京高达有限公司生产的抗 -HIV试剂同时作抗 -HIV筛选 ,收集两种试剂检测同时“阳性”或仅一种试剂“阳性”的样品 2 2份 (0 .4 % )。1.2　试剂　国产队ELISA双抗原夹心法抗 -…     

应用双抗原夹心法和间接法两种方法检测丙型肝炎病毒抗体的结果比较

目的比较应用双抗原夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)法和间接ELISA法两种方法检测丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)的检查结果,为临床血液样本抗-HCV的筛查提供参考依据。方法收集2017年6月至2018年2月某院检测的1 300份住院患者传染病丙肝筛查标本作为研究对象,经荧光定量PCR血液筛查,其中抗-HCV阴性标本1 221份,抗-HCV阳性标本79份,所有血液样本均分别采用双抗原夹心ELISA法和间接ELISA法进行检测,记录两种检测方法的结果,并与荧光定量PCR血液筛查结果进行对照,计算两种检测方法的灵敏度、特异度、符合率等指标。结果双抗原夹心ELISA法检测出抗-HCV阳性标本1 174份,其中真阳性1 173份,假阳性1份。间接ELISA法检测出抗-HCV阳性标本1 072份,其中真阳性1 060份,假阳性12份。双抗原夹心ELISA法检测抗-HCV的灵敏度、特异度以及符合率分别为96.07%(1 173/1 221)、98.73%(78/79)、96.23%(1 251/1 300),间接ELISA法检测抗-HCV的灵敏度、特异度以及符合率分别为86.81%(1 060/1 221)、84.81%(67/79)、86.69%(1 127/1 300),双抗原夹心ELISA法检测的灵敏度、特异度以及符合率均明显高于间接ELISA法,差异均有统计学意义(P0.05)。结论与间接ELISA法比较,双抗原夹心ELISA法检测抗-HCV的灵敏度和特异性明显提高,能提高临床检测的准确性,降低假阳性,减少血液的浪费,可作为临床血液样本抗-HCV筛查的首选方法。     

国产与进口抗-HIV试剂检测结果分析

目的分析比较国产第4代抗-HIV(1/2)型/P24抗原(1型)诊断试剂盒与进口第4代抗-HIV(1/2)及抗原(HIV1P24)联合检测试剂盒的检测效果。方法采用两种HIV检测试剂盒对献血者血液标本、室内质控、室间质评、卫生部临检中心的HIV质控品同时进行检测,所有检测标本无论哪种试剂呈反应性,均判为初筛反应性,呈反应性的标本送百色市艾滋病性病防治中心实验室进行HIV确认。结果 26713份标本,进口试剂有39份呈反应性,国产第4代试剂有15份呈反应性,其中两种试剂都呈反应性者13份,经中心实验室确认HIV阳性标本10份,其余送检标本均为阴性。结论国产第4代试剂盒实际应用效果敏感性和特异性与进口第4代试剂盒相差不大。     

丙型肝炎病毒抗体双抗原夹心法酶联免疫试剂的初步临床评价

目的对研制的丙型肝炎病毒抗体（双抗原夹心）酶联免疫检测试剂进行临床评价。方法以克隆表达的HCV多表位嵌合蛋白作为包被抗原,经多表位嵌合蛋白修饰后用于标记抗原,研制HCV双抗原夹心酶联免疫检测试剂;检测血液筛查阴性标本440份,乙肝表面抗原阳性标本90份,HIV抗体阳性标本10份,梅毒螺旋体抗体阳性标本90份及丙型肝炎病毒抗体阳性标本259份。结果对259份HCV抗体阳性标本进行检测时,有3份标本未检出,应用Chiron RIBA确认试剂检测后,结果为阳性。其余标本的检测结果均为阴性。结论采用HCV双抗原夹心酶联免疫检测试剂共检测889份标本,其中只有3份标本结果不一致,总符合率99．7％,敏感性和特异性较好。     

酶免法检测抗-HIV假阳性结果的消除

目前检测抗-HIV主要采用酶免法(ELISA法)，国内外大多数诊断试剂厂家生产的抗-HIV诊断试剂已由过去的间接法检测抗体改为双抗原夹心法。国产诊断试剂虽经国家生物制品检定所检定合格，试剂的可靠性和准确性明显提高，但仍存在着假阳性现象，这主要是由于血清标本中存在的自身抗体等多种因素对ELISA夹心法检测抗体试     

国产抗-HIV酶免双抗原夹心法试剂在血液检测中质量分析

近年来,国产抗人类免疫缺陷病毒抗体(抗 HIV)第3代双抗原夹心法酶免诊断试剂的生产,使检测的灵敏性和特异性有了很大改善,但因生产厂家工艺不同,抗原组选择包被板的差异,以及试剂的贮存运输过程的损坏,使其在应用过程中的质量有所不同。我们对5个厂家抗HIV试剂进行了质量分析,以选择适合本实验室的试剂。一、材料和方法1.试剂　5个厂家抗HIV酶免双抗原夹心法试剂盒,分别用代号I1、I2 、I3 、I4、I5表示,批号分别为:2 0 0 2 0 813、2 0 0 2 0 70 1、2 0 0 2 0 710、2 0 0 2 0 80 1、2 0 0 2 0 6 2 0。2 .参考品　抗 HIV国家参考品阴性…