机械扩张力作用下小鼠腭中缝成骨与破骨的研究

目的观察小鼠腭中缝在机械扩张力作用的不同阶段成骨与破骨现象,探讨两种现象在腭中缝机械力扩张骨改建过程中的意义。方法选用6周龄健康雄性C57BL/6小鼠90只,随机分成对照1d、3d、7d、14d、28d组和实验加力1d、3d、7d、14d、28d组,每组各9只。用两眼簧扩弓器施加扩张力(0.56N)于实验加力组小鼠的腭中缝。于加力后1d、3d、7d、14d、28d通过苏木素-伊红染色观察腭中缝组织形态学的改变,碱性磷酸酶染色(ALP)和抗酒石酸酸性磷酸酶染色(TRAP)观察腭中缝组织中成骨细胞与破骨细胞的变化。结果实验组1d紧邻腭骨的骨膜细胞ALP染色呈强阳性,7d实验组腭中缝明显被扩宽,缝边缘ALP染色呈强阳性。TRAP染色显示实验组第1天有破骨细胞活动而3d破骨细胞消失,7d实验组破骨细胞主要分布于鼻底侧且较第1天组多,14d实验组与7d相似而28d破骨细胞消失。结论对腭中缝施加扩张力能够促使成骨细胞与破骨细胞活化增殖,二者时间与空间的数量和分布差异导致了腭中缝扩张骨改建。     

扩张力作用下SD大鼠顶骨矢状缝中细胞凋亡的观察

目的　观察大鼠顶骨矢状缝在扩张力作用下的细胞凋亡现象 ,初步探讨细胞凋亡在骨缝改建中的作用。方法　选用 36只健康雄性SD大鼠 ,随机分到自然生长组、手术对照组、实验加力组 ,用开大弹簧施加扩张力 (约 0 .10kg)于实验加力组大鼠的矢状缝 ,于加力后 4、7、14天通过TUNEL法观察骨缝组织中凋亡细胞变化情况。结果　加力后 4天实验加力组的骨缝组织中凋亡的纤维细胞增多 ,加力后 14天实验加力组的骨缝组织中凋亡的纤维细胞减少而凋亡的骨细胞增多。结论　细胞凋亡参与了扩张力作用下矢状缝改建的过程     

机械扩张力作用下小鼠腭中缝EphB4和ephrinB2表达的研究

目的　观察小鼠腭中缝在机械扩张力作用的不同阶段EphB4/ephrinB2分布和表达规律。方法　选用6周龄健康雄性C57BL/6小鼠40只,随机分成对照组和实验扩张组,每组各20只。用双眼簧扩弓器施加扩张力（0.56 N）于实验加力组小鼠的腭中缝区。实验组分别于加力后1、3、7、14 d抽取5只小鼠通过石蜡切片免疫组化对EphB4/ephrinB2进行组织定位,观察表达规律并与未施力的对照组比较。结果　扩张组EphB4/ephrinB2表达水平高于对照组,差异具有统计学意义。第3天实验组EphB4/ephrinB2表达水平表达最高。结论　对小鼠腭中缝施加扩张力的情况下能够诱导EphB4/ephrinB2的表达增加,说明EphB4/ephrinB2在腭中缝扩张新骨改建过程中具有重要意义。     

机械扩张力作用下小鼠腭中缝组织中CD13/APN的表达及意义

目的 观察小鼠腭中缝在机械扩张力作用的不同阶段CD13/APN表达的变化规律,探讨其在腭中缝机械力扩张组织改建过程中的意义。方法 选用6周龄健康雄性C57BL/6小鼠90只,随机分成对照组和实验扩张组,每组各45只。用双眼簧扩弓器施加扩张力(0.56N)于实验加力组小鼠的腭中缝区。两组分别于加力后1、3、7、14、28d抽取9只小鼠通过石蜡切片免疫组织化学对CD13/APN进行组织定位,采用Western免疫印迹法半定量鉴定其表达情况,观察表达规律并与未施力的对照组比较。结果 蛋白印记显示扩张组CD13/APN表达水平显著高于对照组,差异具有统计学意义。实验组7d表达水平最高,14d与28d表达呈下降,但高于对照组。扩张组1d和3d之间,14d和28d之间差异没有统计学意义。免疫组织化学染色显示CD13/APN主要定位于间充质细胞和软骨细胞膜上,阳性面积与蛋白印记结果基本对应。结论 对小鼠腭中缝施加扩张力的情况下能够诱导CD13/APN的表达增加,说明CD13/AP在腭中缝扩张新骨改建过程中具有重要意义。?     

扩张力作用下大鼠腭中缝组织成骨现象的连续观察

目的：观察扩张力作用下大鼠腭中缝牵张成骨的组织形态学变化及新骨形成情况,探讨扩弓后腭中缝组织的反应和新骨形成方式。方法：选用4周龄健康雄性wistar大鼠55只,随机分为实验组5组、对照组6组,采用两眼簧后牙扩弓器扩张大鼠上颌腭中缝组织,分别于0d、实验1、2、4、7、11d取材,标本常规进行石蜡切片,行常规苏木精-伊红染色、Masson三色染色、骨钙素（OCN）免疫组化。结果：扩张1d后即可见腭中缝明显增宽,并可见成骨细胞的分化和成纤维细胞的增殖;扩张2d和4d后可见软骨细胞带外侧有新骨沉积;固定3d后可见骨缝边缘内外侧均有新骨沉积;固定7d后,可见两侧陈旧的软骨细胞带内侧有大量类骨质形成,两侧骨缘呈指状嵌合。结论：扩张的腭中缝新骨改建主要发生在腭中缝骨缘,并由软骨内成骨的方式向膜内成骨方式进行转变。     

双膦酸盐对大鼠腭中缝快速扩弓后骨缝重建的影响

目的研究双膦酸盐对大鼠腭中缝快速扩开后骨缝重建的影响。方法将7周龄雄性wisrar大鼠42只随机分成3组，每组14只，所有大鼠均进行快速上颌扩大1周，再保持4周时，对照组不给药，实验一组双膦酸盐灌胃2周，实验二组双膦酸盐灌胃4周，保持结束后拆除所有大鼠的保持器，并且处死各组的一半大鼠，其余的大鼠复发4周，结束时再全部处死。测量每个实验步骤结束时腭中缝的宽度。所有大鼠取材后制做脱钙骨切片，光镜下观察计算各组大鼠扩弓后的复发率及破骨细胞数量。结果对照组腭中缝处破骨细胞数量及扩弓后腭中缝复发率明显高于实验一组和实验二组。结论大鼠上颌快速扩大后机械保持配合使用双膦酸盐能减少腭中缝处破骨细胞的数量，抑制新生骨质吸收，减少扩弓后的复发率。     

大鼠前腭缝扩张中细胞凋亡与骨缝改建的关系

目的:观察大鼠前腭缝扩张中细胞凋亡的发生,探讨细胞凋亡与骨缝改建的关系.方法:取35天龄SD大鼠40只,随机分为对照组和实验组.实验组动物用扩大簧施加(200±10)g力,扩大前腭缝,对照组不作处理.2组动物分别于扩弓后第1、2、3、5天后处死(每组5只).使用HE染色和甲苯胺蓝染色,观察骨缝的组织学变化,ssDNA免疫组织化学染色检测凋亡细胞.采用SPSS15.0软件包对数据作t检验,比较实验组和对照组间的差异.结果:实验组动物在扩弓后1天,前腭缝扩大,骨缝边缘成骨细胞增殖明显;第2天成骨细胞数目最多,第3天有明显的新骨沉积,成骨细胞数目减少;第5天新骨大量形成呈树突状.ssDNA免疫组化染色显示,对照组前腭缝组织中鲜有凋亡细胞,而扩张后的前腭缝中细胞凋亡发生明显增多.凋亡细胞主要分布在骨缝边缘的成骨细胞和前腭骨内的骨细胞中,并在扩张后的第2天和第3天最明显(P<0.01).结论:在大鼠前腭缝扩张成骨中有细胞凋亡发生,细胞凋亡参与了牵张力下上颌骨缝的骨改建.     

上颌快速扩大兔腭中缝组织改建的连续组织学研究

目的研究上颌快速扩大腭中缝牵张成骨的连续过程及规律，了解快速扩张腭中缝的缝组织反应和组织再生机理。方法选用处于生长期新西兰大白兔52只，随机分为13组，实验组5组、对照组6组，荧光标记的实验组和对照组各1组。采用螺旋分裂基托扩大矫治器（Haas矫正器）扩张兔上牙弓，快速扩张期2周，固定期4周。扩张速率为0．25mm／12h，共扩张牵引14天，分别于即刻、第7、14、21、28、42天取材，标本常规进行组织学观察。并利用激光共聚焦扫描显微镜及荧光标记观察快速扩张腭中缝成骨活动的情况。结果快速扩张2周后可见腭中缝明显增宽，可见创伤性反应，成骨和成纤维细胞大量增殖，大量胶原纤维沿扩张力方向有序排列，成骨活动沿骨缝边缘平行沉积。快速扩张的腭中缝有强烈的血管生成反应，新生骨组织改建活跃，直至新的骨缘形成。缝恢复正常的形态。荧光标记观察实验组骨沉积带明显宽于对照组。结论扩张的腭中缝新骨改建主要发生在腭中缝骨缘。腭中缝改建的过程是纤维修复和骨组织再生过程。     

局部应用二磷酸盐对鼠正畸牙移动影响的研究

目的 探讨局部注射Zoledronate溶液对鼠正畸牙齿移动距离与牙周组织形态的影响。方法 选用42只雄性Wistar大鼠，牵引其上颌第一磨牙近中移动。实验中分别将Zoledronate溶液及生理盐水注射入实验组（左侧）及对照组大鼠（双侧）上颌第一磨牙腭侧的粘骨膜下。注射于实验前3d开始，共进行9次，每3d一次。分别在加力0、3、7、14、21d后记录上颌第一磨牙移动距离，组织HE染色后，观察牙周组织形态学的改变。结果 ①实验组大鼠牙齿移动距离明显低于对照组。②实验组大鼠压力侧破骨细胞数在实验全过程中均低于对照组，而根分叉区破牙骨质细胞数除加力14d外，2组差异无显著性。③实验过程中Zoledronate溶液对破骨细胞和破牙骨质细胞以外的细胞作用不明显。结论 Zoledronate能有效地抑制支抗牙移动，减少压力侧牙槽骨表面破骨细胞数。     

TGFβ/Smad信号分子在大鼠腭中缝牵张成骨中表达规律的初步研究

目的观察TGFβ/Smad信号分子在大鼠腭中缝牵张成骨过程中的表达规律。方法实验选用36只5周龄雄性Wistar大鼠,分为实验组和对照组(包括阴性对照和空白对照)。将初始力值为0.49 N的腭中缝扩大簧黏接到大鼠两侧上颌牙列上建立大鼠腭中缝牵张模型。取牵张第1、4、7天标本,采用免疫组化方法分析TGFβ/Smad信号分子在腭中缝牵张各加力时间点的表达。结果大鼠腭中缝牵张过程中,TGFβ1、2、3及Smad2、3、4等分子表达增强,并主要集中于骨端边缘骨膜、成骨细胞、继发软骨层、髓腔及骨缝纤维层与骨边缘的间充质细胞中。Smad7始终处于较低表达水平,无明显变化。结论机械牵张力可能通过刺激骨缝细胞TGFβ/Smad表达水平的改变,促进其增殖,并介导了骨缝牵张成骨的过程。     

Force-induced rapid changes in cell fate at midpalatal suture cartilage of growing rats.

The application of expansional force induces replacement of the cartilaginous tissue with bone at the midpalatal suture of growing rats. We examined the early cellular events evoked by force by analyzing the expression of proliferating cell nuclear antigen (PCNA), an operational marker of cell proliferation, and of several bone matrix proteins. A rectangular orthodontic appliance was set between the right and left upper molars of four-week-old rats, with 50 g of initial expansional force. Two days after application of the force, the pre-existing cartilage was separated laterally. Mesenchymal cells with stretched shapes were arranged parallel to the expansional force and filled the center of the suture. Only a few of these stretched cells exhibited nuclear accumulation of PCNA. In contrast, many polygonal mesenchymal cells distributed along the inner lateral side of the cartilaginous tissue exhibited strong immunoreactivity for PCNA. Localization of alkaline phosphatase activity overlapped into this proliferating cell zone. Nascent extracellular matrix under the proliferating cells was positive for osteocalcin, indicating commencement of active bone formation. These findings indicated that, among mesenchymal cells subjected to expansional forces, only cells located on the inner side of the cartilaginous tissue proliferate and differentiate into osteoblasts. In agreement with rapid bone growth progression, apoptosis was also observed in the zone of proliferating cells, as measured by TdT-mediated dUTP-biotin nick end labeling (TUNEL) assays.     

槲皮素在大鼠上颌快速扩弓时对腭中缝骨改建的影响

目的：研究槲皮素对大鼠上颌快速扩弓时腭中缝骨质改建的作用。方法：18只6周龄SPF级雄性Wistar大鼠,随机分为3组,A组为空白对照组,B组为扩弓组,C组为扩弓并灌服槲皮素组,每组均6只。其中,A组不扩弓,也不灌服槲皮素;B﹑C组用双眼圈簧扩弓器扩弓,力值0.98 N,C组扩弓后每天灌服槲皮素（100 mg/kg）,A、B组根据体重灌服同剂量的生理盐水。14 d后处死大鼠,标本进行石蜡切片,行常规苏木精-伊红染色、Masson三色染色、免疫组织化学染色。利用Image-pro plus软件对切片吸光度进行分析,采用SPSS 19.0 软件包对数据进行统计学分析。结果：实验第14天,H-E染色和Masson染色显示,A组腭中缝见少量纤维组织,可见软骨细胞、间充质样细胞及成骨细胞等;B﹑C组腭中缝处纤维组织较多,成纤维细胞﹑软骨细胞增多,腭中缝近骨区域处多见成骨细胞;C组成骨细胞数量明显多于B组,有新骨钙化沉积。免疫组织化学染色显示,B组大鼠腭中缝组织中的BMP-2表达量在第14天时显著高于A组（P<0.01）,C 组大鼠腭中缝组织中BMP-2 的表达量显著高于B组（P<0.05）。结论：上颌快速扩弓可扩大生长发育期大鼠的腭中缝;槲皮素能够促进大鼠上颌快速扩弓时腭中缝BMP-2的表达,使骨质沉积钙化,加速新骨形成。     

锂盐对大鼠腭中缝扩张成骨的影响

目的：观察锂盐对腭中缝扩张后新骨形成的影响。方法：使用扩大簧对Wistar大鼠作快速扩弓,腭中缝扩大3d后每日给予LiCl灌胃,对照组使用NaCl。通过甲苯胺蓝染色定量分析新骨的形成,免疫组化染色检测β-catenin的表达。结果：腭中缝扩大后第3天开始有新骨形成,应用LiCl后新骨边缘成骨细胞表达β-catenin增加。半定量分析显示实验组7d新骨形成量显著增加,是对照组的1.36倍（P〈0.05）。结论：锂盐能够通过激活β-catenin信号,促进大鼠腭中缝扩大后的新骨形成。     

雷尼酸锶对大鼠上颌快速扩弓影响的实验研究

目的 探讨雷尼酸锶对大鼠上颌快速扩弓的影响。方法 36只6周龄雄性Wistar大鼠,随机分为3组,空白对照（A）组﹑扩弓（B）组﹑扩弓并给药雷尼酸锶（C）组,每组12只。A组不扩弓,也不给药雷尼酸锶;B﹑C组用双眼圈簧扩弓器扩弓,力值1 N;C组扩弓开始即每天定时给药雷尼酸锶（600 mg•kg-1）。实验第4﹑7﹑10天分批处死大鼠,测量上颌宽度,并对大鼠腭中缝进行组织学观察和成骨细胞计数。结果 扩弓结束后,A组大鼠上颌宽度无明显变化（P>0.05）,B﹑C组上颌宽度较扩弓前均增加（P<0.05）,而B﹑C两组间的上颌宽度无明显差异（P>0.05）。组织学观察,A组腭中缝见少量红染的纤维组织,可见间充质样细胞、软骨细胞及成骨细胞。B﹑C组腭中缝处见较多红染的纤维组织,成纤维细胞﹑软骨细胞增多,腭中缝近骨边缘处多见成骨细胞;C组成骨细胞计数多于B组。结论 上颌快速扩弓可开大发育期大鼠腭中缝,增加上牙弓及上颌宽度;雷尼酸锶可以促进大鼠上颌快速扩弓时腭中缝处成骨细胞分化,加速新骨形成及骨质沉积钙化,减少复发。     

上颌牙弓反复快速扩缩的动物模型的建立及初步研究

目的建立上颌牙弓反复快速扩缩的动物模型并进行初步研究。材料和方法选择6周龄健康雄性SD大鼠22只，随机分成3组：实验一组（单纯扩弓组）9只，连续扩弓5天；实验二组（反复扩缩组）9只，先扩弓5天，再缩弓5天，然后再扩弓5天…，如此反复25天，扩三次，缩两次；对照组4只，不进行任何处理。实验组在实验前、扩弓结束、缩弓结束时，拍腭中缝X线片，取大鼠上颌石膏模型。结果大鼠上颌咬合片中可以看到：扩弓后，大鼠腭中缝被打开，而缩弓结束后，腭中缝回复到扩弓前水平。模型测量发现：单纯扩弓组扩弓结束时中切牙间距离及第一磨牙间的距离比扩弓前增大（P〈0．05）。反复扩缩组每次扩弓结束时中切牙间距离及第一磨牙间的距离均增大（P〈0．05）；每次缩弓结束时，中切牙间距离及第一磨牙间的距离均缩小，与扩弓前水平相当（P〉0．05）。对照组腭中缝宽度、中切牙间距离及第一磨牙间的距离均无变化。结论本研究利用扩弓和缩弓装置成功建立了上颌牙弓反复快速扩缩的动物模型；腭中缝宽度、中切牙间距离及第一磨牙间的距离随着扩弓或缩弓而增大或回复，并且随着扩弓次数的增加，每次扩弓后中切牙间距离及第一磨牙间的距离均比前一次扩弓增大，第一扩弓和第三次扩弓的差异有显著性。     

The study of rapid maxillary expansion in the laboratory animals

Forty rabbits were used to study the rapid maxillary expansion. The widths of the dental arch and the base arch were measured. The histologic changes of the palatal medius suture tissue and periodontal tissue of the anchorage teeth after various degree of rapid maxillary expansion were observed. The result indicated that the width of dental arch and base arch were increased by expansion force. The increasing width of the dental arch almost were caused by the expansion of the medius suture chiefly. The stronger the force, the more the expansion of the palatal medius sutures, but this kind of force might cause the damage of the anchorage tooth periodontal tissue and delay the repairing and remodeling response of the tissue. The medius suture tissue has stronger endurance to the heavy expansion force.     

快速上颌扩弓后局部应用二磷酸盐对腭中缝复发率的影响

目的 :探讨快速上颌扩弓后二磷酸盐 (BP)对大鼠腭中缝复发率的影响。方法 :6周龄SD雄性大鼠 88只 ,随机分为 11组 ,进行快速上颌扩弓实验 :快速扩弓 1周、保持 2周或 4周、复发后 4周。在保持期大鼠根据保持时间和注射BP的剂量不同分为 5种不同的处理方式 ,分别在扩弓结束、保持结束、复发结束时处死大鼠 ,制作脱钙及不脱钙切片 ,比较 5种处理方法大鼠扩弓后的复发率 (RR)、矿化沉积速率 (MAR )、破骨细胞的数量 (ON )。结果 :保持期注射BP的剂量不同明显影响扩弓后的复发率。结论 :快速上颌扩弓后局部应用二磷酸盐能减少大鼠腭中缝区破骨细胞的数量 ,加快新骨的矿化沉积速率 ,形成更多的新骨以减少扩弓后的复发率